El diagnóstico oportuno de la infección por VIH se convierte en una medida extremadamente importante, ya que el inicio temprano del tratamiento puede determinar en gran medida el desarrollo posterior de la enfermedad y prolongar la vida del paciente. En los últimos años, se han producido avances significativos en la identificación de esta terrible enfermedad: los sistemas de prueba más antiguos están siendo reemplazados por otros más avanzados, los métodos de examen son cada vez más accesibles y su precisión aumenta significativamente.
En este artículo hablaremos sobre los métodos modernos para diagnosticar la infección por VIH, cuyo conocimiento es útil para el tratamiento oportuno de este problema y para mantener una calidad de vida normal del paciente.
Métodos de diagnóstico del VIH.
En Rusia, se lleva a cabo un procedimiento estándar para diagnosticar la infección por VIH, que incluye dos niveles:
- Sistema de prueba ELISA (análisis de detección);
- inmunotransferencia (IB).
También se pueden utilizar otros métodos para el diagnóstico:
- pruebas rápidas.
Sistemas de prueba ELISA
En la primera etapa del diagnóstico, se utiliza una prueba de detección (ELISA) para detectar la infección por VIH, que se basa en proteínas del VIH creadas en laboratorios que capturan anticuerpos específicos producidos en el cuerpo en respuesta a la infección. Después de su interacción con los reactivos (enzimas) del sistema de prueba, el color del indicador cambia. A continuación, estos cambios de color se procesan mediante un equipo especial, que determina el resultado del análisis realizado.
Estas pruebas ELISA pueden mostrar resultados unas pocas semanas después de la introducción de la infección por VIH. Esta prueba no determina la presencia del virus, pero detecta la producción de anticuerpos contra el mismo. A veces, en el cuerpo humano, la producción de anticuerpos contra el VIH comienza 2 semanas después de la infección, pero en la mayoría de las personas se producen más tarde, después de 3 a 6 semanas.
Hay cuatro generaciones de pruebas ELISA con diferentes sensibilidades. En los últimos años se han utilizado cada vez más sistemas de pruebas de tercera y cuarta generación, que se basan en péptidos sintéticos o proteínas recombinantes y tienen mayor especificidad y precisión. Se pueden utilizar para diagnosticar la infección por VIH, controlar la prevalencia del VIH y garantizar la seguridad al realizar pruebas de sangre donada. La precisión de los sistemas de prueba ELISA de generación III y IV es del 93-99% (las pruebas producidas en Europa occidental son más sensibles: 99%).
Para realizar una prueba ELISA se extraen 5 ml de sangre de la vena del paciente. Deben transcurrir al menos 8 horas entre la última comida y el análisis (normalmente se realiza por la mañana en ayunas). Se recomienda realizar dicha prueba no antes de 3 semanas después de la sospecha de infección (por ejemplo, después de una relación sexual sin protección con una nueva pareja sexual).
Los resultados de la prueba ELISA se obtienen en 2-10 días:
- resultado negativo: indica ausencia de infección por VIH y no requiere contactar a un especialista;
- resultado falso negativo: se puede observar en las primeras etapas de la infección (hasta 3 semanas), en las últimas etapas del SIDA con supresión severa del sistema inmunológico y con una preparación inadecuada de la sangre;
- resultado falso positivo: se puede observar en algunas enfermedades y en caso de preparación inadecuada de la sangre;
- resultado positivo: indica infección por VIH, requiere la realización de un BI y que el paciente contacte con un especialista en el centro de SIDA.
¿Por qué una prueba ELISA puede dar resultados falsos positivos?
Los resultados falsos positivos de la prueba ELISA del VIH pueden ocurrir debido a un procesamiento inadecuado de la sangre o en pacientes con las siguientes condiciones y enfermedades:
- mieloma múltiple;
- enfermedades infecciosas causadas por el virus de Epstein-Barr;
- estado después;
- Enfermedades autoinmunes;
- en el contexto del embarazo;
- condición después de la vacunación.
Por las razones descritas anteriormente, pueden estar presentes en la sangre anticuerpos inespecíficos de reacción cruzada, cuya producción no fue provocada por la infección por VIH.
En los últimos años, la frecuencia de resultados falsos positivos ha disminuido significativamente debido al uso de sistemas de prueba de generación III y IV, que contienen péptidos y proteínas recombinantes más sensibles (se sintetizan mediante ingeniería genética in vitro). Después de la introducción de este tipo de pruebas ELISA, la frecuencia de resultados falsos positivos disminuyó significativamente y se sitúa entre el 0,02 y el 0,5%.
Un resultado falso positivo no significa que la persona esté infectada con VIH. En tales casos, la OMS recomienda realizar otra prueba ELISA (necesariamente de generación IV).
La sangre del paciente se envía a un laboratorio de referencia o arbitraje con la marca "repetir" y se analiza utilizando un sistema de prueba ELISA de cuarta generación. Si el resultado del nuevo análisis es negativo, entonces el primer resultado se considera erróneo (falso positivo) y no se realiza la IS. Si el resultado es positivo o dudoso durante la segunda prueba, el paciente debe someterse a una IB después de 4 a 6 semanas para confirmar o refutar la infección por VIH.
transferencia inmune
Sólo se puede realizar un diagnóstico definitivo de infección por VIH después de obtener un resultado positivo de inmunotransferencia (IB). Para realizarlo se utiliza una tira de nitrocelulosa, sobre la que se aplican proteínas virales.
La toma de muestras de sangre para IB se realiza desde una vena. A continuación, se somete a un procesamiento especial y las proteínas contenidas en su suero se separan en un gel especial según su carga y peso molecular (la manipulación se realiza con un equipo especial bajo la influencia de un campo eléctrico). Se aplica una tira de nitrocelulosa al gel de suero sanguíneo y se realiza una transferencia ("transferencia") en una cámara especial. La tira se procesa y, si los materiales utilizados contienen anticuerpos contra el VIH, se unen a las bandas antigénicas del IB y aparecen como líneas.
El IB se considera positivo si:
- según los criterios del CDC estadounidense: en la tira hay dos o tres líneas gp41, p24, gp120/gp160;
- Según los criterios de la FDA estadounidense, la tira tiene dos líneas p24, p31 y una línea gp41 o gp120/gp160.
En el 99,9% de los casos, un resultado positivo de IB indica infección por VIH.
Si no hay líneas, el IB es negativo.
Al identificar líneas con gr160, gr120 y gr41, IB tiene dudas. Este resultado puede ocurrir cuando:
- enfermedades oncológicas;
- el embarazo;
- Transfusiones de sangre frecuentes.
En tales casos, se recomienda repetir el estudio utilizando un kit de otra empresa. Si después de una IB adicional el resultado sigue siendo dudoso, entonces es necesaria la observación durante seis meses (la IB se realiza cada 3 meses).
