(קישור למאמר השלישי בקובץ זה), המאפשר להעריך את יכולת הגוף להתנגד למחלות זיהומיות ולהראות את שלב המחלה, בדיקת ספיגה חיסונית מקושרת אנזים (ELISA) משחקת תפקיד חשוב. ביצוע מחקר זה מאפשר לך להעריך באופן מקיף את פעילות התפקוד המגן של הדם ולזהות את מצב הכשל החיסוני בפתולוגיות זיהומיות, כמו גם מחלות דם, תהליכים אוטואימוניים ובעיות הורמונליות.
איך אפשר לכסות כל כך הרבה יעדים בניתוח אחד, ואילו אינדיקציות יש ליישומו? בואו ננסה להבין את זה.
מהי בדיקת דם המבוצעת בשיטת ELISA?זוהי בדיקת מעבדה המאפשרת לקבוע נוכחות של נוגדנים ספציפיים (גורמי דם מגנים בעלי אופי חלבוני) לאנטיגנים מסוימים (סוכנים פתוגניים). בין הנוגדנים, יש חשיבות עיקרית לאימונוגלובולינים, שיכולים להתקיים בצורה של קומפלקסים אימונו.
אימונוגלובולינים מיוצרים כתוצאה מתגובות נוירוהומורליות אנושיות מורכבות המתרחשות כתגובה להחדרת אנטיגנים זרים. כל סוג של גורם פתוגני מייצר נוגדנים ספציפיים משלו. הם פועלים על ידי "קשירת" אנטיגן או מיקרואורגניזם פתולוגי, ויוצרים תרכובת מורכבת של "אנטיגן-נוגדן", ולאחריה ניטרול, תמוגה אנזימטית, תגובות פגוציטוזיס והסרה מהגוף.
הערה:על ידי נוכחותם של קומפלקסים מסוימים, שיטת ELISA קובעת את סוג הפתוגן או החומר המזיק הקיים במטופל.
אתה יכול ללמוד את העקרונות הבסיסיים של תפקוד החסינות האנושית על ידי צפייה בסקירת הווידאו הזו:
מהם אימונוגלובולינים?5 מחלקות עיקריות של אימונוגלובולינים התגלו ונחקרו - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. תפקידם של השאר עדיין לא הובהר במלואו והוא נמצא במחקר מדעי.
הערה:האימונוגלובולינים של מחלקות A, M ו-G הם בעלי חשיבות רבה ברפואה המעשית האינפורמטיביות של ההגדרה מבוססת על מרווחי זמן שונים של הופעתם, מקסימום והיעלמותם.
הבה נשקול את הנושא הזה ביתר פירוט.
המשימה העיקרית של אימונוגלובולין A (IgA) היא תפקודי ההגנה של הממברנות הריריות של דרכי הנשימה, מערכת העיכול ומערכת השתן. בהתפרצות החריפה של המחלה, אי אפשר לזהות אותם. קומפלקסים מגנים אלה מופיעים רק מהשבוע השני להופעת המחלה, לפעמים מאוחר יותר. עיקר האימונוגלובולין A מרוכז ברקמות ריריות. בערך 80%. שאר הנוגדנים מסתובבים בדם. התפקיד העיקרי הוא נטרול והרס של מיקרואורגניזמים. לאחר שכוך הביטויים החריפים של המחלה, כמות האימונוגלובולינים הללו מתחילה לרדת ונעלמת לחלוטין עד 8 שבועות לאחר הופעת המחלה. אם מתגלה IgA במועד מאוחר יותר, הדבר מצביע על תהליך כרוני.
הסמנים העיקריים והראשונים של השלב החריף של התפתחות הפתולוגיה הם אימונוגלובולינים מסוג M (IgM). הם מתגלים עד היום החמישי להופעת המחלה. ניתן לקבוע את נוכחותם בדם תוך כ-6 שבועות. ואז הם מתחילים להיעלם במהירות.
