प्रोटीन चयापचय अध्ययन
अग्नाशयी लाइपेस गतिविधि
परिभाषा का नैदानिक और नैदानिक मूल्य
उठानागतिविधि अग्न्याशय लाइपेसरक्त सीरम में अग्नाशयशोथ के साथकिसी भी मूल के, विशेष रूप से तीव्र अग्नाशयशोथ, जिसमें जलोदर द्रव में एंजाइम की गतिविधि भी बढ़ जाती है। अग्नाशयशोथ के रोगियों में, रक्त और मूत्र में लाइपेस की गतिविधि की एक साथ जांच करने की सलाह दी जाती है, क्योंकि बाद में यह रक्त की तुलना में अधिक बार बढ़ जाता है। ड्रग्स जो ओड्डी (नशीले पदार्थों, एनाल्जेसिक, सेक्रेटिन) के स्फिंक्टर की ऐंठन को भड़काती हैं, हेपरिन (लाइपेस की रिहाई को उत्तेजित करना) इस एंजाइम को सक्रिय करती हैं।
तपेदिक, सिफलिस, कैंसर और विभिन्न संक्रामक रोगों के रोगियों में लाइपेस गतिविधि के निम्न स्तर पाए गए, और जैसे-जैसे रोग प्रक्रिया आगे बढ़ती है, एंजाइम की गतिविधि अधिक से अधिक घटती जाती है।
प्रोटीन उच्च आणविक भार नाइट्रोजन युक्त पदार्थ हैं। सरल प्रोटीन होते हैं - प्रोटीन जिसमें 20 अलग-अलग अमीनो एसिड होते हैं, और जटिल प्रोटीन - प्रोटीड्स, जिसमें एक प्रोटीन और एक प्रोस्थेटिक (गैर-प्रोटीन) घटक होता है। प्रोस्थेटिक घटकों में न्यूक्लिक एसिड, हीम, लिपिड, फॉस्फोरिक एसिड आदि शामिल हैं। कॉम्प्लेक्स प्रोटीन में न्यूक्लियोप्रोटीन, क्रोमोप्रोटीन, लिपोप्रोटीन और फॉस्फोप्रोटीन शामिल हैं।
बायोकेमिकल विश्लेषण आमतौर पर सामग्री के निर्धारण के साथ शुरू होता है प्लाज्मा (सीरम) रक्त में कुल प्रोटीन.
कुल प्रोटीन के स्तर में परिवर्तन निरपेक्ष और सापेक्ष दोनों हैं। उत्तरार्द्ध आमतौर पर रक्त (प्लाज्मा) मात्रा में वृद्धि (कमी) के साथ मनाया जाता है। इस प्रकार, हाइड्रेमिया सापेक्ष हाइपोप्रोटीनेमिया की ओर जाता है, और निर्जलीकरण सापेक्ष हाइपरप्रोटीनेमिया की ओर जाता है। इस संबंध में, रक्त के सीरम (प्लाज्मा) में कुल प्रोटीन के संकेतकों की व्याख्या करते समय, जल चयापचय के उल्लंघन को ध्यान में रखना आवश्यक है।
निर्जलीकरण पूर्ण हाइपोप्रोटीनीमिया को छिपा सकता है, क्योंकि इस संयोजन के साथ रक्त प्लाज्मा में प्रोटीन की एकाग्रता हमेशा आदर्श से भिन्न नहीं होती है। यह इस प्रकार है कि हाइपो- और हाइपरप्रोटीनेमिया का कारण न केवल प्रोटीन सेवन, जैवसंश्लेषण, इसके अपचय और हटाने के बीच असंतुलन हो सकता है, बल्कि रक्त के तरल (पानी) भाग के कारण इंट्रावास्कुलर स्पेस की मात्रा में परिवर्तन भी हो सकता है। यह स्पष्ट है कि इन परिवर्तनों का रोगजनन अलग है।
प्लाज्मा प्रोटीन सामग्री में पूर्ण और सापेक्ष परिवर्तनों के बीच अंतर करने के लिए, हेमेटोक्रिट की जांच करना या प्लाज्मा (रक्त) की मात्रा निर्धारित करना पर्याप्त है।
आंतरिक अंगों के अधिकांश पुराने रोगों में, प्रोटीन चयापचय में परिवर्तन के साथ, हाइपोप्रोटीनेमिया का पता लगाया जाता है, जो आमतौर पर माध्यमिक होता है।
पूर्ण हाइपोप्रोटीनेमियापैथोफिजियोलॉजिकल सिंड्रोम में पाया जाता है, जैवसंश्लेषण में कमी, अपचय में वृद्धि, असामान्य नुकसान, शरीर के अलग-अलग क्षेत्रों के बीच प्रोटीन के रोग वितरण में व्यक्त किया जाता है। पूर्ण हाइपोप्रोटीनेमिया के कारण हैं:
1. भुखमरी, कुपोषण, घुटकी (जलने, ट्यूमर के कारण) के संकुचन (सख्त) के कारण भोजन से प्रोटीन का अपर्याप्त सेवन, आंतों की दीवार और अन्य में लंबे समय तक भड़काऊ प्रक्रियाओं के साथ जठरांत्र संबंधी मार्ग की अखंडता और कार्य का उल्लंघन पाचन और प्रोटीन अवशोषण में गिरावट के साथ स्थितियां प्लाज्मा में कुल प्रोटीन के स्तर में कमी (या हाइपोप्रोटीनीमिया विकसित करने की प्रवृत्ति) प्रोटीन खाद्य पदार्थों के खराब अवशोषण के सिंड्रोम और इसकी एमिनो एसिड संरचना में असंतुलन में भी उल्लेख किया गया है।
2. जिगर के प्रोटियोसिंथेटिक फ़ंक्शन का दमन, पैरेन्काइमल हेपेटाइटिस, यकृत के सिरोसिस के साथ-साथ लंबे समय तक दमनकारी प्रक्रियाओं, घातक नवोप्लाज्म, थायरोटॉक्सिकोसिस और कुछ रसायनों के विषाक्त प्रभाव के कारण होने वाले नशा।
3. ऊर्जा की बड़ी लागत की भरपाई करने की आवश्यकता के कारण शरीर में प्रोटीन का टूटना प्लास्टिक संसाधनों की कमी से जुड़ा हुआ है। यह थर्मल बर्न और बर्न डिजीज, मैलिग्नेंट नियोप्लाज्म में नोट किया जाता है।
4. शरीर द्वारा प्रोटीन की हानि: तीव्र और जीर्ण रक्तस्राव के मामले में रक्त के साथ, नेफ्रोटिक सिंड्रोम (नेफ्रोसिस, किडनी के एमाइलॉयडोसिस) के मामले में मूत्र के साथ।
5. केशिका दीवार की तेजी से बढ़ी हुई पारगम्यता के साथ अन्य ऊतकों में जाना: व्यापक शोफ का गठन, तीसरे स्थान पर संक्रमण - एक्सयूडेट्स के गठन के साथ, सीरस गुहाओं में प्रवाह, आंतों के लुमेन में (वॉल्वुलस, पेरिटोनिटिस के साथ) ).
