Определение количества гликопротеидов в крови. Общий белок сыворотки крови

Альбумин . Данный белок, имеющий относительную молекулярную массу 65000 Д, синтезируется в печени. Концентрация альбумина в плазме крови поддерживается на высоком уровне благодаря относительной непроницаемости для этого белка стенок кровеносных сосудов. Этот концентрационный градиент важен для поддержания постоянства объема плазмы крови. Содержание в норме: 3,5 – 5,5 г% (СИ: 33-55 / л). Белок синтезируется в печени. Альбумин не содержит углеводных остатков, образован одной длинной полипептидной цепью с большим количеством дикарбоновых аминокислот, имеет отрицательный заряд. Поэтому удерживает много положительных ионов натрия и создает основную часть осмотического давления крови.

Уникальность его пространственной структуры заключается в том, что он способен формировать высоко и низко специфичные сайты для связывания различных молекул, он обратимо соединяется с билирубином, жирными кислотами, ионами кальция, хлора, лекарственными веществами. Структурно-функциональная изменчивость является источником дополнительных функциональных способностей, в частности возможности формирования буферной антиоксидантно – проксидантной системы.

Определение его концентрации в сыворотке крови является важным диагностическим показателем в лабораторной практике. Снижение концентрации приводит к выраженному нарушению метаболизма. Гипоальбуминемия вызывается следующими факторами:

Ослаблением синтеза альбуминов биоэнергетических процессов, истощением ферментных систем;

Нарушением утилизации белка тканями при одновременном повышении его распада;

Нарушением динамического равновесия белков крови и тканей;

Использованием белка для энергетических целей при нарушении энергетического и углеводного метаболизмов;

Пропотеванием альбуминов в межтканевые пространства в силу повышенной проницаемости клеток эндотелия капиляров;

Потерей белка через почки, раневые и ожоговые поверхности;

Нарушением усвоения белка вследствие поражения желудочно-кишечного тракта.

Лизоцим – белок, секретируется во всех организмах, начиная с вирусов, кончая человеком. Имеется в сыворотке крови человека, в слезах, секретах из носа. Белок с м.м. 14000Д. Действует на пептидогликаны гр+ бпктерий, поэтому называют мурамидазой, т.е.расщепляет основное вещество клеточной стенки – муреин. Гидролизует 1,4 гликозидные связи между N - ацетилмурамовой и N – ацетилглюкозамином. Установлена его третичная структура. Это глобулярный белок из 129 аминокислот, содержит 4 дисульфидных мостика. 30 % это альфа – спираль, 70% - бетта структура. Лизоцим быстро синтезируется, накапливается в лизосомах и поступает в среду в зависимости от различных стимулов. Особенно велика его активность на слизистых оболочках. В сыворотке крови менеее активен из - за самоассоциации в гуморальной среде. Но он придает сыворотке крови 50 % бактерицидность. Лизоцим повышает свертываемость крови, способен связывать биогенные амины и другие БАВ, участвует во многих физиологических процессах, способствует выработке антител.

С – реактивный белок (СРБ) - свое название получил за способность вступать в реакцию преципитации с С – полисахаридом пневмококков. В сыворотке крови здоровых людей его мало – до 5 мг/ мл. Обнаруживается при многих заболеваниях, которые сопровождаются воспалением, некрозом тканей, он самый чувствительный маркер, увеличивается в 20 – 100 раз и до 1000 в первые 6 – 8 часов. Имеет важное диагностическое значение при ревматизме, инфаркте миокарда и является в этом случае более чувствительным тестом, чем РОЭ, лейкоцитоз.

СРБ может находиться в виде пентапексина, имея в составе 5 одинаковых негликозилированных субъединиц, нековалентно связанных друг с другом с м.м. 100 000 Д, а также в виде нео СРБ. Пентамер СРБ переходит в мономер – нео СРБ, который индуцирует воспалительный процесс. Он является мультифункциональным белком острой фазы, играет решающую роль при воспалении, в защите от чужеродных антигенов, в аутоиммунных процессах: он связывается с бактериальными полисахаридами, гликолипидами и это ведет к активации по классическому пути системы комплемента, участвует в регуляции функции иммунокомпетентных клеток. СРБ активирует моноциты, регулирует функцию нейтрофилов, усиливает фагоцитоз, индуцирует хемотаксис и выработку супероксидазы.

Гаптоглобин (Нр) – гликопротеид, образует прочный комплекс с гемоглобином и таким образом предохраняет организм от потери железа. Нр составляет 1,2 – 1,4 % общего количества протеинов сыворотки. Доказано 2 типа гаптоглобина: Нр 1- 1 с м.м. 85 тыс Д, константой седиментации 4,5 S и Нр 11 с м.м. 165 тыс. Д, константой седиментации 7 S. Тип Нр 1-1 у гомозигот, химически однороден, он способен связывать одну молекулу гемоглобина (Нb), а Нр 2 – 2 гомозиготный и Нр 2-1 гетерозиготный связывают по 2 молекулы гемоглобина. Молекулярный вес комплекса Нр. Hb 1-1 155 тыс Д, а вес комплексов Нр. Нb 2-2 и Нр.Нb 2-1 по 310- тыс Д. Наследование Нр зависит от 2 –х аутосомных генов Нр 1 и Нр 2, которые образуют белки из 2- х типов пептидных цепей: а и В- цепи. В- цепь обладает одинаковой для всех фенотипов подвижностью, а-цепь меняющаяся в зависимости от типа Нр: а1 –цепь обладает высокой подвижностью, а2 –медленной. У гомозигот Нр 1-1 – только а 1 цепь, Нр 2-2 только а2 цепь, а у гетерозигот Нр 1-2 есть и а1 и а2 цепи в равном соотношении. Типы передаются по наследству, поэтому фенотипирование используют в судебно-медицинской практике.

Гаптоглобин является реактантом острой фазы, неспецифически увеличивается его содержание на различные патологические стимулы. Он комплексируется со многими веществами, которые образуются при распаде клеток, является естественным ингибитором катепсина В. Комплекс Нр.Нb является пероксидазой, вместе с церулоплазмином тормозит перекисное окисление.

Церулоплазмин (Ср) - медьсодержащий гликопротеид плазмы крови, обладает четвертичной структурой, состоит из 8 субъединиц. В Ср входит 6-7 ионов меди, это 95% всей меди организма, Ср ее транспортирует и медь играет существенную роль в образовании четвертичной структуры. В формировании активного центра. Выявлен генетический полиморфизм Ср. Основным источником синтеза Ср является печень, но и некоторые ткани также способны его вырабатывать: лимфоциты, клетки селезенки, ткани мозга, бронхов. Синтезируется Ср геном протяженностью в 65 кб, он находится в 3 хромосоме, содержит 20 экзонов.

Функции Ср многообразны:

Является ферроксидазой – окисляет 2-х валентное железо до 3-х валентного, которое встраивается в трансферрин. Трансферрин транспортирует железо в костный мозг, где происходит синтез гема. Таким образом Ср способствует кроветворению феррооксидазной активностью;

Обладает антиоксидантным действием, он усиливая связывание окисленных ионов железа с трансферрином – исключает их из реакции перекисного окисления, Ср удаляет радиотоксины, сохраняет систему кроветврорения и таким образом повышает выживаемость организма;

Ср значительно увеличивается в сыворотке крови при различных инфекционных заболеваниях, оказывает противовоспалительное действие;

Ср регулирует уровень биогенных аминов в организме, участвует в метаболизме биогенных аминов – медиаторов нервной системы, регулирует уровень норадреналина, адреналина, серотонина.

Трансферрин (Тf) – железосодержащий гликопротеид с м.м. 76-80 кДа. Молекула скручена и имеет 2 глобулярных домена, в каждом имеется сайт для связывания железа. Комплекс метталл-белок устойчив. Синтез осуществляется с гена трансферрина, который находится в 3 хромосоме, синтезируется в гепатоцитах. Трансферрин получает жнлезо от гемоглобина. Старые эритроциты захватываются макрофагами, которые освобождают железо из протопорфиринового кольца путем действия гемоксикиназы и отдают его трансферрину.

Трансферрин находится при электрофорезе в В – глобулиновой фракции, встречается в 3-х и более генетических состояниях. Комплекс трансферрина с железом окрашивается в оранжевый цвет, здесь железо находится в 3-х валентной форме. Концентрация у здоровых людей от 200 до 400 мг%. Выявлено 19 типов Тf, различающихся по величине заряда белков молекулы, аминокислотному составу и числу молекул сиаловых кислот. Типы связаны с наследственными особенностями. В норме Тf насыщен железом на 1/ 3, дополнительное количество железа, которое может связаться с трансферрином, составляет ненасыщенную (латентную) железосвязывающую способность сыворотки крови.

В плазме здорового человека трансферрин может находиться в 4-х молекулярных формах: 1. Апотрансферрин- не связанный с железом; 2. Моножелезистый трансферрин С – железо занимает один сайт для связывания в С терминальном домене. 3. Моножелезистый трансферрин N – железо только в N сайте. 4. Дижелезистый трансферрин – железо в С и N доменах.

Сывороточный трансферрин является источником железа для всех клеток тела. Для поступления железа в клетки есть специальные механизмы – рецептор трансферриновый, он состоит из 2-х доменов с м.м. 180 кДа. На каждом домене возможно связывание 2-х молекул трансферрина. Уровень экспрессии рецептора отражает потребности клетки в поглощении железа, которые определяются скоростью клеточного деления. При присоединении трансферрина к рецептору комплекс подвергается эндоцитозу и железо освобождается от трансферрина при низком рН. Затем железо через эндосомальную мембрану транспортируется во внутриклеточный пул железа, а комплекс апотрансферрин - рецептор с помощью анутриклеточных везикул возвращается на наружную поверхность клетки. Рецептор остается включенным в мембрану, а апотрансферрин освобождается в окружающую среду.

Повышение уровня трансферрина наблюдается при дефиците железа, оно может предшествовать развитию анемии Понижение уровня трансферрина отмечается при многих хронических процессах, при циррозе печени, потери белка при ожогах, нефротическом синдроме и гастроэнтеритах, злокачественных опухолях.

Гемоглобин – в своем составе тоже содержит железо, составляет молекулярную основу дыхательной функции крови, транспортирует кислород и углекислый газ. Молекулярный вес равен 66 кДа, форма молекулы шарообразная. В воде гемоглобин хорошо растворяется. Гемоглобин состоит из белка глобина и гемма (ферропротопорфирина) нековалентно связанных между собой. Гемм представляет плоскую молекулу, в которой ион железа в центре ядра протопорфирина. Белок гемоглобина – глобин состоит из 2-х альфа и 2-х В- цепей, т.е. составляет тетрамер внутри полость, в нее обращены неполярные группы аминокислот. Они защищают молекулу изнутри от контакта с водой и стабилизируют молекулу в целом. Уровень гемоглобина в норме составляет 132-164 г/л, повышается при гипоксии, при хронической легочной недостаточности. Врожденных пороках сердца, при потери жижкости организмом, при отравлении угпрным газом. Снижается при расстройстве всасывательной способности железа, при острых кровотечениях, при гемолизе, остомиеломах, фиброзе, остеобластах, раке, поражениях почек.

Миоглобин – хромпоротеид, содержащийся в миокарде и скелетной мускулатуре, поэтому увеличивается его содержание в крови при инфаркте миокарда и при повреждении мышц. Значение его определения имеет в первые часы инфаркта миокарда (ИФМ), особенно при атипическом течении, в этом случае увеличение миоглобина происходит через 2-3 часа у 92 % больных, через 5 часов у 100%. Снижение концентрации происходит по разным типам, что имеет прогностическое значение. 1 тип – литический – характеризуется одним пиком повышения концентрации с постепенным снижением к 16-36 часам. Он характерен для неосложненного течения ИФМ. Тип 11 – гектический протекает в форме скачкообраазных изменнений от высоких цифр до нормы в первые 24 часа. Тип 111 –постоянный характеризуется постоянным высоким содержанием миоглобина с небольшими колебаниями. Наблюдается при осложненном тромбоэндокардитом ИФМ.

Компоненты системы комплемента – это не один белок, а сложная система белков, включающая около 20 взаимодействующих компонентов: С1, С2, С3.....С9, фактор В, фактор D и ряд регуляторных белков. Все эти компоненты – растворимые белки с м.м. от 24000 до 400 000Д, циркулирующие в крови и тканевой жидкости. Большинство из них не активны до тех пор, пока не будут приведены в действие или в результате иммунного ответа (с участием антител), или непосредственно внедрившимся микроорганизмом.

Один из возможных результатов активации комплемента - последовательное объединение так называемых поздних компонентов (С5, С6, С6, С7, С8 и С9) в большой белковый комплекс. Вызывающий лизис клеток (литический, или мембранатакующий, комплекс). Агрегация поздних компонентов происходит в результате ряда последовательных реакций протеолитической активации с участием ранних компонентов (С1, С2, С3, С4, фактора в и фактора D). Большинство этих ранних компонентов – проферменты. Последовательно активируемые путем протеолиза. Когда какой-либо из этих проферментов расщепляется, он становится активным протеолитическим ферментом и расщепляет следующий профермент, и т.д. Так как многие из активированных компонентов прочно связываются с мембранами, большинство этих событий происходит на поверхности клеток.