Reacción en cadena de la polimerasa
Una prueba de PCR puede detectar el ARN del virus. Su sensibilidad es bastante alta y permite detectar la infección por VIH dentro de los 10 días posteriores a la infección. En algunos casos, la PCR puede dar resultados falsos positivos, ya que su alta sensibilidad también puede responder a anticuerpos contra otras infecciones.
Esta técnica de diagnóstico es costosa y requiere equipo especial y especialistas altamente calificados. Estas razones no permiten realizar pruebas masivas a la población.
La PCR se utiliza en los siguientes casos:
- detectar el VIH en recién nacidos de madres infectadas por el VIH;
- para detectar el VIH en el “período ventana” o en caso de BI dudosa;
- controlar la concentración de VIH en la sangre;
- para el estudio de sangre de donantes.
La prueba PCR por sí sola no permite diagnosticar el VIH, sino que se realiza como método de diagnóstico adicional para resolver situaciones controvertidas.
Métodos expresos
Una de las innovaciones en el diagnóstico del VIH son las pruebas rápidas, cuyos resultados pueden evaluarse en 10 a 15 minutos. Los resultados más eficaces y precisos se obtienen mediante pruebas inmunocromatográficas basadas en el principio de flujo capilar. Son tiras especiales sobre las que se aplica sangre u otros líquidos de prueba (saliva, orina). Si hay anticuerpos contra el VIH, después de 10 a 15 minutos aparece una tira de control coloreada en la prueba: un resultado positivo. Si el resultado es negativo, sólo aparece la tira de control.
Al igual que ocurre con las pruebas ELISA, los resultados de las pruebas rápidas deben confirmarse mediante análisis IB. Sólo después de esto se podrá realizar un diagnóstico de infección por VIH.
Hay kits de pruebas caseras rápidas disponibles. La prueba OraSure Technologies1 (EE. UU.) está aprobada por la FDA, está disponible sin receta y puede usarse para detectar el VIH. Después de la prueba, si el resultado es positivo, se recomienda que el paciente sea examinado en un centro especializado para confirmar el diagnóstico.
La FDA aún no ha aprobado otras pruebas para uso doméstico y sus resultados pueden ser muy cuestionables.
A pesar de que las pruebas rápidas tienen una precisión inferior a las pruebas ELISA de cuarta generación, se utilizan ampliamente para realizar pruebas adicionales a la población.
Puede realizar pruebas para detectar la infección por VIH en cualquier clínica, hospital del distrito central o centros especializados en SIDA. En el territorio de Rusia se llevan a cabo de forma absolutamente confidencial o anónima. Cada paciente puede esperar recibir consulta médica o psicológica antes o después de la prueba. Las pruebas de VIH solo tendrán que pagar en instituciones médicas comerciales, mientras que en clínicas y hospitales públicos se realizan de forma gratuita.
Lee sobre las formas en las que puedes infectarte con el VIH y qué mitos existen sobre las posibilidades de infectarte.
... el diagnóstico de cualquier enfermedad infecciosa se basa en una comparación de datos epidemiológicos, clínicos y de laboratorio, y la exageración de la importancia de uno de los grupos de estos datos puede provocar errores de diagnóstico.
El diagnóstico de la infección por VIH incluye dos etapas.:
I escenario - establecer el hecho real de la infección por VIH
;
II escenario - determinar el estadio de la enfermedad
.
ESTABLECIENDO EL HECHO DE LA INFECCIÓN POR VIH
Establecer el hecho real de la infección por VIH (es decir, identificar a las personas infectadas por el VIH), a su vez, también incluye dos etapas:
Etapa I- ensayo inmunoabsorbente vinculado(ELISA): el método ELISA es un método de detección (selección): la selección de individuos presumiblemente infectados, es decir, su objetivo es identificar individuos sospechosos y eliminar individuos sanos; Los anticuerpos contra el VIH se detectan utilizando otros anticuerpos contra los anticuerpos deseados (anticuerpos contra otros anticuerpos). Estos anticuerpos “colaboradores” están marcados con una enzima. Todas las pruebas de detección deben ser muy sensibles para no pasar por alto a ningún paciente. Por ello, su especificidad no es muy alta, es decir, ELISA puede dar una respuesta positiva (“probablemente enferma”) en personas no infectadas (por ejemplo, en pacientes con enfermedades autoinmunes: reumatismo, lupus eritematoso sistémico, etc.). La frecuencia de resultados falsos positivos cuando se utilizan varios sistemas de prueba oscila entre el 0,02 y el 0,5%. Si la prueba ELISA de una persona da un resultado positivo, es necesario realizar más exámenes para confirmar la infección por VIH. Al realizar ELISA, es posible obtener resultados falsos negativos en el 3-5% de los casos, si la infección ocurrió hace relativamente poco tiempo y el nivel de anticuerpos aún es muy bajo, o en la etapa terminal de la enfermedad, caracterizada por un daño severo al sistema inmunológico. con una profunda alteración del proceso de formación de anticuerpos. Por lo tanto, si hay evidencia de contacto con personas infectadas por el VIH, generalmente se repiten los estudios después de 2 a 3 meses.
Etapa II - inmunotransferencia(Western Blot modificado, Western Blot): es un método más complejo y sirve para confirmar el hecho de la infección. Este método no detecta anticuerpos complejos contra el VIH, sino anticuerpos contra sus proteínas estructurales individuales (p24, gp120, gp41, etc.). Los resultados de la inmunotransferencia se consideran positivos si se detectan anticuerpos contra al menos tres proteínas, una de las cuales está codificada por los genes env, la otra por los genes gag y la tercera por los genes pol. Si se detectan anticuerpos contra una o dos proteínas, el resultado se considera cuestionable y requiere confirmación. En la mayoría de los laboratorios, el diagnóstico de infección por VIH se realiza si se detectan simultáneamente anticuerpos contra las proteínas p24, p31, gp4l y gpl20/gp160. La esencia del método: el virus se destruye en componentes (antígenos), que consisten en residuos de aminoácidos ionizados y, por lo tanto, todos los componentes tienen un origen diferente entre sí; luego, mediante electroforesis (corriente eléctrica), los antígenos se distribuyen en la superficie de la tira; si el suero de prueba contiene anticuerpos contra el VIH, interactuarán con todos los grupos de antígenos y esto podrá detectarse.
hay que recordar que los anticuerpos contra el VIH aparecen en el 90-95% de las personas infectadas dentro de los 3 meses posteriores a la infección, en el 5-9% de las personas infectadas los anticuerpos contra el VIH aparecen después de 6 meses y en el 0,5-1% de las personas infectadas los anticuerpos contra el VIH aparecen más tarde. Durante la etapa del SIDA, la cantidad de anticuerpos puede disminuir hasta desaparecer por completo.