6. डिफेक्टोप्रोटीनमियास, ᴛᴇ. रक्त प्रोटीन के संश्लेषण में अपेक्षाकृत दुर्लभ वंशानुगत (आनुवंशिक रूप से निर्धारित) विकार।
7. शरीर की शारीरिक स्थिति की विशेषताएं . रक्त प्लाज्मा में प्रोटीन की कम मात्रा कुछ शारीरिक स्थितियों में भी नोट की गई थी: उदाहरण के लिए, गर्भावस्था के आखिरी महीनों में और स्तनपान के दौरान महिलाओं में।
सापेक्ष हाइपोप्रोटीनेमिया।यह ज्ञात है कि ग्लूकोज समाधान और अन्य शारीरिक तरल पदार्थों के प्रचुर मात्रा में छिड़काव से रक्त के तरल भाग की मात्रा में वृद्धि के कारण प्रोटीन की एकाग्रता में कमी आती है।
प्लाज्मा प्रोटीन की कुल मात्रा (35-55g/l) का आधे से अधिक हिस्सा एल्ब्यूमिन द्वारा होता है। प्लाज्मा एल्बुमिन जल्दी से अद्यतन होता है: दिन के दौरान, इस प्रोटीन का 10-16 ग्राम संश्लेषित और विघटित होता है। इसकी उच्च सांद्रता, उच्च हाइड्रोफिलिसिटी और छोटे आणविक आकार के कारण, एल्ब्यूमिन रक्त के कोलाइड आसमाटिक दबाव को बनाए रखने में एक महत्वपूर्ण कार्य करता है। इस प्रकार, वह रक्त और अंतरालीय स्थान के बीच पानी के आदान-प्रदान में भाग लेता है। जब एल्बुमिन की मात्रा 30 g/l से कम होती है, तो ऑन्कोटिक दबाव इतना कम हो जाता है कि पानी अंदर से बहिर्वाहिक क्षेत्र में चला जाता है।
प्लाज्मा में एल्ब्यूमिन के स्तर का निर्धारण हाइपोएल्ब्यूमिनमिया के साथ होने वाली बीमारियों की गंभीरता का आकलन करने में एक आवश्यक भूमिका निभाता है।
समान रूप से महत्वपूर्ण निदान मूल्य मूत्र में एल्ब्यूमिन की एकाग्रता का निर्धारण है।
क्रोनिक किडनी रोगों में एल्ब्यूमिन के स्तर में कमी देखी गई है - नेफ्रोटिक सिंड्रोम, साथ ही जलन, खून की कमी, संक्रामक रोग, प्यूरुलेंट प्रक्रियाएं, निरर्थक निमोनिया, फुफ्फुसीय तपेदिक और अन्य अंग, तीव्र पॉलीआर्थराइटिस और अन्य सूजन की स्थिति, घातक ट्यूमर ( कैंसर कैशेक्सिया), ल्यूकेमिया, एनीमिया, दिल की विफलता, मायोकार्डियल इंफार्क्शन, आंतों के माध्यम से प्रोटीन का भारी नुकसान।
मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति (प्रोटीनुरिया) गुर्दे की कई बीमारियों में देखी जाती है। यह कार्बनिक को अलग करने के लिए प्रथागत है (गुर्दे के पैरेन्काइमा के घावों के कारण - सूजन संबंधी बीमारियां, नेफ्रोटिक सिंड्रोम, कभी-कभी नेफ्रॉन के जन्मजात दोष) और गुर्दे की फिल्टर की पारगम्यता में वृद्धि या रक्त प्रवाह में मंदी के साथ जुड़े कार्यात्मक गुर्दे प्रोटीनमेह ग्लोमेरुली (हाइपोथर्मिया, शारीरिक और मानसिक ओवरस्ट्रेन के प्रभाव में)।
प्रीरेनल प्रोटीनूरिया ऊतक प्रोटीन के बढ़ते टूटने, गंभीर हेमोलिसिस से जुड़ा हुआ है; गुर्दे - गुर्दे की विकृति के कारण (ग्लोमेरुलर और ट्यूबलर); पोस्ट्रेनल - मूत्र पथ के विकृति के कारण और सबसे अधिक बार - भड़काऊ निकास।
भेद करने की प्रथा है प्रोटीनुरिया के तीन स्तर: मध्यम - 1 ग्राम तक प्रोटीन की दैनिक हानि के साथ, मध्यम - 1 से 3 ग्राम तक और उच्चारित - 3 ग्राम / दिन से अधिक।
प्रोटीनमेह के मुख्य कारण हैं:
1. प्लाज्मा प्रोटीन (ग्लोमेरुलर प्रोटीनुरिया) के लिए ग्लोमेरुलर फिल्टर की पारगम्यता में वृद्धि;
2. फ़िल्टर्ड प्रोटीन (ट्यूबलर प्रोटीनुरिया) के ट्यूबलर पुनर्वसन का उल्लंघन;
3. पैराप्रोटीनेमिया और / या रक्त में प्रोटीन सामग्री में वृद्धि;
4. गुर्दे के हेमोडायनामिक्स में परिवर्तन;
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वीडियो: सीरम में प्रतिक्रियाशील प्रोटीन का निर्धारण
कई रोगों के निदान में कुल रक्त प्लाज्मा प्रोटीन और उसके अलग-अलग अंशों के संकेतक महत्वपूर्ण हैं।