התגובה החיסונית השיורית מאופיינת בנוכחות אימונוגלובולינים G (IgG) בדם. הופעת גורמים אלו בדם מתגלה כחודש לאחר הופעת המחלה. בעתיד, הם יכולים להיקבע במשך חודשים רבים, שנים ואפילו לכל החיים, תוך ביצוע תפקיד מגן מפני החזרה (הישנות) של המחלה, ובמקרים מסוימים להפוך את ההתפתחות המשנית של הפתולוגיה לבלתי אפשרית. אם כמות האימונוגלובולין G מתחילה לעלות שוב, אזי ניתן לחשוד בזיהום חוזר. מסקנה דומה ניתן להסיק על ידי ביצוע שתיים או שלוש דגימות שנלקחו במרווח של שבועיים.
אימונוגלובולין D (IgD) ממוקם על לימפוציטים B ונמצא בריכוז נמוך אצל אנשים בריאים. לאחר 10 שנות חיים הוא מגיע לערכים המקסימליים שלו. כמות האימונוגלובולין D עולה במהלך ההריון, בחולים עם מחלות רקמת חיבור מערכתיות, ומחלות הנגרמות ממצב של כשל חיסוני.
אינדיקציות לרישום אנזים אימונואסאי בדיקת דםקביעת נוגדנים לנוכחות בגוף של חיידקים פתוגניים הגורמים:
- טריכומוניאזיס;
- ureaplasmosis ו
יש עלייה בכמות האימונוגלובולינים ועם.
אבחון מתבצע כדי לזהות:
- מחלות הרפטיות;
- קבוצות של צהבת ויראלית;
- וירוס אפשטיין בר;
- ציטומגואלווירוס.
באמצעות ELISA ניתן לקבוע נוכחות של נוגדנים ל-600 סוגי אלרגנים, לזהות את מצב הכשל החיסוני, לערוך בדיקה מקיפה לפני ניתוח השתלה ולערוך ניתוח מקיף של יעילות הטיפול.
ELISA היא שיטה נוספת לאיתור תאים סרטניים.
כיצד מתבצעת ELISA בדם?
עבור בדיקת אנזים חיסונית, ברוב המקרים, נעשה שימוש בדם של המטופל לפעמים רקמת זגוגית, נוזל תעלת עמוד השדרה ומי שפיר.
דם נשאב דרך מחט הזרקה לתוך מזרק מהווריד הקוביטלי. המחקר מתבצע על קיבה ריקה. יש לזכור כי נטילת תרופות מסוימות עשויה להשפיע על תוצאת הבדיקה. לפני תרומת דם, עליך להימנע מעישון ושתיית אלכוהול. שימוש בסמים עלול לעוות את התוצאות.
במקרה של ערכים שליליים של אימונוגלובולינים IgM, IgG, IgA, אנו יכולים לדבר על היעדר המחלה או השלב הראשוני שלה אפשרי גם עם החלמה מלאה לאחר פרק זמן משמעותי.
אם IgA ו-IgM לא מתגלים, וה-IgG חיובי, אז ככל הנראה אנחנו מדברים על חסינות שנוצרה לאחר מחלה זיהומית, או לאחר חיסון.
במקרה של טיטר גבוה של IgM עם ערכים שליליים של IgG ו-IgA, ניתן להסיק שיש מחלה זיהומית חריפה.
ערכים חיוביים סימולטניים של תוצאות אימונוגלובולינים - IgA, IgM, IgG אופייניים לשלב החריף של הישנות של מחלה כרונית קיימת.
עבור זיהום כרוני שנמצא בשלב הירידה של התהליך (הפוגה), ELISA מציג ערכים שליליים של אימונוגלובולין M (IgM), בעוד שהתוצאה של אימונוגלובולינים G (IgG) ו-A (IgA) תהיה חיובית.