En inmunología existe un concepto como "ventana serológica" - el período desde la infección hasta la aparición de una cantidad tal de anticuerpos que pueda detectarse. En el caso del VIH, este período suele durar de 2 a 12 semanas y, en casos raros, más. Durante la “ventana serológica”, según las pruebas, una persona está sana, pero en realidad está infectada por el VIH. Se ha establecido que el ADN del VIH puede permanecer en el genoma humano durante al menos tres años sin signos de actividad y no aparecen anticuerpos contra el VIH (marcadores de infección por VIH).
Durante este período (“ventana serológica”) es posible identificar a una persona infectada por el VIH e incluso 1-2 semanas después de la infección utilizando reacción en cadena de la polimerasa(PCR). Se trata de un método extremadamente sensible: teóricamente se puede detectar 1 ADN por cada 10 ml de medio. La esencia del método es la siguiente: mediante la reacción en cadena de la polimerasa, se obtienen muchas copias de un ácido nucleico (un virus es un ácido nucleico, ADN o ARN, en una capa de proteína), que luego se identifican mediante enzimas o isótopos marcados. , así como por su estructura característica. La PCR es un método de diagnóstico costoso, por lo que no se utiliza para detección ni de forma rutinaria.
DETERMINACIÓN DEL ETAPA DE LA ENFERMEDAD
El desarrollo del SIDA se basa en, en primer lugar, la destrucción de los linfocitos T auxiliares, marcados por anticuerpos monoclonales (grupos de diferenciación) como CD4. En este sentido, diagnosticar y controlar la progresión de la enfermedad es imposible sin controlar la subpoblación de células T colaboradoras, lo que se lleva a cabo de forma más cómoda mediante un clasificador de células láser.
Para una infección leve por VIH El número de linfocitos T es un indicador extremadamente variable. En general, se observa una disminución del recuento de células CD4 (absoluta y relativa) en personas cuya infección por VIH se produjo hace al menos un año. Por otro lado, en las primeras etapas de la infección suele haber un número marcadamente aumentado de células T supresoras (CD8), tanto en la sangre periférica como en los ganglios linfáticos agrandados.
Con SIDA severo La mayoría absoluta de los pacientes tiene un número total reducido de linfocitos T (menos de 1000 en 1 μl de sangre, incluidos los linfocitos CD4, menos de 22 en 1 μl, mientras que el valor absoluto del contenido de CD8 permanece dentro de los límites normales). En consecuencia, la proporción CD4/CD8 disminuye drásticamente. Las respuestas de las células T in vitro a antígenos y mitógenos estándar se reducen estrictamente de acuerdo con el recuento de CD4 relativamente reducido.
Para las últimas etapas del SIDA Se caracteriza por linfopenia general, neutropenia, trombocitopenia (respectivamente, una disminución en el número de linfocitos, neutrófilos y plaquetas), anemia. Estos cambios pueden ser consecuencia de la inhibición central de la hematopoyesis debido al daño de los órganos hematopoyéticos por el virus, así como a la destrucción autoinmune de subpoblaciones celulares en la periferia. Además, el SIDA se caracteriza por un aumento moderado de la cantidad de gammaglobulinas con un aumento dominante del contenido de IgG. Los pacientes con síntomas graves de SIDA suelen tener niveles elevados de IgA. En algunas etapas de la enfermedad, el nivel de marcadores del SIDA como 1-microglobulina, interferón ácido estable y 1-timosina aumenta significativamente. Lo mismo ocurre con la secreción de neopterina libre, un metabolito de los macrófagos. Aún no es posible evaluar la importancia relativa de cada una de las pruebas enumeradas, cuyo número aumenta constantemente. Por tanto, deben considerarse en interacción con marcadores de infección por VIH, tanto inmunovirológicos como citológicos. Un análisis de sangre clínico se caracteriza por leucopenia, linfopenia (respectivamente, una disminución en la cantidad de leucocitos y linfocitos).
Nivel 1 - " etapa de incubación»
- aún no se han detectado anticuerpos contra el VIH; el diagnóstico de infección por VIH en esta etapa se realiza sobre la base de datos epidemiológicos y debe confirmarse en el laboratorio mediante la detección del virus de la inmunodeficiencia humana, sus antígenos y los ácidos nucleicos del VIH en el suero sanguíneo del paciente;
Etapa 2 - " etapa de manifestaciones primarias»
- en este período ya se produce la producción de anticuerpos:;
Etapa 2A - “ asintomático»
- La infección por VIH se manifiesta únicamente por la producción de anticuerpos;
Etapa 2B - “ Infección aguda por VIH sin enfermedades secundarias.»
- linfocitos de plasma ancho: se pueden detectar "células mononucleares" en la sangre de los pacientes y, a menudo, se observa una disminución transitoria en el nivel de linfocitos CD4 (la infección clínica aguda se observa en el 50-90% de los individuos infectados en los primeros 3 meses después de la infección; el comienzo del período de infección aguda, por regla general, precede a la seroconversión, es decir, la aparición de anticuerpos contra el VIH);
Etapa 2B - “ infección aguda por VIH con enfermedades secundarias»
- en el contexto de una disminución en el nivel de linfocitos CD4 y la inmunodeficiencia resultante, aparecen enfermedades secundarias de diversas etiologías (angina de pecho, neumonía bacteriana y por Pneumocystis, candidiasis, infección por herpes, etc.);
Etapa 3 - " latente»
- en respuesta a la progresión de la inmunodeficiencia, se produce una modificación de la respuesta inmunitaria en forma de reproducción excesiva de células CD4, seguida de una disminución gradual del nivel de linfocitos CD4, en promedio a razón de 0,05-0,07x109/l por año; los anticuerpos contra el VIH se detectan en la sangre;
Etapa 4 - " etapa de enfermedades secundarias»
- agotamiento de los linfocitos de la población CD4, la concentración de anticuerpos contra el virus disminuye significativamente (dependiendo de la gravedad de las enfermedades secundarias, se distinguen las etapas 4A, 4B, 4B);
Etapa 5 - " etapa terminal»
- normalmente una disminución del número de células CD4 por debajo de 0,05x109/l; la concentración de anticuerpos contra el virus disminuye significativamente o es posible que no se detecten anticuerpos.
El diagnóstico de la infección por VIH se realiza para realizar un diagnóstico final. Si el paciente está seguro de la infección, no debe automedicarse: debe consultar a un especialista.
Bajo la máscara del SIDA se pueden esconder muchas enfermedades que pueden curarse consultando a un médico. Las pruebas de infección son el método de diagnóstico más común y temprano.
La determinación del grado de infección continúa en el laboratorio mediante un análisis de sangre mediante ELISA o PCR.
Debido al deterioro de los indicadores epidemiológicos de la infección por VIH, el reconocimiento temprano de la enfermedad ha adquirido gran importancia. El médico realiza un diagnóstico diferencial de la infección por VIH y recopila información epidemiológica sobre la enfermedad.
En el proceso de estudiar métodos de infección, un especialista realiza investigaciones como:
- estudiar el mecanismo de desarrollo de la infección por VIH;
- diagnóstico de dolencias asociadas.