रक्त सीरम में कुल प्रोटीन का निर्धारण। इसे कई विधियों (एज़ोटोमेट्रिक, ग्रेविमेट्रिक, नेफेलोमेट्रिक, अपवर्तक, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक, आदि) का उपयोग करके उत्पादित किया जा सकता है। वर्णमिति विधियों में से, बायोरेट विधि सबसे विशिष्ट, काफी संवेदनशील, सटीक और व्यावहारिक रूप से सुलभ है। यह विधि रक्त सीरम में कुल प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए एक एकीकृत विधि के रूप में प्रस्तुत की जाती है। यह निम्नलिखित सिद्धांत पर आधारित है: प्रोटीन क्षारीय वातावरण में कॉपर सल्फेट के साथ प्रतिक्रिया करते हैं, जिससे बैंगनी रंग के यौगिक बनते हैं।
कुल प्रोटीन के निर्धारण की तकनीक इस प्रकार है। बायोरेट अभिकर्मक के कार्यशील घोल के 5 मिली (रोशेल के नमक के 4.5 ग्राम को 0.2 N NaOH के 40 मिली में घोल दिया जाता है, C11SO4 5H2O के 1.5 ग्राम और K1 के 0.5 ग्राम को मिलाया जाता है और 0.2 N NaOH के 100 मिली तक टॉप किया जाता है) 0.1 मिली ब्लड सीरम डालें। 30 मिनट के बाद, नमूना FEK पर 10 मिमी क्युवेट में नियंत्रण के खिलाफ एक हरे रंग की रोशनी फिल्टर के साथ वर्णमिति है। एक नियंत्रण तैयार करने के लिए, 0.9% NaCl के 0.1 मिलीलीटर को बायोरेट अभिकर्मक के 5 मिलीलीटर में जोड़ा जाता है। गणना अंशांकन अनुसूची के अनुसार की जाती है।
वयस्कों में कुल प्रोटीन की सामान्य मात्रा 62 से 82 g/l के बीच होती है। बच्चों में उम्र के हिसाब से डेटा तालिका में प्रस्तुत किया गया है। 49.
Tab.g 49. उम्र के हिसाब से प्रोटीन की कुल मात्रा (औसत डेटा) के प्रतिशत के रूप में प्रोटीन अंशों की सामग्री (यू। ई। वेल्टिशचेव, 1979 के अनुसार)
हाइपोप्रोटीनेमिया का सबसे आम कारण भोजन के साथ शरीर में प्रोटीन का अपर्याप्त सेवन (प्रोटीन भुखमरी), महत्वपूर्ण प्रोटीन नुकसान और रक्त प्रोटीन जैवसंश्लेषण का अवरोध है।
शरीर में प्रोटीन का अपर्याप्त सेवन गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट (अन्नप्रणाली, पाइलोरोस्पाज्म और पाइलोरिक स्टेनोसिस, ट्यूमर, गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट की सूजन, आदि) के उल्लंघन में मनाया जाता है, आहार में कम प्रोटीन सामग्री या असंतुलित अमीनो एसिड संरचना, वगैरह।
गुर्दे की बीमारियाँ जो प्रोटीनुरिया, तीव्र और जीर्ण रक्तस्राव, सीरस गुहाओं में व्यापक स्राव और बहाव, जलने आदि के साथ होती हैं, शरीर द्वारा प्रोटीन की हानि का कारण बनती हैं।
जिगर में प्रोटीन जैवसंश्लेषण में कमी के साथ जुड़े हाइपोप्रोटीनेमिया क्रोनिक हेपेटाइटिस, नशा, सिरोसिस, लंबे समय तक पकने वाली प्रक्रियाओं, घातक ट्यूमर आदि में होता है।
हाइपरप्रोटीनेमिया एक अपेक्षाकृत दुर्लभ घटना है। एक्सिकोसिस, डायबिटीज इन्सिपिडस, आंतों में रुकावट, सामान्यीकृत पेरिटोनिटिस, मायलोमा (120 g / l तक लगातार) के साथ देखा गया।
रक्त सीरम में प्रोटीन अंशों के निर्धारण के तरीके। व्यक्तिगत प्रोटीन अंशों के बीच मात्रात्मक संबंध का अध्ययन महान नैदानिक मूल्य का है, क्योंकि यह कुछ प्रकार के हाइपो- और हाइपरप्रोटीनेमिया के साथ-साथ कई बीमारियों को अलग करने की अनुमति देता है जो कुल प्रोटीन सामग्री में बदलाव के साथ नहीं होते हैं।
प्लाज्मा प्रोटीन के विभाजन के लिए, तटस्थ लवण, इलेक्ट्रोफोरेटिक अंशांकन, इम्यूनोलॉजिकल और अवसादन विधियों के साथ नमकीन बनाना, कम तापमान पर एथिल अल्कोहल के साथ वर्षा, क्रोमैटोग्राफी, जेल निस्पंदन का उपयोग किया जाता है। इन विधियों का सबसे अधिक उपयोग विद्युत क्षेत्र में प्रोटीन की गति की विभिन्न गति के आधार पर इलेक्ट्रोफोरेटिक तरीके हैं, जो उनके विद्युत आवेश और अन्य भौतिक और रासायनिक गुणों पर निर्भर करता है।
