HEMAGLUTINATION

המגלוטינציה(מתוך היוונית háima blood and lat. agglutinatio gluing), הדבקה ומשקעים של אריתרוציטים בהשפעת חיידקים, וירוסים, רעלים וכו', המסוגלים לספוג על פני השטח של אריתרוציטים, כמו גם ההמגלוטינינים. אריתרוציטים של חיה אחת יכולים להיות צמודים על ידי נסיוב של חיה אחרת עקב נוכחותם של איזו-המגלוטינינים (נוגדנים) תקינים בו. בעזרת תגובה G.להתקין . תופעה G.משמש במחקרים מיקרוביולוגיים ואימונולוגיים.

הבחנה בין ישיר, או אקטיבי, לבין עקיף, או פסיבי, G.יָשָׁר G.בשל ההשפעה הישירה של סוכנים חיידקיים וויראליים על אריתרוציטים. במקביל, ההמגלוטינינים מקיימים אינטראקציה עם קולטני הטבע המוקופרוטאז הממוקמים על פני האריתרוציטים בעזרת האנזים mucinase, וגורמים לספיחת האנטיגן. כתוצאה מכך, השעיה של אריתרוציטים (לדוגמה, עוף) יוצרת משקעים רחבים בצורת מטרייה עם קצוות לא אחידים. תגובה זו אינה ספציפית, ממשיכה ללא השתתפות של סרום חיסוני. ישיר G.משמש במחקרים סרולוגיים, במיוחד בקביעת דילול העבודה של האנטיגן המשמש בתגובת העיכוב G., המבוסס על עיכוב פעולת ההמגלוטינציה של האנטיגן על ידי הסרום הספציפי למערכת החיסון. ישיר G.משמש גם לאבחון משוער של כמה מחלות ויראליות (שפעת סוסים, מכת ציפורים, מחלת ניוקאסל, שפעת ברווז). עקיף G.(RNHA) מבוסס על יכולתם של אריתרוציטים רגישים (על ידי ספיחה של אנטיגן עליהם) להצטבר בנוגדנים הומולוגיים של הסרום החיסוני. בשל הרגישות והספציפיות הגבוהה של עקיף G.הוא משמש לאבחון מחלות ויראליות, חיידקיות ומחלות ריכציאליות רבות. ישנם מספר שינויים של העקיף G.תגובות של עיכוב, עיכוב, נטרול נוגדנים וכו'. בעזרת RNHA והשינויים שלו, הן נוגדנים בסרום הדם של בעלי חיים ובני אדם (בעת שימוש באדמית רגישים עם אנטיגן ידוע) והן אנטיגן (בעת שימוש באדמית עם רגישות מסוימת ניתן לזהות נוגדנים). עבור התגובה, אריתרוציטים שטופים של מיני בעלי חיים שונים משמשים (לרוב אריתרוציטים של כבשים ועוף). יכולתם של אריתרוציטים לספוג אנטיגנים מולקולריים גדולים בעלי אופי חלבוני עולה לאחר הטיפול שלהם בטאנין. כדי להגדיל את חיי המדף של אריתרוציטים, הם נשמרים עם פורמלין. אבחונים המתקבלים מאריתרוציטים פורמליים יכולים לשמור על פעילותם לאורך זמן. בנוכחות אבחון אריתרוציטים מוכנים, ניסוח התגובה מפושט מאוד. בפרקטיקה הווטרינרית, RNGA משמש לאבחון כמה מחלות בעלי חיים (בעיקר ויראליות) - מכת עופות קלאסית, מחלת ניוקאסל, אבעבועות פרות, שפעת סוסים, שפעת חזירים וברווזים, פולורוזיס - טיפוס העופות וכו'. ראה גם,.

סִפְרוּת:
מחקרי מעבדה ברפואה וטרינרית, מ', 1971;
מדריך לשיטות מחקר מיקרוביולוגיות וויירולוגיות, עורך. M. O. Birger מהדורה 2, M., 1973.

מילון אנציקלופדי וטרינרי. - מ.: "האנציקלופדיה הסובייטית". העורך הראשי V.P. שישקוב. 1981 .