יתרונות שיטת בדיקת הדם של אנזים immunoassayהיתרונות העיקריים של שיטת ELISA הם:
- עלות נמוכה של ניתוח;
- ספציפיות אבחנתית, דיוק;
- בקרה דינמית (חזרה על הניתוח כדי לקבוע את יעילות הטיפול ושלבי המחלה);
- אפשרות לערוך בדיקות המוניות באזורי זיהום;
- מהירות השגת תוצאות;
- פשטות יחסית של ניתוח;
- האפשרות להשתמש בטכנולוגיית מידע בעיבוד;
- בטיחות וחוסר כאב עבור המטופל.
ההיבט השלילי העיקרי של המחקר הוא האפשרות לקבל נתונים שליליים שקריים וחיוביים שגויים. הגורם לאי הבנות עשוי להיות ליקויים טכניים או שימוש בתרופות, שעלולים לעוות את התמונה.
ELISA משמש לזיהוי:
- (אסקריס, תולעי סיכה);
- צורות חריפות וכרוניות של אופיסטורכיאזיס;
- טריכינוזה;
- הנוכחות של Giardia (כניתוח נוסף);
- צורות של לישמניאזיס;
- אמוביאזיס;
- תוכן טוקסופלזמה;
לסיכום, יש לציין כי האימונולוגיה המודרנית נמצאת כל הזמן בשלב הפיתוח, מחפשת שיטות חדשות לאבחון וטיפול במחלות.
סטפננקו ולדימיר, מנתח
בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA) היא בדיקת מעבדה המבוססת על הספציפיות ומידת הסלקטיביות הגבוהה של התגובה האימונולוגית "אנטיגן-נוגדן". נהוג להבחין בכמה עשרות וריאציות של ELISA. הפופולרי ביותר הוא הבדיקה האימונו-פאזית הטרוגנית או ELISA (בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים).
אורז. 1
בדיקת אנזימים חיסונית משמשת לשתי מטרות: במידת הצורך, כדי לקבוע את נוכחותם של אנטיגנים של הגורם הסיבתי של כל זיהום, או (אשר נהוג לעתים קרובות יותר) כדי לקבוע את נוכחותם של נוגדנים מסוג IgA, IgM, IgG ל- אנטיגן של הגורם הסיבתי של המחלה. באמצעות ELISA, נוגדנים כמעט לכל זיהום המועבר במגע מיני נקבעים.
העיקרון של בדיקת אנזים אימונו מבוססת על התגובה החיסונית של אנטיגן עם נוגדנים, כאשר על ידי הצמדת תווית אנזים לנוגדנים, החוקר קובע את תוצאות תגובת נוגדן-אנטיגן, תוך רישום הופעה או שינוי ברמת האנזימטית. פעילות.
התגובה הראשונה נצפית בין האנטיגן הפתוגן המטוהר (Ag) לבין ה-Ig המותקן (Ab) על ידי קיבוע הצלחת של האימונולוג למישור הבארות.
התגובה האימונולוגית השנייה מתבצעת כדי לזהות את הקומפלקסים החיסונים המתעוררים. כאן משתמשים ב-Ig קשור ספציפית כאנטיגן, ומשתמשים בצמוד עם נוגדנים נגדו - Ig (Ab) ל-Ig אנושי ספציפי, המסומן באנזים K (פרוקסידאז). התגובה האנזימטית המתרחשת לאחר מכן מזורזת על ידי החלק האנזימטי של המולקולה המצומדת. חומר חסר צבע הנקרא כרומוגן משמש כמצע תגובה במהלך התגובה, הכרומוגן מקבל צבע. כמות האימונוגלובולין בדגימה נקבעת על פי עוצמת הצביעה של הבאר.
עם השלמת התגובה, מתבצעת פוטומטריה של הבאר, והתוצאות נרשמות באמצעות מכשיר מיוחד. עיבוד מתמטי של תוצאות המחקר מראה נוכחות וכמות של נוגדנים אופייניים בדגימה.
