Determinación de la cantidad de glicoproteínas en sangre. Proteína total sérica

Albumen. Esta proteína, que tiene un peso molecular relativo de 65.000 D, se sintetiza en el hígado. La concentración de albúmina en el plasma sanguíneo se mantiene en un nivel alto debido a la relativa impermeabilidad de las paredes de los vasos sanguíneos a esta proteína. Este gradiente de concentración es importante para mantener un volumen plasmático constante. Contenido normal: 3,5 – 5,5 g% (SI: 33-55 / l). La proteína se sintetiza en el hígado. La albúmina no contiene residuos de carbohidratos, está formada por una larga cadena polipeptídica con una gran cantidad de aminoácidos dicarboxílicos y tiene una carga negativa. Por lo tanto, retiene muchos iones de sodio positivos y crea la mayor parte de la presión osmótica de la sangre.

La singularidad de su estructura espacial radica en el hecho de que es capaz de formar sitios específicos altos y bajos para unir varias moléculas, se combina reversiblemente con bilirrubina, ácidos grasos, iones de calcio y cloro y medicamentos. La variabilidad estructural y funcional es una fuente de capacidades funcionales adicionales, en particular la posibilidad de formar un sistema amortiguador antioxidante-proxidante.

La determinación de su concentración en suero sanguíneo es un indicador de diagnóstico importante en la práctica de laboratorio. Una disminución de la concentración provoca graves alteraciones metabólicas. La hipoalbuminemia es causada por los siguientes factores:

Debilitamiento de la síntesis de albúmina, procesos bioenergéticos, agotamiento de los sistemas enzimáticos;

Deterioro de la utilización de proteínas por parte de los tejidos y al mismo tiempo aumenta su descomposición;

Violación del equilibrio dinámico de las proteínas sanguíneas y tisulares;

El uso de proteínas con fines energéticos en casos de alteración del metabolismo energético y de carbohidratos;

Sudación de albúmina hacia los espacios intersticiales debido al aumento de la permeabilidad de las células endoteliales de los capilares;

Pérdida de proteínas a través de los riñones, superficies de heridas y quemaduras;

Deterioro de la absorción de proteínas debido a daños en el tracto gastrointestinal.

Lisozima – Proteína secretada en todos los organismos, desde los virus hasta los humanos. Disponible en suero sanguíneo humano, lágrimas y secreciones nasales. Proteína con m.m. 14000D. Actúa sobre los peptidoglicanos de las bacterias Gr+, por eso se llama muramidasa, es decir, descompone la sustancia principal de la pared celular: la mureína. Hidroliza los enlaces glicosídicos 1,4 entre N - acetilmurámico y N - acetilglucosamina. Se ha establecido su estructura terciaria. Es una proteína globular de 129 aminoácidos y contiene 4 puentes disulfuro. El 30% es una hélice alfa y el 70% es una estructura beta. La lisozima se sintetiza rápidamente, se acumula en los lisosomas y ingresa al medio ambiente dependiendo de diversos estímulos. Su actividad es especialmente grande sobre las membranas mucosas. En el suero sanguíneo es menos activo debido a la autoasociación en el ambiente humoral. Pero esto hace que el suero sanguíneo sea 50% bactericida. La lisozima aumenta la coagulación sanguínea, es capaz de unirse a aminas biogénicas y otras sustancias biológicamente activas, participa en muchos procesos fisiológicos y promueve la producción de anticuerpos.

C – proteína reactiva (PCR)- recibió su nombre por su capacidad para entrar en una reacción de precipitación con el polisacárido C de los neumococos. En el suero sanguíneo de personas sanas hay poca cantidad: hasta 5 mg/ml. Se encuentra en muchas enfermedades que se acompañan de inflamación, necrosis tisular, es el marcador más sensible, aumenta de 20 a 100 veces y hasta 1000 en las primeras 6-8 horas. Tiene un valor diagnóstico importante para el reumatismo, el infarto de miocardio y en este caso es una prueba más sensible que la ROE y la leucocitosis.

La SRP puede estar en forma de pentapexina, que contiene 5 subunidades idénticas no glicosiladas, unidas de forma no covalente entre sí con m.m. 100.000 D, y también en forma de neo SRB. El pentámero de la PCR se convierte en un monómero, el neo-CRP, que induce un proceso inflamatorio. Es una proteína multifuncional de fase aguda, desempeña un papel decisivo en la inflamación, en la protección contra antígenos extraños, en los procesos autoinmunes: se une a los polisacáridos bacterianos, a los glicolípidos y esto conduce a la activación por la vía clásica del sistema del complemento, y participa en la regulación de la función de las células inmunocompetentes. La PCR activa los monocitos, regula la función de los neutrófilos, mejora la fagocitosis, induce la quimiotaxis y la producción de superoxidasa.

Haptoglobina (Hr) – glicoproteína, forma un fuerte complejo con la hemoglobina y así protege al cuerpo de la pérdida de hierro. HP constituye entre el 1,2 y el 1,4% de la cantidad total de proteínas de suero. Se han comprobado 2 tipos de haptoglobina: Hp 1- 1 con m.m. 85 mil D, constante de sedimentación 4,5 S y Нр 11 s m.m. 165 mil D, constante de sedimentación 7 S. El tipo Hp 1-1 en homocigotos es químicamente homogéneo, es capaz de unir una molécula de hemoglobina (Hb), y Hp 2 - 2 homocigotos y Hp 2-1 heterocigotos unen 2 moléculas de hemoglobina. Peso molecular del complejo Hp. Hb 1-1 155 mil D, y el peso de los complejos es Hp. Нb 2-2 y Нр.Нb 2-1 son 310 mil D cada uno. La herencia de Нр depende de 2 genes autosómicos Нр 1 y Нр 2, que forman proteínas a partir de 2 tipos de cadenas peptídicas: la cadena a y la cadena B. La cadena B tiene la misma movilidad para todos los fenotipos, la cadena a varía según el tipo de HP: la cadena a1 tiene alta movilidad, la cadena a2 tiene movilidad lenta. Los homocigotos Hp 1-1 tienen solo una cadena 1, los Hp 2-2 tienen solo una cadena a2 y los heterocigotos Hp 1-2 tienen cadenas a1 y a2 en proporciones iguales. Los tipos se heredan, por lo que el fenotipado se utiliza en la práctica forense.

La haptoglobina es un reactivo de fase aguda; su contenido aumenta de forma inespecífica ante diversos estímulos patológicos. Forma complejos con muchas sustancias que se forman durante la degradación celular y es un inhibidor natural de la catepsina B. El complejo Hp.Hb es una peroxidasa y, junto con la ceruloplasmina, inhibe la peroxidación.

Ceruloplasmina (Cp) - Glicoproteína del plasma sanguíneo que contiene cobre, tiene una estructura cuaternaria y consta de 8 subunidades. Cp contiene 6-7 iones de cobre, esto es el 95% de todo el cobre en el cuerpo, Cp lo transporta y el cobre juega un papel importante en la formación de la estructura cuaternaria. En la formación del centro activo. Se identificó polimorfismo genético. La principal fuente de síntesis de Cp es el hígado, pero algunos tejidos también son capaces de producirla: linfocitos, células del bazo, tejido cerebral y bronquios. Es sintetizado por el gen Cp de 65 kb, se localiza en el cromosoma 3 y contiene 20 exones.

Las funciones del CP son variadas:

Es una ferroxidasa: oxida el hierro bivalente a hierro trivalente, que se incorpora a la transferrina. La transferrina transporta hierro a la médula ósea, donde se produce la síntesis del hemo. Así, Cp promueve la hematopoyesis a través de la actividad ferrooxidasa;

Tiene un efecto antioxidante, mejora la unión de los iones de hierro oxidados a la transferrina: los elimina de la reacción de peroxidación, Cp elimina las radiotoxinas, preserva el sistema hematopoyético y, por lo tanto, aumenta la supervivencia del cuerpo;

La CP aumenta significativamente en el suero sanguíneo en diversas enfermedades infecciosas y tiene un efecto antiinflamatorio;

CP regula el nivel de aminas biogénicas en el cuerpo, participa en el metabolismo de las aminas biogénicas, mediadores del sistema nervioso, regula el nivel de norepinefrina, adrenalina y serotonina.

Transferrina (Tf) – Glicoproteína que contiene hierro con m.m. 76-80 kDa. La molécula está enrollada y tiene dos dominios globulares, cada uno con un sitio para la unión del hierro. El complejo metal-proteína es estable. La síntesis se realiza a partir del gen de la transferrina, que se encuentra en el cromosoma 3 y se sintetiza en los hepatocitos. La transferrina se deriva de la hemoglobina. Los glóbulos rojos viejos son capturados por los macrófagos, que liberan hierro del anillo de protoporfirina mediante la acción de la hemooxiquinasa y lo entregan a la transferrina.

La transferrina se encuentra en la electroforesis en la fracción de globulina B y se encuentra en 3 o más condiciones genéticas. El complejo de transferrina con hierro se vuelve naranja; aquí el hierro está en forma trivalente. La concentración en personas sanas es de 200 a 400 mg%. Se han identificado 19 tipos de Tf, que se diferencian por la magnitud de la carga proteica de la molécula, la composición de aminoácidos y el número de moléculas de ácido siálico. Los tipos están asociados con características hereditarias. Normalmente, Tf está saturado con hierro en 1/3; la cantidad adicional de hierro que puede entrar en contacto con la transferrina constituye la capacidad insaturada (latente) de unión al hierro del suero sanguíneo.

En el plasma de una persona sana, la transferrina se puede encontrar en 4 formas moleculares: 1. Apotransferrina, no asociada con el hierro; 2. Transferrina C monoglandular: el hierro ocupa un sitio de unión en el dominio C terminal. 3. Transferrina N monoglandular: hierro sólo en el sitio N. 4. Diiron transferrina: hierro en los dominios C y N.

La transferrina sérica es una fuente de hierro para todas las células del cuerpo. Existen mecanismos especiales para la entrada de hierro en las células: el receptor de transferrina, consta de 2 dominios con m.m. 180 kDa. Cada dominio puede unir dos moléculas de transferrina. El nivel de expresión del receptor refleja las necesidades de absorción de hierro de la célula, que están determinadas por la tasa de división celular. Cuando la transferrina se une al receptor, el complejo sufre endocitosis y la transferrina libera hierro a pH bajo. Luego, el hierro se transporta a través de la membrana endosómica hacia la reserva intracelular de hierro y el complejo receptor de apotransferrina regresa a la superficie externa de la célula mediante vesículas intracelulares. El receptor permanece incrustado en la membrana y la apotransferrina se libera al medio ambiente.

Se observa un aumento en el nivel de transferrina con deficiencia de hierro, que puede preceder al desarrollo de anemia. Se observa una disminución en el nivel de transferrina en muchos procesos crónicos, con cirrosis hepática, pérdida de proteínas debido a quemaduras, síndrome nefrótico y gastroenteritis, tumores malignos.

Hemoglobina– también contiene hierro, forma la base molecular de la función respiratoria de la sangre, transporta oxígeno y dióxido de carbono. El peso molecular es de 66 kDa y la forma de la molécula es esférica. La hemoglobina se disuelve bien en agua. La hemoglobina está formada por una proteína globina y un hemo (ferroprotoporfirina) unidos entre sí de forma no covalente. El hemo es una molécula plana con un ion de hierro en el centro del núcleo de protoporfirina. Proteína de hemoglobina: la globina consta de 2 cadenas alfa y 2 cadenas B, es decir. forma un tetrámero dentro de la cavidad, en él se convierten grupos no polares de aminoácidos. Protegen la molécula desde el interior del contacto con el agua y estabilizan la molécula en su conjunto. El nivel normal de hemoglobina es de 132 a 164 g/l; aumenta con la hipoxia y la insuficiencia pulmonar crónica. Defectos cardíacos congénitos, pérdida de líquido en el cuerpo, intoxicación por dióxido de carbono. Disminuye con un trastorno de la capacidad de absorción de hierro, con hemorragia aguda, con hemólisis, ostomieloma, fibrosis, osteoblastos, cáncer y daño renal.

mioglobina– cromoporotida, contenida en el miocardio y los músculos esqueléticos, por lo que su contenido en la sangre aumenta durante el infarto de miocardio y el daño muscular. Su determinación es importante en las primeras horas del infarto de miocardio (IM), especialmente con un curso atípico, en este caso se produce un aumento de mioglobina a las 2-3 horas en el 92% de los pacientes, a las 5 horas en el 100%. La disminución de la concentración se produce en diferentes tipos, lo que tiene importancia pronóstica. El tipo 1, lítico, se caracteriza por un pico de mayor concentración con una disminución gradual a las 16-36 horas. Es típico del curso sencillo de IFM. Tipo 11: la agitación ocurre en forma de cambios abruptos de números elevados a niveles normales en las primeras 24 horas. El tipo 111 – constante se caracteriza por un contenido alto y constante de mioglobina con ligeras fluctuaciones. Observado en casos de IFM complicado por tromboendocarditis.

Componentes del sistema del complemento.- No se trata de una proteína, sino de un sistema complejo de proteínas que incluye alrededor de 20 componentes que interactúan: C1, C2, C3.....C9, factor B, factor D y varias proteínas reguladoras. Todos estos componentes son proteínas solubles con mm. de 24.000 a 400.000 D, circulando en la sangre y el líquido tisular. La mayoría de ellos no están activos hasta que son activados por una respuesta inmune (que involucra anticuerpos) o directamente por un microorganismo invasor.

Uno de los posibles resultados de la activación del complemento es la asociación secuencial de los llamados componentes tardíos (C5, C6, C6, C7, C8 y C9) en un gran complejo proteico. Provocando lisis celular (complejo lítico o de ataque a membranas). La agregación de componentes tardíos se produce como resultado de una serie de reacciones secuenciales de activación proteolítica con la participación de componentes tempranos (C1, C2, C3, C4, factor B y factor D). La mayoría de estos primeros componentes son proenzimas. Activado secuencialmente por proteólisis. Cuando cualquiera de estas proenzimas se escinde, se convierte en una enzima proteolítica activa y escinde la siguiente proenzima, y así sucesivamente. Debido a que muchos de los componentes activados se unen estrechamente a las membranas, la mayoría de estos eventos ocurren en la superficie celular.