Центральный компонент этого протеолитического каскада С3 компонент. Его активация путем расщепления представляет собой главную реакцию всей цепи системы комплемента. Он может быть активирован классическим и альтернативным путем. В обоих случаях С3 расщепляется С3 конвертазой. Два разных пути приводят к образованию разных С3 конвертаз. С3 конвертаза расщепляет С3 на 2 фрагмента – большой С3b и С3а. С3b – связывается с мембраной клетки мишени и с С3 конвертазой. В результате образуется большой ферментный комплекс с измененной специфичностью - С 5 конвертаза. Затем С5 конвертаза расщепляет С5 и тем самым инициирует сборку литического комплекса из поздних компонентов от С5 до С 9. Каждый активированный фермент расщепляет много молекул следующего профермента. Каскад активации ранних компонентов действует как усилитель: каждая молекула активированная в начале всей цепи, приводит к образованию множества литических компонентов.

Функции белков системы комплемента: 1. Опсонизирующая – т.е.присоединение к м.о. различных молекул, которые являются лигандами и к ним присоединяются мононуклеарные клетки с определенными рецепторами- все это усиливает фагоцитоз. 2. Участие в воспалительных реакциях, активация системы комплемента приводит к выделению из тканевых базофилов БАВ, которые стимулируют воспалительную реакцию. 3. С3а способен вызывать миграцию нейтрофилов к месту воспаления, индуцировать их прикрепление к эндотелию сосудов, вызывать в них развитие респираторного взрыва и дегрануляцию. 4. С5а содействует хемотаксису, агрегации и дегрануляции нейтрофилов и образованию свободных радикалов кислорода. 5. Цитотоксическая или литическая функция. В конечой стадии активации комплемента образуется мембраноатакующий комплекс (МАК), который атакует мембрану бактериальной клетки и разрушает ее.

Альфа 2 – макроглобулин – ингибитор протеаз, регулирует активность различных протеолитических ферментов (Каждая субъединица имеет по две полипептидные цепитрипсин, химотрипсин, тромбин, калликреин, плазмин). Альфа макроглобулин существенно отличается от других белков сыворотки крови. Это гликопротеид м.м. 716000 – 725 000Д, состоит из 2-х субъединиц нековалентно связанных. В молекуле имеется кальций и магний. Альфа2 макроглобулин устойчив к действию температуры, чувствителен к кислым реакциям среды. При температуре 40 градусов С активность сохраняется. Синтезируется в печени, присутствует в сыворотке крови, во внеклеточной, синовиальной, амниотической, спинномозговой, лимфатической жидкости. Потеря этого белка приводит к летальному исходу.

На долю альфа 2 макроглобулина приходится до 12% ингибиторной активности крови. Образование комплекса между ферментом и ингибитором – это сложная многоступенчатая реакция. На первом этапе активная протеаза реагирует с альфа 2 макроглобулином, образуется непрочная связь, на 11 этапе фермент расщепляет пептидную связь и это приводит к конформационному изменению альфа 2 макроглобулина, а на 111 этапе протеаза ковалентно присоединяется к особому участку в молекуле альфа 2 макроглобулина. Это приводит к образованию компактной структуры, к фактическому захвату протеазы и ее блокированию, т.е. как бы альфа макроглобулин ловит в свою ловушку фермент и лишает протеазы протеолитической активности, поэтому его называют рестриктор протеаз, а не ингибитор.

Уровень альфа 2 макроглобулина снижается при вирусном гепатите, на ранних стадиях ожоговой болезни. Увеличение отмечается при нефротическом синдроме, у больных сахарным диабетом. Особая роль белка имеется при злокачественных опухолях. При далеко зашедшем процессе снижается его уровень в 2- 5 раз на фоне повышения массы опухоли.

Фибриноген – гликопротеин с м.м. 340000Д, состоит из 3-х тысяч аминокислот, имеет 2 димера в каждом 3 полипептидных цепи. Фибриноген вырабатывается паренхимными клетками печени и поступает в кровь. Фибриноген под влиянием тромбина превращается в фибрин по типу протеолитического дробления молекулы. Сначала тромбин отщепляет от молекулы фибриногена 2 пептида А, образуя неполноценные мономеры фибрина – дез А мономеры. Затем отщепляются 2 пептида В. Возникают А-В мономеры или полные мономеры фибрина.

Фибринопептиды А иногда появляются в крови – это говорит о внутрисосудистом свертывании крови. Оставшаяся молекула фибриногена – фибрин – мономер приобретает способность соединяться с себе подобными и образовывать фибрин - полимер, который представляет гель. Сборка мономеров проходит этапы формирования димеров, которые в продольном и поперечном сшивании образуются полимеры фибрина – протофибриллы, а затем нити фибрина. Тромб из такого фибрина легко растворяется фибринолизином и он не может обеспечить полноценный гомеостаз. Это бывает причиной кровоточивости и плохого заживления ран.

2.4. Определение некоторых индивидуальных белков сыворотки крови

2.4.1. Определение гаптоглобина

Принцип метода: сывороточный гаптоглобин образует с раствором гемоглобина комплекс, осаждаемый риванолом. По уровню оставшегося в растворе гемоглобина фотометрически определяют содержание гаптоглобина в сыворотке крови.

Реактивы:

1. Риванол. К 100 мг риванола добавить 15 мл дистиллированной воды, встряхнуть до полного растворения.

2. Гемоглобин. К 100 мг гемоглобина добавить 10 мл дистиллированной воды, встряхнуть и центрифугировать 10 минут при 3000 об/мин для удаления агрегатов.

3. раствор сульфата аммония 10 %.

Ход определения: Для проведения исследования необходимо поставить 3 пробы: опытную, контрольную и стандартную.

В опытную пробу вносят 0,3 мл дистиллированной воды, 0,5 мл негемолизированной сыворотки, 0,2 мл раствора гемоглобина и перемешивают.

В контрольную пробу вносят 0,5 мл дистиллированной воды, 0,5 мл сыворотки крови и перемешивают. Обе пробы инкубируют 10 минут при комнатной температуре, после чего добавляют по 3 мл раствора риванола.

В стандартную пробу вносят 2,8 мл дистиллированной воды и 0,2 мл гемоглобина, перемешивают. Через 5 минут все три пробы центрифугируют при 3000 об/ мин в течение 6-7 минут. К надосадочной жидкости добавляют 0,2 мл 10 %-ного раствора сульфата аммония и инкубируют 60 минут при комнатной температуре.

Оценка результата; расчет ведут по формуле:

Х = ((Ес - (Ео - Ек) х2) / Ес, ЭТО надо исправить

где Х - концентрация гаптоглобина г/л; Ес, Ео, Ек – оптическая плотность стандартной, опытной, контрольной проб.

МУЗ «ПЕРВАЯ ГОРОДСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА СКОРОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ»

СЕВЕРНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КУРС КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

Общий белок, его значение и методы определения

Выполнила врач-интерн:

Гернет М.М.

г. Архангельск2008 г.

Введение

Классификация

Белки плазмы крови

Альбумины

Глобулины

Клинико-диагностическое значение

Гипопротеинемия

Гиперпротеинемия

Методы определения общего белка в сыворотке крови

Список использованной литературы

Введение

Белки – высокомолекулярные органические азотсодержащие соединения, состоящие более чем из 20 видов альфа-аминокислот. Условной границей между крупными полипептидами и белками служит молекулярная масса 8000-10000. Плазменные белки синтезируются преимущественно в печени, клетках плазмы, лимфатических узлах, селезенке и костном мозге.

Плазма крови человека содержит более 100 различных белков, различающихся по происхождению и функциям. Из 9-10% сухого остатка плазмы крови на долю белков приходится 6.5-8.5%.

Классификация

· Простые (протеины) (содержат только аминокислоты)

· Сложные (протеиды) (аминокислоты и неаминокислотные компоненты: гем, производные витаминов, липиды или углеводы)

· Фибриллярные (составляющие многие плотные ткани)

· Глобулярные (альбумины (4-5%), глобулины (2-3%), фибриноген (0.2-0.4%)

Существуют следующие функциональные классы белков:

Транспортные белки (трансферрин)

Белки острой фазы (С-реактивный белок)

Белки неострой фазы (Альбумин, трансферрин)

Комплемент и свертывающие факторы (комплемент С4, фактор VIII)

Ферменты (Амилаза)

Антифермент (Антитромбин III)

Протеогормоны (Инсулин)

Иммуноглобулины (IgG)

Белки, чьи функции недостаточно изучены (альфа-гликопротеиновая кислота)

Физиологическая функция белков плазмы состоит в поддержании коллоидно-осмотического давления, буферной емкости плазмы, в некоторых случаях – депонировании (хранении) молекул липидов, продуктов метаболизма, гормонов, лекарственных веществ и микроэлементов. Некоторые белки плазмы выполняют ферментативную функцию, иммуноглобулины осуществляют гуморальный иммунитет. Компоненты комплемента и С-реактивный белок важны для осуществления неспецифической резистентности, особенно в случае бактериальных инфекций. Баланс между факторами и ингибиторами свертывания обеспечивают жидкое состояние крови в норме и быстрое свертывание в случае травмы

Белки плазмы крови

Альбумины:

Нормируемое значение 56.5 – 66.8 (На альбумин в сыворотке крови приходится приблизительно 60% общего белка. Альбумины синтезируются в печени (примерно 15г/сут), время их полураспада составляет примерно 17 дней. Онкотическое давление плазмы на 65-80 % обусловлено альбумином. Альбумины выполняют важную функцию транспортировки многих биологически активных веществ, в частности гормонов. Они способны связываться с ХС, билирубином. Значительная часть кальция в крови также связана с альбумином. Альбумины способны соединяться с различными ЛС.

Возможны как качественные, так и количественные изменения альбуминов плазмы крови. Качественные изменения альбуминов очень редки из-за гомогенного состава этой белковой фракции; количественные изменения проявляются гипер- и гипоальбуминемией.

Гиперальбуминемию наблюдают при дегидратации в случаях тяжелых травм, при обширных ожогах, холере.

Гипоальбуминемии бывают первичные (у новорожденных детей в результате незрелости печеночных клеток) и вторичные, обусловленные различными патологическими состояниями, аналогичными тем, что вызывают гипопротеинемию. В понижении концентрации альбуминов может также играть роль гемодилюция, например при беременности. Снижение содержания альбуминов ниже 22-24 г/л сопровождается развитием отека легких.)

Глобулины:

· Альфа 1 - 3.5 - 6.0 (основные компоненты данной фракции включают α 1 –антитрипсин, α 1 – липопротеид, кислый α 1 – гликопротеид) (Изменение фракции α 1 – глобулинов наблюдают при острых, подострых, обострении хронических воспалительных процессов; поражении печени; всех процессах тканевого распада или клеточной пролиферации. Снижение фракции α 1 – глобулинов наблюдают при дефиците α 1 – антитрипсина, гипо - α 1 – липопротеидемии.)

· Альфа 2 - 6.9 – 10.5 (фракция содержит α 2 – макроглобулин, гаптоглобин, алипопротеины А, В (апо-А, апо-В), С, церулоплазмин) (увеличение фракции α 2 – глобулинов наблюдают при всех видах острых воспалительных процессах, особенно с выраженным экссудативным и гнойным характером (пневмонии, эмпиема плевры, другие виды гнойных процессов); заболеваниях, связанных с вовлечением в патологический процесс соединительной ткани (коллагенозы, аутоиммунные заболевания, ревматические заболевания); злокачественных опухолях; в стадии восстановления после термических ожогов; нефротическом синдроме; гемолизе крови в пробирке. Снижение фракции наблюдают при сахарном диабете, панкреатитах (иногда), врожденной желтухе механического происхождения у новорожденных, токсических гепатитах. К α 2 – глобулинам относится основная масса белков острой фазы. Увеличение их содержания отражает интенсивность стрессорной реакции и воспалительных процессов при перечисленных видах патологии.

· Бета - 7.3 – 13.0 (β-фракция содержит трансферрин, гемопексин, компоненты комплемента, иммуноглобулины и липопротеины) (увеличение фракции бета-глобулинов выявляют при первичных и вторичных гиперлипопротеинемиях, заболеваниях печени, нефротическом синдроме, кровоточащей язве желудка, гипотиреозе. Понижение величины содержания бета-глобулинов выявляют при гопо-бета-липопротеинемии.

· Гамма - 12.8 – 19.0 (γ-фракция содержит Ig (IgG, IgA, IgM IgD, IgE), поэтому повышение содержания γ-глобулинов отмечают при реакции системы иммунитета, когда происходит выработка AT и аутоантител: при вирусных и бактериальных инфекциях, воспалении, коллагенозах, деструкции тканей и ожогах. Значительная гипергаммаглобулинемия, отражая активность воспалительного процесса, характерна для хронически активных гепатитов и циррозов печени. Повышение фракции γ - глобулинов наблюдают у 88-92% больных хроническим активным гепатитом (причем у 60-65% больных оно весьма выраженное - до 26 г/л и выше). Почти такие же изменения отмечают у больных при высокоактивном и далеки зашедшем циррозе печени, при этом нередко содержание γ-глобулином превышает содержание альбуминов, что считают плохим прогностическим признаком.