עבור serodiagnosis, צלחת פוליסטירן 96 בארים משמש, על המשטחים הצדדיים של התאים אשר האנטיגן נספג מראש. כאשר הסרום הבדיקה מתווסף לבארות הצלחת, נוגדנים הומולוגיים אליו מחוברים לאנטיגן. לאחר מכן מכניסים לבארות נוגדנים אנטי-אנושיים המסומנים באנזים (אימונוגלובולינים). אם סרום הבדיקה מכיל נוגדנים הניתנים לזיהוי, הם יופיעו כאנטיגנים איתם יגיבו הנוגדנים המסומנים. כרומוגן (צבע) שנוסף לאחר הכביסה יאפשר רישום התגובה על ידי הצביעה האופיינית של התאים. עוצמת צבע זה תהיה פרופורציונלית לשיעור האנזים, ובהתאם, לכמות הנוגדנים.
על ידי מדידת הצפיפות האופטית (OD) של הנוזל בתא והשוואתו לדגימת תבנית, מחושב ריכוז הנוגדנים ליחידת נפח. לרוב, התוצאה מחושבת ביחידות OP. זה אופייני שכל מערכת בדיקה מצוידת באינדיקטורים משלה לפתולוגיה ונורמליות, כמו גם אינדיקטורים לרישום התוצאות, אותם יש לקחת בחשבון בעת פירוש התוצאות.
הוונרולוגיה המודרנית משתמשת בטכניקות של בדיקת אנזים אימונו כדי לאבחן עגבת, דלקת כבד נגיפית וזיהומי HIV. ELISA משמש גם לאבחון של ציטומגלווירוס וזיהומים כלמידיאלים, זיהומים ממקור הרפס. באמצעות אנזים אימונואסאי, נקבעים נוגדנים למחלות זיהומיות שונות, רמת ההורמונים, סמני סרטן ונוגדנים עצמיים.
ידוע כי קביעת נוכחות ורמת הנוגדנים בדם במהלך האבחון הראשוני של זיהומים המועברים במגע מיני אינה מומלצת. במקרה זה, פנייה לטכניקת האנזים החיסונית תהיה מוצדקת לחלוטין. ELISA מסוגלת בהחלט לזהות עגבת. אתה רק צריך לזכור שהנוכחות של נוגדנים בסרום מעידה אך ורק על מגע של הגוף עם פתוגנים בעבר או בהווה.
ולריה 22-08-2018 16:01:18ה-MRI חיובי חלש, ועגבת טופלה לפני 8 חודשים. למה זה יכול להיות המקרה?
פנה לרופא עגבת. בדיקות למעקב אחר ריפוי עגבת נעשות במתחם (RPGA, immunoblot). ו"עקבות" של אבחנה זו עשויים להיות נוכחים בניתוחים במשך שנים רבות.
סניה 19-08-2018 13:02:00אם 1-40 חיובי וההתייחסות שלילית הייתי חולה קודם וטופלתי, מה זה אומר?
ELISA לאיזה זיהום? בבקשה תבדוק.
אירינה 2018-07-25 12:39:58אחר הצהריים טובים בשנת 2002, בעלי ואני סבלנו מעגבת ראשונית. אני כרגע בהריון. עשינו בדיקות: RMP שלילי, IgM שלילי IgG שלילי, IFA חיובי, RPGA 4+. הרופא אומר שיש צורך בטיפול מונע ב-CVD בשבוע 20, 6 זריקות ליום למשך 10 ימים. אנא ספר לי אם יש לי אינדיקציות לטיפול כה רציני.
זו נקודה מאוד עדינה, כי בדיקות חיוביות שגויות אפשריות במהלך ההריון. יש צורך בהתייעצות עם עגבת.