El componente central de esta cascada proteolítica es el componente C3. Su activación por escisión es la reacción principal de toda la cadena del complemento. Se puede activar de forma clásica y alternativa. En ambos casos, C3 es escindido por la convertasa C3. Dos vías diferentes conducen a la formación de diferentes convertasas C3. La convertasa C3 divide C3 en 2 fragmentos: C3b y C3a grandes. C3b: se une a la membrana celular diana y a la convertasa C3. Como resultado, se forma un gran complejo enzimático con especificidad alterada: la convertasa C 5. Luego, la convertasa C5 escinde C5 e inicia así el ensamblaje del complejo lítico de los componentes tardíos C5 a C9. Cada enzima activada escinde muchas moléculas de la siguiente proenzima. La cascada de activación de los primeros componentes actúa como un amplificador: cada molécula activada al comienzo de toda la cadena conduce a la formación de muchos componentes líticos.

Funciones de las proteínas del sistema del complemento: 1. Opsonizante – es decir, unión al m.o. varias moléculas que son ligandos y células mononucleares a las que se les unen ciertos receptores; todo esto mejora la fagocitosis. 2. Participación en reacciones inflamatorias, la activación del sistema del complemento conduce a la liberación de sustancias biológicamente activas de los basófilos de los tejidos, que estimulan la reacción inflamatoria. 3. C3a es capaz de provocar la migración de neutrófilos al lugar de la inflamación, induciendo su unión al endotelio vascular, provocando el desarrollo de un estallido respiratorio y desgranulación en ellos. 4. C5a promueve la quimiotaxis, la agregación y desgranulación de neutrófilos y la formación de radicales libres de oxígeno. 5. Función citotóxica o lítica. En la etapa final de la activación del complemento, se forma un complejo de ataque a la membrana (MAC), que ataca la membrana celular bacteriana y la destruye.

Alfa 2 – macroglobulina– un inhibidor de la proteasa, regula la actividad de varias enzimas proteolíticas (Cada subunidad tiene dos cadenas polipeptídicas: tripsina, quimotripsina, trombina, calicreína, plasmina). La alfa macroglobulina se diferencia significativamente de otras proteínas séricas. Esta es una glicoproteína m.m. 716000 – 725 000D, consta de 2 subunidades unidas de forma no covalente. La molécula contiene calcio y magnesio. La macroglobulina alfa2 es resistente a la temperatura y sensible a las reacciones ácidas del medio ambiente. A una temperatura de 40 grados C la actividad permanece. Sintetizado en el hígado, presente en suero sanguíneo, líquido extracelular, sinovial, amniótico, cefalorraquídeo y linfático. La pérdida de esta proteína es fatal.

La alfa 2 macroglobulina representa hasta el 12% de la actividad inhibidora de la sangre. La formación de un complejo entre una enzima y un inhibidor es una reacción compleja de varios pasos. En la primera etapa, la proteasa activa reacciona con la alfa 2 macroglobulina, se forma un enlace débil, en la undécima etapa la enzima escinde el enlace peptídico y esto conduce a un cambio conformacional en la alfa 2 macroglobulina, y en la 111 etapa la proteasa se une covalentemente a un sitio especial en la molécula de macroglobulina alfa 2. Esto conduce a la formación de una estructura compacta, a la captura propiamente dicha de la proteasa y a su bloqueo, es decir. Es como si la alfa macroglobulina atrapara la enzima y privara a la proteasa de actividad proteolítica, por eso se le llama restrictor de proteasa, no inhibidor.

El nivel de alfa 2 macroglobulina disminuye en la hepatitis viral y en las primeras etapas de la enfermedad por quemaduras. Se observa un aumento en el síndrome nefrótico y en pacientes con diabetes mellitus. La proteína juega un papel especial en los tumores malignos. Con un proceso avanzado, su nivel disminuye de 2 a 5 veces en el contexto de un aumento en la masa tumoral.

Fibrinógeno – glicoproteína con m.m. 340000D, consta de 3 mil aminoácidos, tiene 2 dímeros en cada 3 cadenas polipeptídicas. El fibrinógeno es producido por las células parenquimatosas del hígado y ingresa a la sangre. El fibrinógeno bajo la influencia de la trombina se convierte en fibrina mediante el tipo de fragmentación proteolítica de la molécula. Primero, la trombina escinde 2 péptidos A de la molécula de fibrinógeno, formando monómeros de fibrina inferiores: monómeros des A. Luego se escinden 2 péptidos B. Aparecen monómeros A-B o monómeros de fibrina completos.

A veces aparecen fibrinopéptidos A en la sangre, lo que indica coagulación intravascular. La molécula de fibrinógeno restante, la fibrina, el monómero adquiere la capacidad de combinarse con los de su propia especie y formar fibrina, un polímero que representa un gel. El ensamblaje de monómeros pasa por las etapas de formación de dímeros que, mediante reticulación longitudinal y cruzada, forman polímeros de fibrina: protofibrillas y luego filamentos de fibrina. Un trombo formado por dicha fibrina se disuelve fácilmente con la fibrinolisina y no puede proporcionar una homeostasis completa. Esto puede provocar sangrado y mala cicatrización de las heridas.

2.4. Determinación de algunas proteínas séricas individuales.

2.4.1. Determinación de haptoglobina.

Principio del método: La haptoglobina sérica forma un complejo con la solución de hemoglobina, que es precipitada por el rivanol. En función del nivel de hemoglobina restante en la solución, se determina fotométricamente el contenido de haptoglobina en el suero sanguíneo.

Reactivos:

1. Rivanol. Añadir 15 ml de agua destilada a 100 mg de rivanol, agitar hasta su completa disolución.

2. Hemoglobina. Agregar 10 ml de agua destilada a 100 mg de hemoglobina, agitar y centrifugar durante 10 minutos a 3000 rpm para eliminar los agregados.

3. solución de sulfato de amonio al 10%.

Progreso de la determinación: Para realizar el estudio es necesario suministrar 3 muestras: experimental, de control y estándar.

Agregue 0,3 ml de agua destilada, 0,5 ml de suero no hemolizado, 0,2 ml de solución de hemoglobina a la muestra problema y mezcle.

Agregue 0,5 ml de agua destilada y 0,5 ml de suero sanguíneo a la muestra de control y mezcle. Ambas muestras se incuban durante 10 minutos a temperatura ambiente, tras lo cual se añaden 3 ml de solución de rivanol.

Añadir 2,8 ml de agua destilada y 0,2 ml de hemoglobina a una muestra estándar y mezclar. Después de 5 minutos, las tres muestras se centrifugan a 3000 rpm durante 6-7 minutos. Añadir 0,2 ml de solución de sulfato de amonio al 10% al sobrenadante e incubar durante 60 minutos a temperatura ambiente.

Evaluación del resultado; El cálculo se realiza según la fórmula:

X = ((Ec - (Eo - Ek) x2) / Es, ESTO necesita ser arreglado

donde X es la concentración de haptoglobina g/l; Ec, Eo, Ek: densidad óptica de muestras de control estándar, experimentales.

MUZ "HOSPITAL CLÍNICO DE ATENCIÓN MÉDICA DE EMERGENCIA DE LA PRIMERA CIUDAD"

UNIVERSIDAD MÉDICA DEL ESTADO DEL NORTE

CURSO DE DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO CLÍNICO

Proteína total, su significado y métodos de determinación.

Realizado por un pasante:

Gernet M.M.

Arcángel 2008

Introducción

Clasificación

Proteínas del plasma sanguíneo

Albúmina

Globulinas

Valor clínico y diagnóstico.

hipoproteinemia

hiperproteinemia

Métodos para determinar la proteína total en suero sanguíneo.

Lista de literatura usada

Introducción

Las proteínas son compuestos orgánicos de alto peso molecular que contienen nitrógeno y constan de más de 20 tipos de alfa aminoácidos. El límite convencional entre polipéptidos grandes y proteínas es el peso molecular de 8000-10000. Las proteínas plasmáticas se sintetizan principalmente en el hígado, las células plasmáticas, los ganglios linfáticos, el bazo y la médula ósea.

El plasma sanguíneo humano contiene más de 100 proteínas diferentes que difieren en origen y función. Del 9-10% del residuo seco del plasma sanguíneo, las proteínas representan el 6,5-8,5%.

Clasificación

Simple (proteínas) (contiene solo aminoácidos)

· Complejos (proteínas) (aminoácidos y componentes no aminoácidos: hemo, derivados vitamínicos, lípidos o carbohidratos)

Fibrilares (componentes de muchos tejidos densos)

· Globular (albúmina (4-5%), globulinas (2-3%), fibrinógeno (0,2-0,4%)

Existen las siguientes clases funcionales de proteínas:

Proteínas de transporte (transferrina)

Proteínas de fase aguda (proteína C reactiva)

Proteínas de fase no aguda (Albúmina, transferrina)

Factores del complemento y de la coagulación (complemento C4, factor VIII)

Enzimas (amilasa)

Antienzima (Antitrombina III)

Proteohormonas (insulina)

Inmunoglobulinas (IgG)

Proteínas cuyas funciones no se conocen bien (ácido alfa glicoproteico)

La función fisiológica de las proteínas plasmáticas es mantener la presión osmótica coloidal, la capacidad tampón del plasma y, en algunos casos, la deposición (almacenamiento) de moléculas lipídicas, productos metabólicos, hormonas, fármacos y microelementos. Algunas proteínas plasmáticas realizan una función enzimática, mientras que las inmunoglobulinas proporcionan inmunidad humoral. Los componentes del complemento y la proteína C reactiva son importantes para la aparición de resistencias inespecíficas, especialmente en el caso de infecciones bacterianas. El equilibrio entre los factores de coagulación y los inhibidores garantiza el estado fluido de la sangre en condiciones normales y una rápida coagulación en caso de lesión.

Proteínas del plasma sanguíneo

Albúminas:

El valor normalizado es 56,5 - 66,8 (la albúmina en el suero sanguíneo representa aproximadamente el 60% de la proteína total. Las albúminas se sintetizan en el hígado (aproximadamente 15 g / día), su vida media es de aproximadamente 17 días. La presión oncótica de El plasma se debe en un 65-80% a la albúmina. Las albúminas desempeñan una función importante en el transporte de muchas sustancias biológicamente activas, en particular las hormonas. Pueden unirse al colesterol y la bilirrubina. Una parte importante del calcio en la sangre también está asociada a la albúmina. La albúmina puede unirse con varios fármacos.

Son posibles cambios tanto cualitativos como cuantitativos en la albúmina plasmática sanguínea. Los cambios cualitativos en la albúmina son muy raros debido a la composición homogénea de esta fracción proteica; Los cambios cuantitativos se manifiestan por hiper e hipoalbuminemia.

La hiperalbuminemia se observa durante la deshidratación en casos de lesiones graves, quemaduras extensas y cólera.

La hipoalbuminemia puede ser primaria (en recién nacidos como resultado de la inmadurez de las células hepáticas) y secundaria, causada por diversas condiciones patológicas similares a las que causan la hipoproteinemia. La hemodilución también puede desempeñar un papel en la reducción de las concentraciones de albúmina, por ejemplo durante el embarazo. Una disminución del contenido de albúmina por debajo de 22-24 g/l se acompaña del desarrollo de edema pulmonar).

Globulinas:

· Alfa 1 - 3,5 - 6,0 (los componentes principales de esta fracción incluyen α 1 - antitripsina, α 1 - lipoproteína, α 1 - glicoproteína ácida) (Los cambios en la fracción de α 1 - globulina se observan en exacerbaciones agudas, subagudas y crónicas procesos inflamatorios; daño hepático; todos los procesos de descomposición de tejidos o proliferación celular. Se observa una disminución en la fracción de α 1 - globulina con deficiencia de α 1 - antitripsina, hipo - α 1 - lipoproteinemia).

· Alfa 2 - 6,9 – 10,5 (la fracción contiene α 2 - macroglobulina, haptoglobina, alipoproteínas A, B (apo-A, apo-B), C, ceruloplasmina) (se observa un aumento en la fracción de α 2 - globulina en todos los tipos de procesos inflamatorios agudos, especialmente con una naturaleza exudativa y purulenta pronunciada (neumonía, empiema pleural, otros tipos de procesos purulentos); enfermedades asociadas con la participación del tejido conectivo en el proceso patológico (colagenosis, enfermedades autoinmunes, enfermedades reumáticas); tumores malignos ; en la etapa de recuperación después de quemaduras térmicas; síndrome nefrótico; hemólisis de la sangre in vitro. Se observa una disminución de la fracción en diabetes mellitus, pancreatitis (a veces), ictericia congénita de origen mecánico en recién nacidos, hepatitis tóxica. Las α 2 - globulinas incluyen la mayor parte de las proteínas de fase aguda. Un aumento en su contenido refleja la intensidad de la respuesta al estrés y los procesos inflamatorios en los tipos de patología enumerados.

· Beta - 7,3 – 13,0 (la fracción β contiene transferrina, hemopexina, componentes del complemento, inmunoglobulinas y lipoproteínas) (se detecta un aumento en la fracción de betaglobulina en hiperlipoproteinemia primaria y secundaria, enfermedades hepáticas, síndrome nefrótico, úlceras gástricas sangrantes, hipotiroidismo . Se detecta un contenido reducido de beta globulinas en la lipoproteinemia gopo-beta.

· Gamma - 12,8 – 19,0 (la fracción γ contiene Ig (IgG, IgA, IgM, IgD, IgE), por lo que se observa un aumento en el contenido de γ-globulinas durante la reacción del sistema inmunológico, cuando se producen AT y autoanticuerpos. : durante infecciones virales y bacterianas, inflamación, colagenosis, destrucción de tejidos y quemaduras. La hipergammaglobulinemia significativa, que refleja la actividad del proceso inflamatorio, es característica de la hepatitis crónica activa y la cirrosis del hígado. Se observa un aumento en la fracción de γ - globulinas en el 88-92% de los pacientes con hepatitis crónica activa (y en el 60-65% de los pacientes es muy pronunciada, hasta 26 g/l y más). Casi los mismos cambios se observan en pacientes con cirrosis hepática muy activa y avanzada. , mientras que el contenido de γ-globulina suele superar el contenido de albúmina, lo que se considera un signo de mal pronóstico.