Los métodos de diagnóstico de la infección por VIH tienen como objetivo identificar anticuerpos en ELISA, y cuando se confirma el diagnóstico, el especialista realiza un trabajo explicativo con el paciente sobre su cumplimiento de las normas para evitar la propagación de la enfermedad.
Se prescriben pruebas de SIDA a los niños nacidos de madres infectadas después del tratamiento antirretroviral. Las pruebas de detección detectan anticuerpos contra el VIH 1 y 2.
La inmunotransferencia es de naturaleza confirmatoria y detecta anticuerpos contra las proteínas de la infección por VIH.
El diagnóstico precoz de la inmunodeficiencia permite al paciente cambiar rápidamente su estilo de vida, iniciar un tratamiento y recibir ayuda psicológica. Las quejas características del paciente siempre ayudan al médico a sospechar de SIDA y a enviar la sangre del paciente al laboratorio para su análisis.
Pruebas rápidas de 4ta generación para el SIDA
El diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH, realizado con pruebas de cuarta generación, permite identificar la enfermedad en la fase aguda de la enfermedad. La prueba Determinar VIH-1/2 Ag/Ab Combo es altamente sensible a los antígenos y anticuerpos en el suero sanguíneo del paciente. La especificidad del estudio es del 99,19% para la línea Ab y del 99,64% para la línea Ag, y el valor predictivo positivo se determina dentro del 55%.
La sensibilidad del ensayo se determina determinando resultados previamente conocidos. Al recibir datos positivos, la probabilidad de obtener números incorrectos alcanza el 45%.
Una prueba de hisopo oral se realiza en casa. La exploración es cómoda, sencilla e indolora para el paciente. La tira reactiva "ImmunoChrome-½-Express" se utiliza para el análisis y proporciona un resultado estable si el paciente sigue las instrucciones incluidas con el medicamento. Si se detectan dos franjas violetas idénticas en el área de prueba y en el área de control, la prueba se considera positiva. La presencia de una tira se interpreta como un resultado negativo de la prueba.
El tiempo dedicado al estudio oscila entre 15 y 30 minutos.
Diagnóstico de la enfermedad durante el período de incubación.
El daño al sistema inmunológico ocurre cuando el virus ingresa al cuerpo del paciente. El período de incubación oscila entre los 3 meses.
Después de un contacto no deseado y peligroso con una pareja, es necesario realizar una prueba de PCR y, en base a los resultados obtenidos, concluir sobre la presencia de infección por VIH en el cuerpo. El plazo máximo para iniciar el diagnóstico de inmunodeficiencia es de 8-9 meses, ampliándose excepcionalmente a 2 años.
Para el diagnóstico definitivo de la enfermedad, el estudio se realiza en el plazo de un año; cada 3 meses el paciente dona sangre para el VIH. El contacto inmediato con un especialista después de un contacto peligroso reduce la probabilidad de infección en un 90%.
Para el diagnóstico de laboratorio del período inicial de la enfermedad, se utiliza el método de reacción de la polimerasa, que determina los ácidos nucleicos. Los resultados del análisis se descifran en unas pocas horas, manteniendo total anonimato.
La creativa prueba MP-HIV ½ para detectar el VIH/SIDA se realiza en casa, 4 semanas después del contacto peligroso. Los casetes de prueba detectan anticuerpos contra los virus del VIH nº 1 y 2.
Métodos para el diagnóstico rápido del SIDA en niños.
A los bebés nacidos de madres infectadas se les hacen pruebas para detectar el virus del SIDA. Los métodos serológicos para identificar la enfermedad no siempre se confirman en niños de 5 a 18 meses, pero el resultado tiene un valor positivo posterior en la inmunotransferencia.
El método PCR de alta sensibilidad permite determinar la presencia del virus del SIDA en el cuerpo de un niño.
El ADN del patógeno se detecta en un niño en el primer mes de vida. El sistema de detección de provirus de inmunodeficiencia está diseñado para determinar la concentración de ARN del patógeno.
Para el análisis son adecuadas la sangre entera o las gotas de sangre seca. La muestra se coloca en un tubo de ensayo con conservante EDTA en una proporción de 1:20. Almacenar el material a una temperatura de 2-8 °C durante dos días, evitando la congelación de la sangre.
Las muestras de sangre seca se obtienen aplicando todo el líquido sobre un papel especial. El material diagnóstico se guarda a una temperatura no más 8 °C. El período de uso de las tarjetas no supera los 8 meses.
El examen del recién nacido y la realización de análisis se realizan en los siguientes momentos: 2 días después del nacimiento, a los dos meses de edad, después de 3-6 meses. La detección del gen del provirus del VIH unas horas después del nacimiento indica una infección del feto durante el período prenatal. La infección puede ocurrir durante el parto o mientras se amamanta al bebé.
Los datos que confirman la presencia de ADN viral en dos muestras de control indican el desarrollo de infección por VIH en el bebé.
La observación del dispensario se cancela después de recibir pruebas de PCR negativas 4 meses después del nacimiento del niño.
Errores durante la investigación.
Una prueba falsamente positiva para detectar la presencia del virus de la inmunodeficiencia en la sangre del paciente distorsiona por muchas razones la precisión de la determinación de la enfermedad. Los errores aguardan al paciente al realizar la prueba en casa.
Un resultado falso aparece cuando el paciente presenta afecciones como reacción cruzada, embarazo, donantes de sangre, infección por el virus de la influenza, enfermedades del tracto respiratorio, enfermedades autoinmunes, cáncer, esclerosis.
Las alergias contribuyen a la producción de antígenos extraños al cuerpo del paciente. Son reconocidos por el sistema de prueba y producen un resultado falso. Las infecciones fúngicas y virales contribuyen a una determinación incorrecta de la presencia del virus del SIDA.
La infección debe tratarse y luego hacerse pruebas para detectar el SIDA. Para obtener un resultado de investigación de alta calidad, el paciente está obligado a informar al médico sobre las dolencias concomitantes y el tratamiento que se está llevando a cabo.
Diagnóstico por ELISA
El espectro general de anticuerpos detectados mediante inmunoensayo enzimático aparece en el 95% de los individuos infectados con el virus del SIDA. Un doble resultado positivo en ELISA requiere la presencia de un segundo paso de confirmación: una prueba de inmunotransferencia. Consiste en el estudio de los anticuerpos y su relación con las estructuras proteicas individuales del patógeno. La prueba ELISA tiene dos reacciones: enzimática e inmunológica. El análisis se basa en la interacción de anticuerpos y antígenos.
Se determinan secuencialmente los anticuerpos, los complejos inmunitarios y la actividad enzimática. El especialista descifra los datos del análisis. Los indicadores negativos indican la ausencia de infección por VIH en el paciente.
En ausencia de anticuerpos e infección reciente, el médico determina un resultado falso negativo.