कागज और जैल पर वैद्युतकणसंचलन के तरीके - अगर, स्टार्च और अन्य, विशेष रूप से पॉलीएक्रिलामाइड जेल पर, जिसका उपयोग लगभग 30 प्रोटीन अंश प्राप्त करने के लिए किया जा सकता है, व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। अधिक बार, सेल्यूलोज एसीटेट फिल्मों पर वैद्युतकणसंचलन का उपयोग किया जाने लगा। हालांकि, नैदानिक नैदानिक प्रयोगशालाओं में, कागज पर वैद्युतकणसंचलन की विधि का मुख्य रूप से उपयोग किया जाता है (वी। जी। कोल्ब, वी.एस. कामिश्निकोव, 1976)। यह विधि निम्नलिखित सिद्धांत पर आधारित है: एक निरंतर विद्युत क्षेत्र के प्रभाव में, एक विद्युत आवेश के साथ सीरम प्रोटीन कागज के साथ एक बफर समाधान के साथ एक गति से सिक्त होता है जो आवेश और आणविक भार के परिमाण पर निर्भर करता है। इस मामले में, रक्त सीरम प्रोटीन को पांच अंशों में विभाजित किया जाता है: एल्ब्यूमिन और ग्लोब्युलिन a1, a2, b, y।
एल्ब्यूमिन और ग्लोब्युलिन का सामान्य अनुपात (एल्ब्यूमिन-ग्लोबुलिन अनुपात) लगभग 2:1 है। उम्र के आधार पर वयस्कों और बच्चों में प्रोटीन के अलग-अलग अंशों का प्रतिशत तालिका में प्रस्तुत किया गया है। 49. बच्चों में विभिन्न रोगों के साथ रक्त में प्रोटीन और प्रोटीन अंशों की कुल मात्रा बदल जाती है।
वयस्कों और बड़े बच्चों में, निम्न प्रकार के इलेक्ट्रोफेरोग्राम को प्रतिष्ठित किया जाता है: I) तीव्र भड़काऊ प्रक्रिया - 2) सबस्यूट जीर्ण सूजन - 3) नेफ्रोटिक लक्षण जटिल - 4) घातक नवोप्लाज्म - 5) हेपेटाइटिस - 6) यकृत सिरोसिस - 7) प्रतिरोधी पीलिया - 8) इन - और पी-ग्लोबुलिन प्लास्मेसीटोमास।
पहले प्रकार में, एल्ब्यूमिन के स्तर में कमी और a1, a2-ग्लोब्युलिन और बाद के चरणों में, और y-ग्लोब्युलिन में वृद्धि होती है; दूसरे में, एल्ब्यूमिन अंशों में मामूली कमी और a2 में स्पष्ट वृद्धि होती है। -, y-ग्लोबुलिन अंश; तीसरे में, एल्ब्यूमिन में उल्लेखनीय कमी, y-ग्लोब्युलिन में मामूली कमी के साथ a-ग्लोब्युलिन में वृद्धि; चौथे में - एल्ब्यूमिन में कमी और सभी ग्लोब्युलिन अंशों में उल्लेखनीय वृद्धि; में पांचवां - एल्ब्यूमिन में मामूली कमी और y- और (3-ग्लोब्युलिन) में वृद्धि; छठे में - y-ग्लोब्युलिन अंश में मजबूत वृद्धि के साथ एल्ब्यूमिन में कमी, जिसका आधार विस्तारित है; सातवें में - कमी एल्बुमिन में और CC2-, P- और y-ग्लोबुलिन में मामूली वृद्धि; आठवें में - कुल प्रोटीन में तेजी से वृद्धि हुई है, एल्ब्यूमिन और अधिकांश ग्लोब्युलिन कम हो गए हैं, प्रकार के आधार पर, y- या β-ग्लोब्युलिन अधिक बढ़ गए हैं - बुलिन।
शिशुओं में, वाई-ग्लोबुलिन के जैवसंश्लेषण में शारीरिक कमी होती है। इसलिए, संक्रामक रोगों में, उनके बी- और ए2-ग्लोब्युलिन बड़े बच्चों और वयस्कों की तुलना में काफी अधिक बढ़ जाते हैं। छोटे बच्चों में वाई-ग्लोबुलिन में लगातार वृद्धि एक सेप्टिक स्थिति का संकेत दे सकती है।
प्रोटीन मुख्य नाइट्रोजन युक्त कार्बनिक पदार्थ है। एक ग्राम नाइट्रोजन में 6.25 ग्राम प्रोटीन (नाइट्रोजन अनुपात) होता है, यानी प्रोटीन लगभग 16% नाइट्रोजन होता है। इसलिए, शरीर में नाइट्रोजन के आदान-प्रदान की जांच करके प्रोटीन चयापचय की स्थिति का आकलन करना संभव है। प्रोटीन संश्लेषण की तीव्रता का अंदाजा शरीर में प्रवेश करने वाली नाइट्रोजन की मात्रा से लगाया जा सकता है, प्रोटीन के टूटने का अंदाजा मूत्र और पसीने में निकलने वाली नाइट्रोजन की मात्रा से लगाया जा सकता है (सामान्य परिस्थितियों में पसीने से निकलने वाली नाइट्रोजन की मात्रा नगण्य है, इसलिए पसीना नाइट्रोजन को अक्सर ध्यान में नहीं रखा जाता है)। आप नाइट्रोजन संतुलन का निर्धारण करके प्रोटीन के संश्लेषण और टूटने की तुलना कर सकते हैं।
नाइट्रोजन संतुलन शरीर में प्रवेश करने वाले और उससे निकलने वाले नाइट्रोजन की मात्रा का अनुपात है। निम्नलिखित प्रकार के नाइट्रोजन संतुलन प्रतिष्ठित हैं - सकारात्मक, नकारात्मक और नाइट्रोजन संतुलन। सकारात्मक नाइट्रोजन संतुलन: शरीर में नाइट्रोजन का सेवन शरीर से इसके उत्सर्जन (शरीर में नाइट्रोजन प्रतिधारण) से अधिक हो जाता है। यह इंगित करता है कि प्रोटीन संश्लेषण इसके टूटने से अधिक है। आम तौर पर, इस प्रकार का नाइट्रोजन संतुलन शरीर के विकास के दौरान, गर्भावस्था के दौरान, आरोग्यलाभ, और खेल के दौरान मांसपेशियों में वृद्धि के दौरान होता है। नकारात्मक नाइट्रोजन संतुलन - नाइट्रोजन का सेवन शरीर से इसके उत्सर्जन से कम होता है। यह इंगित करता है कि प्रोटीन संश्लेषण इसके टूटने से कम है। इस प्रकार का नाइट्रोजन संतुलन निम्नलिखित स्थितियों में होता है:
1) प्रोटीन भुखमरी (प्रोटीन की अपर्याप्त मात्रा शरीर में प्रवेश करती है या दोषपूर्ण प्रोटीन भोजन के साथ आपूर्ति की जाती है। एक दोषपूर्ण प्रोटीन में एक या अधिक आवश्यक अमीनो एसिड नहीं होते हैं);
2) अमीनो एसिड का बिगड़ा हुआ अवशोषण;
3) बुढ़ापा;
4) स्पष्ट ऊतक टूटने (ट्यूमर, कैशेक्सिया) के साथ रोग या स्थितियां;
5) किण्वन के कारण प्रोटीन संश्लेषण में कमी आई।
नाइट्रोजन संतुलन - नाइट्रोजन का सेवन और उत्सर्जन समान है। यह प्रोटीन संश्लेषण और क्षय की समान तीव्रता को इंगित करता है (रागुज़िन ए.वी., सेटको एन.पी., शिरशोव ओ.वी., फतेवा टी.ए. 2001)
निष्कर्ष
गिलहरी(प्रोटीन) अमीनो एसिड से युक्त जटिल उच्च-आणविक नाइट्रोजन युक्त यौगिक हैं। एक प्रोटीन में अमीनो एसिड का सेट और अनुक्रम इसकी जैव रासायनिक विशिष्टता और पोषण मूल्य दोनों की विशेषता है। वर्तमान में ज्ञात दर्जनों अमीनो एसिड में से केवल 20 ही भोजन में पाए जाते हैं।
प्रोटीन बनाने वाले अमीनो एसिड को आवश्यक और गैर-आवश्यक में विभाजित किया गया है। तात्विक ऐमिनो अम्लआवश्यक मात्रा में और निश्चित अनुपात में भोजन की आपूर्ति की जानी चाहिए। गैर-आवश्यक अमीनो एसिडविभिन्न जैव रासायनिक परिवर्तनों (संक्रमण प्रतिक्रियाओं, नाइट्रोजन के स्रोत के रूप में अमोनिया का उपयोग करके गैर-प्रोटीन यौगिकों से संश्लेषण) के परिणामस्वरूप शरीर में पारस्परिक परिवर्तन हो सकते हैं या अपूरणीय लोगों से बन सकते हैं। आवश्यक अमीनो एसिड में आर्जिनिन, वेलिन, हिस्टिडीन, आइसोल्यूसिन, ल्यूसीन, लाइसिन, मेथिओनिन, ट्रिप्टोफैन, फेनिलएलनिन, थ्रेओनाइन शामिल हैं (इसके अलावा, आर्गिनिन और हिस्टिडीन 3 वर्ष से कम उम्र के बच्चों के लिए आवश्यक माने जाते हैं)। गैर-आवश्यक अमीनो एसिड: ऐलेनिन, शतावरी, एस्पार्टिक एसिड, ग्लाइसिन, ग्लूटामिक एसिड, ग्लूटामाइन, सेरीन, सिस्टीन, टायरोसिन, प्रोलाइन।
मानव शरीर के प्रोटीन महत्वपूर्ण कार्य करते हैं: प्लास्टिक, ऊर्जा, उत्प्रेरक, नियामक, सुरक्षात्मक, परिवहन, रिसेप्टर।
हमारे देश में लागू शारीरिक पोषण मानकों के अनुसार, बच्चों के आहार में प्रोटीन की कुल मात्रा नाइट्रोजन संतुलन या नाइट्रोजन संतुलन प्रदान करने वाली मात्रा से दोगुनी होनी चाहिए, और वयस्क आबादी के लिए - 1.5 मात्रा। प्रीस्कूलर के लिए - 53-69 ग्राम, स्कूली बच्चों के लिए - 77-98 ग्राम, वयस्क आबादी के लिए: महिलाओं के लिए - 58-87 ग्राम और पुरुषों के लिए - 65-117 ग्राम (उनकी व्यावसायिक गतिविधियों के आधार पर)।
ग्रंथ सूची
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सीरम/प्लाज्मा/रक्त और अन्य जैविक तरल पदार्थों में कुल प्रोटीन का निर्धारण।
रक्त सीरम में कुल प्रोटीन की एकाग्रता का निर्धारण करने के लिए सभी ज्ञात विधियों को निम्नलिखित मुख्य समूहों में विभाजित किया गया है:
1. एज़ोटोमेट्रिक, प्रोटीन नाइट्रोजन की मात्रा के निर्धारण पर आधारित - केल्डाल विधि और इसके संशोधन।
2. सीरम के घनत्व को निर्धारित करने के तरीके गलत हैं, क्योंकि घनत्व न केवल प्रोटीन की सामग्री पर निर्भर करता है।
3. वजन - रक्त सीरम प्रोटीन को अवक्षेपित किया जाता है, एक स्थिर वजन तक सुखाया जाता है और एक विश्लेषणात्मक संतुलन पर तौला जाता है। विधियां श्रमसाध्य हैं और बड़ी मात्रा में सीरम की आवश्यकता होती है।
4. रेफ्रेक्टोमेट्रिक - सही नहीं, क्योंकि अपवर्तन का हिस्सा सीरम के अन्य घटकों के कारण होता है।
5. कलरिमेट्रिक - सबसे आम बायोरेट विधि है, जो एकीकृत है।