מילים נרדפות:

ראה מה זה "HEMAGGLUTINATION" במילונים אחרים:

המגלוטינציה-המגלוטינציה... מילון איות

המגלוטינציה- צפיפות, צפיפות מילון מילים נרדפות רוסיות. שם עצם של hemagglutination, מספר מילים נרדפות: 2 agglutination (3) … מילון מילים נרדפות

HEMAGLUTINATION- (מתוך hemo... ו-lat. agglutinatio bonding) התקשרות ומשקעים של אריתרוציטים התלויים בנוזל בהשפעת גורמים שונים, למשל, נוגדנים, חיידקים או וירוסים. בדיקת ההמגלוטינציה משמשת לאבחון ... ... מילון אנציקלופדי גדול

המגלוטינציה- תהליך הדבקת אריתרוציטים לאגרגטים הנראים לעין בלתי מזוינת. G. סיבה: 1) At to אריתרוציטים ו-Ag heterophilic; 2) Ab ל-Ag, זר לאריתרוציטים, נספג על פני השטח שלהם (ראה תגובה פסיבית להמגלוטינציה); 3)... מילון מיקרוביולוגיה

HEMAGLUTINATION- HEMAGLUTINATION, אגלוטינציה (גיבוש) של אריתרוציטים בשילוב עם סרה הומולוגית. אם אריתרוציטים אנושיים מוחלפים בסרום של אותו אדם, אזי תתקבל תרחיף אחיד על ידי ניעור. אם תאי הדם האדומים של אדם אחד ...... אנציקלופדיה רפואית גדולה

המגלוטינציה- התופעה העומדת בבסיס השיטה לקביעת נוגדנים, בהתבסס על הצטברותם של אריתרוציטים כתוצאה מקשירה או לאנטיגנים של האריתרוציטים עצמם, או לאנטיגנים אחרים המחוברים באופן מלאכותי לפני השטח של האריתרוציטים. ... ... מדריך מתרגם טכני- (heme + agglutination) agglutination של אריתרוציטים ... מילון רפואי גדול

המגלוטינציה- מיוונית. חימא דם ולט. agglutinatio agglutination), תהליך הצבירה והשקיעה שלאחר מכן של תאי דם אדומים; נגרמת על ידי המגלוטינינים (ראה. המגלוטינינים), חיידקים ווירוסים, חומרים המסוגלים להיספג על ... ... האנציקלופדיה הסובייטית הגדולה

המגלוטינציה- הדבקה (אגלוטינציה) של אריתרוציטים. זה מתפתח, כולל עם עירוי של דם לא תואם.

תגובה להמגלוטינציה (RHA)

RGA מבוסס על העובדה שלסוגים מסוימים של חיידקים ווירוסים יש את היכולת לספוח על פני השטח של אריתרוציטים של מינים שונים של בעלי חיים (וציפורים), ולגרום להם להיצמד זה לזה וליצור צמיגים (RGA ישיר).

ספיחה של אנטיגן (חיידקים, וירוסים) על פני השטח של אריתרוציטים לא תמיד מתבטאת ביצירת משקע גלוי; בנוסף, RGA אינו ספציפי, מכיוון שאריתרוציטים מאותו מין בעלי חיים יכולים לספוג אנטיגנים שונים.

התגובה של hemagglutination פסיבית (עקיפה) (RPHA) היא ספציפית. לקביעתו, מכינים מראש אבחון אריתרוציטים (אריתרוציטים שעליהם נספג האנטיגן). לשם כך, דם ראם (או תרנגול) מתקבל באופן סטרילי, דה-פיברין ונשטף מספר פעמים בתמיסת חיץ פוספט (pH 7.2) באמצעות צנטריפוגה פי 3-5. הסופרנטנט מוסר, ריכוז האריתרוציטים מותאם ל-2.5% (1:40). לתרחיף של 2.5% של אריתרוציטים מתווסף בנפח שווה (1 מ"ל או 0.5 מ"ל) תרחיף של חיידקים ממין החיידקים הנחקרים בריכוז של 5-10 מיליארד תאים ל-1 מ"ל. אריתרוציטים סופחים בקלות את האנטיגן בעל אופי פוליסכריד. כדי לספוח את האנטיגן בעל אופי חלבוני, אריתרוציטים מטופלים מראש בטאנין בדילול של 1:20,000. האריתרוציטים בשילוב עם האנטיגן המוסף נשארים לרגישות (ספיחה) למשך שעתיים בתרמוסטט (37 מעלות צלזיוס). , לאחר מכן צנטריפוגה שוב ב-3-4 אלף סל"ד לדקה למשך 5 דקות עם תמיסת חיץ פוספט (איור 9.13).

אבחון אריתרוציטים שנוצר מונח במבחנות (או בארות בלוח פרספקס) ומוסיפים לו סרום חיסוני סטנדרטי.

במקרים חיוביים יתרחש RGA - אובדן אריתרוציטים בצורה של משקע מתקלף או גרגירי אופייני המופץ על פני כל פני השטח של תחתית המבחנה (hemagglutinate). משמעות הדבר היא שסוג החיידק (אנטיגן) הנחקר הוא ספציפי לנוגדני האימונוזרום. במקרים שליליים, תאי דם אדומים לא מודבקים ישקעו לתחתית בצורה של עיגול קטן אחיד.