מידע מהמרשם של המדינה לציוד רפואי:מספר ערך רישום ייחודי
מספר רישום של המכשיר הרפואי
פס"ר 2011/10506
תאריך רישום המדינה של המכשיר הרפואי
שם המוצר הרפואי
סט ריאגנטים "DS-ELISA-ANTI-LEWIS-TOTAL ANTIBODIES" מערכת בדיקת אנזימים אימונוסורבנט לאיתור נוגדנים לגורם הסיבתי של עגבת לפי TU 9398-182-05941003-2010
ערכת הריאגנטים זמינה בשלושה סטים: - סט 1 מיועד לבצע 96 (צלחת מתקפלת אחת) קביעות, כולל בקרה, המיועדות הן לבדיקה ידנית והן לבדיקה על מנתחי ELISA מסוג פתוח עם אפשרות לשימוש חלקי. - סט 2 נועד לבצע 192 (שתי לוחות מתקפלות) קביעות, כולל בקרות, המיועדות הן לבדיקה ידנית והן לבדיקה על מנתחי ELISA מסוג פתוח עם אפשרות לשימוש חלקי - סט 3 מיועד לבצע 480 (חמישה טבליות מתקפלות) קביעות, כולל בקרה, מיועדות הן להגדרה ידנית והן להגדרה על מנתחי ELISA מסוג פתוח עם אפשרות לשימוש חלקי. הערכה כוללת את הריאגנטים הבאים: - חומר אימונוסורבנט - טבלית פוליסטירן מתקפלת, שבבארותיה נספגים אנטיגנים רקומביננטיים - אנלוגים לחלבוני T. Pallidum: סט 1 (1 טבליה), סט 2 (2 טבליות), סט 3 (5) טבליות), - מצומד: סט 1 (בקבוק אחד 14.0 מ"ל), סט 2 (בקבוק אחד 28.0 מ"ל), סט 3 (2 בקבוקים 28.0 מ"ל כל אחד), - K+ - דגימת ביקורת חיובית: סט 1 (בקבוקון אחד 0.25 מ"ל), סט 2 (בקבוקון 1 0.5 מ"ל), סט 3 (בקבוקון 1 1.0 מ"ל), - K- - דגימת ביקורת שלילית: סט 1 (בקבוקון אחד 0.25 מ"ל), סט 2 (בקבוקון אחד 0.5 מ"ל), סט 3 (בקבוקון אחד 1.0 מ"ל), - PR - תמיסת כביסה: סט 1 (בקבוקון אחד 50.0 מ"ל), סט 2 (בקבוקון 1 50.0 מ"ל), סט 3 (2 בקבוקים של 120.0 מ"ל), - מגיב עצור: סט 1 (בקבוק אחד). של 25.0 מ"ל), סט 2 (בקבוק אחד של 50.0 מ"ל), סט 3 (2 בקבוקים של 50.0 מ"ל), - TMB - תמיסת מצע: סט 1 (בקבוק אחד של 14.0 מ"ל), סט 2 (2 בקבוקים של 14.0 מ"ל) , סט 3 (5 בקבוקים של 14 .0 מ"ל) או - SB - תמיסת חיץ מצע: סט 1 (1 פל. 25.0 מ"ל), סט 2 (1 fl. 25.0 מ"ל), סט 3 (2 בקבוקים של 50.0 מ"ל) או - TMB - תמיסה המכילה 3,3",5,5"-tetramethylbenzidine: סט 1 (בקבוק אחד של 2.5 מ"ל), סט 2 (בקבוק אחד 2.5 מ"ל), סט 3 (2 בקבוקים 3.5 מ"ל כל אחד). אביזרים: - סרטי הגנה לצלחות ELISA: סט 1 (1 יח'), סט 2 (2 יח'), סט 3 (5 יח'), - טיפים חד פעמיים: סט 1 (16 יח'), סט 2 (32 יח') .), סט 3 (80 יח'), - אמבטיות פלסטיק עבור ריאגנטים נוזליים: סט 1 (2 יח'), סט 2 (4 יח'), סט 3 (10 יח'), - שקיות ניילון עם Zip- מנעול: סט 1 (1 חלק), סט 2 (2 חלקים), סט 3 (3 חלקים). ערכת המשלוח כוללת: סט ריאגנטים (ניתן לצייד בנוסף באביזרים), הוראות שימוש ודרכון.