Si las muestras de material para estudiar el virus se almacenan descuidadamente, los indicadores obtenidos pueden ser falsos.
La prueba realizada después de que el paciente haya sido vacunado da un resultado positivo y no puede ser fiable.
Debes preparar adecuadamente la dilución de sueros, limpiar las placas usadas y comprar un tinte de alta calidad.
Un resultado positivo del inmunobolting se manifiesta por una combinación de bandas GP 41 y GP 120 y un antígeno. Un resultado negativo se indica por la ausencia de bandas.
Al llegar a una conclusión diagnóstica, se tienen en cuenta los resultados de las pruebas, los indicadores del examen del paciente en el hospital y el examen epidemiológico del paciente.
Los primeros están destinados a identificar a todas las personas infectadas con el VIH, los segundos, a identificar a las personas que no están infectadas con el VIH, pero que dieron una reacción positiva durante las pruebas de detección. Por lo tanto, las pruebas de detección son muy sensibles, es decir, casi no dan resultados falsos negativos, y las pruebas de confirmación son muy específicas, es decir, casi no dan resultados falsos positivos. Cuando se combinan, estas pruebas brindan resultados precisos y confiables que pueden detectar productos sanguíneos contaminados y hacer un diagnóstico de infección por VIH. Sin embargo, existen factores biológicos que reducen la precisión de estas pruebas; También son posibles errores de laboratorio. Por lo tanto, todo laboratorio que realice pruebas de anticuerpos contra el VIH debe contar con un excelente programa de control de calidad para estas pruebas. No debemos olvidar que la fiabilidad de las pruebas de laboratorio nunca es del cien por cien y que sus resultados siempre deben considerarse como un complemento al diagnóstico clínico.
Período de ventana y detección de la infección por VIH en las primeras etapas de la infección:
Los anticuerpos contra el VIH comienzan a producirse poco después de la infección, pero el momento de su aparición depende de muchos factores, en particular, del estado del sistema inmunológico del paciente y de las propiedades del virus. Es importante tener en cuenta que los anticuerpos pueden estar presentes en la sangre poco después de la infección, pero su concentración está por debajo del límite de sensibilidad de algunos métodos (período de ventana). Los primeros sistemas de prueba detectaron anticuerpos en casi todas las personas infectadas por el VIH entre 6 y 12 semanas después de la infección. Los últimos sistemas de prueba, incluido el ELISA trampa de tercera generación, detectan anticuerpos entre 3 y 4 semanas después de la infección. El tiempo entre la infección y el diagnóstico de la infección por VIH se puede reducir en varios días utilizando métodos para detectar antígenos del VIH y en varios días más utilizando métodos para detectar el ARN del VIH. Si se utilizan todos los métodos descritos, el diagnóstico de infección por VIH en la mayoría de los pacientes se puede establecer entre 2 y 3 semanas después de la infección. Los sistemas de prueba disponibles comercialmente para detectar anticuerpos contra el VIH tienen una sensibilidad muy alta y aproximadamente uniforme, suficiente para detectar a la mayoría de las personas infectadas por el VIH (la llamada sensibilidad epidemiológica). Sin embargo, los diferentes sistemas de prueba difieren en la sensibilidad analítica, es decir, en su capacidad para detectar niveles bajos de anticuerpos que ocurren antes de que se complete la seroconversión.
Existen sistemas de prueba diseñados para detectar anticuerpos IgM contra el VIH, pero no han encontrado un uso generalizado en el diagnóstico temprano de la infección por VIH, ya que los anticuerpos IgM no siempre se producen poco después de la infección. Algunos sistemas de prueba de tercera generación detectan simultáneamente anticuerpos IgM e IgG contra el VIH y tienen una mayor sensibilidad analítica.
Ver también: Divulgación del estado serológico respecto del VIH sin arrepentimientos, Tabique nasal desviado, Aneurisma vascular: una amenaza oculta para la salud, Detección prenatal; Anomalías cromosómicas, Estrabismo latente (Strabismus latente, Heteroforia), Riesgo oculto: mujeres y enfermedades cardíacas, Sífilis latente (Syphilis latens), Protocolo de RT-PCR en tiempo real de los CDC para la detección e investigación del virus de la influenza A (H1N1), Rechinar de dientes (bruxismo) , Precaución: alérgenos ocultos
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Diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH.
Al diagnosticar la infección por VIH, se utilizan 4 grupos de métodos:
1. Determinación de la presencia del virus, sus antígenos o copias de ARN en materiales de un paciente o persona infectada por el VIH.
Diagnóstico serológico basado en la detección de anticuerpos específicos contra las proteínas de superficie (gp 120 y gp 41) e internas (p 18 y p 24) del VIH.
3. Identificación de cambios patognomónicos (específicos) en el sistema inmunológico de la infección por VIH.
Diagnóstico de laboratorio de infecciones oportunistas (enfermedades asociadas al SIDA).
1. Diagnóstico virológico. El material para aislar el VIH son los linfocitos T sanguíneos, los leucocitos de la médula ósea, los ganglios linfáticos, el tejido cerebral, la saliva, los espermatozoides, el líquido cefalorraquídeo y el plasma sanguíneo.
El material resultante se utiliza para infectar un cultivo continuo de linfocitos T (H9). La indicación del VIH en cultivos celulares se realiza mediante CPD (formación de simplastos), así como mediante inmunofluorescencia, microscopía electrónica y actividad de transcriptasa inversa expresada.
Los métodos de investigación modernos permiten detectar un linfocito infectado por cada 1000 células.
La detección de antígenos virales en linfocitos T infectados se realiza mediante anticuerpos monoclonales.
En los últimos años, determinar el número de copias de ARN del VIH en el plasma sanguíneo mediante el método de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la llamada carga viral, ha sido crucial para determinar el pronóstico y la gravedad de la infección por VIH.
Si en pacientes que no reciben terapia la carga viral está por debajo del límite de detección (menos de 5000 copias de ARN del VIH en 1 ml de plasma), esto indica ausencia de progresión o progresión lenta. El grado de contagio es mínimo. Una carga viral elevada (más de 10.000 copias de ARN en 1 ml de plasma) en pacientes con un número de linfocitos CO4 inferior a 300 en 1 µl siempre indica progresión de la enfermedad.
Diagnóstico serológico. Actualmente es el más extendido.
Material para investigación: 5 ml. sangre heparinizada, que se puede almacenar refrigerada, pero no congelada, durante 6 a 8 horas antes de enviarla al laboratorio.
Para el diagnóstico serológico del SIDA se utilizan principalmente métodos de inmunoensayo enzimático con sistemas de inmunoensayo enzimático estándar (ELISA).
Este es un método de detección. El principio de funcionamiento se basa en el principio clásico del ELISA directo. El inmunosorbente son tabletas de poliestireno con un antígeno específico del virus inactivado inmovilizado, obtenido del VIH o sintéticamente.