לאמינות רבה יותר של התוצאות של RPGA, עיכוב תגובה(בְּלִימָה) תופעת המגלוטינציה(RZGA) או השינוי שלו - תגובה לנטרול נוגדנים(RIA).

אורז. 9.13. תגובת המוגלוטינציה פסיבית (סכמה): Er - אריתרוציטים: AG - אנטיגן: AT - נוגדן

המהות של ה-RZGAמורכב מהעובדה שתגובת האגלוטינציה נקבעת עם סרום אבחוני ספציפי והאנטיגן שנבדק (סוג החיידק הנחקר משמש כאנטיגן). תערובת זו נשמרת במשך 1-2 שעות ב-37 מעלות צלזיוס, ואז מוסיפים אריתרוציטים. אם האנטיגן הנבדק הומולוגי לנוגדני הסרום האבחנתי, הם מקיימים אינטראקציה זה עם זה והאריתרוציטים שנוספו אינם מתאגרים - תוצאת התגובה חיובית. אם האנטיגן הנבדק אינו הומולוגי לנוגדנים בסרום או שהוא אינו כלול בחומר, אזי האריתרוציטים שנוספו סופחים את האנטיגן ומתרחשת RHA - התוצאה של RHA שלילית, סוג החיידק (האנטיגן) הנבדק לא נקבע.

שיטת הגדרת PH Aהוא שהם לוקחים נפחים שווים ומערבבים את הסרום החיסוני האבחוני עם דילולים שונים של חומר הבדיקה (האנטיגן הרצוי), משאירים אותו למגע למשך 1-2 שעות, ואז מוסיפים אריתרוציטים רגישים עם אנטיגן מסוים (ידוע) ספציפי לסרום. נוגדנים (אריתרוציטים אבחון). כאשר האנטיגן הרצוי מגיב עם נוגדנים בסרום, הם מנוטרלים והאריתרוציטים שנוספו אינם מתאגרפים, RHA אינו מתרחש - תוצאת PHA חיובית. אם חומר הבדיקה אינו מכיל אנטיגן ספציפי לנוגדנים של הסרום בו נעשה שימוש, לא יהיה נטרול של הנוגדנים. לכן, כאשר מתווסף אבחון אריתרוציטים, מופיעה אגלוטינציה של אריתרוציטים (המגלוטינציה), והתוצאה של RHA שלילית. בדיקת נטרול הנוגדנים היא שיטה רגישה ביותר לגילוי אנטיגן לא רק בתרחיף של חיידקים חיים (או מומתים), אלא גם בתרחיף של רקמת קרקע של איברים שונים, הפרשות מקומיות ומחוממות והפרשות של אורגניזם חולה.

1. תגובת ההמגלוטינציה

(RGA)

שיטה לזיהוי וזיהוי של וירוסים המבוססת על יכולתם של וירוסים מסוימים לצבור באופן סלקטיבי אריתרוציטים של מיני בעלי חיים מסוימים.

RHA מבוסס על תופעת הידבקות אריתרוציטים, המתרחשת בהשפעת גורמים שונים. הבחנה בין המגלוטינציה ישירה לעקיפה. בתגובת ההמגלוטינציה הישירה, אריתרוציטים נצמדים זה לזה כאשר אנטיגנים מסוימים, כמו וירוסים, נספגים עליהם.

במחקרים סרולוגיים משתמשים בתגובת עיכוב ההמגלוטינציה הישירה, כאשר הנגיף המבודד מהמטופל מנוטרל עם סרום חיסוני ספציפי, ולאחר מכן משולב עם כדוריות דם אדומות. היעדר המגלוטינציה מעיד על התאמת הנגיף והנסיוב החיסוני המשמש.

תגובת המגלוטינציה עקיפה (המגלוטינציה פסיבית) נצפית כאשר אריתרוציטים שטופלו מראש (הרגישו) באנטיגנים שונים מתווספים בסרום חיסוני או בסרום חולה שיש לו את הנוגדנים המתאימים. יש קשר ספציפי של אריתרוציטים, ההמגלוטינציה הפסיבית שלהם.

התגובה של המגלוטינציה עקיפה, או פסיבית, עדיפה ברגישות ובספציפיות לשיטות סרולוגיות אחרות, והיא משמשת לאבחון זיהומים הנגרמים על ידי חיידקים, ריקטזיה ופרוטוזואה.