שם הארגון - מבקש המכשיר הרפואי
מיקום הארגון המבקש למכשיר הרפואי
כתובת משפטית של הארגון המבקש עבור המכשיר הרפואי
603014, רוסיה, ניז'ני נובגורוד, st. קומינטרן, 47
שם יצרן המכשור הרפואי או יצרן המכשור הרפואי
LLC "NPO "מערכות אבחון"
מיקום ארגון-יצרן המכשיר הרפואי או ארגון-יצרן המכשיר הרפואי
603093, רוסיה, ניז'ני נובגורוד, st. יבלונביה, 22, ת.ד 69
מחיר לפי בקשה
אתה יכול להוסיף פריט לעגלת הקניות שלך על ידי ציון הכמות
יצרן: מערכות דיאגנוסטיקה
מדינה רוסיה
יחידה מידה: סט
סוג האריזה: קופסת קרטון
מאמר: L-1823
תיאור
מערכת בדיקת אנזים אימונואסאי לאיתור נוגדנים מסוגים G, M ו-A ל-Treponema pallidum (T. pallidum) בסרום דם אנושי (פלזמה) ונוזל מוחי לצורך אבחון עגבת, סט שלם של ריאגנטים לקביעות 96x2, מתאים ל שיטות ידניות ומנתחי בדיקה אוטומטיים. השיטה מבוססת על עקרון ה"מלכודת", המורכב מהעובדה שנוגדנים אנטי-טרפונמאליים ספציפיים מכל המעמדות הקיימים בדגימה נקשרים בו זמנית לאנטיגנים רקומביננטיים - אנלוגים של חלבונים אימונודומיננטיים של T. pallidum, קבועים בבארות הצלחת, ולאותם אנטיגנים המסומנים בחזרת פרוקסידאז, כאשר מדגרים במשותף דגימות של סרום דם אנושי (פלזמה) או נוזל מוחי והמצומד. שינוי בצבע של תערובת המצע-כרומוגנית המכילה TMB כאשר היא מתווספת לבארות הצלחת מעיד על נוכחות של נוגדנים ספציפיים ל-Treponema pallidum בדגימות הבדיקה.
מטרה פונקציונלית
גילוי נוגדנים ל-Treponema pallidum ממלא תפקיד חשוב באבחון של עגבת, שכן לא ניתן לבודד את T. pallidum מתרבית תאים, ולעיתים אינן זמינות דגימות לקביעה ישירה של הפתוגן בשלבים סמויים ומאוחרים של המחלה. בסרודיאגנוזה של עגבת, נעשה שימוש בבדיקות לא-טרפונמל (RMP, RPR, VDRL) ו-treponemal (RPGA, RIF, ELISA). בדיקות אימונו של אנזימים לקביעת סך הנוגדנים משמשות להקרנה המונית של דם התורם ולאבחון עגבת כחלק ממכלול בדיקות סרולוגיות. לאחר טיפול מוצלח, התגובתיות של בדיקות טרפונמל ברוב המקרים נשארת
מפרטיםהגדר תוכן:
1. פלטה מתקפלת מפוליסטירן 96 בארות - 2 יחידות,
2. המצומד הוא נוזל צהוב שקוף,
3. בקרה חיובית - נוזל אדום שקוף,
4. בקרה שלילית - נוזל ירוק שקוף,
5. תמיסת שטיפה, תרכיז, pH מ-6.9 עד 7.6,
6. TMB הוא נוזל שקוף חסר צבע,
7. תמיסת מצע - נוזל שקוף חסר צבע, pH ~4.2.
8. עצור ריאגנט (0.2M),
9. הוראות שימוש ותעודת איכות.
תנאי אחסון: בטמפרטורה של +2...8 מעלות צלזיוס, הקפאה אינה מקובלת.
חיי המדף הם 15 חודשים מתאריך הייצור המצוין על תווית הערכה.
עמידה בדרישות TU 9398-182-05941003-2010.
רשום ב-Roszdravnadzor.