Luego se añade el suero problema diluido. La incubación se realiza en pocillos con antígeno. Después de la unión de AG a AT, las proteínas no unidas se lavan tres veces y luego se agrega a los pocillos un conjugado de anticuerpos contra inmunoglobulinas humanas con una etiqueta enzimática.
La formación de un complejo AG+AT específico se detecta añadiendo un sustrato para la enzima (una solución de ortofenilendiamina y peróxido de hidrógeno).
Como resultado, el color del medio cambia en proporción a la cantidad de anticuerpos. Los resultados del estudio se tienen en cuenta en un espectrofotómetro.
Los sueros sanguíneos que contienen anticuerpos específicos del virus según los datos de ELISA deben examinarse más a fondo mediante inmunotransferencia.
La inmunotransferencia es una prueba de confirmación porque detecta anticuerpos contra varias proteínas del VIH.
Se basa en el fraccionamiento preliminar por peso molecular (separación) de las proteínas del VIH mediante electroforesis en un gel de poliacrilamida, seguido de la transferencia de antígenos a una membrana de nitrocelulosa. Luego se aplica el suero problema a la membrana. En este caso, los anticuerpos específicos forman un complejo con un antígeno específico (gp.120, gp.41, p.24, p.18). La etapa final del estudio es la identificación de anticuerpos contra diversas proteínas del VIH.
Para ello, se añaden al sistema anticuerpos contra proteínas humanas, marcados con una enzima o un marcador de radioisótopos.
Por lo tanto, los anticuerpos específicos del virus contra todos o la mayoría de los antígenos del VIH se detectan (o no) en el suero del paciente.
3. Estudios del estado inmunológico. Dirigido a identificar:
1) reducir la proporción de células CD4/CD8 (en N 2 y >, con SIDA - 0,5 y<);
2) reducir el contenido de células CD4 (<200 клеток/мл.);
3) la presencia de uno de los signos de laboratorio, incluyendo anemia, leucopenia, trombopenia, linfopenia;
4) aumentar la concentración de Ig A e Ig G en el suero sanguíneo;
5) reducir la respuesta de la formación de blastos de linfocitos a los mitógenos;
6) ausencia de reacción cutánea de GTZ a algunos antígenos;
7) aumentar el nivel de complejos inmunes circulantes.
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Anticuerpos contra el VIH 1/2– componentes del plasma sanguíneo, de naturaleza proteica, que previenen la proliferación de la infección por VIH y neutralizan completamente sus efectos negativos.
¿Qué es una prueba de anticuerpos contra el VIH 1/2 (detección)?
La prueba de detección de anticuerpos contra el VIH 1.2 es un sistema de pruebas que puede identificar a personas infectadas con el virus de la inmunodeficiencia. Además de estas, existen las llamadas pruebas de confirmación (auxiliares), cuya tarea es identificar a las personas que no están infectadas con el virus, pero que durante el examen tienen una reacción positiva al virus.
La esencia de un estudio de detección de la infección por VIH es determinar los anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia.
Su característica distintiva es una mayor sensibilidad: más del 99,5%. La especificidad de las pruebas es que la detección puede dar un resultado falso positivo si el cuerpo del paciente contiene autoanticuerpos.
Se puede detectar un resultado idéntico en caso de enfermedad hepática del paciente, vacunación antigripal o presencia de cualquier enfermedad viral aguda. En base a esto, para obtener resultados precisos, junto con el cribado, se suele acostumbrar a realizar la prueba confirmatoria mencionada anteriormente.
Indicaciones de análisis.
En la práctica médica, existe una gama bastante amplia de indicaciones para someterse a un examen de detección.
Un paciente puede contactar al laboratorio si:
- sospecha de infección (si hubo contacto cercano con un portador de infección por VIH);
- con pérdida de peso, fiebre;
- neumonía que no responde a la terapia convencional;
- enfermedades crónicas que surgen por razones desconocidas;
- en proceso de preparación para la cirugía;
- transfusiones de sangre;
- embarazo y planificación familiar;
- Con ganglios linfáticos inflamados;
- Relaciones sexuales casuales.
Personas de especial riesgo: drogadictos y personas promiscuas.
¿Cómo se realiza la detección de anticuerpos contra el VIH 1/2?
La realización del trámite requiere el cumplimiento de una serie de reglas necesarias:
- el paciente debe donar sangre exclusivamente en ayunas (se permite beber agua);
- deben haber transcurrido al menos ocho horas desde la última comida;
- se debe informar al médico qué medicamentos está tomando el paciente y conocer la dosis (si no hay posibilidad de abstinencia ni siquiera a corto plazo);
- si el paciente puede retrasar el uso de medicamentos, se recomienda hacerlo entre 10 y 15 días antes del día de la manipulación;
- El día anterior a la prueba, es recomendable que el paciente deje de comer alimentos fritos o grasosos, también tiene prohibido beber bebidas alcohólicas, fumar y limitar la actividad física intensa.
Cabe señalar que las pruebas de laboratorio para detectar la presencia de infección en niños nacidos de madres portadoras del virus de la inmunodeficiencia tienen sus propias características específicas.
Dado que en los primeros meses de vida de un niño los anticuerpos maternos contra el VIH pueden estar presentes en su sangre, es imposible obtener una imagen objetiva del estado de salud del recién nacido a partir de los resultados del análisis, e incluso un resultado negativo no significa que el virus no pudo atravesar la barrera placentaria.
Para obtener datos precisos, las pruebas deben realizarse dentro de los 36 meses posteriores al nacimiento del bebé.
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Las pruebas o la detección de anticuerpos contra el VIH tienen dos objetivos amplios pero muy claramente definidos: la detección de casos y la vigilancia. Al identificar los casos, el primer paso es aclarar el estado de infección por VIH de cada individuo para prescribir el tratamiento adecuado o realizar un seguimiento con las medidas adecuadas.
El objetivo de la vigilancia epidemiológica es estimar la prevalencia del VIH, la distribución de los casos de infección y sus tendencias en un grupo o población.
La sensibilidad de una prueba de anticuerpos contra el VIH es una medida de su capacidad para detectar con precisión estos anticuerpos en una muestra, y la especificidad de una prueba es una medida de su capacidad para confirmar con precisión la ausencia de anticuerpos cuando no están presentes en la muestra.
Lo ideal es que la sensibilidad y especificidad de la prueba alcancen el 100%. En la práctica, ninguna prueba biológica satisface este requisito y, sin embargo, las pruebas utilizadas para detectar anticuerpos contra el VIH se encuentran entre las más sensibles y específicas disponibles actualmente.
El diagnóstico de laboratorio del SIDA consiste en la realización de estudios virológicos, serológicos e inmunológicos del material de personas enfermas sospechosas de padecer esta enfermedad.
En estudios virológicos, se pueden utilizar cultivos primarios de células sanguíneas mononucleares para aislar el virus.