שיטת הגדרת התגובה של hemagglutination עקיפה מורכבת ממספר שלבים. ראשית, האריתרוציטים נשטפים בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית, ולאחר מכן, במידת הצורך (בעת שימוש באנטיגנים בעלי אופי חלבוני), הם מטופלים בתמיסת טאנין של 1:20,000 ומרגישים באנטיגנים מסיסים. לאחר כביסה עם תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית מבוקרת, אנטיגן האריתרוציטים מוכן לשימוש. סרום הבדיקה מדוללים בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית במבחנות או בצלחות פלסטיק מיוחדות עם חורים, לאחר מכן מוסיפים לכל דילול סרום אבחון אריתרוציטים. התוצאות של תגובת ההמגלוטינציה העקיפה נלקחות בחשבון על ידי אופי משקע האריתרוציטים הנוצרים בתחתית הצינור. תוצאת התגובה נחשבת חיובית, שבה האריתרוציטים מכסים באופן שווה את כל תחתית המבחנה. עם תגובה שלילית, אריתרוציטים בצורה של דיסק קטן או "כפתור" ממוקמים במרכז החלק התחתון של המבחנה.

שימוש ב-RHA

RGA משמש לאינדיקציה (גילוי) של וירוסים במהלך אבחון אינדיקטיבי, לטיטרציה של וירוסים לפי תכונות ההמגלוטינציה (קביעת יחידות ההמגלוטינציה - AU).

ספיחת וירוסים

הבסיס של תופעת האגלוטינציה הנגרמת על ידי וירוסים הוא ספיחה של וירוסים על פני השטח של אריתרוציטים, מלווה בהדבקה (אגלוטינציה) של האחרונים ומשקעים.

אנטיגן עבור RGA

כאנטיגן ל-RHA נלקח כל חומר (חומר פתולוגי בצורת תרחיף מאיברים, חומר מ-TBE נגוע, תרביות רקמה וכו'), בו צפויה נוכחות של וירוס. החומר חייב להיות נוזלי, ללא חלקיקים גדולים.

הגדרת RGA אינדיקטיבי

כדי להגדיר RGA משוער, מורחים טיפה אחת של חומר המכיל וירוסים על שקופית זכוכית נקייה ומורטת שומן היטב, מוסיפים לה טיפה אחת של תרחיף אריתרוציטים של 5% ומערבבים עם מוט זכוכית.

הערכת התגובה של ה-RHA

העריכו את התגובה בהצלבים (פלוסים). כאשר מעריכים את התגובה בהצלבים, שמים לב לאופי המשקע. אם האריתרוציטים התמקמו בשכבה דקה באופן שווה לאורך תחתית הצינור (בצורת מטריה), התגובה מוערכת בארבעה הצלבות

2. תגובת עיכוב ההמגלוטינציה- תגובה סרולוגית המבוססת על יכולתם של נוגדנים למנוע אגלוטינציה של אריתרוציטים על ידי נגיפים מסוג המגלוטינציה (אדנו-וירוסים, ארבו-וירוסים, חלק מהאנטרו-וירוסים, נגיפי שפעת ופרא-אינפלואנזה, חצבת, ריאו-וירוס). נוגדנים אנטי-ויראליים ספציפיים מקיימים אינטראקציה עם מולקולות פני השטח של ההמגלוטינינים של נגיפים של וירוסים אלה וחוסמים את הקישור שלהם למולקולות משלימות של קרום האריתרוציטים.

לאחרונה, נעשה שימוש נרחב בתגובה במעבדות וירולוגיה קלינית לקביעת הטיטרים של נוגדנים ספציפיים לנגיפים מסוימים, כמו גם לזיהוי סרולוגי והקלדה של מבודדים וירוסים מחומר קליני של חולים. השימוש מוגבל במידה מסוימת בשל נוכחותם בסרום הדם של אנשים של מעכבים לא ספציפיים של וירוסים, כמו גם נוגדנים טבעיים - agglutinins.

תגובת עיכוב ההמגלוטינציה (RTGA). למרות שמה, עקרון התגובה דומה מבחינות רבות ל-PH של וירוסים, שכן הוא מבוסס על יכולתו של AT לקשור וירוסים שונים ולנטרל אותם, מה שהופך את אריתרוציטים בלתי אפשריים להצטבר. מבחינה ויזואלית, השפעה זו מתבטאת ב"עיכוב" ההמגלוטינציה. RTHA משמש באבחון של זיהומים ויראליים לזיהוי אנטי-המגלוטינינים ספציפיים ולזיהוי וירוסים שונים לפי ההמגלוטינינים שלהם, המציגים את התכונות של Ag.