6. अन्य विधियाँ - नेफेलोमेट्रिक, पोलरिमेट्रिक, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक व्यापक रूप से उपयोग नहीं की जाती हैं।
घरेलू उद्योग ने बायोरेट प्रतिक्रिया के अनुसार रक्त सीरम में कुल प्रोटीन की सांद्रता के अध्ययन के लिए किट का उत्पादन शुरू किया है। विभिन्न कंपनियों द्वारा आपूर्ति किए गए अभिकर्मकों का उपयोग करके जैविक तरल पदार्थों में कुल प्रोटीन के स्तर को मापने के लिए एक ही सिद्धांत का उपयोग किया जाता है।
बायोरेट प्रतिक्रिया द्वारा रक्त सीरम में कुल प्रोटीन का निर्धारण।
अभिकर्मकों।
1.0.9% सोडियम क्लोराइड घोल / 0.9 ग्राम सोडियम क्लोराइड प्रति 100 मिली आसुत जल /।
2.0.2N सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल, कार्बन डाइऑक्साइड से मुक्त / 1N सोडियम हाइड्रॉक्साइड के 20 मिली को उबले हुए आसुत जल / के साथ 100 मिली में समायोजित किया जाता है।
3. बायोरेट अभिकर्मक: 4.5 ग्राम रोशेल के नमक को 0.2 एन सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल के 40 मिली में घोला जाता है, फिर 1.5 ग्राम कॉपर सल्फेट और 0.5 ग्राम कास्टिक सोडा मिलाया जाता है। एक अंधेरे कांच के कंटेनर में स्टोर करें, समाधान स्थिर है।
0.2N सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल में पोटेशियम आयोडाइड का 4.0.5% घोल।
5. बाइयूरेट अभिकर्मक का कार्यशील घोल: 20 मिली बायोरेट अभिकर्मक को 80 मिली पोटेशियम आयोडाइड घोल में मिलाया जाता है। रैक समाधान।
6. मानव या गोजातीय सीरम से एल्ब्यूमिन का मानक समाधान: 0.9% सोडियम क्लोराइड घोल में एल्ब्यूमिन का 10% घोल / 1 मिली घोल में 0.1 ग्राम प्रोटीन - 100 ग्राम / लीटर / होता है।
विधि का सिद्धांत।
क्षारीय वातावरण में प्रोटीन कॉपर सल्फेट के साथ अभिक्रिया करके बैंगनी रंग के यौगिक बनाते हैं \biuret अभिक्रिया/।
दृढ़ संकल्प का कोर्स: फोम के गठन से बचने के लिए मिश्रित बायोरेट अभिकर्मक के 5 मिलीलीटर में सीरम का 0.1 मिलीलीटर जोड़ा जाता है। 30 मिनट के बाद \ और बाद में एक घंटे से अधिक नहीं \ उन्हें 540-560 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर 1 सेमी की परत मोटाई के साथ क्युवेट में एफईके पर मापा जाता है \ हरा प्रकाश फिल्टर \ नियंत्रण के खिलाफ।
नियंत्रण: 0.9% सोडियम क्लोराइड घोल का 0.1 मिली, बायोरेट अभिकर्मक के कार्यशील घोल के 5 मिली में मिलाया जाता है, फिर इसे प्रयोग के रूप में संसाधित किया जाता है।
गणना अंशांकन अनुसूची के अनुसार की जाती है।
कुल प्रोटीन का सामान्य मान 65-85 g/l है।
एक अंशांकन ग्राफ का निर्माण।
अभिकर्मक: 0.9% सोडियम क्लोराइड घोल में एल्ब्यूमिन 10% का मानक घोल, जिसके 1 मिली में 0.1 ग्राम प्रोटीन होता है। अभिकर्मक की तैयारी के लिए, लैकेम से बिलीरुबिन मानक किट से लियोफिलाइज्ड एल्ब्यूमिन का उपयोग किया जा सकता है। किट के निर्देश mg में एल्ब्यूमिन की मात्रा को दर्शाते हैं। इसके आधार पर, हम गणना करते हैं कि घोल के 1 मिली में 0.1 ग्राम प्रोटीन प्राप्त करने के लिए इस एल्ब्यूमिन में 0.9% सोडियम क्लोराइड मिलाना कितना आवश्यक है।
उदाहरण के लिए:किट के निर्देश बताते हैं कि लियोफिलाइज्ड एल्ब्यूमिन में 160 मिलीग्राम एल्ब्यूमिन होता है। गणना: मानक 10% समाधान में 100 मिलीलीटर में 10 ग्राम या 10,000 मिलीग्राम होता है
एक्स में मानक 160 मिलीग्राम में
एक्स = 1.6 मिली, यानी एल्ब्यूमिन युक्त बोतल में 1.6 मिली 0.9% सोडियम क्लोराइड मिलाएं और हम पाते हैं कि इस घोल के 1 मिली में 0.1 ग्राम प्रोटीन होता है।
मानक समाधान तैयार करने के बाद, हम तालिका के अनुसार कार्यशील तनुकरणों की एक श्रृंखला तैयार करते हैं:
जी/एल में प्रोटीन एकाग्रता की गणना।
मानक 10% समाधान के 1 मिलीलीटर में 0.1 ग्राम प्रोटीन होता है
1 मिली घोल में 0.04 ग्राम प्रोटीन होता है