El aislamiento y la identificación del virus son metodológicamente complejos y pueden realizarse en laboratorios especializados. El método de diagnóstico más eficaz que se utiliza actualmente para los exámenes masivos de rutina es la detección de anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia humana. Los anticuerpos contra el VIH pueden aparecer al final del primer mes de infección. Según varios autores, el desarrollo de la seroconversión requiere de 4 a 7 semanas a 6 meses o más. La presencia de anticuerpos tiene valor diagnóstico para el SIDA o indica el riesgo de su desarrollo.
Los anticuerpos no son sólo un marcador serológico del SIDA. Detectados en la fase preclínica de la enfermedad, permiten su diagnóstico precoz. Su presencia es de particular importancia para la detección de portadores.
Los anticuerpos se detectan a lo largo de muchos años, casi durante toda la vida. Los investigadores han establecido un paralelismo en la identificación del virus y los anticuerpos contra él, es decir, la presencia de anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia indica una alta probabilidad de que una persona sea portadora del virus.
Los anticuerpos contra el antígeno del VIH, que aparecieron durante el período de incubación, continúan produciéndose intensamente con el desarrollo de la enfermedad, ya que la irritación antigénica es estimulada por los viriones liberados de los linfocitos infectados y los componentes de los subviriones que ingresan al torrente sanguíneo durante la desintegración de las células infectadas. y linfocitos infectados.
Al mismo tiempo, el provirus integrado en el genoma de las células infectadas permanece inaccesible a anticuerpos específicos. Esto explica un hecho aparentemente paradójico: cuantos más anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia humana haya en el suero sanguíneo, más fácil será aislar el virus del paciente.
Esto sucede porque los anticuerpos producidos en respuesta a una infección viral no son neutralizantes y, como resultado, no tienen un efecto notable sobre el virus, sino que simplemente están presentes en el cuerpo junto con él. Para detectar anticuerpos (AT) contra el virus del SIDA, se han desarrollado una serie de pruebas que permiten realizar investigaciones con un nivel suficientemente alto de especificidad y sensibilidad. Se trata de métodos de radioinmunoensayo en fase sólida, radioinmunoprecipitación, inmunofluorescencia, ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas e inmunotransferencia.
Los métodos más utilizados en la práctica son el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), que se caracteriza por una alta sensibilidad y la capacidad de registrar cuantitativa y visualmente los resultados de la reacción, lo que hace que el método sea accesible para laboratorios de cualquier nivel.
ELISA utiliza sistemas de prueba nacionales y extranjeros.
Curso clínico de la infección por VIH y SIDA.
Se debe tener precaución con los niños nacidos de madres infectadas. En ausencia de una clínica, se considera que un niño está infectado si la AT al VIH persiste después de un año. Al recibir un resultado positivo en ELISA, es necesario analizar tres veces los sueros que dieron resultados positivos únicos y confirmar el resultado positivo en un sistema independiente: inmunotransferencia.
La detección de AT en una reacción ELISA no proporciona información suficiente, ya que no indica el estado de la persona que se está analizando, solo indica incubación, enfermedad o la presencia de una infección asintomática.
La inmunotransferencia proporciona más información, ya que la presencia de AT frente a muchos antígenos del VIH es característica de una enfermedad grave, mientras que una reacción con 1-2 antígenos es más típica de un proceso infeccioso leve.
Es informativo contar el número de linfocitos T (colaboradores) y la proporción de linfocitos T4 a Te (supresores), determinados mediante anticuerpos monocuerpos.
Un criterio importante para la enfermedad puede ser un fuerte aumento en la cantidad de inmunoglobulinas, especialmente A y V. En un análisis de sangre clínico general, la enfermedad puede estar indicada por linfopenia, leucopenia, eritropenia, trombocitopenia y eosinofilia.
No es necesario que las pruebas de VIH utilizadas para la vigilancia epidemiológica sean tan precisas como las requeridas con fines clínicos.
Sin embargo, si la prevalencia del VIH en la población es muy baja, todas las muestras positivas deben volver a examinarse mediante pruebas adicionales.
La extracción de sangre para una prueba de anticuerpos contra el VIH o para un cribado puede ir acompañada del registro de los nombres de los sujetos (colección nombrada) o realizarse sin registrar nombres o información de identificación individual (colección anónima) (Tabla
El cribado anónimo y sin identificación tiene las siguientes características: utiliza muestras de sangre recogidas para otros fines; El anonimato está garantizado debido a que no se recogen ni se tienen en cuenta datos de identificación; no es necesario obtener el consentimiento de los sujetos; no se requiere contacto con asesoramiento o servicios sociales; Por último, y lo más importante, se minimizan los errores en las estimaciones estadísticas en función del nivel de participación de la población.
Aunque las pruebas anónimas del VIH pueden proporcionar datos más precisos, este método tiene las siguientes desventajas: no puede eliminar el posible sesgo de selección; los datos sobre conductas de alto riesgo y otras variables importantes no están disponibles y no pueden recopilarse retrospectivamente; es imposible contactar a las personas afectadas por el VIH para informarles sobre su condición; El examen sólo puede realizarse en grupos de personas a las que se les extrae sangre para otros fines.
En zonas donde la prevalencia de las infecciones por VIH se considera muy baja, la vigilancia de la salud pública debe centrarse principalmente en las personas o poblaciones con comportamientos de mayor riesgo.
La sangre para la prueba del VIH en este grupo de riesgo se recolecta más fácilmente en centros especializados en el tratamiento de enfermedades de transmisión sexual o instituciones similares.
Si el consumo de drogas intravenosas también es común, se deben tomar muestras de sangre de los consumidores de drogas en instituciones especiales.
Generalmente será suficiente la extracción de sangre una vez cada 3 o 6 meses de los grupos de mayor riesgo en las áreas geográficas donde dichos grupos son más abundantes. Una excepción pueden ser los grupos de riesgo, como los drogadictos que practican la administración de drogas por vía intravenosa, para quienes pueden ser necesarios más exámenes privados.
Actualmente la OMS está desarrollando un sistema de clasificación (estadificación) de enfermedades para ensayos clínicos que también puede utilizarse en ensayos de tratamiento, que también pueden tener valor pronóstico.
Sin embargo, dicho sistema no pretende reemplazar las definiciones existentes de SIDA utilizadas en la vigilancia de los sistemas de salud.
Actualmente, se están desarrollando en todas partes sistemas planificados (de rutina) de vigilancia del VIH.
Estos sistemas deben adaptarse a la situación epidemiológica actual; Por lo tanto, los métodos de muestreo en poblaciones con prevalencia viral muy baja necesariamente deben diferir de aquellos utilizados en poblaciones donde la prevalencia es moderada o alta.
Esta vigilancia implica exámenes rutinarios de grupos de población bien definidos y accesibles.