При определённых заболеваниях возможен повышенный синтез белком, попадающих в фракцию γ-глобулинов, и в крови появляются патологические протеины - парапротеины, которые выявляют при электрофорезе. Для уточнения характера этих изменений необходим иммуноэлектрофорез. Подобные изменения отмечают при миеломной болезни, болезни Вальденстрема.

Уменьшение содержания γ-глобулинов бывает первичным и вторичным.

Различают три основных вида первичных гипогаммаглобулинемий: физиологическую (у детей в возрасте 3-5 мес), врождённую и идиопатическую. Причинами вторичных гипогаммаглобулинемий могут быть многочисленные заболевания и состояния, приводящие к истощению иммунной системы.

Сопоставление направленности изменении содержания альбуминов и глобулинов с изменениями общего содержания белка даёт основание для заключения, что гиперпротеинемия чаще связана с гиперглобулинемиями, в то время как гипопротеинемия обычно обусловлена гипоальбуминемией. В прошлом широко применяли вычисление альбумин-глобулинового коэффициента, то есть отношения величины фракции альбуминов к величине фракции глобулинов. В норме этот показатель составляет 2,5-3,5. У больных хроническими гепатитами и циррозами печени этот коэффициент снижается до 1,5 и даже до 1 за счёт снижения содержания альбумина и повышения фракции глобулинов. В последние годы всё больше внимания уделяют определению содержания преальбуминов, особенно у тяжёлых реанимационных больных, находящихся на парентеральном питании. Снижение концентрации преальбуминов - ранний и чувствительный тест белковой недостаточности в организме больного.)

Коэффициент А\Г обычно используется как индекс соотношения альбумина и глобулинов.

Изменения этого коэффициента могут наблюдаться при циррозе печени, гломерулонефрите, нефротическом синдроме, остром гепатите, системной красной волчанке.

Концентрация белков в плазме крови зависит от соотношения между скоростью их синтеза и выведения из организма, а также объема распределения.

Многие белки образуются в печени, плазматические клетки и лимфоциты синтезируют иммуноглобулины, макрофаги – белки системы комплимента. Пассивная потеря белков с низкой молекулярной массой происходит через почечные клубочки и стенку кишечника. Часть из этих белков подвергается реабсорбции либо захватывается и расщепляется в слизистой оболочке кишечника. Большинство белков плазмы после их захвата путем пиноцитоза катаболизируется в клетках эндотелия капилляров или мононуклеарных фагоцитов.

Физиологические роли белков крови многочисленны, основные из них следующие:

· Поддерживают коллоидно-онкотическое давление, сохраняя объем крови, связывая воду и задерживая ее, не позволяя выходить из кровеносного русла;

· Принимают участие в процессах свертывания крови;

· Поддерживают постоянство Рн крови, формируя одну из буферных систем крови;

· Соединяясь с рядом веществ (ХС, билирубин и др.), а также с ЛС, доставляют их в ткани.

· Поддерживают нормальный уровень катионов в крови путем образования с ними недиализируемых соединений (например, 40-50%кальция сыворотки связано с белками; значительная часть железа, меди, магния и других микроэлементов также связано с белками);

· Играют важнейшую роль в иммунных процессах;

· Служат резервом аминокислот;

· Выполняют регулирующую функцию (гормоны, ферменты и другие биологически активные белковые вещества).

Клинико-диагностическое значение

Нормопротеинемия – нормальное содержание общего белка

Гипопротеинемия – пониженное содержание общего белка

Гиперпротеинемия – повышенное содержание белка

Гипопротеинемия

1. Недостаточное поступления белка пищи, наблюдаемое обычно при недоедании, голодании, опухоли, сужении пищевода, нарушении функции желудочно-кишечного тракта (вследствие ухудшения переваривания и всасывания белковых компонентов пищевых продуктов), например, при продолжительных воспалительных процессах кишечника.

По мнению А.А.Покровского, даже несбалансированный аминокислотный состав пищи может иногда приводить к гипопротеинемии.

Для обеспечения нормальных процессов жизнедеятельности организм утилизирует альбуминовую фракцию белков плазмы крови. При усиленном расходовании альбуминов (в основном обусловливающих онкотическое давление крови) развиваются так называемые онкотические или голодные отеки. Вообще говоря, всякое уменьшение содержания белка в плазме крови ниже 5 г% часто сопровождается гипопротеинемическими отеками тканей.

2. Понижение процессов биосинтеза белка (хронические паренхиматозные гепатиты, острые и хронические заболевания, длительные нагноительные процессы, злокачественные новообразования, тяжелые тиреотоксикозы и т.д.).

3. Потеря белка организмом при острых и хронических кровотечениях, при резко увеличенной проницаемости капиллярных стенок (при токсическом их поражении, когда белки крови выходят в ткани), при кровоизлияниях, образовании обширных экссудатов, выпотов в серозные полости, отеках.

Выход белков(главным образом альбуминов)из русла крови происходит при нарушении почечного фильтра вследствие органических заболеваний почек (особенно нефрозах и амилоидозах), при которых белок почти всегда обнаруживается в моче, а также при ожогах.

4. Дефектопротеинемии (альбуминемия) – врожденное отсутствие или недостаточное содержание церулоплазмина в плазме крови при болезни Вильсона.

5. У женщин в период лактации и последних месяцев беременности.

6. Нефротический синдром

7. Квашиоркор (острая белковая недостаточность)

8. Ретенционный солевой синдром

Гиперпротеинемия

1. Серьезное обезвоживание

2. При сгущении крови из-за незначительных потерь жидкости, что бывает при профузных поносах, усиленном потоотделении, неукротимой рвоте, несахарном диабете, при холере, непроходимости кишечника, генерализованном перитоните, тяжелых ожогах, лишении воды.

3. При хроническом полиартрите и некоторых и некоторых хронических воспалительных процессах.

4. Стойкая гиперпротеинемия до 12 г% и выше отмечается при миеломной болезни (плазмацитоме), макроглобулинемии Вандельстрема, при которых в плоских костях черепа появляются дополнительные очаг и образования «ненормальных», патологических белков – парапротеинов.

Гипопротеинемия связана почти всегда с гипоальбуминемией, а гиперпротеинемия – с гиперглобулинемией.

Гипоальбуминемию организм компенсирует гиперглобулинемией (даже если нет раздражения ретикуло-эндотелиальной системы) для того, чтобы сохранить уровень коллоидно-осмотического давления. Напротив, увеличение глобулинов компенсируется гипоальбуминемией.

Важное диагностическое значение имеет выяснение количественных взаимоотношений между отдельными фракциями сыворотки крови. Их изучение позволяет произвести дифференциацию заболеваний даже тогда, когда содержание общего белка в сыворотке оказывается неизменным.

Методы определения общего белка в сыворотке крови

Референтные величины концентрации общего белка в сыворотке крови – 65-85 г/л

1. Азотметрические

2. Определение удельного веса сыворотки

3. Весовые (гравиметрические), когда белки крови осаждают, высушивают до постоянного веса и взвешивают на аналитических весах.

4. Рефрактометрические

5. Колориметрические

6. Нефлометрические

7. Поляриметрические

8. Спектрофометрические

1. Рефрактометр ИРФ – 454 Б2М

предназначен для определения белка в сыворотке крови, спинно-мозговой жидкости, контроля концентрации лекарств, измерения плотности мочи.

2. Cobas integra – Total Protein Gen .2

Принцип теста: двухвалентная медь реагирует в щелочном растворе с белковыми пептидными связями с образованием характерного пурпурного цветного биуретового комплекса.

3. Определение белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза на ацетатцеллюлозной пленке.

Буферный раствор предназначен для электрофоретического разделения белков сыворотки крови на мембранах из ацетатцеллюлозы с последующим денситометрическим определением белковых фракций.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Принцип электрофоретического разделения белков основан на различной скорости движения молекул белков сыворотки крови в постоянном электрическом поле определенной напряженности. Разделенные белковые фракции окрашиваются красителем. Интенсивность окраски белковых фракций пропорциональна их количеству.

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Сыворотка крови, свободная от гемолиза, липемии и не желтушная. Белковые фракции сыворотки крови стабильны в плотно закрытой пробирке при 18-25 в течение 8 часов, при 2-8 – в течение 3 дней, при 20 – в течение 1 месяца.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

1. Проведение электрофореза

1.1. сухие мембраны осторожно положить на поверхность буфера для электрофореза, избегая быстрого их погружения, и выдержать до полного смачивания. Смоченные мембраны аккуратно промокнуть между листами плотной фильтровальной бумаги, не допуская их высыхания. Перед нанесением образцов желательно провести фазу префореза. Для этого мембрану следует поместить в камеру для электрофореза и включить ток в выбранном режиме на 10 минут. Фазу префореза можно заменить длительным замачиванием мембраны в растворе буфера (несколько часов).

1.2. с помощью аппликатора нанести анализируемые образцы сыворотки крови на расстоянии 2-3 см от катодного края мембраны. Мембрану поместить в электрофоретическую камеру и подключить ток.

2. Обработка электрофореграммы

2.1. краситель Пунцовый С.

После отключения тока мембрану осторожно перенести в раствор красителя на 3-5 минут, затем дважды на 3 минуты в 5-7% раствор уксусной кислоты (до отбеливания фона).

1.2. электрофореграмму обработать с помощью сканера и компьютерной программы.

4. Тимоловая проба

Принцип метода:

Сывороточные бета-глобулины, гамма-глобулины и липопротеины осаждаются при рН 7.55 тимоловым реактивом. В зависимости от количества и взаимного отношения белковых фракций при реакции возникает помутнение, интенсивность которого измеряют турбидиметрически.

Клинико-диагностическое значение:

Тимоловая проба более пригодна для функционального исследования печени, чем коллоидно-устойчивые пробы. Считают что она положительна в 90-100 % случаев болезни Боткина (уже в преджелтушной ее стадии и при безжелтушной форме) и при токсическом гепатите. Реакция положительна при послегепатитном и постнекротическом, особенно желтушном циррозе (в отличие от других форм циррозов), при коллагеновых заболеваниях, малярии и вирусных инфекциях. При механической желтухе она (в 75% случаев) отрицательна, что имеет дифференциально-диагностическое значение.

При механической желтухе проба становится положительной лишь в случае, если процесс осложняется паренхиматозным гепатитом. Для дифференциации механической желтухи от паренхиматозной большое значение имеет применение тимоловой пробы с пробой Бурштейна (на бета- и пре-беталипопротеиды).

При паренхиматозной желтухе обе пробы положительны, при механической желтухе тимоловая проба отрицательна, проба Бурштейна – резко положительна.

Список использованной литературы

1. Специфические белки в клинической лабораторной диагностике: вопросы и ответы. – Тёпфер Г., Тома Р., Цавта Б., М., 2004. – 96с

МУЗ «ПЕРВАЯ ГОРОДСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА СКОРОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ»

СЕВЕРНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КУРС КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

Общий белок, его значение и методы определения

Выполнила врач-интерн:

Гернет М.М.

г. Архангельск 2008 г.

ВВЕДЕНИЕ

Классификация

Белки плазмы крови

Альбумины

Глобулины

Клинико-диагностическое значение

Гипопротеинемия

Гиперпротеинемия

Методы определения общего белка в сыворотке крови

Список использованной литературы

ВВЕДЕНИЕ

Белки - высокомолекулярные органические азотсодержащие соединения, состоящие более чем из 20 видов альфа-аминокислот. Условной границей между крупными полипептидами и белками служит молекулярная масса 8000-10000. Плазменные белки синтезируются преимущественно в печени, клетках плазмы, лимфатических узлах, селезенке и костном мозге.

Классификация

· Простые (протеины) (содержат только аминокислоты)

· Фибриллярные (составляющие многие плотные ткани)

· Глобулярные (альбумины (4-5%), глобулины (2-3%), фибриноген (0.2-0.4%)

Существуют следующие функциональные классы белков:

Транспортные белки (трансферрин)

Белки острой фазы (С-реактивный белок)

Белки неострой фазы (Альбумин, трансферрин)

Комплемент и свертывающие факторы (комплемент С4, фактор VIII)

Ферменты (Амилаза)

Антифермент (Антитромбин III)

Протеогормоны (Инсулин)

Иммуноглобулины (IgG)

Белки, чьи функции недостаточно изучены (альфа-гликопротеиновая кислота)

Физиологическая функция белков плазмы состоит в поддержании коллоидно-осмотического давления, буферной емкости плазмы, в некоторых случаях - депонировании (хранении) молекул липидов, продуктов метаболизма, гормонов, лекарственных веществ и микроэлементов. Некоторые белки плазмы выполняют ферментативную функцию, иммуноглобулины осуществляют гуморальный иммунитет. Компоненты комплемента и С-реактивный белок важны для осуществления неспецифической резистентности, особенно в случае бактериальных инфекций. Баланс между факторами и ингибиторами свертывания обеспечивают жидкое состояние крови в норме и быстрое свертывание в случае травмы

Бел ки плазмы крови

Альбумины:

Нормируемое значение 56.5 - 66.8 (На альбумин в сыворотке крови приходится приблизительно 60% общего белка. Альбумины синтезируются в печени (примерно 15г/сут), время их полураспада составляет примерно 17 дней. Онкотическое давление плазмы на 65-80 % обусловлено альбумином. Альбумины выполняют важную функцию транспортировки многих биологически активных веществ, в частности гормонов. Они способны связываться с ХС, билирубином. Значительная часть кальция в крови также связана с альбумином. Альбумины способны соединяться с различными ЛС.