תגובה לעיכוב ההמגלוטינציה

(RTGA)

שיטה לזיהוי נגיף או גילוי נוגדנים אנטי-ויראליים בסרום הדם של החולה, המבוססת על תופעה של היעדר אגלוטינציה של אריתרוציטים על ידי תכשיר המכיל וירוס בנוכחות סרום דם חסין מפניו.

תגובה לעיכוב ההמגלוטינציה. מנגנון ושימוש מעשי.

לנגיפים רבים יש את היכולת לצבור אריתרוציטים של מינים מוגדרים בהחלט של יונקים וציפורים. לפיכך, נגיפי שפעת וחזרת מציצים אריתרוציטים של תרנגולות, חזירי ניסיונות ובני אדם, ואדנו-וירוס מצמידים אריתרוציטים של חולדות ועכברים. בהקשר זה, לצורך איתורם בחומר של חולים או תרביות תאים, עוברים ובעלי חיים, הם שמים תגובת המגלוטינציה(RGA). לשם כך, בבארות הטבליות מכינים דילולים בעלי גידול כפול של חומרים ונוזלים המכילים וירוסים, ומוסיפים להם השעיות של אריתרוציטים שטופים בתמיסה איזוטונית של NaCl. כדי לשלוט באגלוטינציה ספונטנית, אריתרוציטים מעורבבים עם נפח שווה של תמיסת NaCl איזוטונית. התערובות מודגרות בתרמוסטט בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס או בטמפרטורת החדר.

התוצאות של RHA נלקחות בחשבון על ידי אופי הצבירה של אריתרוציטים לאחר 30-60 דקות, כאשר הם בדרך כלל משוקעים לחלוטין בבקרה. תגובה חיובית מסומנת על ידי פלוסים. "++++" הוא משקע בצורת מטרייה, "+++" הוא משקע עם מרווחים, "++" הוא משקע עם מרווחים גדולים, "+" הוא משקע פלפלי מוקף באזור של אריתרוציטים מקובצים, ו-"–" - אותו משקע אריתרוציטים מוגדר בחדות בצורת "כפתור" כמו בביקורת

בהיותו ספציפי לקבוצה, RGA אינו מאפשר לקבוע את מיני הנגיפים. הם מזוהים עם תגובות עיכוב המגלוטינציה(RTGA). להגדרתו, נעשה שימוש בסרה אנטי-ויראלית חיסונית ידועה, המדוללים בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית בריכוז פוחת פי שניים ושופכים לבארות. כמות שווה של נוזל המכיל וירוס מתווספת לכל דילול. הבקרה היא השעיה של הנגיף בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית. צלחות עם תערובת של סרה ווירוס נשמרות בתרמוסטט למשך 30 דקות או בטמפרטורת החדר למשך שעתיים, ואז מתווספת השעיה של אריתרוציטים לכל אחד מהם. לאחר 30 דקות נקבע הטיטר של הסרום המנטרל (כלומר, הדילול המקסימלי שלו), מה שגרם לעיכוב באגלוטינציה של אריתרוציטים.

RTGA משמש באבחון סרולוגי של מחלות ויראליות, בפרט זיהומי שפעת ואדנוווירוס. עדיף לשים אותו באותו אופן כמו ה-pH, עם סרה מזווגת. עלייה של פי ארבע בטיטר הנוגדנים בסרום השני מאשרת את האבחנה החשודה.

3. בדיקה סרולוגיתמאפשר לך לבצע אבחנה במקרה של זיהוי של נוגדנים ספציפיים בסרום של חולים. עבור תגובות סרולוגיות, משתמשים בסמים זוגיים, הנלקחים בימים הראשונים מתחילת המחלה ולאחר 1 עד 3 שבועות, אך נלמדים בו זמנית. עלייה בטיטר נוגדנים פי 4 או יותר היא בעלת ערך אבחנתי. RTGA, RN, RSK, RTGads, RIF, RIA, ELISA מוגדרים עם אנטיגנים (דיאגנוסטיקומים) שהוכנו מזני התייחסות של הנגיפים המתאימים.

4. מזווג - זה אומר שנלקח דם פעמיים עם מרווח זמן מסוים. על ידי הגדלת טיטר הנוגדנים, נקבע כי התרחש זיהום. אם טיטר הנוגדנים לא משתנה, זה אומר שהנוגדנים הללו נמצאים בגוף במשך זמן רב, אין זיהום טרי.

הערך האבחוני הגדול ביותר הוא מחקר של סמים זוגיים שנלקחו מבעלי חיים בתחילת המחלה ובסופה (במרווח של 14-21 ימים). הסרום נאסף בצינורות סטריליים ומאוחסן לניתוח.