1000 मिली में एक्स
इसी सांद्रता के प्रत्येक कार्यशील तनुकरण से, 0.1 मिली को 3-4 परखनलियों में लिया जाता है, अर्थात। प्रत्येक दृढ़ संकल्प 3-4 समानांतरों में किया जाता है और प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में 5 मिलीलीटर बायोरेट अभिकर्मक जोड़ा जाता है। नियंत्रण के विरुद्ध FEC पर 30-60 मिनट वर्णमिति के बाद। हम प्रत्येक एकाग्रता के लिए ऑप्टिकल घनत्व के 3-4 रीडिंग प्राप्त करते हैं। हम उनसे अंकगणितीय माध्य पाते हैं, पहले तेजी से विचलित करने वाले रीडिंग को छोड़ देते हैं।
हम एक अंशांकन ग्राफ का निर्माण करते हैं: भुज पर हम g / l में प्रोटीन सांद्रता की साजिश रचते हैं, अर्थात। 40-60-80-100g\l; और y-अक्ष के साथ, FEC \arithmetic mean/ पर प्राप्त ऑप्टिकल घनत्व की रीडिंग।
अंशांकन वक्र को 3 बिंदुओं के माध्यम से तैयार किए गए प्राइमा की तरह दिखना चाहिए। इस कर्व को डोनर सेरा \कम से कम 3-4 निर्धारण\ पर चेक किया जाता है। सामान्य प्रोटीन रीडिंग प्राप्त करते समय, अर्थात सामान्य सीमा के भीतर; निर्मित अंशांकन वक्र का उपयोग कार्य में किया जाता है।
टिप्पणी।
1. अंशांकन वक्र वर्ष में कम से कम एक बार बनाया जाना चाहिए, साथ ही हर बार मरम्मत के बाद और नए प्राप्त फोटोइलेक्ट्रिक कलरमीटर पर।
2. ऑप्टिकल घनत्व और एकाग्रता के बीच रैखिक संबंध डी = 0.5 तक बनाए रखा जाता है। यदि सीरम में अधिक मात्रा में प्रोटीन होता है, तो सीरम को सोडियम क्लोराइड से दो बार पतला किया जाता है।
रक्त और मूत्र में यूरिया का निर्धारण।
यूरिया प्रोटीन अपचय का मुख्य नाइट्रोजन युक्त उत्पाद है।
प्रोटीन के टूटने के दौरान अमोनिया जमा होता है - एक जहरीला पदार्थ। अमोनिया को बेअसर करने का मुख्य तरीका लीवर में यूरिया का संश्लेषण है। रक्त में यूरिया की एकाग्रता यकृत में इसके गठन की दर और मूत्र के साथ गुर्दे के माध्यम से शरीर से हटाने पर निर्भर करती है।
अधिकांश रोगियों में, यूरिया निर्माण की दर सेलुलर प्रोटीन के उपयोग और टूटने की दर को दर्शाती है।
गंभीर यकृत विकृति में, यूरिया को संश्लेषित करने के लिए हेपेटोसाइट्स की क्षमता क्षीण होती है, अमोनिया जमा होता है, और रक्त में यूरिया की मात्रा कम हो जाती है।
गठित यूरिया का उत्सर्जन मूत्र में होता है और गुर्दे के उत्सर्जन कार्य पर निर्भर करता है।
यूरिया का निर्धारण निम्न विधियों द्वारा किया जाता है:
1. डायसेटाइल मोनोऑक्साइम के साथ रंग प्रतिक्रिया द्वारा रासायनिक विधि।
2. एंजाइमैटिक विधि (यूरेज़)
3. "शुष्क रसायन" की विधि।
डायसेटाइल मोनोऑक्साइम के साथ प्रतिक्रिया द्वारा यूरिया का निर्धारण।
अभिकर्मकों।
1. गोलियों में डाइसेटाइल मोनोआक्सिम और थायोसेमीकार्बाजाइड या अभिकर्मक।
2. संदर्भ या मानक समाधान जिसमें 100 मिलीग्राम यूरिया 100 मिलीलीटर या 1 मिलीग्राम 1 मिलीलीटर में होता है।
समाधानों की तैयारी।
अभिकर्मक समाधान: आसुत जल के 30 मिलीलीटर में 50 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में गर्म करके 1 टैबलेट को घोलें। ठंडा होने के बाद, मात्रा को निशान तक ले आएं। समाधान कई हफ्तों तक स्थिर रहता है।
सल्फ्यूरिक एसिड समाधान: 150 मिलीलीटर आसुत जल और 25 मिलीलीटर 96% विश्लेषणात्मक ग्रेड सल्फ्यूरिक एसिड को 250 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में मिलाया जाता है। ठंडा होने के बाद गरम करें, आयतन को निशान पर लाएँ। समाधान स्थिर है।
1:1 के अनुपात में प्रतिक्रिया से पहले अभिकर्मक और सल्फ्यूरिक एसिड का कार्यशील समाधान तैयार किया जाता है (परिभाषा योजना देखें)।
विधि का सिद्धांत।
यूरिया एक अत्यधिक अम्लीय माध्यम में थायोसेमिकार्बाजाइड और लोहे के लवण की उपस्थिति में डायसेटाइल मोनोऑक्सिम के साथ एक लाल परिसर बनाता है, रंग की तीव्रता यूरिया की एकाग्रता के समानुपाती होती है।
परिभाषा प्रगति.