En determinadas enfermedades, es posible una mayor síntesis de proteínas que pertenecen a la fracción de γ-globulina y aparecen en la sangre proteínas patológicas (paraproteínas), que se detectan mediante electroforesis. Para aclarar la naturaleza de estos cambios, es necesaria la inmunoelectroforesis. Se observan cambios similares en el mieloma y la enfermedad de Waldenström.

Una disminución en el contenido de γ-globulinas puede ser primaria o secundaria.

Hay tres tipos principales de hipogammaglobulinemia primaria: fisiológica (en niños de 3 a 5 meses), congénita e idiopática. Las causas de la hipogammaglobulinemia secundaria pueden ser numerosas enfermedades y afecciones que conducen al agotamiento del sistema inmunológico.

La comparación de la dirección de los cambios en el contenido de albúminas y globulinas con los cambios en el contenido total de proteínas da motivos para concluir que la hiperproteinemia se asocia más a menudo con la hiperglobulinemia, mientras que la hipoproteinemia suele ser causada por la hipoalbuminemia. En el pasado, se utilizaba ampliamente el cálculo del coeficiente albúmina-globulina, es decir, la relación entre la fracción de albúmina y la fracción de globulina. Normalmente, esta cifra es de 2,5-3,5. En pacientes con hepatitis crónica y cirrosis hepática, este coeficiente disminuye a 1,5 e incluso a 1 debido a una disminución del contenido de albúmina y un aumento de la fracción de globulina. En los últimos años se ha prestado cada vez más atención a la determinación del contenido de prealbúmina, especialmente en pacientes en cuidados intensivos críticos que reciben nutrición parenteral. Una disminución en la concentración de prealbúmina es una prueba temprana y sensible de deficiencia de proteínas en el cuerpo del paciente).

El coeficiente A\G se utiliza habitualmente como índice de la proporción entre albúmina y globulinas.

Se pueden observar cambios en este coeficiente en cirrosis hepática, glomerulonefritis, síndrome nefrótico, hepatitis aguda y lupus eritematoso sistémico.

La concentración de proteínas en el plasma sanguíneo depende de la relación entre la tasa de síntesis y excreción del cuerpo, así como del volumen de distribución.

En el hígado se forman muchas proteínas, las células plasmáticas y los linfocitos sintetizan inmunoglobulinas, los macrófagos sintetizan proteínas del sistema del complemento. La pérdida pasiva de proteínas de bajo peso molecular se produce a través de los glomérulos y la pared intestinal. Algunas de estas proteínas se reabsorben o capturan y descomponen en la mucosa intestinal. La mayoría de las proteínas plasmáticas, después de ser absorbidas por pinocitosis, se catabolizan en células endoteliales capilares o fagocitos mononucleares.

Funciones fisiológicas de las proteínas. sangre son numerosos, los principales son los siguientes:

· Mantener la presión coloide-oncótica, manteniendo el volumen sanguíneo, reteniendo el agua y no permitiéndola salir del torrente sanguíneo;

· Participar en los procesos de coagulación sanguínea;

· Mantener un pH sanguíneo constante, formando uno de los sistemas tampón de la sangre;

· Al combinarse con una serie de sustancias (colesterol, bilirrubina, etc.), así como con medicamentos, se liberan en los tejidos.

· Mantener niveles normales de cationes en la sangre formando compuestos no dializables con ellos (por ejemplo, entre el 40 y el 50% del calcio sérico está unido a proteínas; una parte importante del hierro, cobre, magnesio y otros oligoelementos también está unido a proteínas);

· Desempeñar un papel crítico en los procesos inmunológicos;

· Servir como reserva de aminoácidos;

· Realizar una función reguladora (hormonas, enzimas y otras sustancias proteicas biológicamente activas).

Valor clínico y diagnóstico.

Normoproteinemia: contenido normal de proteínas totales

Hipoproteinemia: bajo contenido de proteínas totales

Hiperproteinemia: aumento del contenido de proteínas.

hipoproteinemia

1. Ingesta insuficiente de proteínas alimentarias, generalmente observada con desnutrición, inanición, tumores, estrechamiento del esófago, disfunción del tracto gastrointestinal (debido al deterioro de la digestión y la absorción de los componentes proteicos de los alimentos), por ejemplo, con procesos inflamatorios prolongados de los intestinos.

Según A. A. Pokrovsky, incluso una composición de aminoácidos desequilibrada de los alimentos a veces puede provocar hipoproteinemia.

Para garantizar procesos vitales normales, el cuerpo utiliza la fracción de albúmina de las proteínas del plasma sanguíneo. Con un mayor consumo de albúmina (principalmente responsable de la presión arterial oncótica), se desarrolla el llamado edema oncótico o por inanición. En términos generales, cualquier disminución del contenido de proteínas plasmáticas por debajo de 5 g% suele ir acompañada de edema tisular hipoproteinémico.

2. Reducción de los procesos de biosíntesis de proteínas (hepatitis parenquimatosa crónica, enfermedades agudas y crónicas, procesos supurativos prolongados, neoplasias malignas, tirotoxicosis grave, etc.).

3. Pérdida de proteínas por parte del cuerpo durante el sangrado agudo y crónico, con un fuerte aumento de la permeabilidad de las paredes capilares (con su daño tóxico, cuando las proteínas de la sangre se filtran al tejido), con hemorragias, formación de exudados extensos, derrames en las cavidades serosas. , edema.

La liberación de proteínas (principalmente albúmina) del torrente sanguíneo se produce cuando el filtro renal se altera debido a enfermedades orgánicas del riñón (especialmente nefrosis y amiloidosis), en las que las proteínas casi siempre se encuentran en la orina, así como en las quemaduras.

4. Defectoproteinemia (albuminemia): ausencia congénita o contenido insuficiente de ceruloplasmina en el plasma sanguíneo en la enfermedad de Wilson.

5. En mujeres durante la lactancia y los últimos meses de embarazo.

6. Síndrome nefrótico

7. Kwashiorkor (deficiencia proteica aguda)

8. Síndrome de retención de sal

hiperproteinemia

1. Deshidratación severa

2. Cuando la sangre se espesa por pérdidas menores de líquidos, lo que ocurre con diarrea profusa, aumento de la sudoración, vómitos incontrolables, diabetes insípida, cólera, obstrucción intestinal, peritonitis generalizada, quemaduras graves, falta de agua.

3. Para poliartritis crónica y algunos procesos inflamatorios crónicos.

4. En el mieloma (plasmocitoma), macroglobulinemia de Vandelström, se observa una hiperproteinemia persistente de hasta 12 g% y más, en la que aparecen focos adicionales y formaciones de proteínas patológicas "anormales" (paraproteínas) en los huesos planos del cráneo.

La hipoproteinemia casi siempre se asocia con hipoalbuminemia y la hiperproteinemia con hiperglobulinemia.

El cuerpo compensa la hipoalbuminemia con hiperglobulinemia (incluso si no hay irritación del sistema reticuloendotelial) para mantener el nivel de presión osmótica coloide. Por el contrario, el aumento de globulinas se compensa con la hipoalbuminemia.

La aclaración de las relaciones cuantitativas entre fracciones individuales de suero sanguíneo es de gran importancia diagnóstica. Su estudio permite diferenciar enfermedades incluso cuando el contenido de proteínas totales en el suero permanece sin cambios.

Métodos para determinar la proteína total en suero sanguíneo.

Los valores de referencia para la concentración de proteínas totales en el suero sanguíneo son 65-85 g/l

1. Métrica de nitrógeno

2. Determinación del peso específico del suero

3. Gravimétrico (gravimétrico), cuando las proteínas de la sangre se precipitan, se secan hasta peso constante y se pesan en una balanza analítica.

4. Refractométrico

5. Colorimétrico

6. neflométrico

7. polarimétrico

8. espectrométrico

1. Refractómetro IRF – 454 B2M

destinado a determinar proteínas en suero sanguíneo, líquido cefalorraquídeo, controlar las concentraciones de fármacos y medir la densidad de la orina.

2. Cobás integra – Total Proteína generación .2

Principio de prueba: El cobre bivalente reacciona en una solución alcalina con enlaces peptídicos de proteínas para formar el característico complejo de biuret de color púrpura.

3. Determinación de fracciones proteicas del suero sanguíneo mediante electroforesis sobre película de acetato de celulosa.

La solución tampón está destinada a la separación electroforética de proteínas séricas sobre membranas de acetato de celulosa con posterior determinación densitométrica de fracciones proteicas.

PRINCIPIO DEL MÉTODO

El principio de separación electroforética de proteínas se basa en las diferentes velocidades de movimiento de las moléculas de proteínas del suero sanguíneo en un campo eléctrico constante de cierta intensidad. Las fracciones de proteínas separadas se tiñen con un tinte. La intensidad del color de las fracciones proteicas es proporcional a su cantidad.

MUESTRAS ANALIZADAS

Suero libre de hemólisis, lipemia y no ictérico. Las fracciones proteicas del suero sanguíneo son estables en un tubo de ensayo bien cerrado a 18-25ºC durante 8 horas, a 2-8ºC durante 3 días, a 20ºC durante 1 mes.

REALIZANDO EL ANÁLISIS

1. Realización de electroforesis

1.1. Coloque con cuidado las membranas secas sobre la superficie del tampón de electroforesis, evitando la inmersión rápida, y déjelas hasta que estén completamente mojadas. Seque suavemente las membranas humedecidas entre hojas de papel de filtro grueso, evitando que se sequen. Antes de aplicar las muestras es recomendable realizar una fase de preforesis. Para hacer esto, la membrana se debe colocar en la cámara de electroforesis y se debe encender la corriente en el modo seleccionado durante 10 minutos. La fase de preforesis se puede sustituir por un remojo prolongado de la membrana en una solución tampón (varias horas).

1.2. Con un aplicador, aplique las muestras de suero sanguíneo analizadas a una distancia de 2-3 cm del borde del cátodo de la membrana. Coloque la membrana en una cámara electroforética y conecte la corriente.

2. Procesamiento de electroferograma

2.1. tinte carmesí S.

Después de cortar la corriente, transfiera con cuidado la membrana a la solución de tinte durante 3 a 5 minutos, luego dos veces durante 3 minutos a una solución de ácido acético al 5-7% (hasta que el fondo se blanquee).

1.2. Procese el electroferograma utilizando un escáner y un programa de computadora.

4. prueba de timol

Principio del método:

Las beta globulinas, gamma globulinas y lipoproteínas séricas se precipitan a pH 7,55 con reactivo de timol. Dependiendo de la cantidad y la proporción mutua de las fracciones de proteínas, durante la reacción se produce turbiedad, cuya intensidad se mide turbidimétricamente.

Valor clínico y diagnóstico:

La prueba de timol es más adecuada para estudios funcionales del hígado que las pruebas de resistencia a los coloides. Se cree que es positivo en el 90-100% de los casos de la enfermedad de Botkin (ya en su fase preictérica y en la forma anictérica) y en la hepatitis tóxica. La reacción es positiva en poshepatitis y posnecrótica, especialmente en cirrosis ictérica (a diferencia de otras formas de cirrosis), enfermedades del colágeno, malaria e infecciones virales. Con ictericia obstructiva es negativo (en el 75% de los casos), lo que tiene importancia diagnóstica diferencial.

En caso de ictericia obstructiva, la prueba se vuelve positiva solo si el proceso se complica con hepatitis parenquimatosa. Para diferenciar la ictericia obstructiva de la ictericia parenquimatosa, es de gran importancia el uso de una prueba de timol con una prueba de Burstein (para beta y prebetalipoproteínas).

Con ictericia parenquimatosa, ambas pruebas son positivas; con ictericia obstructiva, la prueba de timol es negativa y la prueba de Burstein es marcadamente positiva.

Lista de literatura usada

1. Proteínas específicas en el diagnóstico de laboratorio clínico: preguntas y respuestas. – Töpfer G., Toma R., Tsavta B., M., 2004. – 96s

MUZ "HOSPITAL CLÍNICO DE ATENCIÓN MÉDICA DE EMERGENCIA DE LA PRIMERA CIUDAD"

UNIVERSIDAD MÉDICA DEL ESTADO DEL NORTE

CURSO DE DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO CLÍNICO

Proteína total, su significado y métodos de determinación.

Realizado por un pasante:

Gernet M.M.

Arcángel 2008

INTRODUCCIÓN

Clasificación

Proteínas del plasma sanguíneo

Albúmina

Globulinas

Valor clínico y diagnóstico.

hipoproteinemia

hiperproteinemia

Métodos para determinar la proteína total en suero sanguíneo.

Lista de literatura usada

INTRODUCCIÓN

El plasma sanguíneo humano contiene más de 100 proteínas diferentes que difieren en origen y función. Del 9-10% del residuo seco del plasma sanguíneo, las proteínas representan el 6,5-8,5%.

Clasificación

Simple (proteínas) (contiene solo aminoácidos)

· Complejos (proteínas) (aminoácidos y componentes no aminoácidos: hemo, derivados vitamínicos, lípidos o carbohidratos)

Fibrilares (componentes de muchos tejidos densos)

· Globular (albúmina (4-5%), globulinas (2-3%), fibrinógeno (0,2-0,4%)

Existen las siguientes clases funcionales de proteínas:

Proteínas de transporte (transferrina)

Proteínas de fase aguda (proteína C reactiva)

Proteínas de fase no aguda (Albúmina, transferrina)

Factores del complemento y de la coagulación (complemento C4, factor VIII)

Enzimas (amilasa)

Antienzima (Antitrombina III)

Proteohormonas (insulina)

Inmunoglobulinas (IgG)

Proteínas cuyas funciones no se conocen bien (ácido alfa glicoproteico)

Belplasma sanguíneo ki

Albúminas:

La hiperalbuminemia se observa durante la deshidratación en casos de lesiones graves, quemaduras extensas y cólera.