Гиперальбуминемию наблюдают при дегидратации в случаях тяжелых травм, при обширных ожогах, холере.

Глобулины:

· Альфа 1 - 3.5 - 6.0 (основные компоненты данной фракции включают б 1 -антитрипсин, б 1 - липопротеид, кислый б 1 - гликопротеид) (Изменение фракции б 1 - глобулинов наблюдают при острых, подострых, обострении хронических воспалительных процессов; поражении печени; всех процессах тканевого распада или клеточной пролиферации. Снижение фракции б 1 - глобулинов наблюдают при дефиците б 1 - антитрипсина, гипо - б 1 - липопротеидемии.)

· Альфа 2 - 6.9 - 10.5 (фракция содержит б 2 - макроглобулин, гаптоглобин, алипопротеины А, В (апо-А, апо-В), С, церулоплазмин) (увеличение фракции б 2 - глобулинов наблюдают при всех видах острых воспалительных процессах, особенно с выраженным экссудативным и гнойным характером (пневмонии, эмпиема плевры, другие виды гнойных процессов); заболеваниях, связанных с вовлечением в патологический процесс соединительной ткани (коллагенозы, аутоиммунные заболевания, ревматические заболевания); злокачественных опухолях; в стадии восстановления после термических ожогов; нефротическом синдроме; гемолизе крови в пробирке. Снижение фракции наблюдают при сахарном диабете, панкреатитах (иногда), врожденной желтухе механического происхождения у новорожденных, токсических гепатитах. К б 2 - глобулинам относится основная масса белков острой фазы. Увеличение их содержания отражает интенсивность стрессорной реакции и воспалительных процессов при перечисленных видах патологии.

· Бета - 7.3 - 13.0 (в-фракция содержит трансферрин, гемопексин, компоненты комплемента, иммуноглобулины и липопротеины) (увеличение фракции бета-глобулинов выявляют при первичных и вторичных гиперлипопротеинемиях, заболеваниях печени, нефротическом синдроме, кровоточащей язве желудка, гипотиреозе. Понижение величины содержания бета-глобулинов выявляют при гопо-бета-липопротеинемии.

· Гамма - 12.8 - 19.0 (г-фракция содержит Ig (IgG, IgA, IgM IgD, IgE), поэтому повышение содержания г-глобулинов отмечают при реакции системы иммунитета, когда происходит выработка AT и аутоантител: при вирусных и бактериальных инфекциях, воспалении, коллагенозах, деструкции тканей и ожогах. Значительная гипергаммаглобулинемия, отражая активность воспалительного процесса, характерна для хронически активных гепатитов и циррозов печени. Повышение фракции г - глобулинов наблюдают у 88-92% больных хроническим активным гепатитом (причем у 60-65% больных оно весьма выраженное -- до 26 г/л и выше). Почти такие же изменения отмечают у больных при высокоактивном и далеки зашедшем циррозе печени, при всём этом нередко содержание г-глобулином превышает содержание альбуминов, что считают плохим прогностическим признаком.

При определённых заболеваниях возможен повышенный синтез белком, попадающих в фракцию г-глобулинов, и в крови появляются патологические протеины -- парапротеины, которые выявляют при электрофорезе. Для уточнения характера этих изменений необходим иммуноэлектрофорез. Подобные изменения отмечают при миеломной болезни, болезни Вальденстрема.

Уменьшение содержания г-глобулинов бывает первичным и вторичным.

Сопоставление направленности изменении содержания альбуминов и глобулинов с изменениями общего содержания белка даёт основание для заключения, что гиперпротеинемия чаще связана с гиперглобулинемиями, в то время как гипопротеинемия обычно обусловлена гипоальбуминемией. В прошлом широко применяли вычисление альбумин-глобулинового коэффициента, то есть отношения величины фракции альбуминов к величине фракции глобулинов. В норме этот показатель составляет 2,5-3,5. У больных хроническими гепатитами и циррозами печени этот коэффициент снижается до 1,5 и даже до 1 за счёт снижения содержания альбумина и повышения фракции глобулинов. В последние годы всё больше внимания уделяют определению содержания преальбуминов, особенно у тяжёлых реанимационных больных, находящихся на парентеральном питании. Снижение концентрации преальбуминов -- ранний и чувствительный тест белковой недостаточности в организме больного.)

Коэффициент А\Г обычно используется как индекс соотношения альбумина и глобулинов.

Многие белки образуются в печени, плазматические клетки и лимфоциты синтезируют иммуноглобулины, макрофаги - белки системы комплимента. Пассивная потеря белков с низкой молекулярной массой происходит через почечные клубочки и стенку кишечника. Часть из этих белков подвергается реабсорбции либо захватывается и расщепляется в слизистой оболочке кишечника. Большинство белков плазмы после их захвата путем пиноцитоза катаболизируется в клетках эндотелия капилляров или мононуклеарных фагоцитов.

Физиологические роли белков крови многочисленны, основные из них следующие:

· Принимают участие в процессах свертывания крови;

· Поддерживают постоянство Рн крови, формируя одну из буферных систем крови;

· Соединяясь с рядом веществ (ХС, билирубин и др.), а также с ЛС, доставляют их в ткани.

· Играют важнейшую роль в иммунных процессах;

· Служат резервом аминокислот;

· Выполняют регулирующую функцию (гормоны, ферменты и другие биологически активные белковые вещества).

К линико-диагностическое значение

Нормопротеинемия - нормальное содержание общего белка

Гипопротеинемия - пониженное содержание общего белка

Гиперпротеинемия - повышенное содержание белка

Гипопротеинемия

4. Дефектопротеинемии (альбуминемия) - врожденное отсутствие или недостаточное содержание церулоплазмина в плазме крови при болезни Вильсона.

5. У женщин в период лактации и последних месяцев беременности.

6. Нефротический синдром

7. Квашиоркор (острая белковая недостаточность)

8. Ретенционный солевой синдром

Гиперпротеинемия

1. Серьезное обезвоживание

3. При хроническом полиартрите и некоторых и некоторых хронических воспалительных процессах.

Гипопротеинемия связана почти всегда с гипоальбуминемией, а гиперпротеинемия - с гиперглобулинемией.

Методы определения общего белка в сыворотке крови

Референтные величины концентрации общего белка в сыворотке крови - 65-85 г/л

1. Азотметрические

2. Определение удельного веса сыворотки

4. Рефрактометрические

5. Колориметрические

6. Нефлометрические

7. Поляриметрические

8. Спектрофометрические

1. Рефрактометр ИРФ - 454 Б2М

2. Cobas integra - Total Protein Gen .2

3. Определение белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза на ацетатцеллюлозной пленке .

ПРИНЦИП МЕТОДА

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Сыворотка крови, свободная от гемолиза, липемии и не желтушная. Белковые фракции сыворотки крови стабильны в плотно закрытой пробирке при 18-25 в течение 8 часов, при 2-8 - в течение 3 дней, при 20 - в течение 1 месяца.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

1. Проведение электрофореза

2. Обработка электрофореграммы

2.1. краситель Пунцовый С.

1.2. электрофореграмму обработать с помощью сканера и компьютерной программы.

4. Тимоловая проба

Принцип метода:

Клинико-диагностическое значение:

При паренхиматозной желтухе обе пробы положительны, при механической желтухе тимоловая проба отрицательна, проба Бурштейна - резко положительна.

С писок использованной литературы

1. Специфические белки в клинической лабораторной диагностике: вопросы и ответы. - Тёпфер Г., Тома Р., Цавта Б., М., 2004. - 96с

Автореферат диссертации по медицине на тему Диагностическое значение определения трофобластического В1-гликопротеина и продуктов ПОЛ в оценке состояния фето-плацентарной системы при гестозах

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ имени И.М. СЕЧЕНОВА

На правах рукописи УДК 618.3-008.6-07:618.36

АЛЕКСАНДРОВ ЛЕОНИД СЕМ^ ,ВИЧ

ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО В^ГЛИКОПРОТЕИНА И ПРОДУКТОВ ПОЛ В ОЦЕНКЕ СОСТОЯНИЯ ФЕТО-ПЛАЦЕНТАРНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ГЕСТОЗАХ

14.00.01 - акушерство и гинекология

Москва - 1992

Работа выполнена имени И.М.Сеченова

Московской медицинской академии

Научный руководитель: Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Н.М. Побединский

доктор медицинских наук, профессор Е.А. Чернуха

доктор медицинских наук, профессор И.Б. Манухин

Ведущая организация: МОНИАГ МЗ РФ

Защита состоится " "_ 1992 г.

в - ■ - часов на заседании специализированного Совета Д 074.05.02 Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (г. Москва, ул. Б.Пироговская, д. 2/6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (г. Москва, Зубовская площадь, д. 1)

Ученый секретарь специализированного совета, доктор медицинских наук

А.М. Шелутко

ГОСУАД?-: :j ля

SHi>i"iviw ä Г: г, А

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Несмотря на значительные успехи акушерской науки, проблема беременности, осложненной гестозом, является одной из самых актуальных, так как именно гестозам принадлежит одно из первых мест в структуре материнской и пеританальной заболеваемости и смертности (Савельева Г.М., 1991 г., Репина М.А., 1991 г.) .Частота возникновения перитональных осложнений в зависимости от тяжести гестоза колеблется в пределах от 7,7% до 44,4% (Каршунина JI.M., Кагенюк Ю.А., 1984 г., Сокольский Я.П., 1981 г.), и несмотря на достигнутые в последнее время успехи не имеет устойчивой тенденции к снижению. Поэтому изучение патогенеза фето-плацентарной недостаточности при гестозе, разработка адекватных методов ранней диагностики нарушений состояния внутриутробного плода имеет очень большое значение. С этой точки зрения несомненный теоретический и практический интерес представляет изучение специфических плацентарных антигенов, в частности трофобластического В1-гликопротеина (ТБГ). Поскольку плацента представляет собой орган, специфический для эмбрионального периода, сывороточный уровень ТБГ может позволить объективно оценить изменение специфического биохимического статуса, возникающего при беременности. Имеющиеся же данные о динамике содержания ТБГ при неосложненном.естационном процессе и при гестозе достаточно противоречивы.

В последние годы показана важная роль в патогенезе многих эндокрино-обменных заболеваний и патологических состояний нарушения регуляции процесса свободно-радикального окисления липидов (ПОЛ). Состоянию системы ПОЛ при гестозе посвящен ряд работ (Ганина A.A., 1985 г., Грищенко В.И. с соавт., 1986г., Кущ И.Б., 1986 ., Лебеденко B.C., 1987 г.), однако, в большинстве своем, объектом изучения являласьсыворотка крови или мембрана эритроцита, и лишь в отдельных работах изучался процесс ПОЛ в структурных элементах трофобласта. Помимо этого, недостаточно комплексных исследований, позволяющих с разных сторон оценить состояние фето-плацентарной системы при гестозе, в связи с чем актуальным представляется изучение взаимосвязи динамики ТБГ ипроцессов ПОЛ с гормональной функцией фето-плацентарного комплекса.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является совершенствование методов диагностики состояния фето-плацентарной системы при гестозах. В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучить содержание ТБГ в сыворотке крови в динамике физиологической беременности;

2. Выявить особенности изменения уровня ТБГ при беременности, осложненной гестозом различной степени тяжести в динамике, определить влияние различных клинических проявлений гестоза на уровень сывороточного ТБГ;

3. Определить особенности изменений ТБГ при развитии фето-плацентарной недостаточности при гестозе;

4. Изучить влияние различных клинических проявлений гестоза на гормонпродуцирующую функцию фето-плацентарного комплекса;

5. Выявить особенности регуляции реакций ПОЛ в плаценте, а аткже состяние антиоксидантной системы крови при гестозе различной степени тяжести, их зависимость от формы и длительности гестоза и при развитии фето-плацентарной недостаточности.

Научная новизна. Впервые в нашей стране проведено изучение содержания ТБГ в сыворотке крови в динамике физиологической беременности с 8 до 42 недель с двухнедельным интервалом, изучено содержание ТБГ в сыворотке крови в динамике при чистых и сочетанных формах гестоза. Выявлен характер взаимодействия между процессом ПОЛ в плаценте и активностью антиоксидантной системы крови при гестозах различной степени тяжести, зависимость этих процессов от формы и длительности гестоза, их состояние при фето-плацентарной недостаточности.

Теоретическая и практическая значимость работы. Комплексное исследование состояния фето-плацентарной системы при гестозах различной степени тяжести позволяет расширить современные представления о патогенезе развитияфето-плацентарной недостаточности при гестозе, дать оценку диагностической и прогностической значимости комплексного определения ТБГ, эстриола, прогестерона и кортизола в крови беременных с гестозом, научно обосновать применение антиоксидантной терапии при гестозе.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Осложнение беременности гестозом вызывает патологические изменения в состоянии фето-плацентарного

гомеостаза, выражающиеся в нарушении синтеза ТБГ, гормональной функции плаценты, взаимоотношения про- и антиоксидантных систем.