Debe incluir principalmente aquellos grupos que tienen mayor riesgo de infección, y de cada uno de estos grupos debe seleccionarse un número constante y predeterminado de individuos para el examen.
En los últimos años, la detección anónima y sin identidad se ha vuelto cada vez más común como método preciso y rentable para la vigilancia del VIH en entornos de atención médica.
Métodos de diagnóstico de laboratorio para el VIH.
En un laboratorio altamente especializado se realiza lo siguiente:
a) determinación de anticuerpos, antígenos y complejos inmunes que circulan en la sangre; cultivar el virus, identificar su material genómico y enzimas;
b) evaluación de las funciones de la parte celular del sistema inmunológico.
El papel principal pertenece a los métodos de diagnóstico serológico destinados a determinar anticuerpos, así como antígenos patógenos en la sangre y otros fluidos biológicos del cuerpo.
La prueba de anticuerpos contra el VIH se realiza para:
a) seguridad de las transfusiones y trasplantes de sangre;
b) vigilancia, pruebas para monitorear la prevalencia de la infección por VIH y estudiar la dinámica de su prevalencia en una determinada población;
c) diagnóstico de infección por VIH, es decir
e) análisis voluntarios del suero sanguíneo de personas aparentemente sanas o de pacientes con diversos signos y síntomas clínicos similares a la infección por VIH o SIDA.
El sistema de diagnóstico de laboratorio de la infección por VIH se basa en un principio de tres etapas.
La primera etapa es la detección, destinada a realizar análisis de sangre primarios para detectar la presencia de anticuerpos contra las proteínas del VIH. La segunda etapa es referencial: permite, utilizando técnicas metodológicas especiales, aclarar (confirmar) el resultado positivo primario obtenido en la etapa de selección. La tercera etapa es la etapa de expertos, destinada a la verificación final de la presencia y especificidad de los marcadores de infección por VIH identificados en las etapas anteriores del diagnóstico de laboratorio.
La necesidad de varias etapas de diagnóstico de laboratorio se debe principalmente a consideraciones económicas.
En la práctica, se utilizan varias pruebas que permiten identificar a las personas infectadas por el VIH con un grado suficiente de fiabilidad:
La prueba ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) para la detección del primer nivel, se caracteriza por una alta sensibilidad, aunque menos especificidad que las siguientes;
Immune blot (Western-blot), una prueba muy específica y más utilizada que permite diferenciar el VIH-1 y el VIH-2;
Prueba de antigenemia p25, eficaz en las etapas iniciales de la infección;
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
En los casos de análisis masivo de muestras de sangre, se recomienda probar mezclas de sueros de un grupo de sujetos, preparados de tal manera que la dilución final de cada muestra no supere 1:100.
Si una mezcla de sueros es positiva, se analiza cada suero de la mezcla positiva. Este método no conduce a una pérdida de sensibilidad tanto en ELISA como en inmunotransferencia, pero reduce los costos de mano de obra y el costo del examen inicial en un 60-80%.
Métodos inmunológicos
número de ayudantes T,
2. relación de T4 y T8,
3. estado de hipersensibilidad,
4. función compensatoria del sistema de células T.
Se manifiesta por una hiperproducción de inmunoglobulinas, estas son de baja afinidad y el material del organismo se consume aún más.
Desventajas: aparecen tarde, algunos indicadores inmunológicos pueden estar presentes en otras infecciones.
Métodos clínicos – m.b. Son similares a otras enfermedades, las manifestaciones más típicas se registran en las etapas posteriores, por lo que el diagnóstico clínico no es muy efectivo.
El método principal – serológico – se implementa en 2 etapas:
1 – examen de detección – muestreo de anticuerpos totales contra todas las proteínas del inmunoensayo.
Esta etapa da un 95% de resultados verdaderos y un 5% de falsos positivos.
2 – método de confirmación – todas las muestras se examinan mediante un método de confirmación. Esta técnica le permite detectar anticuerpos contra la proteína viral.
Un resultado positivo es cuando se detectan anticuerpos contra al menos 3 proteínas virales, si para 1 o 2 el resultado es dudoso y requiere un examen adicional.
Durante el serodiagnóstico primario de la infección por VIH, los anticuerpos totales se determinan mediante pruebas de detección: ELISA y reacciones de aglutinación.
En la segunda etapa (arbitraje), se utiliza una prueba más compleja: una inmunotransferencia, que permite no solo confirmar o rechazar la conclusión inicial, sino también hacerlo a nivel de determinación de anticuerpos contra proteínas individuales del virus.
Interpretación de los resultados de la prueba de anticuerpos contra el VIH.
Una cantidad bastante grande de factores diferentes influyen en el resultado de una prueba de anticuerpos contra el VIH y, entre ellos, es importante el momento de la prueba después de una posible infección.
En la mayoría de los casos, los anticuerpos contra el VIH pueden detectarse entre 6 y 12 semanas después de la infección.
Este período desde que el virus ingresa al cuerpo hasta que aparece una cantidad detectable de anticuerpos se denomina período de seroconversión positiva o período de “ventana”. Hay casos raros de aparición de anticuerpos 6 meses después de la infección, y los informes de detección de anticuerpos solo después de 1 año no tienen evidencia. Actualmente, el servicio de diagnóstico utiliza nuevas generaciones de métodos ELISA que permiten detectar anticuerpos contra el VIH entre 3 y 4 semanas después de la infección, y determinadas combinaciones de estos métodos, las llamadas estrategias de prueba, reducen el período de “ventana” a 2– 3 semanas, es decir.
permiten detectar anticuerpos contra el VIH tan pronto como comienzan a producirse en el cuerpo.
Un resultado negativo significa que no se detectaron anticuerpos contra el VIH en la sangre de la persona examinada.
Esta condición se llama seronegatividad y generalmente significa que la persona no está infectada.
Un resultado negativo no ofrece ninguna garantía para el futuro. Sólo declara la condición en el momento del examen. Existe una pequeña posibilidad de que la encuesta se haya realizado durante el período ventana. Por lo tanto, si una persona ha estado expuesta previamente al VIH y ha dado negativo en la prueba, debe volver a hacerse la prueba al menos 6 meses después del evento de riesgo.
Un resultado positivo significa que se encontraron anticuerpos contra el VIH en la sangre del paciente.
Esta condición se llama seropositividad: una persona está infectada con el VIH. Es importante comprender que un resultado positivo sólo indica infección por VIH y no SIDA.
Sin embargo, es extremadamente importante contactar a un médico después de recibir un resultado positivo para recibir asesoramiento y, si es necesario, asistencia médica, que le permitirá mantener su calidad de vida en un buen nivel durante mucho tiempo.
Resultado incierto. En casos raros, el resultado de una prueba de anticuerpos contra el VIH no está claro.
El laboratorio no puede responder si una persona es seropositiva o seronegativa. En tales circunstancias, es necesario consultar a un médico y hacerse la prueba nuevamente.