Globulinas:

· Alfa 1 - 3,5 - 6,0 (los componentes principales de esta fracción incluyen b 1 - antitripsina, b 1 - lipoproteína, ácido b 1 - glicoproteína) (Los cambios en la fracción b 1 - globulina se observan en exacerbaciones agudas, subagudas y crónicas procesos inflamatorios; daño hepático; todos los procesos de descomposición de tejidos o proliferación celular. Se observa una disminución en la fracción de b 1 - globulinas con deficiencia de b 1 - antitripsina, hipo - b 1 - lipoproteinemia).

· Alfa 2 - 6,9 - 10,5 (la fracción contiene b 2 - macroglobulina, haptoglobina, alipoproteínas A, B (apo-A, apo-B), C, ceruloplasmina) (se observa un aumento en la fracción de b 2 - globulinas en todos tipos de procesos inflamatorios agudos, especialmente con una naturaleza exudativa y purulenta pronunciada (neumonía, empiema pleural, otros tipos de procesos purulentos); enfermedades asociadas con la participación del tejido conectivo en el proceso patológico (colagenosis, enfermedades autoinmunes, enfermedades reumáticas); maligno tumores; en la etapa de recuperación después de quemaduras térmicas; síndrome nefrótico; hemólisis de la sangre in vitro. Se observa una disminución de la fracción en diabetes mellitus, pancreatitis (a veces), ictericia congénita de origen mecánico en recién nacidos, hepatitis tóxica. B 2 - globulinas incluyen la mayor parte de las proteínas de fase aguda. Un aumento en su contenido refleja la intensidad de la respuesta al estrés y los procesos inflamatorios en los tipos de patología enumerados.

· Beta - 7,3 - 13,0 (la fracción beta contiene transferrina, hemopexina, componentes del complemento, inmunoglobulinas y lipoproteínas) (se detecta un aumento en la fracción de beta globulina en hiperlipoproteinemia primaria y secundaria, enfermedades hepáticas, síndrome nefrótico, úlceras gástricas sangrantes, hipotiroidismo. Contenido reducido Las beta globulinas se detectan en la lipoproteinemia gopo-beta.

· Gamma - 12,8 - 19,0 (la fracción g contiene Ig (IgG, IgA, IgM, IgD, IgE), por lo que se observa un aumento en el contenido de g-globulinas durante la reacción del sistema inmunológico, cuando se producen AT y autoanticuerpos. : durante infecciones virales y bacterianas, inflamación, colagenosis, destrucción de tejidos y quemaduras. La hipergammaglobulinemia significativa, que refleja la actividad del proceso inflamatorio, es característica de la hepatitis crónica activa y la cirrosis del hígado. Se observa un aumento en la fracción de g - globulina en El 88-92% de los pacientes tienen hepatitis crónica activa (y en el 60-65% de los pacientes es muy pronunciada, hasta 26 g/l y más). Casi los mismos cambios se observan en pacientes con cirrosis hepática muy activa y avanzada, con todo esto, el contenido de g-globulina suele superar el contenido de albúmina, lo que se considera un signo de mal pronóstico.

En determinadas enfermedades, es posible una mayor síntesis de proteínas que pertenecen a la fracción g-globulina y aparecen proteínas patológicas en la sangre: paraproteínas, que se detectan mediante electroforesis. Para aclarar la naturaleza de estos cambios, es necesaria la inmunoelectroforesis. Se observan cambios similares en el mieloma y la enfermedad de Waldenström.

Una disminución en el contenido de g-globulinas puede ser primaria o secundaria.

El coeficiente A\G se utiliza habitualmente como índice de la proporción entre albúmina y globulinas.

Se pueden observar cambios en este coeficiente en cirrosis hepática, glomerulonefritis, síndrome nefrótico, hepatitis aguda y lupus eritematoso sistémico.

La concentración de proteínas en el plasma sanguíneo depende de la relación entre la tasa de síntesis y excreción del cuerpo, así como del volumen de distribución.

En el hígado se forman muchas proteínas, las células plasmáticas y los linfocitos sintetizan inmunoglobulinas, los macrófagos sintetizan proteínas del sistema complementario. La pérdida pasiva de proteínas de bajo peso molecular se produce a través de los glomérulos y la pared intestinal. Algunas de estas proteínas se reabsorben o capturan y descomponen en la mucosa intestinal. La mayoría de las proteínas plasmáticas, después de ser absorbidas por pinocitosis, se catabolizan en células endoteliales capilares o fagocitos mononucleares.

Funciones fisiológicas de las proteínas. sangre son numerosos, los principales son los siguientes:

· Mantener la presión coloide-oncótica, manteniendo el volumen sanguíneo, reteniendo el agua y no permitiéndola salir del torrente sanguíneo;

· Participar en los procesos de coagulación sanguínea;

· Mantener un pH sanguíneo constante, formando uno de los sistemas tampón de la sangre;

· Al combinarse con una serie de sustancias (colesterol, bilirrubina, etc.), así como con medicamentos, se liberan en los tejidos.

· Desempeñar un papel crítico en los procesos inmunológicos;

· Servir como reserva de aminoácidos;

· Realizar una función reguladora (hormonas, enzimas y otras sustancias proteicas biológicamente activas).

Avalor clínico y diagnóstico

Normoproteinemia: contenido normal de proteínas totales

Hipoproteinemia: bajo contenido de proteínas totales

Hiperproteinemia: aumento del contenido de proteínas.

hipoproteinemia

Según A. A. Pokrovsky, incluso una composición de aminoácidos desequilibrada de los alimentos a veces puede provocar hipoproteinemia.

4. Defectoproteinemia (albuminemia): ausencia congénita o contenido insuficiente de ceruloplasmina en el plasma sanguíneo en la enfermedad de Wilson.

5. En mujeres durante la lactancia y los últimos meses de embarazo.

6. Síndrome nefrótico

7. Kwashiorkor (deficiencia proteica aguda)

8. Síndrome de retención de sal

hiperproteinemia

1. Deshidratación severa

3. Para poliartritis crónica y algunos procesos inflamatorios crónicos.

4. Se observa hiperproteinemia persistente de hasta 12 g% y más en el mieloma (plasmocitoma), macroglobulinemia de Vandelström, en la que aparecen focos adicionales y formaciones de proteínas patológicas "anormales" (paraproteínas) en los huesos planos del cráneo.

La hipoproteinemia casi siempre se asocia con hipoalbuminemia y la hiperproteinemia con hiperglobulinemia.

Métodos para determinar la proteína total en suero sanguíneo.

Los valores de referencia para la concentración de proteínas totales en el suero sanguíneo son 65-85 g/l

1. Métrica de nitrógeno

2. Determinación del peso específico del suero

3. Gravimétrico (gravimétrico), cuando las proteínas de la sangre se precipitan, se secan hasta peso constante y se pesan en una balanza analítica.

4. Refractométrico

5. Colorimétrico

6. neflométrico

7. polarimétrico

8. espectrométrico

1. Refractómetro IRF - 454 B2M

destinado a determinar proteínas en suero sanguíneo, líquido cefalorraquídeo, controlar las concentraciones de fármacos y medir la densidad de la orina.

2. Cobásintegra - TotalProteínageneración.2

Principio de prueba: El cobre bivalente reacciona en una solución alcalina con enlaces peptídicos de proteínas para formar el característico complejo de biuret de color púrpura.

3. Determinación de fracciones proteicas del suero sanguíneo mediante electroforesis sobre película de acetato de celulosa..

PRINCIPIO DEL MÉTODO

MUESTRAS ANALIZADAS

Suero libre de hemólisis, lipemia y no ictérico. Las fracciones proteicas del suero sanguíneo son estables en un tubo bien cerrado a 18-25 durante 8 horas, a 2-8 durante 3 días y a 20 durante 1 mes.

REALIZANDO EL ANÁLISIS

1. Realización de electroforesis

2. Procesamiento de electroferograma

2.1. tinte carmesí S.

1.2. Procese el electroferograma utilizando un escáner y un programa de computadora.

4. prueba de timol

Principio del método:

Valor clínico y diagnóstico:

Con ictericia parenquimatosa, ambas pruebas son positivas; con ictericia obstructiva, la prueba de timol es negativa y la prueba de Burshtein es marcadamente positiva.

CONlista de literatura usada

1. Proteínas específicas en el diagnóstico de laboratorio clínico: preguntas y respuestas. - Töpfer G., Toma R., Tsavta B., M., 2004. - 96s

Resumen de la tesis.en medicina sobre el tema Valor diagnóstico de la determinación de la glicoproteína B1 trofoblástica y los productos de peroxidación lipídica para evaluar el estado del sistema fetoplacentario durante la gestosis

MINISTERIO DE SALUD DE LA FEDERACIÓN DE RUSIA

ACADEMIA MÉDICA DE MOSCÚ que lleva el nombre de I.M. SECHENOVA

Como manuscrito UDC 618.3-008.6-07:618.36

ALEXANDROV LEONID SEM^,VIH

VALOR DIAGNÓSTICO DE LA DETERMINACIÓN DE LA GLUCOPROTEÍNA B TROFOBÁSTICA Y DE LOS PRODUCTOS POL EN LA EVALUACIÓN DEL ESTADO DEL SISTEMA FETOPLACENTAL EN GESTOS

14.00.01 - obstetricia y ginecología

Moscú - 1992

El trabajo lleva el nombre de I. M. Sechenov.

Academia de Medicina de Moscú

Supervisor científico: Opositores oficiales:

Doctor en Ciencias Médicas, Profesor N.M. Pobedinsky

Doctor en Ciencias Médicas, Profesor E.A. Chernuja

Doctor en Ciencias Médicas, Profesor I.B. Manukhin

Organización líder: MONIAG Ministerio de Salud de la Federación de Rusia

La defensa se llevará a cabo " "_ 1992.

a las - ■ - en punto en una reunión del Consejo especializado D 074.05.02 de la Academia Médica de Moscú que lleva su nombre. A ELLOS. Sechenov (Moscú, calle B. Pirogovskaya, 2/6).

La disertación se puede encontrar en la biblioteca de la Academia de Medicina de Moscú. A ELLOS. Sechenov (Moscú, Plaza Zubovskaya, 1)

Secretario Científico del Consejo Especializado, Doctor en Ciencias Médicas

SOY. Shelutko

GOSUAD?-: :j la

SHi>i"iviw ä G: g, A

DESCRIPCIÓN GENERAL DEL TRABAJO

Relevancia del problema. A pesar de los importantes avances en la ciencia obstétrica, el problema del embarazo complicado por la gestosis es uno de los más urgentes, ya que la gestosis ocupa uno de los primeros lugares en la estructura de la morbilidad y mortalidad materna y peritanal (Savelyeva G.M., 1991, Repina M. A. , 1991).La incidencia de complicaciones peritoneales, dependiendo de la gravedad de la gestosis, oscila entre el 7,7% y el 44,4% (Karshunina JI.M., Kagenyuk Yu.A., 1984, Sokolsky Ya. P., 1981), y a pesar de Después de los éxitos recientes, no tiene una tendencia constante a la baja. Por tanto, es de gran importancia estudiar la patogénesis de la insuficiencia fetoplacentaria durante la gestosis y desarrollar métodos adecuados para el diagnóstico precoz de los trastornos del feto intrauterino. Desde este punto de vista, el estudio de antígenos placentarios específicos, en particular la glicoproteína B1 trofoblástica (TBG), es de indudable interés teórico y práctico. Dado que la placenta es un órgano específico del período embrionario, los niveles séricos de TBG pueden permitir una evaluación objetiva de los cambios en el estado bioquímico específico que ocurren durante el embarazo. Los datos disponibles sobre la dinámica del contenido de TBG en el proceso estacional no complicado y en la preeclampsia son bastante contradictorios.

En los últimos años, se ha demostrado que la desregulación del proceso de oxidación de lípidos por radicales libres (LPO) desempeña un papel importante en la patogénesis de muchas enfermedades metabólicas endocrinas y afecciones patológicas. Varios trabajos están dedicados al estado del sistema LPO durante la gestosis (Ganina A.A., 1985, Grishchenko V.I. et al., 1986, Kushch I.B., 1986, Lebedenko V.S., 1987), sin embargo, en su mayor parte, el objeto de El estudio fue el suero sanguíneo o la membrana de los eritrocitos, y sólo unos pocos estudios estudiaron el proceso de peroxidación lipídica en los elementos estructurales del trofoblasto. Además, no existen suficientes estudios completos que permitan evaluar el estado del sistema fetoplacentario durante la gestosis desde diferentes ángulos, por lo que es relevante estudiar la relación entre la dinámica de los procesos TBG y LPO con la función hormonal de el complejo fetoplacentario.

Propósito y objetivos del estudio. El propósito de este estudio es mejorar los métodos para diagnosticar el estado del sistema fetoplacentario durante la gestosis. De acuerdo con el objetivo, se plantearon las siguientes tareas:

1. Estudiar el contenido de TBG en el suero sanguíneo en la dinámica del embarazo fisiológico;

2. Identificar la dinámica de los cambios en el nivel de TBG durante el embarazo complicado por gestosis de diversa gravedad, para determinar la influencia de diversas manifestaciones clínicas de gestosis en el nivel de TBG sérico;

3. Determinar las características de los cambios en TBG durante el desarrollo de insuficiencia fetoplacentaria durante la gestosis;

4. Estudiar la influencia de diversas manifestaciones clínicas de la gestosis sobre la función productora de hormonas del complejo fetoplacentario;

5. Identificar las características de la regulación de las reacciones de peroxidación lipídica en la placenta, así como el estado del sistema antioxidante de la sangre durante la gestosis de diversa gravedad, su dependencia de la forma y duración de la gestosis y el desarrollo del feto. insuficiencia placentaria.

Novedad científica. Por primera vez en nuestro país se estudió el contenido de TBG en el suero sanguíneo en la dinámica del embarazo fisiológico de 8 a 42 semanas con un intervalo de dos semanas, se estudió el contenido de TBG en el suero sanguíneo a lo largo del tiempo en puro y formas combinadas de gestosis. La naturaleza de la interacción entre el proceso de peroxidación lipídica en la placenta y la actividad del sistema antioxidante de la sangre durante la gestosis de diversa gravedad, la dependencia de estos procesos de la forma y duración de la gestosis y su condición en la fetoplacentaria. Se revelaron insuficiencias.