2. При физиологической беременности содержание ТБГ в сыворотке крови прогрессивно нарастает до 36 недель беременности, после чего происходит снижение уровня к сроку родов. Развитие гестоза сопровождается снижением уровня ТБГ и характера его динамики. Выявленные нарушения находятся в прямой зависимости от степени тяжести гестоза и его клинических особенностей. Развитие фето-плацентарной недостаточности также сопровождается снижением уровня сывороточного ТБГ, что можно использовать в комплексной диагностике состояния фето-плацентарной системы при гестозах.

3. Гестозы приводят к нарушению гормональной функции фето-плацентарной системы, степень и характер которого находится в зависимости от клинических особенностей заболевания и отражает этапы компенсаторно-адаптационных нарушений в системе мать-плацента-плод.

4. Развитие гестоза сопровождается дисбалансом про- и антиоксидантных систем, характер которого зависит от клинических проявлений заболевания. Легкая форма гестоза характеризуется активацией реакций ПОЛ в плаценте и компенсаторным повышением антиоксидантной активности крови; при средней и тяжелой форме заболевания, на фоне более выраженной интенсгфикации ПОЛ в плаценте.

Апробация клинических итогов работы. Работа выполнена на кафедре акушерства и гинекологии I лечебного факультета Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова. По теме диссертации опубликована одна печатная работа, две - приняты в печать. Статьи отражают основные положения диссертационной работы. Апробация диссертации состоялась 13 мая 1992 года на заседании сотрудников кафедры акушерства и гинекологии I лечебного факультета.

Объем и структура работы. Диссертация сотоит из введения, обзора литературы, общей характеристики собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Работа изложена на 109 страницах машинописного текста, иллюстрирована 13 рисунками и 50 таблицами. Литературный указатель содержит 169 отечественных и 105 иностранных источников.

Общая клиническая характеристика обследованных пациенток. С целью выполнения поставленных задач в настоящей работе проведены: клиническое обследование, анализ данных анамнезу, течение и ведение беременности и родов, состояние новорожденных у 318 женщин. Подбор беременных проводился методом случайной выборки. Все обследованные женщины были распределены на две основные группы: контрольную группу составили 198 женщин с неосложненным течением беременности, основную - 120 женщин, беременность которых осложнилась гестозом различной степени тяжести.

Характеристика контрольной группы. 198 пациенток в возрасте от 17 до 40 лет. Обследование проводилось в сроках от 8 до 42 недель с двухнедельным интервалом. В контрольную группу не были включены беременные с "высоким риском" возникновения гестоза в связи с сопутствующей соматической патологией и высоким инфекционным индексом. Наиболее часто в анамнезе обследованных женщин контрольной группы встречались: ветряная оспа - 14.64%, корь - 17,11%, грипп - 26,26%, ОРВИ - 34,84%.

Через естественные родовые пути роды произошли у 178 женщин, из них у 170 (89,9%) в головном предлежании, у 8 - в тазовом. 20 беременных были родоразрешены путем операции кесарева сечения.

Все дети родились с оценкоц по шкале Апгар на первой минуте жизни - 7-8 баллов, на 5 минуте - 8-9 баллов. Масса новорожденных составила от 3000 до 4500 гр (в среднем 3650+74,30 гр). Послеродовой период у родильниц и ранний неонатальный период у новорожденных протекал без осложнений.

Характеристика_основной_группы. Основную

группу составил и 120 пациенток, беременность которых осложнилась гестозом различной степени тяжести. Оценка тяжести заболевания проводилась по бальной системе (Методические указания МЗ СССР, 1987 г.). По степени тяжести гестоза женщины основной группы была разделены на три подгруппы: I подгруппу составили 42 беременных с гестозом легкой степени, во II вошли 43 беременных с гестозом средней степени тяжести, в III - 35 женщин с

тяжелой формой гестоза. Обследование проводилось в сроки 23-24, 31-32, 35-36, 37-38, 39-40 недель. Все обследованные были в возрасте от 16 до 41 года. Из перенесенных инфекционных заболеваний чаще всего в основной группе встречались: корь - 22,5%, грипп -30,8%, скарлатина - 20,8%, хронический тонзилит - 16,7%. В целом же, в основной группе был отмечен более высокий инфекционный индекс. У 62 (51?6%) беременных. гестоз развился на фоне экстрагенитальной патологии: вегетососуднстой дистонии по гипертоническому типу - у 32 (26,7%), гипертонической болезни I-II степени - у 9 (7,5%), хронического пиелонефрита - у 19 (15,8%), ревмакордита - у 2 (1,7%). Наиболее часто, в 77,14% экстрагенитальная патология наблюдалась в III подгруппе. Течение настоящей беременности помимо гестоза осложнилось угрожающим выкидышем у 16 беременных (13,3%), угрожающими преждевременными родами - 6 (5%), анемией - у 30 ("%%), острыми респираторными инфекциями - у 12 (105). При обследовании беременных основной группы ангиоспазм артерий сетчатки выявлен: в 1 подгруппе - у 2 женщин (4,76%), во II - у 7 (16,28%), в III - у 17 пациенток (48,%.%). С целью определения состояния белковообразующей функции печени и жирового обмена проводилось определение в сыворотке крови матери содержания общего белка и холестерина (табл.1). Представленные данные свидетельствуют о более низком содержании общего белка и более высоком содержании холестерина в крови беременных с тяжелыми формами гестоза.

Среди рожденных в срок детей хроническая внутриутробная гипоксия плода диагносцирована у 21 новорожденного, внутриутробная гипотрофия - у 11,

морфофункциональная незрелость - у 11. Наиболее часто, в 57% развитие фето-плацентарной недостаточности наблюдалось у женщин III подгруппы.

Через естественные родовые пути роды проведены у 91 родильницы, из них в головном предлежании - 88, в тазовом - у 4. Операция наложения акушерских щипцов проводилась в двух случаях: по поводу острой начавшейся гипоксии плода и в связи с тяжелой формой нефропатии. Абдоминальным путем родоразрешены были 28 женщин. При анализе отмечается увеличение частоты абдоминального родоразрешения во II и III подгруппах. Повышение частоты

абдоминального родоразрешения было связано, в основном, с неэффективностью проводимой комплексной терапии гестоза, соответственно 6,98% и37,14%. Средняя масса новорожденных соответственно по подгруппам составила: 3515+-94.8 г, 3472+87,19 г и 3042+-79,15 г.

Таблица 1

Основная группа

Контрольная группа I подгр. II подгр. III подгр.

Общий белок 65.26+-0.54 64.75+-2.01 61.50+-1.16 57.21+-1.28*

Холестерин 7.50+-0.54 8.14+-0.49 8.60+-0.24* 9.26+-0.62*

*р 0.05 при сравнении с контрольной группой.

Содержание ТБГ в динамике физиологической беременности. Всего было обследовано 198 беременных женщин с неосложненной беременностью. У каждой пациентки пробы крови брались от 1 до 3 раз, с интервалом в 2 недели, в сроках от 8 до 42 недель. Результаты представлены на рис. №1. Отмечено прогрессивное повышение концентрации ТБГ до 36 недель беременности с последующим снижением к 42 неделям. Содержание ТБГ в сроке 7-8 недель составило 36+-4,10 мкг/мл. Далее, до 26 недель уровень ТБГ резко возрастал до 135,68+-9,09 мкг/мл. Двухнедельный прирост составил от 10,0 до 33,4%. Статистически достоверной разницы между каждым последующим сроком не отмечалось (р>0,05). В 27-28 и в 31-32 недели отмечено снижение концентрации сывороточного ТБГ соответственно на 8,2% (р>0,05) и 3,9% (р>0,05). Далее содержание белка

прогрессивно увеличивалось до 157,06+-11,74 мкг/мл, достигая своего максимума к 36 неделям беременности. Темпы двухнедельного прироста концентрации ТБГ были заметно снижены и составили 4,7-6,2% в III триместре беременности.

После 36 недель уровень ТБГ незначительно снижался к 40 неделям до 137.06+-10.93 мкг/мл (на 14% (р>0.05)). Затем к 42 неделям происходило резкое падение уровня белка до 99.59+-Ö.59 мкг/мл (р<0.05).

При индивидуальном анализе отмечается значительная вариабельность содержания ТБГ в сыворотке крови, так, в сроке 7-8 недель колебания его находились в пределах от 15.60 до 54.60 мкг/мл, а в сроке 35-36 недель - 112.42237.50 мкг/мл, в связи с чем определение ТБГ необходимо проводить в динамике.

При изучении корреляционной зависимости уровня сывороточного ТБГ с весом плода при рождении отмечена умеренная корреляционная зависимость =0.583.

Получение результаты позволяют сделать вывод о возможности использования определения сывороточной концентрации ТБГ для контроля за течением гестационного процесса.

Содержание ТБГ при различных клинических проявлениях гестозов. На основании полученных результатов (рис.2) установлено, что содержание ТБГ при беременности, осложненной гестозом легкой степени достоверно не отличается от его уровня при нормальной беременности. Концентрация ТБГ достоверно отличалась от конторольной группы лишь в сроке 23-24 недели и составила 89.5+-63 мкг/мл (р<0.05). Затем уровень белка прогрессивно нарастал до 36 недель беременности, достигая 160.43+-14.92 (в среднем на 57.8% (р<0.05)), после чего происходило его снижение к сроку родов до 137.38+-41.42 мкг/мл (на 41.42% (р<0.05)). Более выраженное снижение уровня ТБГ в исследуемые сроки наблюдалось во II подгруппе. В 23-24 недели уровень его в сыворотке крови составил 74.0+-9.98 мкг/мл, что на 14.3% ниже, чем в I подгруппе (р<0.05), и на 36.32% чем в контрольной группе (р<0.05). Далее концентрация ТБГ увеличивалась к 36 неделям до 137.33+-30.03 мкг/мл, достигая своего «пика» (р<0.05), формируя своеобразное «плато». В III подгруппе концентрация белка в сроке 23-24 недели составила 22.75+-0.9 мкг/мл и была в 4 раза ниже, чем в I подгруппе, и в 5.1 раза ниже, чем в контрольной группе. Далее уровень ТБГ нарастал, составив в 35-36 недель 114.50+-37.21 мкг/мл,

Легкая степень -ж-

Средняя степень

Тяжелая степень -X-

Чистая форма Сочетанная форма

т. е. в 4.2 раза. До 37-38 недель уровень белка оставался практически неизменным - 112.75-»-11.97 мкг/мл (р>0.05), после чего происходило его снижение к сроку родов до 88.17+-7.17 мкг/мл (р<0.05). На рис.2 приведены данные исследования, содержания ТБГ при «чистой» и сочетанной форме гестоза.

Анализ результатов свидетельствует, что «чистые» и смешанные формы гестозов, в целом, характеризуются более низкой секрецией ТБГ по сравнению с физиологической беременностью. Наиболее низкий уровень ТБГ отмечался при сочетанной форме гестоза.

В группе женщин, родивших доношенных плодов с признаками внутриутробной гипотрофии, уровень ТБГ был достаточно снижен по сравнению с контрольной группой (р<0.05) и составил 86.25+-26.87 мкг/мл. Развитие хронической внутриутробной гипоксии характеризовалось снижением содержания ТБГ до 100.14+-17.52 мкг/мл (р<0.05). Уровень ТБГ в сыворотке крови женщин, родивших детей с признаками морфофункциональной незрелости составил 106.70»-12.56 мкг/мл. Из доношенных новорожденных основной группы 28 родились в состоянии средней тяжести и 7 - в тяжелом состоянии. Уровень ТБГ в этих группах составил соответственно 130.67+-12.99 мкг/мл (р>0.05) и 92.67+-7.51 мкг/мл (р<0.05).

При анализе зависимости концентрации ТБГ от длительности гестоза, отмечено что значение ТБГ было резко снижено в группе беременных с ранним началом гестоза (в 23-24 нед.) на 38.06% и достоверно отличалось (р<0.05) от содержания его в крови беременных с поздним началом гестоза (в 36-40 нед.).

В основной группе не отмечено корреляции между массой плода при рождении и уровнем ТБГ в сыворотке крови (г=0.067). Полученные результаты позволяют считать, что снижение содержания ТБГ при гестозе служит неблагоприятным диагностическим признаком и позволяет использовать опрелеление его в сыворотке крови матери в качестве одного из методов в комплексной диагностике состояния фето-плацентарной системы и прогнозирования исхода родов и плода.

Влияние клинических проявлений гестозов на содержание гормонов фето-плацентарного комплекса. Результаты анализа динамики содержания эстриола, прогестерона и кортизола в крови матери показали, что по мере развития

физиологического гестационного процесса происходит прогрессивное повышение содержания этих гормонов. Так, содержание эстриола с 23-24 нед. к окончанию беременности увеличивалось с 46.21+-7.23 нмоль/л до 121.76+-13.07 нмоль/л (в 2.63 раза (р<0.05)), прогестерона с 87.31+-4.25 нмоль/л до 197.91+-20.26 нмоль/л (в 2.27 раза (р<0.05)), кортизола с 821.44+-81.61 нмоль/л до 1081.08+-89.05 нмоль/л (в 1.32 раза (р<0.05)) (рис.3,4,5).