अभिकर्मक अनुभव नियंत्रण मानक
1.सीरम 0.02 - -
2. कार्य समाधान
a\reagent समाधान 2.0 2.0 2.0
b \ सल्फ्यूरिक घोल
एसिड 2.0 2.0 2.0
3. मानक समाधान
यूरिया - - 0.02
उबलते पानी के स्नान में 10 मिनट के लिए सेते हैं। ठंडे पानी की धारा में 2-3 मिनट के लिए ठंडा करें। वर्णमिति 15 मिनट से बाद में नहीं: हरी बत्ती फिल्टर \ 490-540 \ तरंग दैर्ध्य पर, क्युवेट 1 सेमी, नियंत्रण के खिलाफ।
गणना: पहले
X \u003d -------- * C सेंट mmol \ l में, जहाँ
करना - अनुभव का ऑप्टिकल घनत्व;
डीएसटी - यूरिया या मानक के मानक समाधान का ऑप्टिकल घनत्व;
सी सेंट मानक समाधान में यूरिया की एकाग्रता है;
X सीरम के नमूने में यूरिया की सांद्रता है।
mg% को mmol / l में बदलने के लिए, 0.1665 के गुणांक का उपयोग किया जाता है।
रक्त सीरम में यूरिया का सामान्य मान 2.5 -8.3 mmol / l है।
टिप्पणियाँ।
1. क्यूवेट की मात्रा के आधार पर, सभी मापा समाधानों की मात्रा को 2-3 गुना बढ़ाकर निर्धारण के उपरोक्त पाठ्यक्रम को संशोधित किया जा सकता है।
3. यूरिया का यूरिया नाइट्रोजन में रूपांतरण 0.466 के कारक से गुणा करके किया जा सकता है।
4. थायोसेमीकार्बाजाइड एक विषैला अभिकर्मक है। इसके साथ काम करते समय, आपको जहरीले पदार्थों के साथ काम करने के नियमों का पालन करना चाहिए।
प्रोटीन चयापचय का अध्ययन करने के तरीके: इलेक्ट्रोफोरेटिक - प्रोटीन अणु के आकार के आधार पर एक निरंतर विद्युत क्षेत्र में प्रोटीन के पृथक्करण पर आधारित है। Ultracentrifugation उनके आणविक भार के आधार पर व्यक्तिगत प्रोटीन की विभिन्न अवसादन दरों पर आधारित है। क्रोमैटोग्राफी: - आयन-एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी आयन-एक्सचेंज रेजिन के आयनों के साथ विनिमय करने के लिए अलग-अलग प्रोटीन की अलग-अलग क्षमता पर आधारित है, - आणविक छलनी पर क्रोमैटोग्राफी (जेल निस्पंदन) - सेफैडेक्स पर - अणु के आकार के आधार पर प्रोटीन को अलग किया जाता है, - एफिनिटी क्रोमैटोग्राफी - एफिनेट (कॉलम फिलर) के प्रति आत्मीयता के आधार पर प्रोटीन को अलग-अलग में विभाजित किया जाता है।
नमकीन बनाना - क्षार और क्षारीय पृथ्वी धातुओं और अमोनियम आयनों के लवणों के विभिन्न सांद्रणों के साथ पानी के खोल को हटाने के आधार पर। यह प्रोटीन को अलग करने की पुरानी विधि है। रंग प्रतिक्रियाओं का उपयोग - उदाहरण के लिए, कुल प्रोटीन के लिए बाइयूरेट, चक्रीय अमीनो एसिड के लिए ज़ैंटोप्रोटीन, रंग की तीव्रता को वर्णमितीय रूप से मापा जाता है। इम्यूनोलॉजिकल तरीके - व्यक्तिगत प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है। एक विशिष्ट एंटीसेरम के साथ बातचीत करते समय, एक बादल का समाधान बनता है, बादल की तीव्रता को वर्णमितीय रूप से मापा जाता है।
विषयों की तैयारी सुबह 8 से 10 बजे तक ब्लड सैंपलिंग की जाती है। आपातकालीन मामलों में, दिन के किसी भी समय रक्त का नमूना लिया जाता है। 8-12 घंटे के उपवास के बाद खाली पेट रक्त लिया जाता है। कम से कम 24 घंटे के लिए मादक पेय लेने से परहेज। शारीरिक तनाव और भावनात्मक उत्तेजना को बाहर रखा गया है, जिसके लिए विषय को 15 मिनट तक आराम करने की अनुमति है।
जैविक सामग्री की प्राप्ति और भंडारण: इक्टेरिक, हेमोलाइज्ड, काइलस सीरम या प्लाज्मा अनुसंधान के लिए उपयुक्त नहीं हैं। प्लाज्मा प्राप्त करने के लिए, शिरापरक रक्त एक थक्कारोधी के साथ एक साफ, सूखी ट्यूब में एकत्र किया जाता है। EDTA लवण, हेपरिन, लिथियम हेपरिनेट, सोडियम ऑक्सालेट, साइट्रेट परिणाम कम करते हैं। सामग्री के नमूने से 3 घंटे के बाद सामान्य मोड में सेंट्रीफ्यूगेशन नहीं किया जाता है।
रक्त सीरम प्राप्त करने के लिए, शिरापरक रक्त को एक साफ, सूखी परखनली में एकत्र किया जाता है। सामग्री के नमूने से 3 घंटे के बाद सामान्य मोड में सेंट्रीफ्यूगेशन नहीं किया जाता है। पेशाब की जांच के लिए सुबह के हिस्से का इस्तेमाल करें। नमूना लेने के 2 घंटे बाद अध्ययन नहीं किया जाता है।
जैविक सामग्री की भंडारण की स्थिति: जैविक सामग्री को अच्छी तरह से बंद कंटेनरों में संग्रहित किया जाता है। परिरक्षकों की उपस्थिति में भी, संपूर्ण रक्त भंडारण के लिए उपयुक्त नहीं है। प्लाज्मा और सीरम को कमरे के तापमान पर 1 दिन, 4-8 डिग्री सेल्सियस पर 7 दिन, -20 डिग्री सेल्सियस पर 3 से 6 महीने तक संग्रहीत किया जा सकता है। सीलबंद कंटेनरों में, कमरे के तापमान पर प्रोटीन 2 दिनों के लिए पेशाब में स्थिर रहता है। रेफ्रिजरेटर में 17 दिन (4-8 8 सी)।
टिप्पणियाँ: कुल प्रोटीन का स्तर उम्र (बच्चों और बुजुर्गों में कम), लिंग (पुरुषों में अधिक), और आहार पर निर्भर हो सकता है। निम्नलिखित कारक रक्त प्रोटीन में वृद्धि का कारण बनते हैं: एक ईमानदार स्थिति में लंबे समय तक रहना, तनाव, शराब का सेवन, कुछ दवाएं (सेफोटैक्सिम, फ़्यूरोसेमाइड, फेनोबार्बिटल, प्रेडनिसोलोन, प्रोजेस्टेरोन)। रक्त में प्रोटीन के स्तर में कमी के कारण होता है: आघात, धूम्रपान, गर्भावस्था, उपवास, शराब के सेवन में विराम, कुपोषण, मोटापा, कुछ दवाएं (डेक्सट्रान, इबुप्रोफेन, मौखिक गर्भ निरोधक)।
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