Importancia teórica y práctica del trabajo. Un estudio completo del estado del sistema fetoplacentario durante la gestosis de diversa gravedad nos permite ampliar las ideas modernas sobre la patogénesis del desarrollo de la insuficiencia fetoplacentaria durante la gestosis, evaluar la importancia diagnóstica y pronóstica de la determinación compleja de TBG. estriol, progesterona y cortisol en la sangre de mujeres embarazadas con gestosis, fundamentan científicamente el uso de terapia antioxidante para la gestosis.

Disposiciones básicas presentadas para la defensa.

1. La complicación del embarazo con gestosis provoca cambios patológicos en el estado del fetoplacentario.

homeostasis, expresada en la alteración de la síntesis de TBG, la función hormonal de la placenta y la relación entre los sistemas pro y antioxidantes.

2. Durante el embarazo fisiológico, el contenido de TBG en el suero sanguíneo aumenta progresivamente hasta las 36 semanas de embarazo, después de lo cual el nivel disminuye hacia la fecha del parto. El desarrollo de gestosis se acompaña de una disminución en el nivel de TBG y la naturaleza de su dinámica. Los trastornos identificados dependen directamente de la gravedad de la gestosis y sus características clínicas. El desarrollo de insuficiencia fetoplacentaria también se acompaña de una disminución en el nivel sérico de TBG, que puede utilizarse en un diagnóstico integral del estado del sistema fetoplacentario durante la gestosis.

3. La gestosis conduce a una alteración de la función hormonal del sistema fetoplacentario, cuyo grado y naturaleza depende de las características clínicas de la enfermedad y refleja las etapas de los trastornos compensatorios y adaptativos en el sistema madre-placenta-feto.

4. El desarrollo de gestosis se acompaña de un desequilibrio de los sistemas pro y antioxidantes, cuya naturaleza depende de las manifestaciones clínicas de la enfermedad. Una forma leve de gestosis se caracteriza por la activación de reacciones de peroxidación lipídica en la placenta y un aumento compensatorio de la actividad antioxidante de la sangre; en formas moderadas y graves de la enfermedad, en el contexto de una intensificación más pronunciada de la LPO en la placenta.

Aprobación de resultados clínicos del trabajo. El trabajo se llevó a cabo en el Departamento de Obstetricia y Ginecología de la Primera Facultad de Medicina de la Academia Médica de Moscú que lleva su nombre. A ELLOS. Sechenov. Se publicó un trabajo impreso sobre el tema de la disertación y dos fueron aceptados para publicación. Los artículos reflejan las principales disposiciones del trabajo de tesis. La aprobación de la disertación tuvo lugar el 13 de mayo de 1992 en una reunión de empleados del Departamento de Obstetricia y Ginecología de la Primera Facultad de Medicina.

Alcance y estructura del trabajo. La disertación consta de una introducción, una revisión de la literatura, una descripción general de la propia investigación, una discusión de los resultados obtenidos, conclusiones, recomendaciones prácticas y una lista de referencias. La obra se presenta en 109 páginas de texto mecanografiado, ilustradas con 13 dibujos y 50 tablas. El índice literario contiene 169 fuentes nacionales y 105 extranjeras.

Características clínicas generales de los pacientes examinados. Para cumplir con las tareas asignadas, este trabajo realizó: examen clínico, análisis de datos de anamnesis, curso y manejo del embarazo y parto y estado de los recién nacidos en 318 mujeres. La selección de las gestantes se realizó mediante muestreo aleatorio. Todas las mujeres examinadas se dividieron en dos grupos principales: el grupo de control estaba formado por 198 mujeres con un embarazo sin complicaciones, el grupo principal, por 120 mujeres cuyo embarazo se complicó con gestosis de diversa gravedad.

Características del grupo de control. 198 pacientes con edades comprendidas entre 17 y 40 años. El examen se realizó en períodos de 8 a 42 semanas con un intervalo de dos semanas. El grupo de control no incluyó a mujeres embarazadas con “alto riesgo” de gestosis por patología somática concomitante y alto índice infeccioso. El historial médico más común de las mujeres examinadas en el grupo de control fue: varicela - 14,64%, sarampión - 17,11%, influenza - 26,26%, ARVI - 34,84%.

El parto por vía natural ocurrió en 178 mujeres, de las cuales 170 (89,9%) fueron en presentación cefálica y 8 en presentación podálica. 20 mujeres embarazadas nacieron por cesárea.

Todos los niños nacieron con una puntuación de Apgar en el primer minuto de vida: 7-8 puntos, en el quinto minuto: 8-9 puntos. El peso de los recién nacidos osciló entre 3.000 y 4.500 g (promedio 3.650+74,30 g). El período posparto en mujeres posparto y el período neonatal temprano en recién nacidos transcurrieron sin complicaciones.

Características del grupo principal. Principal

El grupo también incluyó a 120 pacientes cuyo embarazo se complicó con gestosis de diversa gravedad. La gravedad de la enfermedad se evaluó mediante un sistema de puntos (Directrices del Ministerio de Salud de la URSS, 1987). Según la gravedad de la gestosis, las mujeres del grupo principal se dividieron en tres subgrupos: el subgrupo I incluía 42 mujeres embarazadas con gestosis leve, el II incluía 43 mujeres embarazadas con gestosis moderada, el III - 35 mujeres con

Forma grave de gestosis. El examen se realizó a las 23-24, 31-32, 35-36, 37-38, 39-40 semanas. Todos los sujetos tenían edades comprendidas entre 16 y 41 años. De las enfermedades infecciosas sufridas, las más frecuentes en el grupo principal fueron: sarampión - 22,5%, gripe - 30,8%, escarlatina - 20,8%, amigdalitis crónica - 16,7%. En general, se observó un índice de infección más alto en el grupo principal. En 62 (51?6%) mujeres embarazadas. La gestosis se desarrolló en el contexto de una patología extragenital: distonía vegetativa-vascular de tipo hipertensivo - en 32 (26,7%), hipertensión de grado I-II - en 9 (7,5%), pielonefritis crónica - en 19 (15,8%), reumacorditis: en 2 (1,7%). Con mayor frecuencia, en el 77,14%, se observó patología extragenital en el subgrupo III. El curso de este embarazo, además de la gestosis, se complicó por la amenaza de aborto espontáneo en 16 mujeres embarazadas (13,3%), la amenaza de parto prematuro - 6 (5%), anemia - en 30 (%%), infecciones respiratorias agudas - en 12 (105) En mujeres embarazadas del grupo principal, se detectó vasoespasmo de las arterias de la retina: en el subgrupo 1 - en 2 mujeres (4,76%), en el subgrupo II - en 7 (16,28%), en el subgrupo III - en 17 pacientes (48%.%).Para determinar el estado de la función formadora de proteínas del hígado y el metabolismo de las grasas, se determinó el contenido de proteínas totales y colesterol en el suero sanguíneo de la madre (Tabla 1). Los datos presentados indican un contenido menor de proteínas totales y un mayor contenido de colesterol en la sangre de mujeres embarazadas con formas graves de gestosis.

Entre los niños nacidos a término, se diagnosticó hipoxia fetal intrauterina crónica en 21 recién nacidos, desnutrición intrauterina en 11,

inmadurez morfofuncional: en 11. Con mayor frecuencia, en el 57%, se observó el desarrollo de insuficiencia fetoplacentaria en mujeres del subgrupo III.

El parto por vía natural se realizó en 91 puérperas, de las cuales 88 fueron en presentación cefálica, 4 en presentación de nalgas, la operación con aplicación de fórceps obstétricos se realizó en dos casos: por inicio agudo de hipoxia fetal y por a una forma grave de nefropatía. 28 mujeres nacieron por vía abdominal. El análisis muestra un aumento en la frecuencia de parto abdominal en los subgrupos II y III. Aumento de frecuencia

El parto abdominal se asoció principalmente con la ineficacia de la terapia compleja para la gestosis, 6,98% y 37,14%, respectivamente. El peso medio de los recién nacidos, respectivamente, por subgrupos fue: 3515+-94,8 g, 3472+87,19 gy 3042+-79,15 g.

tabla 1

Grupo principal

Grupo control I subgr. II subgr. III subgr.

Proteína total 65,26+-0,54 64,75+-2,01 61,50+-1,16 57,21+-1,28*

Colesterol 7,50+-0,54 8,14+-0,49 8,60+-0,24* 9,26+-0,62*

*p 0,05 en comparación con el grupo control.

Contenido de TBG en la dinámica del embarazo fisiológico. Se examinó a un total de 198 mujeres embarazadas con embarazos sin complicaciones. A cada paciente se le tomaron muestras de sangre de 1 a 3 veces, con un intervalo de 2 semanas, en períodos de 8 a 42 semanas. Los resultados se presentan en la fig. N° 1. Hubo un aumento progresivo en la concentración de TBG hasta las 36 semanas de embarazo, seguido de una disminución a las 42 semanas. El contenido de TBG a las 7-8 semanas fue de 36 ± 4,10 µg/ml. Además, hasta las 26 semanas, el nivel de TBG aumentó bruscamente a 135,68+-9,09 μg/ml. El aumento de dos semanas osciló entre el 10,0 y el 33,4%. No hubo diferencia estadísticamente significativa entre cada período posterior (p>0,05). A las 27-28 y 31-32 semanas, se observó una disminución en la concentración sérica de TBG, respectivamente, del 8,2% (p>0,05) y del 3,9% (p>0,05). Más contenido de proteínas

aumentó progresivamente hasta 157,06+-11,74 μg/ml, alcanzando su máximo a las 36 semanas de embarazo. La tasa de aumento de dos semanas en la concentración de TBG se redujo notablemente y ascendió al 4,7-6,2% en el tercer trimestre del embarazo.

Después de 36 semanas, el nivel de TBG disminuyó ligeramente a las 40 semanas hasta 137,06+-10,93 μg/ml (en un 14% (p>0,05)). Luego, a las 42 semanas, hubo una fuerte caída en los niveles de proteína a 99,59+-0,59 mcg/ml (p<0.05).

En el análisis individual, se observa una variabilidad significativa en el contenido de TBG en el suero sanguíneo, por lo que, en un período de 7 a 8 semanas, sus fluctuaciones oscilaron entre 15,60 y 54,60 μg/ml, y en un período de 35 a 36 semanas - 112,42-37,50 μg/ml, por lo que la determinación de TBG debe realizarse en dinámica.

Al estudiar la correlación entre los niveles séricos de TBG y el peso fetal al nacer, se observó una correlación moderada = 0,583.

Los resultados obtenidos nos permiten concluir que es posible utilizar la determinación de la concentración sérica de TBH para controlar el curso del proceso gestacional.

Contenido de TBG en diversas manifestaciones clínicas de la gestosis. Con base en los resultados obtenidos (Fig. 2), se estableció que el contenido de TBG durante el embarazo complicado por gestosis leve no difiere significativamente de su nivel durante el embarazo normal. La concentración de TBH difirió significativamente del grupo de control sólo a las 23-24 semanas y ascendió a 89,5+-63 μg/ml (p<0.05). Затем уровень белка прогрессивно нарастал до 36 недель беременности, достигая 160.43+-14.92 (в среднем на 57.8% (р<0.05)), после чего происходило его снижение к сроку родов до 137.38+-41.42 мкг/мл (на 41.42% (р<0.05)). Более выраженное снижение уровня ТБГ в исследуемые сроки наблюдалось во II подгруппе. В 23-24 недели уровень его в сыворотке крови составил 74.0+-9.98 мкг/мл, что на 14.3% ниже, чем в I подгруппе (р<0.05), и на 36.32% чем в контрольной группе (р<0.05). Далее концентрация ТБГ увеличивалась к 36 неделям до 137.33+-30.03 мкг/мл, достигая своего «пика» (р<0.05), формируя своеобразное «плато». В III подгруппе концентрация белка в сроке 23-24 недели составила 22.75+-0.9 мкг/мл и была в 4 раза ниже, чем в I подгруппе, и в 5.1 раза ниже, чем в контрольной группе. Далее уровень ТБГ нарастал, составив в 35-36 недель 114.50+-37.21 мкг/мл,

Grado leve -f-

Grado medio

Grado severo -X-

Forma pura Forma combinada

es decir, 4,2 veces. Hasta las 37-38 semanas, el nivel de proteína se mantuvo prácticamente sin cambios - 112,75 - -11,97 mcg/ml (p>0,05), después de lo cual disminuyó al momento del parto a 88,17 + -7,17 mcg/ml (p<0.05). На рис.2 приведены данные исследования, содержания ТБГ при «чистой» и сочетанной форме гестоза.

El análisis de los resultados indica que las formas "puras" y mixtas de gestosis se caracterizan, en general, por una menor secreción de TBG en comparación con el embarazo fisiológico. El nivel más bajo de TBG se observó en la forma combinada de gestosis.

En el grupo de mujeres que dieron a luz a fetos a término con signos de hipotrofia intrauterina, el nivel de TBG se redujo suficientemente en comparación con el grupo de control (p<0.05) и составил 86.25+-26.87 мкг/мл. Развитие хронической внутриутробной гипоксии характеризовалось снижением содержания ТБГ до 100.14+-17.52 мкг/мл (р<0.05). Уровень ТБГ в сыворотке крови женщин, родивших детей с признаками морфофункциональной незрелости составил 106.70»-12.56 мкг/мл. Из доношенных новорожденных основной группы 28 родились в состоянии средней тяжести и 7 - в тяжелом состоянии. Уровень ТБГ в этих группах составил соответственно 130.67+-12.99 мкг/мл (р>0,05) y 92,67+-7,51 µg/ml (p<0.05).

Al analizar la dependencia de la concentración de TBG de la duración de la gestosis, se observó que el valor de TBG se redujo drásticamente en el grupo de mujeres embarazadas con inicio temprano de gestosis (a las 23-24 semanas) en un 38,06% y fue significativamente diferente (p.<0.05) от содержания его в крови беременных с поздним началом гестоза (в 36-40 нед.).