При беременности, осложненной гестозом легкой стадии наблюдалось незначительное снижение содержания эстриола, прогестерона в крови матери по сравнению с контрольной группой. Однако, необходимо отметить, что в отличии от контрольной группы отмечалось падение концентрации прогестерона после 38 нед. беременности, а также стабилизация прироста эстриола в эти же сроки (рис.3,4). Содержание кортизола в I подгруппе до 36 недель практически не отличалось от нормы, но в 37-38 и 39-40 недель было сниженным (рис.5).

Во II подгруппе на фоне более выраженного снижения содержания эстриола отмечено повышение уровня прогестерона и кортизола относительно контрольной группы, однако, оно сопровождалось падением их уровня в крови матери после 38 недель беременности (табл. №№ 3,4,5).

Развитие тяжелой формы гестоза характеризовалось выраженным снижением концентрации эстриола и прогестерона во все исследуемые сроки (рис.3,4). Уровень кортизола был незначительно ниже нормы до 36 недель беременности, после чего наблюдалось резкое падение его концентрации (рис.5).

Повышенное содержание кортизола в крови женщин II подгруппы, вероятно может свидетельствовать о напряжении адаптационнных механизмов, направленных на поддержание гомеостаза в системе. Снижение уровня этого гормона в III подгруппе, вероятно, связано с истощением функции коры надпочечников как матери, так и, в основном, плода, что значительно снижает его адаптационные возможности в интра-и неонатальном периоде. Убедительным доказательством этого является выявленное снижение уровня кортизола в крови матерей, родивших детей в состоянии средней тяжести и в тяжелом состоянии. Концентрация кортизола составила соответственно 961.04+-59.85 нмоль/л и 912.77+-34.25 нмоль/л (табл.2).

Фето-плацентарная недостаточность характеризовалась низким уровнем содержания гормонов (табл. №2). Анализ данных, полученных при сравнительном изучении гормонального статуса беременных с «чистой» и сочетанной формой гестоза (рис.3,4,5) показал, что наиболее низкие концентрации гормонов наблюдались при сочетанной форме гестоза при развитии заболевания на фоне хронического пиелонефрита и гипертонической болезни 1-П степени (табл.№3). Полученные данные позволяют сделать вывод о более неблагоприятном влиянии сочетанных гестозов на функцию фето-плацентарной системы.

Выраженное влияние на уровень в крови исследуемых гормонов оказывала длительность заболевания. По мере увеличения длительности гестоза снижалось содержание всех гормонов сыворотки крови (табл. №4). Таким образом, длительность течения гестоза является одним из основных критериев, определяющих степень его тяжести.

Следовательно, осложнение беременности гестозом приводит к развитию гормонального дисбаланса в системе мать - плацента - плод, степень выраженности которого зависит от тяжести заболевани.

Легкая степень -ж-

Средняя степень ■ -□-Тяжелая степень --х- -

Чистая форма Соиетанная форма

Легкая степень -ж-

Средняя степень □ ■

Тяжелая степень х-

Чистая форма Аг-

Соиетанная форма

1250 1200 -1150 1100 Н 1050 1000 950 900 -850 -800 ? 50

Легкая степень -ж-

Средняя степень

Тяжелая степень -х-

Чистая форма Соиетанная форма

Таблица 2

физиологическая беременность хроническ. внутриутробная гипоксия внутриутробная гипотро фия плода морфо-функ- циональная незрелость

эстриол 121.76+13.07 66.90+7.68* 77.11+13.47* 67.15+9.56*

прогестерон 197.91+20.26 151.94+27.79 129.29+16.49* 144.85+19.34

корти-зол 1081.08+89.05 916.12+34.25 923.12+78.53 1120.31+102.11

р<0.05 при сравнении с контрольной группой

Таблица 3

неосложненная беременность II 121.76+13.07 197.91+20.26 1081.08+89.05

гестоз на фоне ВСД по гипертоническому типу 14 79.02+7.64* 157.54+13.39 914.36+54.10

гестоз на фоне гипертонической болезни 1-11 степени б 71.68+13.95* 132.51+14.21* 1239.10+160.60

гестоз на фоне хронического пиелонефрита II 62.84+6.62* 104.46+11.31* 965.09+53.06

р<0.05 при сравнении с контрольной группой

Таблица 4

п эстриол нмоль/л прогестерон нмоль/л кортизол нмоль/л

20-24 нед 15 68.84+-8.14 133.35+-19.69 904.42+-80.72

25-30 нед 14 71.78+-9.45 148.35+-18.92 953.45+-60.14

30-35 нед 15 76.39+-8.80 196.04+-36.87 962.16+-65.37

36-40 нед 12 98.57+-13.05 229.16+-39.59 988.57+-61.65

Р1-Р2>0.05 р|-р2>0.05 р!-р2>0.05 Р2-Рз>0.05 р1-рз<0.05 р]-рз>0.05 Р|-Р3>0.05 Р2-Рз>0.05 р]-р4>0.05 Р1~Р4<0.05 РГР4<0.05 Р2-Р4<0.05

Изменение процессов пероксидации в плаценте и антиоксидантной активности крови. Было обследовано 40 беременных в сроке 39-40 недель. Из них II с неосложненной беременностью (контрольная группа) и 29 с гестозом различной степени тяжести (основная группа). Все женщины основной группы были разделены на две подгруппы: в I вошли 13 беременных с гестозом легкой степени, во II - 16 со средней и тяжелой формой гестоза. О состоянии процессов ПОЛ в плаценте судили по содержанию в ткани плаценты малонового диальдегида (МДА). В качестве показателя, характеризующего состояние антиоксидантной системы крови в сыворотке определяли соотношение церулоплазмин/трансферин.

В контрольной группе содержание МДА в плаценте составило 0.520+-0.30 нмоль/мг белка. В группе беременных с гестозом уровень содержания МДА в плаценте увеличивался по мере нарастания тяжести гестоза. В I подгруппе концентрация МДА в гомогенате плаценты составила 0.564+0.052 нмоль/мг белка (р>0.05), во II подгруппе 0.648+-0.38 нмоль/мг белка (р<0.05). Полученные результаты свидетельствуют об активации процессов ПОЛ непосредственно

в ткани плаценты при гестозах. Кроме того, процесс активации ПОЛ в плаценте по мере нарастания тяжести гестоза сопровождается повышением уровня холестерина в крови и прогрессивным снижением концентрации эстриола, обладающего антиоксидантной активностью.

Наряду с возрастанием интенсивности ПОЛ в плаценте были выявлены изменения в антиоксидантной системе крови. В контрольной группе амплитуда ЗПР-сигнала церулоплазмина составила в среднем 3.57+-0.37 см. Развитие гестоза легкой степени (I подгруппа) сопровождалось увеличением амплитуды сигнала до 5.00+-0.27 см (на 29%) (р<0.05). Во II подгруппе содержание церулоплазмина в сыворотке крови снижалось, о чем свидетельствует низкая средняя величина амплитуды ЗПР-сигнала - 2.43+-0.46 см (на 61.4%) (р<0.05). Средняя величина спектра амплитуды ЗПР в контрольной группе для трансферина составила 5.01+-0.61 см. В I подгруппе было отмечено повышенное содержание трансферина, что проявлялось в увеличении средней величины амплитуды ЗПР-спектра до 7.00+-0.87 см (на 29%) относительно контрольной группы (р>0.05). По мере нарастания тяжести гестоза содержание трансферина в крови снижалось. Во II подгруппе средняя величина амплитуды ЗПР-спектра была 4.08+-0.79 (на 42% меньше, чем в I подгруппе) (р<0.05). Соотношение церулоплазмин/трансферин для контрольной группы составило 0.71+-0.27. При гестозе легкой степени (I подгруппа) наблюдалось повышение этого соотношения до 0.95+-0.16 (р>0.05), что свидетельствует об активации антиоксидантной системы крови. Во II подгруппе данное соотношение было сниженным - 0.60+-0.03 (р<0.05), причем происходило, в основном, за счет уменьшения содержания церулоплазмина. Интенсификация процессов ПОЛ в плаценте при легкой степени заболевания сопровождается активацией антиоксидантной системы крови, при средней и тяжелой - снижением ее активности, что неблагоприятно сказывается на состоянии клеточных мембран структурных элементов трофобласта и хориона.

Таким образом, одной из основных причин развития плацентарной недостаточности является дисбаланс про- и антиоксидантной систем. Так, развитие хронической внутриутробной гипоксии плода и внутриутробной гипотрофии в наблюдаемых случаях сопровождалось активацией процессов ПОЛ в плаценте - содержание МДА соответственно 0.629+0.033 (р<0.05) и 0.537+-0.093 нмоль/мг белка (р>0.05). При

хронической внутриутробной гипоксии плода соотношение церулоплазмин/трансферин было несколько выше нормального значения - 0.86+-0.10 (р>0.05). Развитие же внутриутробной гипотрофии сопровождалось снижением антиоксидантной активности крови - 0.61+-0.08 (р>0.05).

При сравнительной оценке данных, полученных для «чистой» и сочетанной форм гестозов установлено, что для сочетанных форм характерно повышенное содержание в плаценте МДА и более низкая величина соотношения церулоплазмин/трансферин, соответственно 0.608+-0.045 нмоль/мг белка, 0.69+-0.15 (р>0.05) и 0.58+-0.033 нмоль/мг белка, 0.98+-0.16 (р>0.05). Это подтверждает ранее опубликованные данные о более выраженном патологическом влиянии сочетанных форм гестоза на состояние фето-плацентарного комплекса.

Выявлена зависимость между длительностью заболевания и степенью активности про- и антиоксидантных систем. При появлении первых симптомов гестоза в 36-40 недель повышение содержания МДА в плаценте было незначительным - 0.570+-0.044 нмоль/мг белка и сопровождалось повышением активности антиоксидантных систем крови (соотношение церулоплазмин/трансферин - 1.098+-0.24). Увеличение длительности заболевания сопровождалось более выраженной интенсификацией процессов ПОЛ и истощением антиоксидантной активности крови. Так, при начале гестоза в 20-24 недели содержание МДА в плаценте составило 0.635+-0.05 нмоль/мг белка (р<0.05). Следовательно, длительность течения гестоза является одним из самых важных показателей степени его тяжести. Таким образом, развитие гестоза сопровождается интенсификацией реакций ПОЛ в плаценте и снижение антиоксидантной активности крови при средней и тяжелой форме гестоза. Нарушение во взаимодействии про- и антиоксидантных систем приводит к нарушению функций клеточных мембран структурных элементов трофобласта, нарушение синтеза гормонов и белков, способствуя развитию фето-плацентарной недостаточности.

1. Возникновение гестоза во время беременности вызывает изменение фето-плацентарного гомеостаза, выражающееся в нарушении синтеза ТБГ, гормональной функции плаценты, взаимоотношений про- и антиоксидантных систем.

2. При физиологической беременности содержание ТБГ в сыворотке крови прогрессивно нарастает до 36 недель беременности в 4.28 раза, после чего происходит снижение его уровня к сроку родов; темпы прироста концентрации ТБГ за две недели в I и II триместре составляют 10.0-33.4%, в III триместре 4.7-6.2%.

3. Возникновение при беременности гестоза сопровождается снижением уровня сывороточного ТБГ и нарушением характера его динамики. Выявленные нарушения находятся в прямой зависимости от степени тяжести гестоза. Развитие гестоза на фоне экстрагенитальной патологии характеризуется более низким уровнем ТБГ, чем при «чистой» форме.

4. Развитие фето-плацентарной недостаточности при гестозах сопровождается снижением содержания ТБГ в сыворотке крови на 22.7-30.06% по сравнению с нормой, что позволяет использовать определение уровня сывороточного ТБГ в комплексной диагностике состояния фето-плацентарной недостаточности при гестозах.

5. Развитие гестоза приводит к снижению выработки фето-плацентарным комплексом эстриола и прогестерона, степень выраженности которого прямопропорциональна тяжести заболевания. Наиболее выраженные изменения гормонального статуса характерны для тяжелой степени гестоза и его сочетанных форм.

6. При средней тяжести гестоза наблюдается повышение уровня кортизола по сравнению снормой с «пиком» в 36 недель беременности. При тяжелой форме происходит снижение уровня кортизола в динамике, что объясняется истощением функциональных возможностей фето-плацентарного комплекса.

7. Легкая форма гестоза характеризуется активацией ПОЛ в плаценте, при этом содержание МДА в гомогенате плаценты возрастает на 8.46%; и компенсаторным повышением антиоксидантной активности крови (отношение церулоплазмин/трансферин возрастает на 33.8%).

8. При средней и тяжелой форме заболевания, на фоне более выраженной интенсификации ПОЛ и повышения содержания МДА в плаценте на 24.6% отмечается снижение антиоксидантной активности крови, о чем свидетельствует снижение соотношения церулоплазмин/трансферин на 15.5%. Возникновение гестоза на фоне экстрагенитальной патологии характеризуется более высокой интенсивностью ПОЛ в плаценте и низкой антиоксидантной активностью крови, чем его «чистая» форма.