תיאור

הערכה לאבחון מחלת פרבו-וירוס של חזירים מיועדת לזהות אנטיגן פרבו-וירוס בהשעיה של איברים פנימיים של עוברים שהופלו בבדיקת ההמגלוטינציה (HA) ונוגדנים ספציפיים בסרום הדם של חזירים, כמו גם חזרזירים שזה עתה נולדו (לפני נטילתם קולוסטרום) בבדיקת עיכוב ההמגלוטינציה (HA). התגובה מתבצעת בשיטת המיקרו בבארות של לוחות פוליסטירן. פלטות פוליסטירן עם 96 בארים לתגובות אימונולוגיות; אנטיגן ספציפי מושבת, בעל פעילות המאגלוטינציה של לפחות 1:128; סרום ספציפי עם פעילות ב-RTGA לא נמוכה מ-1:256; הסרום תקין (שליטה שלילית).

זמן ניתוח:

RGA - 2.5-3.5 שעות, RTGA - 3.5-4.5 שעות (לא כולל זמן הכנת החומרים ללימוד).

עקרון השיטה:

תגובת ההמגלוטינציה (RHA) מבוססת על הידבקות של אריתרוציטים התלויים בנוזל בהשפעת תכונות ההמגלוטינציה של הנגיף ויצירת משקעים רופפים בצורת מטריה. המהות של RTGA היא לנטרל את תכונות ההמגלוטינציה של הנגיף עם נוגדנים ספציפיים הכלולים בסרום הדם, כתוצאה מכך האריתרוציטים אינם נדבקים זה לזה והם מתיישבים לתחתית ויוצרים משקעים צפופים בצורת כפתור. .

תנאי אחסון

הסט מאוחסן במקום יבש וחשוך בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס. לאחר פירוק, ניתן לאחסן את רכיבי הערכה בהקפאה למשך חודש אחד, אסור להקפיא מחדש.

תאריך אחרון לשימוש

אריתרוציטים (או חלקיקי לטקס) עם אנטיגנים ספוגים עליהם מקיימים אינטראקציה עם נוגדני סרום הדם התואמים, מה שגורם לאריתרוציטים להיצמד זה לזה ולנשור לתחתית הצינור או התא בצורה של משקעים מסולסלים. עם תגובה שלילית, אריתרוציטים מתיישבים בצורה של כפתור. תגובת צבירהיכול להתבצע ב-microvariant בתאים של צלחת 96 בארים למחקרים אימונולוגיים עם תחתית חרוטית. 0.05 מ"ל של FSB (pH 7.2-7.4) מתווספים לבארות הטבליה, ומכינים דילולים כפולים של סרת הדם שנבדקה מ-1:2 ומעלה. לאחר מכן, 0.005 מ"ל של תרחיף של תאי פטרייה מתווספים לכל תא בריכוז של 100,000 תאי פטרייה לכל 1 מ"ל. הטבליה מנערת בעדינות ומודגרת במשך שעתיים בתרמוסטט ב-37 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן 16-18 שעות ב-4 מעלות צלזיוס. כביקורת שלילית, נעשה שימוש בסרום דם רגיל (שלילי) ו-FSB. תוצאות התגובה נלקחות בחשבון באמצעות מיקרוסקופ ויזואלית ונקבעות בהצלבים לפי הסכימה הבאה: (++++) - הארה מלאה של הנוזל והיווצרות אגלוטינאט בתחתית החור בצורת "מטריה הפוכה", כאשר מנערים אותה, ה"מטריה" נשברת לפתיתים; (+++) - הארה לא מלאה של הנוזל ו"מטריה" מוגדרת היטב; (++) - הארה ניכרת של הנוזל, ה"מטריה" מתבטאת בצורה מתונה; (+) - הארה נוזלית בקושי מורגשת, "מטריה" מתבטאת בצורה חלשה; (-) - תוצאה שלילית, הנוזל לא הפך צלול, נוצר משקע בצורת כפתור בתחתית הבאר, עם ניעור קל נוצר השעיה אחידה. טיטר הנוגדנים נלקח כדילול האחרון של סרום הבדיקה, שבו התרחשה אגלוטינציה של לפחות שני הצלבות (++).