En el grupo principal, no hubo correlación entre el peso fetal al nacer y el nivel de TBG en el suero sanguíneo (r = 0,067). Los resultados obtenidos sugieren que una disminución en el contenido de TBG durante la gestosis sirve como un signo diagnóstico desfavorable y permite utilizar su determinación en el suero sanguíneo materno como uno de los métodos en el diagnóstico complejo del estado del sistema fetoplacentario. y predecir el resultado del parto y del feto.

La influencia de las manifestaciones clínicas de la gestosis sobre el contenido de hormonas del complejo fetoplacentario. Los resultados de un análisis de la dinámica del contenido de estriol, progesterona y cortisol en la sangre de la madre mostraron que a medida que avanza el desarrollo

Durante el proceso gestacional fisiológico se produce un aumento progresivo del contenido de estas hormonas. Por tanto, el contenido de estriol se reduce a partir de las 23-24 semanas. al final del embarazo aumentó de 46,21+-7,23 nmol/l a 121,76+-13,07 nmol/l (2,63 veces (p<0.05)), прогестерона с 87.31+-4.25 нмоль/л до 197.91+-20.26 нмоль/л (в 2.27 раза (р<0.05)), кортизола с 821.44+-81.61 нмоль/л до 1081.08+-89.05 нмоль/л (в 1.32 раза (р<0.05)) (рис.3,4,5).

Durante el embarazo complicado por gestosis leve, se observó una ligera disminución en el contenido de estriol y progesterona en la sangre de la madre en comparación con el grupo de control. Sin embargo, cabe señalar que, a diferencia del grupo de control, la concentración de progesterona disminuyó después de 38 semanas. embarazo, así como la estabilización del aumento de estriol al mismo tiempo (Fig. 3, 4). El contenido de cortisol en el subgrupo I hasta las 36 semanas prácticamente no difirió de la norma, pero a las 37-38 y 39-40 semanas disminuyó (Fig. 5).

En el subgrupo II, en el contexto de una disminución más pronunciada en el contenido de estriol, se observó un aumento en el nivel de progesterona y cortisol en relación con el grupo de control, sin embargo, estuvo acompañado de una caída en su nivel en la sangre de la madre después de 38 semanas de embarazo (Cuadros Nos. 3,4,5).

El desarrollo de una forma grave de gestosis se caracterizó por una disminución pronunciada de la concentración de estriol y progesterona en todos los períodos estudiados (Fig. 3, 4). Los niveles de cortisol estuvieron ligeramente por debajo de lo normal hasta la semana 36 de embarazo, tras lo cual se observó una fuerte caída en su concentración (fig. 5).

Un nivel elevado de cortisol en la sangre de las mujeres del subgrupo II probablemente puede indicar una tensión en los mecanismos de adaptación destinados a mantener la homeostasis en el sistema. La disminución del nivel de esta hormona en el subgrupo III probablemente esté asociada con el agotamiento de la función de la corteza suprarrenal tanto de la madre como, principalmente, del feto, lo que reduce significativamente sus capacidades de adaptación en el período intra y neonatal. Una prueba convincente de esto es la disminución identificada en el nivel de cortisol en la sangre de las madres que dieron a luz a niños en un estado moderado y grave. La concentración de cortisol fue de 961,04 ± 59,85 nmol/l y 912,77 ± 34,25 nmol/l, respectivamente (Tabla 2).

La insuficiencia fetoplacentaria se caracterizó por niveles bajos de hormonas (Tabla No. 2). El análisis de los datos obtenidos de un estudio comparativo del estado hormonal de mujeres embarazadas con formas de gestosis "puras" y combinadas (Fig. 3, 4, 5) mostró que las concentraciones más bajas de hormonas se observaron en la forma combinada de gestosis durante el desarrollo de la enfermedad en el contexto de pielonefritis crónica e hipertensión de grado 1 -P (Tabla No. 3). Los datos obtenidos nos permiten concluir que la gestosis combinada tiene un efecto más desfavorable sobre la función del sistema fetoplacentario.

La duración de la enfermedad tuvo un efecto pronunciado sobre los niveles sanguíneos de las hormonas estudiadas. A medida que aumentó la duración de la gestosis, disminuyó el contenido de todas las hormonas séricas (Tabla No. 4). Por tanto, la duración de la gestosis es uno de los principales criterios que determina el grado de su gravedad.

En consecuencia, la complicación del embarazo con gestosis conduce al desarrollo de un desequilibrio hormonal en el sistema madre-placenta-feto, cuya gravedad depende de la gravedad de la enfermedad.

Grado leve -f-

Grado moderado ■ -□-Grado severo --x- -

Forma pura Forma combinada

Grado leve -f-

Grado medio □ ■

Grado severo x-

Forma pura de Ar-

forma combinada

1250 1200 -1150 1100 N 1050 1000 950 900 -850 -800 ? 50

Grado leve -f-

Grado medio

Grado severo -x-

Forma pura Forma combinada

Tabla 2

Embarazo fisiológico crónico. hipoxia intrauterina hipotrofia fetal intrauterina inmadurez morfofuncional

estriol 121,76+13,07 66,90+7,68* 77,11+13,47* 67,15+9,56*

progesterona 197,91+20,26 151,94+27,79 129,29+16,49* 144,85+19,34

cortisol 1081,08+89,05 916,12+34,25 923,12+78,53 1120,31+102,11

R<0.05 при сравнении с контрольной группой

Tabla 3

embarazo sin complicaciones II 121,76+13,07 197,91+20,26 1081,08+89,05

gestosis en el contexto de CIV del tipo hipertensivo 14 79,02+7,64* 157,54+13,39 914,36+54,10

gestosis por hipertensión grado 1-11 b 71,68+13,95* 132,51+14,21* 1239,10+160,60

gestosis por pielonefritis crónica II 62,84+6,62* 104,46+11,31* 965,09+53,06

R<0.05 при сравнении с контрольной группой

Tabla 4

p estriol nmol/l progesterona nmol/l cortisol nmol/l

20-24 semanas 15 68,84+-8,14 133,35+-19,69 904,42+-80,72

25-30 semanas 14 71,78+-9,45 148,35+-18,92 953,45+-60,14

30-35 semanas 15 76,39+-8,80 196,04+-36,87 962,16+-65,37

36-40 semanas 12 98,57+-13,05 229,16+-39,59 988,57+-61,65

Р1-Р2>0.05 р|-р2>0.05 р!-р2>0.05 Р2-Рз>0.05 р1-рз<0.05 р]-рз>0,05 Р|-Р3>0,05 Р2-Рз>0,05 р]-р4>0,05 Р1~Р4<0.05 РГР4<0.05 Р2-Р4<0.05

Cambios en los procesos de peroxidación en la placenta y actividad antioxidante de la sangre. Se examinaron 40 mujeres embarazadas en un período de 39 a 40 semanas. De ellas, II tuvieron un embarazo sin complicaciones (grupo control) y 29 con preeclampsia de diversa gravedad (grupo principal). Todas las mujeres del grupo principal se dividieron en dos subgrupos: el grupo I incluyó a 13 mujeres embarazadas con gestosis leve, el grupo II incluyó a 16 con formas moderadas y graves de gestosis. El estado de los procesos de peroxidación lipídica en la placenta se juzgó por el contenido de malondialdehído (MDA) en el tejido placentario. Como indicador que caracteriza el estado del sistema antioxidante en el suero sanguíneo, se determinó la relación ceruloplasmina/transferina.

En el grupo de control, el contenido de MDA en la placenta fue de 0,520 ± 0,30 nmol/mg de proteína. En el grupo de mujeres embarazadas con gestosis, el nivel de contenido de MDA en la placenta aumentó a medida que aumentaba la gravedad de la gestosis. En el subgrupo I, la concentración de MDA en el homogeneizado de placenta fue 0,564+0,052 nmol/mg de proteína (p>0,05), en el subgrupo II 0,648+-0,38 nmol/mg de proteína (p<0.05). Полученные результаты свидетельствуют об активации процессов ПОЛ непосредственно

en el tejido placentario durante la gestosis. Además, el proceso de activación de la LPO en la placenta a medida que aumenta la gravedad de la gestosis se acompaña de un aumento del nivel de colesterol en sangre y una disminución progresiva de la concentración de estriol, que tiene actividad antioxidante.

Junto con un aumento en la intensidad de la peroxidación lipídica en la placenta, se detectaron cambios en el sistema antioxidante de la sangre. En el grupo de control, la amplitud de la señal ZPR de ceruloplasmina promedió 3,57+-0,37 cm. El desarrollo de gestosis leve (subgrupo I) estuvo acompañado de un aumento en la amplitud de la señal a 5,00+-0,27 cm (en un 29%) ( pag<0.05). Во II подгруппе содержание церулоплазмина в сыворотке крови снижалось, о чем свидетельствует низкая средняя величина амплитуды ЗПР-сигнала - 2.43+-0.46 см (на 61.4%) (р<0.05). Средняя величина спектра амплитуды ЗПР в контрольной группе для трансферина составила 5.01+-0.61 см. В I подгруппе было отмечено повышенное содержание трансферина, что проявлялось в увеличении средней величины амплитуды ЗПР-спектра до 7.00+-0.87 см (на 29%) относительно контрольной группы (р>0,05). A medida que aumentaba la gravedad de la gestosis, disminuía el contenido de transferrina en sangre. En el subgrupo II, la amplitud promedio del espectro ZPR fue de 4,08+-0,79 (42% menos que en el subgrupo I) (p<0.05). Соотношение церулоплазмин/трансферин для контрольной группы составило 0.71+-0.27. При гестозе легкой степени (I подгруппа) наблюдалось повышение этого соотношения до 0.95+-0.16 (р>0,05), lo que indica activación del sistema antioxidante sanguíneo. En el subgrupo II, esta relación se redujo - 0,60+-0,03 (p<0.05), причем происходило, в основном, за счет уменьшения содержания церулоплазмина. Интенсификация процессов ПОЛ в плаценте при легкой степени заболевания сопровождается активацией антиоксидантной системы крови, при средней и тяжелой - снижением ее активности, что неблагоприятно сказывается на состоянии клеточных мембран структурных элементов трофобласта и хориона.

Por tanto, una de las principales razones del desarrollo de insuficiencia placentaria es un desequilibrio de los sistemas pro y antioxidantes. Por lo tanto, el desarrollo de hipoxia fetal intrauterina crónica e hipotrofia intrauterina en los casos observados estuvo acompañado de la activación de los procesos de peroxidación lipídica en la placenta - contenido de MDA, respectivamente, 0,629 + 0,033 (p<0.05) и 0.537+-0.093 нмоль/мг белка (р>0,05). En

hipoxia fetal intrauterina crónica, la relación ceruloplasmina/transferrina fue ligeramente superior al valor normal: 0,86+-0,10 (p>0,05). El desarrollo de hipotrofia intrauterina estuvo acompañado de una disminución de la actividad antioxidante de la sangre: 0,61+-0,08 (p>0,05).

En una evaluación comparativa de los datos obtenidos para las formas "pura" y combinada de gestosis, se encontró que las formas combinadas se caracterizan por un mayor contenido de MDA en la placenta y una menor relación ceruloplasmina/transferina, respectivamente 0,608+-0,045. nmol/mg de proteína, 0,69+-0,15 (p>0,05) y 0,58+-0,033 nmol/mg de proteína, 0,98+-0,16 (p>0,05). Esto confirma datos publicados anteriormente sobre un efecto patológico más pronunciado de las formas combinadas de gestosis sobre el estado del complejo fetoplacentario.

Se reveló una relación entre la duración de la enfermedad y el grado de actividad de los sistemas pro y antioxidante. Cuando aparecieron los primeros síntomas de gestosis entre las 36 y 40 semanas, el aumento en el contenido de MDA en la placenta fue insignificante: 0,570+-0,044 nmol/mg de proteína y estuvo acompañado de un aumento en la actividad de los sistemas sanguíneos antioxidantes (relación ceruloplasmina/transferrina). - 1,098+-0,24). Un aumento en la duración de la enfermedad estuvo acompañado de una intensificación más pronunciada de los procesos de peroxidación lipídica y un agotamiento de la actividad antioxidante en la sangre. Así, al inicio de la gestosis a las 20-24 semanas, el contenido de MDA en la placenta era 0,635+-0,05 nmol/mg de proteína (p<0.05). Следовательно, длительность течения гестоза является одним из самых важных показателей степени его тяжести. Таким образом, развитие гестоза сопровождается интенсификацией реакций ПОЛ в плаценте и снижение антиоксидантной активности крови при средней и тяжелой форме гестоза. Нарушение во взаимодействии про- и антиоксидантных систем приводит к нарушению функций клеточных мембран структурных элементов трофобласта, нарушение синтеза гормонов и белков, способствуя развитию фето-плацентарной недостаточности.

1. La aparición de gestosis durante el embarazo provoca un cambio en la homeostasis fetoplacentaria, expresado en una alteración de la síntesis de TBG, la función hormonal de la placenta y la relación entre los sistemas pro y antioxidante.

2. Durante el embarazo fisiológico, el contenido de TBG en el suero sanguíneo aumenta progresivamente hasta las 36 semanas de embarazo en 4,28 veces, después de lo cual su nivel disminuye en el momento del parto; la tasa de aumento de la concentración de TBG en dos semanas en el primer y segundo trimestre es del 10,0 al 33,4%, en el tercer trimestre del 4,7 al 6,2%.

3. La aparición de gestosis durante el embarazo se acompaña de una disminución del nivel de TBG sérico y una alteración de la naturaleza de su dinámica. Las violaciones identificadas dependen directamente de la gravedad de la gestosis. El desarrollo de gestosis en el contexto de una patología extragenital se caracteriza por un nivel de TBG más bajo que en la forma "pura".

4. El desarrollo de insuficiencia fetoplacentaria durante la gestosis se acompaña de una disminución del contenido de TBG en el suero sanguíneo entre un 22,7 y un 30,06% en comparación con la norma, lo que permite utilizar la determinación del nivel de TBG sérico en el diagnóstico complejo del estado de insuficiencia fetoplacentaria durante la gestosis.

5. El desarrollo de gestosis conduce a una disminución en la producción de estriol y progesterona por parte del complejo fetoplacentario, cuya gravedad es directamente proporcional a la gravedad de la enfermedad. Los cambios más pronunciados en el estado hormonal son característicos de la gestosis grave y sus formas combinadas.