9. Недостаточность функции фето-плацентарного комплекса при гестозах сопровождается повышением содержания продуктов ПОЛ в плаценте на 3.27-20.96%, что свидетельствует об определенной роли активации ПОЛ патогенезе фето-плацентарной недостаточности.

1. Определение сывороточного уровня ТБГ может служить дополнительным диагностическим тестом для определения содержания ТБГ при доношенной беременности на 20-30% может свидетельствовать ■ о развитии фето-плацентарной недостаточности и неблагоприятном исходе родов для плода.

2. Определение содержания в плаценте малонового диальдегида, уровень которого при развитии плацентарной недостаточности возрастает почти на 20%, можно использовать для ретроспективной диагностики состояния плаценты при гестозах.

3. Для определения состояния фето-плацентарной системы при гестозах информативным является определение в сыворотке крови матери эстриола, прогестерона и кортизола. Синхронное снижение их уровня в сыворотке крови свидетельствует об истощении функции и развитии недостаточности фето-плацентарной системы.

№7, с.18-22 (соавт. Побединский Н.М., Разманихина Н.И., Венгеров Ю.Ю., Старовойтова Т.А.)

3. Изменение некоторых биохимических и биофизических показателей при беременности, осложненной гестозом (соавт. Побединский Н.М., Разманихина Н.И., Острахович Е.А., Соодаева С.К.) - принята к печати в журнал «Акушерство и гинекология».

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

"ИЖЕВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ"

ФАКУЛЬТЕТ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ

Кафедра химии

Контрольная работа

по биохимии животных

Тема: "Общий белок сыворотки крови. Методы определения, клинико-диагностическое значение, видовые особенности"

Выполнила: Курочкина В. С.

студентка 3 курса ФЗО

Специальность: "Ветеринария"

Проверил: к. б. н., доцент

Берестов Д. С.

Ижевск 2013 г.

Введение

Приложение

Введение

В живых клетках происходит синтез множества органических молекул, среди которых главную роль играют полимерные макромолекулы - белки, нуклеиновые кислоты, полисахариды. Особая роль в жизнедеятельности живых организмов принадлежит белкам. От родителей детям передается генетическая информация о специфической структуре и функциях всех белков данного организма. Синтезированные белки выполняют транспортную, защитную, структурную функции, участвуют в передаче сигналов от одной клетке к другим и таким же образом реализуют наследственную информацию.

1. Общий белок сыворотки крови

Белки сыворотки крови - достаточно большая группа белков, которые различаются между собой структурой, физико-химическими свойствами и функциями. Общее количество их определяют с помощью рефрактометра или биуретовым методом, а отдельные компоненты - электрофорезом. В зависимости от метода распределения можно получить от 5 до 100 фракций белков. Электрофорезом на бумаге в сыворотке крови определяют 4-5 фракций: альбумины, альфа (иногда альфа-1 и альфа-2), бета -- и гамма-глобулины, а электрофорезом в агаровом, крахмальном и полиакриламидном гелях - значительно больше (до 30).

Количество общего белка и соотношения между отдельными фракциями в сыворотке крови животных разных видов колеблется в определенных пределах.

У молодняка содержание общего белка ниже, чем у взрослых: у телят возрастом 1-10 дней - 56-70 г/л, новорожденных поросят - 45-50, ягнят - 46-54 г/л см. приложение (таб. 1).

Плазма крови животных представляет собой жидкость с плотностью 1,02 - 1,06. Повышение плотности крови наблюдается при обезвоживание организма. На долю сухого остатка плазмы приходится менее 10%, а остальное вода. Основную массу сухого остатка составляют белки, общая концентрация которых в плазме составляет 60-80 г/л. Сумма концентрации альбуминов и глобулинов составляет концентрацию общего белка плазмы крови.

Общий белок - это органический полимер, состоящий из аминокислот. Различные белки участвуют во всех биохимических реакциях нашего организма в качестве катализаторов, транспортируют различные вещества и лекарственные препараты, участвуют в иммунной защите и т.д.

Суммарная концентрация белков, находящихся в сыворотке крови, определяется понятием "общий белок".

Общий белок -- важнейший компонент белкового обмена в организме, так же это суммарная концентрация альбумина и глобулинов, находящихся в сыворотке крови.

В организме общий белок выполняет следующие функции:

Участвует в свертывании крови;

Поддерживает постоянство рН крови;

(перенос жиров, билирубина, стероидных гормонов в ткани и органы) транспортная функция;

Участвует в иммунных реакциях и многие другие функции;

Являются резервом аминокислот;

Выполняют регулирующую функцию в организме, так как входят в состав гормонов, ферментов.

При обезвоживание организма повышается концентрация общего белка плазмы крови. Снижение концентрации общего белка плазмы крови может быть следствием самых разнообразных причин - низкое содержание белка в рационе, болезни почек, печени, при которых теряется белок с мочой, нарушение процесса всасывания питательных веществ в пищеварительном тракте.

Классификация:

Простые (протеины) (содержат только аминокислоты)

Сложные (протеиды) (аминокислоты и неаминокислотные компоненты (гем, производные витаминов, липиды или углеводы)

Фибриллярные (составляющие многие плотные ткани)

Глобулярные (альбумины (4-5%), глобулины (2-3%), фибриноген (0.2-0.4%)

2. Методы определения, клинико-диагностическое значение, видовые особенности

Методы определения общего белка в сыворотке крови:

1. Азотметрические;

2. Определение удельного веса сыворотки;

3. Весовые (гравиметрические), когда белки крови осаждают, высушивают до постоянного веса и взвешивают на аналитических весах;

4. Рефрактометрические;

5. Колориметрические;

6. Нефлометрические;

7. Поляриметрические;

8. Спектрофометрические;

1. Рефрактометр ИРФ - 454 Б2М

предназначен для определения белка в сыворотке крови, спинно-мозговой жидкости, контроля концентрации лекарств, измерения плотности мочи. общий белок кровь животное

2. Cobas integra - Total Protein Gen.2

3. Определение белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза на ацетатцеллюлозной пленке.

Принципы метода

Анализируемые образцы

Проведение анализа

1. Проведение электрофореза

2. Обработка электрофореграммы

2.1. краситель Пунцовый С.

1.2. электрофореграмму обработать с помощью сканера и компьютерной программы.

4. Тимоловая проба

Принцип метода

Клинико-диагностическое значение :

Для определения общего белка в сыворотке крови у животного берут венозную кровь в специальную пробирку с активатором свертываемости см. приложение (таб. 2). Перед сдачей крови животное выдерживают на голодной диете 8 часов. Кровь сдают до приема лекарственных препаратов, которые могут повлиять на результат исследования. Качественный состав белков плазмы крови очень разнообразен. Общий белок делят на отдельные фракции методом электрофореза, основанного на разделении белковых смесей по признаку различной величины массы и конкретного заряда одного белка. При электрофоретическом разделении в зависимости от носителя количество белковых фракций общего белка неодинаково. Меньшее число фракций получают при электрофорезе на бумаге 5 фракций, тогда как при электрофорезе на агаровом геле, полиакриламидном геле число белковых фракций может быть значительно больше до 20 фракций. К основным фракциям относят альбумины и глобулины .

Альбумины синтезируются в печени и являются простыми белками, содержащими до 6--аминокислотных остатков. Они хорошо растворимы в воде. Нормируемое значение 56.5 - 66.8 (На альбумин в сыворотке крови приходится приблизительно 60% общего белка. Альбумины синтезируются в печени (примерно 15г/сут), время их полураспада составляет примерно 17 дней. Онкотическое давление плазмы на 65-80 % обусловлено альбумином. Альбумины выполняют важную функцию транспортировки многих биологически активных веществ, в частности гормонов. Они способны связываться с ХС, билирубином. Значительная часть кальция в крови также связана с альбумином. Альбумины способны соединяться с различными ЛС.

Функция альбуминов:

Поддержание коллоидно-осмотического давления плазмы:

Постоянство концентрации водородных ионов;

Транспорт различных веществ (билирубин, жирные кислоты, минеральные соединения и лекарственные препараты).

Альбумины плазмы крови могут рассматриваться и как определенный резерв аминокислот для синтеза жизненно необходимых специфических белков в условиях дефицита белков в рационе. Альбумины удерживают воду в кровяном русле. При нефритах в мочу из плазмы крови проникают в первую очередь альбумины, как самые низкомолекулярные белки (молекулярная масса альбуминов составляет около 60 000 - 66 000). В норме на долю альбуминов приходится 35-55% от общего количества белков плазмы крови.

Глобулины плазмы - это множество различных белков. При электрофорезе они премещаются вслед за альбуминами. Взаимосвязь с липидами обеспечивает комплексом глобулинов растворимое состояние и транспорт в различные ткани. На основе электрофоретической подвижности глобулины подразделяются на б2-, б1-, в- и г- глобулины. (б- и в- глобулины синтезируются в печени и являются активными переносчиками различных веществ крови). В период интенсивного роста животного в крови отмечается относительное снижение уровня альбуминов и соответствующее повышение уровня б- и г- глобулинов. В- глобулины активно взаимодействуют с липидами крови г- глобулины, наименее подвижная и наиболее тяжелая фракция их всех глобулинов, синтезируется происходящими из части стволовых клеток костного мозга В - лимфоцитами или образующимися из них плазматическими клетками. Они выполняют защитную функцию, являясь защитными антителами (иммуноглобулинами). У птиц изучены три класса иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA, у млекопитающих их пять - IgG, IgM, IgE, IgD. IgA. В количественном плане в крови преобладает IgG (80%). Используя метод иммуноэлектрофореза, выделяют в сыворотке крови до 30 белковых фракций. Все иммуноглобулины состоят из двух тяжелых полипептидных цепей (М. м. 53 000-75 000) и двух легких цепей (М. М. 22 500), связанных тремя дисульфидными мостиками. Каждый тип иммуноглобулинов способен специфически взаимодействовать лишь с одним определенным антигеном.

Сыворотка крови новорожденных телят, ягнят, козлят, поросят, жеребят практически не содержит антител. Новорожденные животные не способны в первые дни жизни синтезировать антитела. Они появляются только после поступления в желудочно-кишечный тракт молозива. Самостоятельный синтез этих защитных белков в костном мозге, селезенке, лимфатических узлах отмечается с 3 или 4-недельного возраста животного. Поэтому важно напоить новорожденного молозивом, которое содержит в 10-20 раз больше иммуноглобулинов, чем обычное молоко. Имунноглобулины молозива способны без расщепления проникать путем пиноцитоза в стенку кишечника и поступать в кровь, создавая защиту организма (молозивный или колостральный иммунитет).

Т-лимфоциты кооперируют с В-лимфоцитами в синтезе иммуноглобулинов, тормозят иммунологические реакции, лизируют различные клетки. В крови Т--лимфоциты составляют 70%, В-лимфоциты - около 30%. Для синтеза иммуноглобулинов необходима и третья популяция клеток - макрофаги. Они выступают как первичные факторы неспецефической защиты, благодаря способности захватывать и переваривать микроорганизмы, антигены, иммунные комплексы, передавать информацию о них Т- и В-лимфоцитам. Макрофаги выступают в роли посредников между всеми участниками процесса с помощью вырабатываемых клетками лимфокинов и монокинов.

В-лимфоциты образуют антитела лишь простив определенных, поступивших в организм антигенов (бактерий, вирусов). Ждя этого структура антигена и глобулинового рецептора на поверхности лимфоцита должны соответствовать друг другу, как ключ к замку.

Концентрация г- глобулинов увеличивается в сыворотке крови при хронических инфекционных болезнях, при иммунизациях, беременности животных.

Целый ряд белков плазмы крови выполняет спецефические функции. Среди них следует выделить такие белки, как трансферрин, гаптоглобин, церулоплазмин, пропердин, система комплеманта, лизоцим, интерферон.

Трансферрины являются в- глобулинами, синтезируемыми в печени. Связывая два атома железа на молекулу белка, они транспортируют этот элемент в различные ткани, регулируют его концентрацию и удерживают его в организме. По величине заряда белковой молекулы, аминокислотному составу различают 19 типов трансферринов, которые связаны с наследственностью. Трансферрины могут оказывать и прямой бактериологический эффект. Концентрация трансферринов в сыворотке крови составляет около 2,9 г/л. Низкое содержание трансферринов в сыворотке крови может быть вызвано недостатком белков в рационе животного.

Гаптоглобин входит в состав б2-глобулин, синтезирующейся в печени, имеет в своем составе медь (0,3%). Связывая медь, церулоплазмин обеспечивает должный уровень этого микроэлемента в тканях. На долю церулоплазмина приходится 3% всего количества меди организма животного. Он проявляет себя как фермент и как оксидант. Церулоплазмин является оксидазой адреналина, аскорбиновой кислоты. Важной характеристикой церулоплазмина является его способность окислять железо в тканях до Fe3+, депонируя его в таком виде.