תגובת צבירה- זוהי תגובה חיסונית של אינטראקציה של אנטיגן עם נוגדנים בנוכחות אלקטרוליטים, והאנטיגן נמצא במצב גופי (אריתרוציטים, חיידקים, חלקיקי לטקס עם אנטיגנים נספחים). במהלך האגלוטינציה, אנטיגנים גופניים מודבקים זה לזה על ידי נוגדנים, המתבטאים ביצירת משקעים פלוקולנטיים. היווצרות פתיתים מתרחשת בשל העובדה שלנוגדנים יש שני מרכזים פעילים, ואנטיגנים הם רב ערכיים, כלומר. יש גורמים אנטיגנים מרובים. RA משמש לזיהוי הפתוגן המבודד מהחומר של החולה, וכן לזיהוי נוגדנים לפתוגן בסרום הדם של החולה (לדוגמה, תגובות רייט והאדלסון בברוצלוזיס, תגובת וידאל במחלת הטיפוס וקדחת פארטיפוס. ).

הדרך הקלה ביותר להגדיר RA היא תגובה על זכוכית, זהו RA משוער, המשמש לקביעת הפתוגן המבודד מהמטופל. כאשר מגדירים את התגובה על שקופית זכוכית, מוחל סרום אגלוטיניסטי אבחנתי (בדילול של 1:10 או 1:20), ולאחר מכן מכניסים תרבית מהמטופל. התגובה חיובית אם מופיע משקעים פקקולנטיים בטיפה. פקד ממוקם בקרבת מקום: במקום סרום, מורחים טיפה של תמיסת נתרן כלורי. אם הסרום האגלוטי האבחוני אינו נספג 1, אז הוא מדולל (לטיטר - הדילול שאליו אמורה להתרחש אגלוטינציה), כלומר. שים RA מורחב במבחנות עם דילולים הולכים וגדלים של סרום מאגד, שאליו מוסיפים 2-3 טיפות תרחיף של הפתוגן שבודד מהמטופל. הצבירה נלקחת בחשבון לפי כמות המשקעים ומידת ההבהרה של הנוזל במבחנות. התגובה נחשבת חיובית אם נצפתה צבירה בדילול קרוב לטיטר של הסרום האבחנתי. התגובה מלווה בבקרות: הסרום, מדולל בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית, צריך להיות שקוף, ההשעיה של חיידקים באותה תמיסה צריכה להיות עכורה באופן אחיד, ללא משקעים.

כדי לקבוע את הנוגדנים לפתוגן בסרום הדם של החולה, נעשה שימוש ב-RA מורחב. כאשר הוא מונח במבחנות, מדולל את סרום הדם של המטופל ומוסיפים למבחנות כמות שווה של תרחיף דיאגנוסטיקום (השעיה של חיידקים מומתים). לאחר הדגירה, נקבע דילול הסרום הגבוה ביותר שבו התרחשה אגלוטינציה, כלומר. נוצר משקע (טיטר בסרום). במקרה זה, תגובת האגלוטינציה עם O-diagnosticum (חיידקים שנהרגים על ידי חימום, תוך שמירה על אנטיגן O-יציב תרמי) מתרחשת בצורה של אגלוטינציה עדינה. תגובת האגלוטינציה עם H-diagnosticum (חיידקים שנהרגים על ידי פורמלין, שומרים על האנטיגן H-flagellar הבלתי רגיש לחום) היא בעלת גרגיר גס ומתמשכת מהר יותר.

התגובה של hemagglutination עקיפה (פאסיבית).(RNGA או RPGA) הוא סוג של RA. שיטה זו רגישה ביותר. בעזרת RNGA ניתן לפתור שתי משימות: קביעת הנוגדנים בסרום הדם של המטופל, שאליו מתווסף אריתרוציטים אנטיגני, שהם אריתרוציטים שעליהם נספגים אנטיגנים ידועים; לקבוע את נוכחותם של אנטיגנים בחומר הבדיקה. במקרה זה, התגובה נקראת לעתים תגובת ההמגלוטינציה הפוכה (RONGA). בעת השלב, מוסיפים לחומר הבדיקה נוגדן אריתרוציטים (אריתרוציטים עם נוגדנים נספגים על פני השטח שלהם). אריתרוציטים בתגובה זו פועלים כנשאים ומעורבים באופן פסיבי ביצירת אגרגטים חיסוניים. עם תגובה חיובית, אריתרוציטים מודבקים באופן פסיבי מכסים את תחתית הבאר בשכבה אחידה עם קצוות מסולסלים ("מטריה"); בהיעדר צבירה, אריתרוציטים מצטברים בשקע המרכזי של החור, ויוצרים "כפתור" קומפקטי עם קצוות מוגדרים בחדות.