6. Con una gravedad moderada de la gestosis, se observa un aumento en los niveles de cortisol en comparación con la norma con un "pico" a las 36 semanas de embarazo. En las formas graves, con el tiempo se produce una disminución de los niveles de cortisol, lo que se explica por el agotamiento de la funcionalidad del complejo fetoplacentario.

7. Una forma leve de gestosis se caracteriza por la activación de LPO en la placenta, mientras que el contenido de MDA en el homogeneizado de placenta aumenta en un 8,46%; y un aumento compensatorio de la actividad antioxidante de la sangre (la relación ceruloplasmina/transferina aumenta un 33,8%).

8. En las formas moderadas y graves de la enfermedad, en el contexto de una intensificación más pronunciada de la LPO y un aumento del contenido de MDA en la placenta en un 24,6%, se observa una disminución de la actividad antioxidante de la sangre, como lo demuestra una disminución en la relación ceruloplasmina/transferrina en un 15,5%. La aparición de gestosis en el contexto de una patología extragenital se caracteriza por una mayor intensidad de peroxidación lipídica en la placenta y una baja actividad antioxidante de la sangre que su forma "pura".

9. La insuficiencia de la función del complejo fetoplacentario durante la gestosis se acompaña de un aumento en el contenido de productos LPO en la placenta en un 3,27-20,96%, lo que indica un cierto papel de la activación de la LPO en la patogénesis de la insuficiencia fetoplacentaria. .

1. La determinación del nivel sérico de TBG puede servir como prueba de diagnóstico adicional para determinar el contenido de TBG durante un embarazo a término en un 20-30%, lo que puede indicar ■ el desarrollo de insuficiencia fetoplacentaria y un resultado desfavorable del parto. para el feto.

2. La determinación del contenido de malondialdehído en la placenta, cuyo nivel aumenta casi un 20% con el desarrollo de insuficiencia placentaria, se puede utilizar para el diagnóstico retrospectivo del estado de la placenta durante la gestosis.

3. Para determinar el estado del sistema fetoplacentario durante la gestosis, es informativo determinar el estriol, la progesterona y el cortisol en el suero sanguíneo de la madre. Una disminución sincrónica de su nivel en el suero sanguíneo indica un agotamiento de la función y el desarrollo de una insuficiencia del sistema fetoplacentario.

No. 7, págs. 18-22 (en coautoría con Pobedinsky N.M., Razmanikhina N.I., Vengerov Yu.Yu., Starovoitova T.A.)

3. Cambios en algunos parámetros bioquímicos y biofísicos durante el embarazo complicado por gestosis (coautores: Pobedinsky N.M., Razmanikhina N.I., Ostrakhovich E.A., Soodaeva S.K.) - aceptado para publicación en la revista "Obstetricia y Ginecología" "

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INSTITUCIÓN EDUCATIVA DEL PRESUPUESTO DEL ESTADO FEDERAL

EDUCACIÓN PROFESIONAL SUPERIOR

"ACADEMIA AGRÍCOLA DEL ESTADO DE IZHEVSK"

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA

Departamento de Química

Prueba

en bioquímica animal

Tema: "Proteína sérica total. Métodos de determinación, importancia clínica y diagnóstica, características de las especies"

Completado por: Kurochkina V.S.

Estudiante de 3er año de la Facultad de Educación

Especialidad: "Veterinaria"

Comprobado: k.b. Sc., Profesor Asociado

Berestov D. S.

Ízhevsk 2013

Introducción

Solicitud

Introducción

En las células vivas, se produce la síntesis de muchas moléculas orgánicas, entre las cuales el papel principal lo desempeñan las macromoléculas poliméricas: proteínas, ácidos nucleicos y polisacáridos. Las proteínas juegan un papel especial en la vida de los organismos vivos. De padres a hijos se transmite información genética sobre la estructura y funciones específicas de todas las proteínas de un organismo determinado. Las proteínas sintetizadas realizan funciones estructurales, protectoras y de transporte, participan en la transmisión de señales de una célula a otra y de la misma forma implementan información hereditaria.

Ardillas- compuestos orgánicos que contienen nitrógeno de alto peso molecular, compuestos por más de 20 tipos de alfa aminoácidos. El límite convencional entre polipéptidos grandes y proteínas es el peso molecular de 8000-10000. Las proteínas plasmáticas se sintetizan principalmente en el hígado, las células plasmáticas, los ganglios linfáticos, el bazo y la médula ósea.

1. Proteína total sérica

Las proteínas séricas son un grupo bastante grande de proteínas que difieren en estructura, propiedades fisicoquímicas y funciones. Su cantidad total se determina mediante un refractómetro o el método de Biuret y los componentes individuales mediante electroforesis. Dependiendo del método de distribución, se pueden obtener de 5 a 100 fracciones de proteínas. La electroforesis sobre papel en suero sanguíneo determina 4-5 fracciones: albúmina, alfa (a veces alfa-1 y alfa-2), beta y gamma globulinas, y mediante electroforesis en geles de agar, almidón y poliacrilamida, muchas más (hasta 30).

La cantidad de proteína total y la proporción entre fracciones individuales en el suero sanguíneo de animales de diferentes especies varía dentro de ciertos límites.

En los animales jóvenes, el contenido total de proteínas es menor que en los adultos: en terneros de 1 a 10 días - 56-70 g/l, lechones recién nacidos - 45-50, corderos - 46-54 g/l, ver Apéndice (Tabla 1). ).

El plasma sanguíneo animal es un líquido con una densidad de 1,02 a 1,06. Se observa un aumento de la densidad sanguínea cuando el cuerpo está deshidratado. El residuo seco del plasma representa menos del 10% y el resto es agua. La mayor parte del residuo seco está formado por proteínas, cuya concentración total en plasma es de 60 a 80 g/l. La suma de las concentraciones de albúminas y globulinas es la concentración de proteínas plasmáticas totales.

Proteina total Es un polímero orgánico formado por aminoácidos. Varias proteínas participan en todas las reacciones bioquímicas de nuestro organismo como catalizadores, transportan diversas sustancias y fármacos, participan en la defensa inmunológica, etc.

La concentración total de proteínas que se encuentran en el suero sanguíneo está determinada por el concepto de "proteína total".

Proteina total-- el componente más importante del metabolismo de las proteínas en el cuerpo, es también la concentración total de albúmina y globulinas que se encuentran en el suero sanguíneo.

En el organismo, la proteína total realiza las siguientes funciones:

Participa en la coagulación de la sangre;

Mantiene un pH sanguíneo constante;

(transferencia de grasas, bilirrubina, hormonas esteroides a tejidos y órganos) función de transporte;

Participa en reacciones inmunes y muchas otras funciones;

Son una reserva de aminoácidos;

Realizan una función reguladora en el organismo, ya que forman parte de hormonas y enzimas.

Cuando el cuerpo está deshidratado, aumenta la concentración de proteínas plasmáticas totales. Una disminución en la concentración de proteínas plasmáticas totales puede ser consecuencia de una variedad de razones: bajo contenido de proteínas en la dieta, enfermedad renal, enfermedad hepática, en la que las proteínas se pierden en la orina, alteración de la absorción de nutrientes en el tubo digestivo.

Clasificación:

Simple (proteínas) (contiene solo aminoácidos)

Complejos (proteínas) (aminoácidos y componentes no aminoácidos (hemo, derivados vitamínicos, lípidos o carbohidratos)

Fibrilares (componentes de muchos tejidos densos)

Globular (albúmina (4-5%), globulinas (2-3%), fibrinógeno (0,2-0,4%)

2. Métodos de determinación, importancia clínica y diagnóstica, características específicas.

Métodos para determinar la proteína total en suero sanguíneo:

1. Métrica de nitrógeno;

2. Determinación del peso específico del suero;

3. Gravimétrico (gravimétrico), cuando las proteínas de la sangre se precipitan, se secan hasta peso constante y se pesan en una balanza analítica;

4. Refractométrico;

5. Colorimétrico;

6. Neflométrica;

7. Polarimétrico;

8. Espectrométrico;

1. Refractómetro IRF - 454 B2M

destinado a determinar proteínas en suero sanguíneo, líquido cefalorraquídeo, controlar las concentraciones de fármacos y medir la densidad de la orina. proteína total sangre animal

2. Cobas integra - Proteína Total Gen.2

Principio de prueba: El cobre bivalente reacciona en una solución alcalina con enlaces peptídicos de proteínas para formar el característico complejo de biuret de color púrpura.

3. Determinación de fracciones proteicas del suero sanguíneo mediante electroforesis sobre película de acetato de celulosa.

Principios del método.

Muestras analizadas

Realización de análisis

1. Realización de electroforesis

2. Procesamiento de electroferograma

2.1. tinte carmesí S.

1.2. Procese el electroferograma utilizando un escáner y un programa de computadora.

4. Prueba de timol

Principio del método

Valor clínico y diagnóstico.:

Con ictericia parenquimatosa, ambas pruebas son positivas; con ictericia obstructiva, la prueba de timol es negativa y la prueba de Burshtein es marcadamente positiva.

Para determinar la proteína total en el suero sanguíneo, se extrae sangre venosa del animal en un tubo de ensayo especial con un activador de la coagulación, consulte el Apéndice (Tabla 2). Antes de donar sangre, el animal se mantiene en ayunas durante 8 horas. La sangre se dona antes de tomar medicamentos que puedan afectar los resultados del estudio. La composición cualitativa de las proteínas del plasma sanguíneo es muy diversa. La proteína total se divide en fracciones separadas mediante electroforesis, que se basa en la separación de mezclas de proteínas en función de diferentes masas y la carga específica de una proteína. Durante la separación electroforética, dependiendo del portador, la cantidad de fracciones proteicas de la proteína total no es la misma. Se obtiene un número menor de fracciones mediante electroforesis sobre papel, 5 fracciones, mientras que con electroforesis sobre gel de agar o gel de poliacrilamida, el número de fracciones de proteínas puede ser significativamente mayor, hasta 20 fracciones. Las principales facciones incluyen albúminas y globulinas.

Albúmina Se sintetizan en el hígado y son proteínas simples que contienen hasta 6 residuos de aminoácidos. Son muy solubles en agua. El valor normalizado es 56,5 - 66,8 (la albúmina en el suero sanguíneo representa aproximadamente el 60% de la proteína total. Las albúminas se sintetizan en el hígado (aproximadamente 15 g / día), su vida media es de aproximadamente 17 días. La presión oncótica de El plasma se debe en un 65-80% a la albúmina. Las albúminas desempeñan una función importante en el transporte de muchas sustancias biológicamente activas, en particular las hormonas. Pueden unirse al colesterol y la bilirrubina. Una parte importante del calcio en la sangre también está asociada a la albúmina. La albúmina puede unirse con varios fármacos.

Función de albúmina:

Mantenimiento de la presión osmótica coloide plasmática:

Constancia de la concentración de iones de hidrógeno;

Transporte de diversas sustancias (bilirrubina, ácidos grasos, compuestos minerales y fármacos).

Las albúminas del plasma sanguíneo también pueden considerarse como una cierta reserva de aminoácidos para la síntesis de proteínas específicas vitales en condiciones de deficiencia de proteínas en la dieta. La albúmina retiene agua en el torrente sanguíneo. En la nefritis, las albúminas son las primeras en llegar a la orina desde el plasma sanguíneo, como proteínas de menor peso molecular (el peso molecular de las albúminas es de aproximadamente 60.000 - 66.000). Normalmente, la albúmina representa del 35 al 55% de la cantidad total de proteínas del plasma sanguíneo.

Globulinas plasmáticas Hay muchas proteínas diferentes. Durante la electroforesis, se mueven detrás de las albúminas. La relación con los lípidos proporciona al complejo de globulinas un estado soluble y transporte a diversos tejidos. Según la movilidad electroforética, las globulinas se dividen en globulinas b2, b1, c y g. (Las globulinas B y C se sintetizan en el hígado y son portadoras activas de diversas sustancias sanguíneas). Durante el período de crecimiento intensivo del animal en la sangre, hay una disminución relativa en el nivel de albúmina y un aumento correspondiente en el nivel de globulinas B y G. Las globulinas B interactúan activamente con los lípidos sanguíneos. Las globulinas G, la fracción más pesada y menos móvil de todas las globulinas, son sintetizadas por los linfocitos B que se originan a partir de una parte de las células madre de la médula ósea o de las células plasmáticas formadas a partir de ellas. Realizan una función protectora, siendo anticuerpos protectores (inmunoglobulinas). En las aves se han estudiado tres clases de inmunoglobulinas: IgG, IgM, IgA; en los mamíferos hay cinco: IgG, IgM, IgE, IgD. IgA. Cuantitativamente, la IgG predomina en la sangre (80%). Mediante el método de inmunoelectroforesis, se aíslan hasta 30 fracciones de proteínas en el suero sanguíneo. Todas las inmunoglobulinas constan de dos cadenas polipeptídicas pesadas (PM 53 000-75 000) y dos cadenas ligeras (PM 22 500), unidas por tres puentes disulfuro. Cada tipo de inmunoglobulina es capaz de interactuar específicamente con un solo antígeno específico.

El suero sanguíneo de terneros, corderos, cabritos, lechones y potros recién nacidos prácticamente no contiene anticuerpos. Los animales recién nacidos no pueden sintetizar anticuerpos en los primeros días de vida. Aparecen sólo después de que el calostro ingresa al tracto gastrointestinal. La síntesis independiente de estas proteínas protectoras en la médula ósea, el bazo y los ganglios linfáticos se observa a partir de las 3 o 4 semanas de edad del animal. Por lo tanto, es importante alimentar al recién nacido con calostro, que contiene entre 10 y 20 veces más inmunoglobulinas que la leche normal. Las inmunoglobulinas del calostro son capaces de penetrar a través de la pinocitosis en la pared intestinal sin dividirse y entrar en la sangre, creando la defensa del organismo (calostro o inmunidad calostral).