Система комплемента - это комплекс сывороточных белков глобулиновой природы, который рассматривается как система проэнзимов, активация которых приводит к цитолизу, разрушению антигена. Синтез системы комплемента, насчитывающей до 25 разных белков, осуществляется преимущественно мононуклеарными фагоцитами, а также гистиоцитами. Это сложная эффекторная система белков сыворотки, играющая важную роль в регуляции иммунного ответа и в поддержании гомеостаза, в плане фило- и онтогенеза возникла раньше иммунной системы. В составе системы комплемента детально изучены 11 компонентов. Каскад ферментативных реакций, запускаемый комплексом антиген - антитела и приводящий к последовательной активации всех компонентов компонента, начиная с первого, называется классическим путем активации. Обходный путь, который характеризуется активацией более поздних компонентов комплемента, начиная с С3, называется альтернативным. Разрушение мокробной клетки наступает только после активации компонента С4. Терминальные белки системы комплемента, последовательно реагируя один с другим, внедряется в двойной слой липидов, повреждая клеточную мембрану с образованием мембранных каналов, что и приводит к осмотическим нарушениям, проникновению внутрь клетки антител, комплемента с последующим лизисом внутриклеточных мембран. Принято считать, что содержание комплемента в сыворотке крови представляет один из наиболее объективных показателей состояния неспецифической защиты организма.

Пропердин - гликопротеин типа г- глобулина с молекулярной массой около 184 000. Он составляет 0,3% от общего количества белков сыворотки крови. Обладая высокой термолабильностью, пропердин разрушается за 30 минут при 56?С. Место синтеза пропердина окончательно не выяснено. Вероятно, что в его синтезе принимает участие лимфоидная ткань. Пропердин проявляет в первую очередь бактерицидное действие в отношении грамотрицательных микробов. Для проявления активности пропердина требуется обязательное присутствие первых четырех компонентов комплемента и ионов магния, соответствующих пропердиновую систему. Выявлена связь между уровнем пропердиновой системы и степенью резистентности организма животного.

Интерферон - это низкомолекулярный белок (М. м. 24 000-36 000), который синтезируется и экскретируется клетками тканей в ответ на проникновение в них вирусов. Из клеток интерферон легко проникает в кровяное русло и распределяется по всем органам и тканям. После проникновения вируса в клетку происходит освобождение одноцепочной РНК и синтез на ее основе двухцепочной РНК. Получается таким образом РНК и индуцирует синтез интерферона. Интерферон связывается с плазматической мембраной других клеток организма и стимулирует их способность сопротивления вирусной инфекции. Противовирусный эффект интерферона связан с его способностью активировать в клетках синтез ингибиторов и ферментов, блокирующих трансляцию вирусной Ирнк и, следовательно, размножение вируса. Интерферон обладает и иммунорегулирующими свойствами. Различают три разновидности интерферонов: а-интерферон (лейкоцитарный), обладающий противовирусным и антипролиферативным, противоопухолевым действием; в-интерферон (фибробластный), обладающий в основном противоопухолевым, а также антивирусным действием; г-интерферон (лимфоцитарный или иммунный), обладающий преимущественно иммуномодулирующими свойствами.

Физиологические роли белков крови многочисленны, основные из них следующие:

Поддерживают коллоидно-онкотическое давление, сохраняя объем крови, связывая воду и задерживая ее, не позволяя выходить из кровеносного русла;

Принимают участие в процессах свертывания крови;

Поддерживают постоянство Рн крови, формируя одну из буферных систем крови;

Соединяясь с рядом веществ (ХС, билирубин и др.), а также с ЛС, доставляют их в ткани.

Поддерживают нормальный уровень катионов в крови путем образования с ними недиализируемых соединений (например, 40-50%кальция сыворотки связано с белками; значительная часть железа, меди, магния и других микроэлементов также связано с белками);

Играют важнейшую роль в иммунных процессах;

Служат резервом аминокислот;

Выполняют регулирующую функцию (гормоны, ферменты и другие биологически активные белковые вещества).

Клинико-диагностическое значение:

1) Нормопротеинемия - нормальное содержание общего белка;

2) Гипопротеинемия - пониженное содержание общего белка;

3) Гиперпротеинемия - повышенное содержание белка;

Изменение общего белка крови может быть относительным и абсолютным.

Гиперпротеинемия:

1. Серьезное обезвоживание.

3. При хроническом полиартрите и некоторых и некоторых хронических воспалительных процессах.

4. Стойкая гиперпротеинемия до 12% и выше отмечается при миеломной болезни (плазмацитоме), макроглобулинемии Вандельстрема, при которых в плоских костях черепа появляются дополнительные очаг и образования "ненормальных", патологических белков - парапротеинов.

Гипопротеинемия связана почти всегда с гипоальбуминемией, а гиперпротеинемия - с гиперглобулинемией.

Относительная гиперпротеинемия - связана с уменьшением объема циркулирующей крови вследствие дегидрации.

Абсолютная гиперпротеинемия - наблюдается при избыточном синтезе патологических белков, повышенном образовании иммуноглобулинов, усиленном синтезе белков острой фазы воспаления.

Кроме содержания общего белка, для диагностики различных патологичных процессов важное значение имеет определение белковых фракций. Нарушение оптимального соотношения между ними называют диспротеинемией. Наиболее выраженные диспротеинемии бывают при поражении органов, где синтезируются белки. Особенно часто уменьшается количество альбуминов (гипоальбуминемия), которые выполняют важные функции по поддержанию коллоидно-осмотического давления крови, регуляции водного обмена между кровью и межтканевым пространством, связывания и транспортировки углеводов, липидов, гормонов, витаминов, минеральных веществ.

Увеличение количества альбуминов бывает редко - преимущественно при дегидратации. При изменениях количества альбуминов нарушается их соотношение с глобулинами (изменяется альбуминно-глобулиновый коэффициент), которое у здоровых животных колеблется в пределах от 0,7 до1,0 (у собак 1,2).

Количество альфа-глобулинов увеличивается при острых воспалительных процессах (ревматизм, пневмония, гломерулонефрит, артрит) и при обострении болезней с хроническим течением (туберкулез, гепатит), поскольку к этой группе относятся белки "острой фазы" (С-реактивный белок, церулоплазмин, гаптоглобин, альфа-1-антитрипсин, альфа-2-макроглобулин, кислый альфа-1-гликопротеин). Уменьшается их уровень редко, чаще всего при тяжелых дистрофических процессах в печени, где частично синтезируются альфа-глобулин.

Увеличение количества бета-глобулинов наблюдается чаще всего при инфекциях с хроническим течением, болезнях почек (нефроз, гломерулонефрит), циррозе печени. В состав фракций бета-глобулинов входит фибриноген, увеличение содержания которого бывает при крупозной пневмонии, бронхопневмонии, лейкозе, септическом эндокардите, а уменьшение - при болезнях печени, где синтезируется.

Фракции гамма-глобулинов содержат основную массу антител (иммуноглобулинов), которые обеспечивают гуморальную защиту организма, поэтому количество их в сыворотке крови зависит от морфологической зрелости и функциональной полноценности иммунореактивной ткани.

Низкий уровень гамма-глобулинов бывает у новорожденных, особенно в первый день жизни, поскольку они не проходят через плацентарный барьер, а поступают в организм только с молозивом (физиологический иммунодефицит), поэтому в поддержании их уровня имеет большое значение качество молока, своевременность его выпойки, состояние слизистой оболочки тонкого кишечника. Синтез собственных иммуноглобулинов начинается с 5-7 дня жизни и достигает оптимального уровня лишь в 6-месячном возрасте, поэтому молодняк восприимчив ко многим болезням (сальмонеллезу, стрептококкозу, пастереллезу, вирусных респираторных, пневмоний). Понижение содержания гамма-глобулинов отмечается также при различных заболеваниях, которые сопровождаются поражениями иммунной системы (миелома, лимфолейкоз, болезнь Гамборо), потерей иммуноглобулинов при нефрозах, энтеритах, хронических кровотечениях, вследствие угнетение функции иммунной системы различными токсинами, лекарственными препаратами (иммунодепрессантами).

Гипопротеинемия:

Недостаточное поступления белка пищи, наблюдаемое обычно при недоедании, голодании, опухоли, сужении пищевода, нарушении функции желудочно-кишечного тракта (вследствие ухудшения переваривания и всасывания белковых компонентов пищевых продуктов), например, при продолжительных воспалительных процессах кишечника.

Для обеспечения нормальных процессов жизнедеятельности организм утилизирует альбуминовую фракцию белков плазмы крови. При усиленном расходовании альбуминов (в основном обусловливающих онкотическое давление крови) развиваются так называемые онкотические или голодные отеки. Всякое уменьшение содержания белка в плазме крови ниже 5 % часто сопровождается гипопротеинемическими отеками тканей.

Выход белков (главным образом альбуминов) из русла крови происходит при нарушении почечного фильтра вследствие органических заболеваний почек (особенно нефрозах и амилоидозах), при которых белок почти всегда обнаруживается в моче, а также при ожогах.

5. У женщин в период лактации и последних месяцев беременности.

6. Нефротический синдром

7. Квашиоркор (острая белковая недостаточность)

8. Ретенционный солевой синдром

Относительная гипопротеинемия - связана с увеличением объема циркулирующей крови за счет воды (при анурии, сердечной декомпенсации, повышенном синтезе антидиуретического гормона гипоталамуса).

Абсолютная гипопротеинемия - наблюдается при недостаточном поступление белков в организм в следствии голодания, недостаточном синтезе белков при хронических воспалительных процессах печени, врожденных нарушениях синтеза отдельных белков крови, повышенном распаде белков в организме, образовании значительного количества экссудата.

Список используемой литературы

1. Бабенко О. О., Савченко Т. Г., Резниченко Л. В. Профилактика гиповитаминоза A в свиноводстве./ Т. Г. Савченко./ Ветеринария. -№ 12. - 2008. - С. 38 - 39.

2. Зайцев С. Ю., Биохимия животных / Ю. В. Конопатов - Спб.: "Лань", 2004., 384 с.

3. Северина Е. С., Биохимия 2-е издание / Е. С. Северина - М.: "Мед" 2004., 184 с.

Приложение

Вид животного	Общий белок, г/л	Фракции белков, в процентах
Альбумины	Глобулины

Крупный рогатый скот

Таб. 2. Биохимические показатели сыворотки крови у различных видов животных




Щелочная фосфатаза

Креатининкиназа



Бикарбонаты
Билирубин общий

Хлориды (Cl-)
Холестеринl
Креатинин




Белок Альбумин Глобулин	55-75 26-40 21-37	57-80 24-38 24-47	62-82 28-39 29-49	57-79 25-38 24-46	58-83 23-40 39-60	59-78 27-37 32-50	61-75 23-36 27-44	54-83 24-46 15-28	55-70 35-44 17-35
Натрий (Na+)
Мочевина

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

Форменные элементы крови: эритроциты, лейкоциты, гемоглобин, гематокрит. Методика подсчёта количества эритроцитов в единице объёма крови в камере Горяева, техника взятия крови. Функции: трофическая, экскреторная, респираторная, защитная, коррелятивная.

практическая работа , добавлен 09.10.2009

Печень как самая массивная железа организма животных и людей. Классификация и особенности строения печени у разных видов животных. Кровоснабжение и функции печени, описание строения печеночной дольки, видовые особенности. Строение желчных протоков.

реферат , добавлен 10.11.2010

Группы крови крупного рогатого скота как основа селекционного процесса. Тестирование типов крови и их использование для определения линий и пород. Использование иммуногенетического мониторинга и биотехнологии трансплантации эмбрионов в воспроизводстве.

курсовая работа , добавлен 02.08.2010

Биоэкологические особенности и агротехника кукурузы. Технология производства кормового белка из кукурузы. Характеристика одноклеточных микроорганизмов. Оборудование, используемое для производства кормовых дрожжей. Автоматизация производственных процессов.

дипломная работа , добавлен 14.06.2015

Современные представления об иммунной системе и неспецифической резистентности организма. Оценка иммунного статуса и корригирующая терапия в комплексном лечении хирургически больных животных. Видовые особенности иммунограммы крови при гнойных воспалениях.

реферат , добавлен 22.12.2011

Описание белков, жиров, углеводов, витаминов, минеральных веществ и микроэлементов. Оценка питательности кормов. Методы изучения обмена веществ в организме животного, основанные на законе сохранения энергии. Баланс азота, углерода и энергии у коровы.

реферат , добавлен 15.06.2014

Экономический ущерб, причиняемый мухами животноводству, средства и методы регуляции их численности. Резервы ценного кормового белка в нетрадиционных кормах и вопросы утилизации птичьего помета. Культивирование и использование комнатной мухи, ее виды.

диссертация , добавлен 23.07.2010

Система органов крово- и лимфообращения, или сосудистая система. Общая характеристика кровоснабжения отдельных органов. Составные компоненты крови и их основные функции. Лимфатическая система млекопитающих животных. Ход и строение лимфатических сосудов.

реферат , добавлен 19.06.2014

Особенности подготовительной работы на участке перед уборкой картофеля: определение общего состояние всей посадки, степень развития кустов, их пораженности фитофторозом. Методы определения примерной величины урожая. Технология и сроки уборки урожая.

статья , добавлен 03.03.2010

Основные функции крови: трофическая (питательная), экскреторная (выделительная), респираторная (дыхательная), защитная терморегулирующая, коррелятивная. Плазма крови, белки плазмы, небелковые азотсодержащие соединения, безазотистые органические вещества.

Определение количества гликопротеидов в крови. Общий белок сыворотки крови

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Подобные документы

Мы в соцсетях

Категории