תגובת קרישהמשמש לזיהוי תאים פתוגנים (אנטיגנים) באמצעות נוגדנים הנספחים עליהם Staphylococcus aureus,מכיל חלבון A. לחלבון A יש זיקה למקטע Fc של אימונוגלובולינים. בשל כך, נוגדנים נקשרים לסטפילוקוקוס בעקיפין דרך מקטע Fc, ושברי Fab מכוונים כלפי חוץ ומסוגלים ליצור אינטראקציה עם החיידקים המתאימים המבודדים מהחולים. במקרה זה נוצרים פתיתים.

תגובת עיכוב הגלוטינציה (HITA)משמש לאבחון של זיהומים ויראליים, ורק זיהומים הנגרמים על ידי וירוסים המגלוטינים. וירוסים אלו מכילים על פני השטח שלהם חלבון - המגלוטינין, האחראי על תגובת ההמגלוטינציה (RHA) כאשר מוסיפים לו וירוסים אריתרוציטים. RTGA מורכב מחסימת אנטיגנים ויראליים באמצעות נוגדנים, וכתוצאה מכך הנגיפים מאבדים את יכולתם לצבור תאי דם אדומים.

תגובת קומבס - RA לאיתור נוגדנים לא שלמים. בחלק ממחלות זיהומיות, כמו ברוצלוזיס, מסתובבים נוגדנים לא שלמים לפתוגן בסרום הדם של החולה. נוגדנים לא שלמים נקראים חסימה מכיוון שיש להם אתר קושר אנטיגן אחד, ולא שניים, כמו נוגדנים מלאים. לכן, כאשר מוסיפים אבחון אנטיגני, נוגדנים לא שלמים נקשרים לאנטיגנים, אך אינם מדביקים אותם יחד. כדי לבטא את התגובה מוסיפים סרום אנטיגלובולין (נוגדנים לאימונוגלובולינים אנושיים), שיובילו לאגלוטינציה של קומפלקסים חיסוניים (אנטיגניים דיאגנוסטיקום + נוגדנים לא שלמים) הנוצרים בשלב הראשון של התגובה.

תגובת Coombs עקיפה משמשת בחולים עם המוליזה תוך-וסקולרית. בחלק מהחולים הללו מתגלים נוגדנים אנטי-רזוס חד ערכיים לא שלמים. הם מקיימים אינטראקציה ספציפית עם אריתרוציטים חיוביים ל-Rh, אך אינם גורמים לאגלוטינציה שלהם. לכן מוסיפים למערכת נוגדני אנטי-Rh סרום אנטיגלובולין + אריתרוציטים חיוביים ל-Rh הגורם לאגלוטינציה של אריתרוציטים. באמצעות תגובת Coombs, מאובחנים מצבים פתולוגיים הקשורים לתמוגה תוך-וסקולרית של אריתרוציטים ממקור חיסוני, למשל, מחלה המוליטית של היילוד עקב קונפליקט Rhesus.

RA לקביעת קבוצות דםמבוסס על אגלוטינציה של אריתרוציטים על ידי נוגדנים של סרום חיסון לאנטיגנים של קבוצות דם A (II), B (III). הבקרה היא סרום שאינו מכיל נוגדנים, כלומר. קבוצות דם AB (IV) בסרום, ואנטיגנים של אריתרוציטים מקבוצות A (P) ו-B (III). אריתרוציטים מקבוצה 0(I) משמשים כבקרה שלילית מכיוון שאין להם אנטיגנים.

כדי לקבוע את גורם ה-Rh, נעשה שימוש בסרה אנטי-Rh (לפחות שתי סדרות שונות). בנוכחות אנטיגן Rh על הממברנה של אריתרוציטים שנחקרו, מתרחשת אגלוטינציה של תאים אלה.

תגובת ספיגת המד(RGAD). ספיגת המד היא חיבור של אריתרוציטים עם פני התאים מושפעי הנגיף, על בסיס הקשר של קולטני הנגיף הממוקמים על פני התא הפגוע עם קולטני אריתרוציטים, מה שמוביל להידבקותם ההדדית בדומה לתגובת ההמגלוטינציה. היתרון של תגובה זו הוא שהיא הופכת לחיובית עוד לפני הופעת שינויים ציטופתיים מובהקים בתאים נגועים.

ישנם הבדלים בסוג הספיחה (מפוזר, מוקד), סוג אריתרוציטים נספגים (אדם, קופים, חזירים וכו'), הטמפרטורה שבה התגובה ממשיכה (37 מעלות צלזיוס, 0 מעלות צלזיוס), הנוכחות של elution (כן, לא). ניתן להאט את G. על ידי דגירה ראשונית של תאי ה-to-ry הנגועים בנגיף עם אנטי-סרום ספציפי לנגיף. תגובת העיכוב של ג' משמשת לזיהוי וירוסים.