Los linfocitos T cooperan con los linfocitos B en la síntesis de inmunoglobulinas, inhiben reacciones inmunológicas y lisan varias células. En la sangre, los linfocitos T constituyen el 70%, los linfocitos B, alrededor del 30%. Para la síntesis de inmunoglobulinas, también es necesaria una tercera población de células: los macrófagos. Actúan como factores primarios de protección inespecífica, debido a la capacidad de capturar y digerir microorganismos, antígenos, complejos inmunes y transmitir información sobre ellos a los linfocitos T y B. Los macrófagos actúan como intermediarios entre todos los participantes en el proceso con la ayuda de linfocinas y monocinas producidas por las células.

Los linfocitos B forman anticuerpos solo en respuesta a ciertos antígenos que ingresan al cuerpo (bacterias, virus). Mientras se espera esto, la estructura del antígeno y del receptor de globulina en la superficie del linfocito deben corresponderse entre sí, como la llave de una cerradura.

La concentración de g-globulinas aumenta en el suero sanguíneo durante las enfermedades infecciosas crónicas, durante las inmunizaciones y la gestación de los animales.

Varias proteínas del plasma sanguíneo realizan funciones específicas. Entre ellas destacan proteínas como la transferrina, la haptoglobina, la ceruloplasmina, lapropidina, el sistema del complemento, la lisozima y el interferón.

Las transferrinas son β-globulinas sintetizadas en el hígado. Al unir dos átomos de hierro por molécula de proteína, transportan este elemento a diversos tejidos, regulan su concentración y lo retienen en el organismo. Según la carga de la molécula de proteína y la composición de aminoácidos, se distinguen 19 tipos de transferrinas, que están asociadas con la herencia. Las transferrinas también pueden tener un efecto bacteriológico directo. La concentración de transferrinas en el suero sanguíneo es de aproximadamente 2,9 g/l. Los niveles bajos de transferrinas en el suero sanguíneo pueden deberse a una falta de proteínas en la dieta del animal.

La haptoglobina forma parte de la b2-globulina, sintetizada en el hígado y contiene cobre (0,3%). Al unirse al cobre, la ceruloplasmina asegura el nivel adecuado de este microelemento en los tejidos. La ceruloplasmina representa el 3% de la cantidad total de cobre en el cuerpo del animal. Se manifiesta como enzima y como oxidante. La ceruloplasmina es una oxidasa de adrenalina y ácido ascórbico. Una característica importante de la ceruloplasmina es su capacidad para oxidar el hierro en los tejidos a Fe3+, depositándolo en esta forma.

El sistema del complemento es un complejo de proteínas séricas de naturaleza globulina, que se considera un sistema de proenzimas, cuya activación conduce a la citólisis, es decir, la destrucción del antígeno. La síntesis del sistema del complemento, que cuenta con hasta 25 proteínas diferentes, se lleva a cabo principalmente por fagocitos mononucleares, así como por histiocitos. Este complejo sistema efector de proteínas séricas, que desempeña un papel importante en la regulación de la respuesta inmunitaria y el mantenimiento de la homeostasis, surgió antes que el sistema inmunitario en términos de filo y ontogénesis. Hay 11 componentes del sistema del complemento que se han estudiado en detalle. La cascada de reacciones enzimáticas desencadenadas por el complejo antígeno-anticuerpo y que conducen a la activación secuencial de todos los componentes del componente, comenzando por el primero, se denomina vía de activación clásica. La vía de derivación, que se caracteriza por la activación de componentes posteriores del complemento, comenzando con C3, se denomina alternativa. La destrucción de la célula microbiana ocurre solo después de la activación del componente C4. Las proteínas terminales del sistema del complemento, que reaccionan secuencialmente entre sí, penetran en la bicapa lipídica, dañando la membrana celular con la formación de canales de membrana, lo que conduce a alteraciones osmóticas, penetración de anticuerpos y complemento en la célula, seguida de lisis intracelular. membranas. En general, se acepta que el contenido de complemento en el suero sanguíneo es uno de los indicadores más objetivos del estado de las defensas inespecíficas del organismo.

La properdina es una glicoproteína del tipo g-globulina con un peso molecular de aproximadamente 184 000. Representa el 0,3% de la cantidad total de proteínas séricas. Al poseer una alta termolabilidad, lapropidina se destruye en 30 minutos a 56 °C. El sitio de síntesis de lapropidina no ha sido completamente dilucidado. Es probable que en su síntesis participe tejido linfoide. Properdin exhibe principalmente un efecto bactericida contra microbios gramnegativos. Para que se produzca la actividad de lapropidina, se requiere la presencia de los primeros cuatro componentes del complemento y de iones de magnesio correspondientes al sistema de lapropidina. Se ha revelado una conexión entre el nivel del sistema de propiedad y el grado de resistencia del cuerpo del animal.

El interferón es una proteína de bajo peso molecular (PM 24 000-36 000), que es sintetizada y excretada por las células de los tejidos en respuesta a la penetración de virus en ellas. El interferón penetra fácilmente desde las células al torrente sanguíneo y se distribuye por todos los órganos y tejidos. Una vez que el virus ingresa a la célula, se libera ARN monocatenario y a partir de él se sintetiza ARN bicatenario. De este modo se obtiene ARN que induce la síntesis de interferón. El interferón se une a la membrana plasmática de otras células del cuerpo y estimula su capacidad para resistir infecciones virales. El efecto antiviral del interferón está asociado a su capacidad para activar en las células la síntesis de inhibidores y enzimas que bloquean la traducción del IRNA viral y, en consecuencia, la reproducción del virus. El interferón también tiene propiedades inmunorreguladoras. Hay tres tipos de interferones: interferón a (leucocito), que tiene efectos antivirales, antiproliferativos y antitumorales; interferón β (fibroblasto), que tiene efectos principalmente antitumorales y antivirales; interferón g (linfocítico o inmunológico), que tiene propiedades predominantemente inmunomoduladoras.

Las funciones fisiológicas de las proteínas sanguíneas son numerosas, siendo las principales:

Mantienen la presión coloide-oncótica, manteniendo el volumen sanguíneo, reteniendo el agua y reteniéndola, impidiendo que salga del torrente sanguíneo;

Participar en los procesos de coagulación sanguínea;

Mantienen un pH sanguíneo constante, formando uno de los sistemas amortiguadores de sangre;

Al combinarse con una serie de sustancias (colesterol, bilirrubina, etc.), así como con medicamentos, las entregan a los tejidos.

Mantienen niveles normales de cationes en la sangre formando con ellos compuestos no dializables (por ejemplo, entre el 40 y el 50% del calcio sérico está unido a proteínas; una parte importante del hierro, cobre, magnesio y otros oligoelementos también está unido a proteínas);

Desempeñar un papel fundamental en los procesos inmunológicos;

Servir como reserva de aminoácidos;

Realizar una función reguladora (hormonas, enzimas y otras sustancias proteicas biológicamente activas).

Valor clínico y diagnóstico:

1) Normoproteinemia: contenido normal de proteínas totales;

2) Hipoproteinemia: contenido reducido de proteínas totales;

3) Hiperproteinemia: aumento del contenido de proteínas;

Los cambios en la proteína sanguínea total pueden ser relativos o absolutos.

Hiperproteinemia:

1. Deshidratación severa.

3. Para poliartritis crónica y algunos procesos inflamatorios crónicos.

4. Se observa hiperproteinemia persistente de hasta el 12% y más en el mieloma (plasmocitoma), macroglobulinemia de Vandelström, en la que aparecen focos adicionales y formaciones de proteínas patológicas "anormales" (paraproteínas) en los huesos planos del cráneo.

La hipoproteinemia casi siempre se asocia con hipoalbuminemia y la hiperproteinemia con hiperglobulinemia.

Hiperproteinemia relativa- asociado con una disminución del volumen sanguíneo circulante debido a la deshidratación.

Hiperproteinemia absoluta- observado con síntesis excesiva de proteínas patológicas, aumento de la formación de inmunoglobulinas, aumento de la síntesis de proteínas en la fase aguda de la inflamación.

Además del contenido total de proteínas, la determinación de fracciones de proteínas es importante para el diagnóstico de diversos procesos patológicos. La violación de la proporción óptima entre ellos se llama disproteinemia. Las disproteinemias más pronunciadas ocurren cuando se dañan los órganos donde se sintetizan las proteínas. Especialmente a menudo disminuye la cantidad de albúmina (hipoalbuminemia), que desempeña funciones importantes en el mantenimiento de la presión arterial coloide-osmótica, regula el intercambio de agua entre la sangre y el espacio intersticial, une y transporta carbohidratos, lípidos, hormonas, vitaminas y minerales.

Rara vez se produce un aumento en la cantidad de albúmina, principalmente durante la deshidratación. Cuando cambia la cantidad de albúmina, se altera su relación con las globulinas (la relación albúmina-globulina cambia), que en animales sanos oscila entre 0,7 y 1,0 (en perros 1,2).

La cantidad de alfaglobulinas aumenta durante los procesos inflamatorios agudos (reumatismo, neumonía, glomerulonefritis, artritis) y durante la exacerbación de enfermedades crónicas (tuberculosis, hepatitis), ya que este grupo incluye proteínas de "fase aguda" (proteína C reactiva, ceruloplasmina, haptoglobina, alfa-1-antitripsina, alfa-2-macroglobulina, alfa-1-glucoproteína ácida). Su nivel rara vez disminuye, con mayor frecuencia durante procesos degenerativos graves en el hígado, donde se sintetiza parcialmente la alfa globulina.

Un aumento en la cantidad de betaglobulinas se observa con mayor frecuencia en infecciones crónicas, enfermedades renales (nefrosis, glomerulonefritis) y cirrosis hepática. La composición de las fracciones de betaglobulina incluye fibrinógeno, cuyo contenido aumenta en casos de neumonía lobular, bronconeumonía, leucemia, endocarditis séptica y disminuye en enfermedades del hígado, donde se sintetiza.

Las fracciones de gammaglobulina contienen la mayor parte de anticuerpos (inmunoglobulinas), que brindan protección humoral al cuerpo, por lo que su cantidad en el suero sanguíneo depende de la madurez morfológica y la utilidad funcional del tejido inmunorreactivo.

Los niveles bajos de gammaglobulinas ocurren en los recién nacidos, especialmente en el primer día de vida, ya que no atraviesan la barrera placentaria, sino que ingresan al cuerpo solo con el calostro (inmunodeficiencia fisiológica), por lo tanto, al mantener su nivel, la calidad de la leche. y la puntualidad de su consumo son de gran importancia para el estado de la mucosa del intestino delgado. La síntesis de sus propias inmunoglobulinas comienza a los 5-7 días de vida y alcanza el nivel óptimo solo a los 6 meses de edad, por lo que los animales jóvenes son susceptibles a muchas enfermedades (salmonelosis, estreptococosis, pasteurelosis, infecciones respiratorias virales, neumonía). También se observa una disminución en el contenido de gammaglobulinas en diversas enfermedades que se acompañan de daño al sistema inmunológico (mieloma, leucemia linfocítica, enfermedad de Gumboro), pérdida de inmunoglobulinas durante la nefrosis, enteritis, hemorragia crónica, debido a la supresión de la función. del sistema inmunológico por diversas toxinas, medicamentos (inmunosupresores).

Hipoproteinemia:

Ingesta insuficiente de proteínas alimentarias, generalmente observada con desnutrición, inanición, tumores, estrechamiento del esófago, disfunción del tracto gastrointestinal (debido al deterioro de la digestión y la absorción de los componentes proteicos de los alimentos), por ejemplo, con procesos inflamatorios prolongados de los intestinos. .

Según A. A. Pokrovsky, incluso una composición de aminoácidos desequilibrada de los alimentos a veces puede provocar hipoproteinemia.

Para garantizar procesos vitales normales, el cuerpo utiliza la fracción de albúmina de las proteínas del plasma sanguíneo. Con un mayor consumo de albúmina (principalmente responsable de la presión arterial oncótica), se desarrolla el llamado edema oncótico o por inanición. Cualquier disminución del contenido de proteínas en el plasma sanguíneo por debajo del 5% suele ir acompañada de edema tisular hipoproteinémico.

4. Defectoproteinemia (albuminemia): ausencia congénita o contenido insuficiente de ceruloplasmina en el plasma sanguíneo en la enfermedad de Wilson.

5. En mujeres durante la lactancia y los últimos meses de embarazo.

6. Síndrome nefrótico

7. Kwashiorkor (deficiencia proteica aguda)

8. Síndrome de retención de sal

Hipoproteinemia relativa- asociado con un aumento en el volumen de sangre circulante debido al agua (con anuria, descompensación cardíaca, aumento de la síntesis de la hormona antidiurética del hipotálamo).

Hipoproteinemia absoluta- observado con ingesta insuficiente de proteínas en el cuerpo como resultado del ayuno, síntesis insuficiente de proteínas durante procesos inflamatorios crónicos del hígado, trastornos congénitos de la síntesis de proteínas sanguíneas individuales, aumento de la degradación de proteínas en el cuerpo y formación de una cantidad significativa de exudado.

Bibliografía

1. Babenko O. O., Savchenko T. G., Reznichenko L. V. Prevención de la hipovitaminosis A en la cría de cerdos./ T. G. Savchenko./ Medicina veterinaria. -Nº 12. - 2008. - P. 38 - 39.

2. Zaitsev S. Yu., Bioquímica de animales / Yu. V. Konopatov - San Petersburgo: "Lan", 2004., 384 p.

3. Severina E. S., Bioquímica 2ª edición / E. S. Severina - M.: "Med" 2004., 184 p.

Solicitud

Tipo de animal	Proteínas totales, g/l	Fracciones de proteínas, porcentaje.
Albúmina	Globulinas

Ganado

Pestaña. 2. Parámetros bioquímicos del suero sanguíneo en diversas especies animales.




Fosfatasa alcalina

Creatinina quinasa



bicarbonatos
Bilirrubina total

Cloruros (Cl-)
Colesterol
creatinina




Proteína Albúmina Globulina	55-75 26-40 21-37	57-80 24-38 24-47	62-82 28-39 29-49	57-79 25-38 24-46	58-83 23-40 39-60	59-78 27-37 32-50	61-75 23-36 27-44	54-83 24-46 15-28	55-70 35-44 17-35
Sodio (Na+)
Urea

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