HEMAGLUTINACIJA

hemaglutinacija(iz grške háima krvi in ​​lat. agglutinatio lepljenje), lepljenje in obarjanje eritrocitov pod vplivom bakterij, virusov, toksinov itd., ki se lahko adsorbirajo na površini eritrocitov, pa tudi hemaglutininov. Eritrocite ene živali lahko aglutinira serum druge živali zaradi prisotnosti normalnih izohemaglutininov (protiteles) v njem. S pomočjo reakcije G. namestiti. Fenomen G. uporabljajo v mikrobioloških in imunoloških študijah.

Razlikovati med neposrednim ali aktivnim in posrednim ali pasivnim, G. Naravnost G. zaradi neposrednega vpliva bakterijskih in virusnih povzročiteljev na eritrocite. Hkrati hemaglutinini medsebojno delujejo z mukoproteaznimi naravnimi receptorji, ki se nahajajo na površini eritrocitov s pomočjo encima mucinaze, kar povzroči adsorpcijo antigena. Posledično suspenzija eritrocitov (na primer piščanca) tvori široko oborino v obliki dežnika z neenakomernimi robovi. Ta reakcija ni specifična, poteka brez sodelovanja imunskega seruma. neposredno G. uporablja se v seroloških študijah, zlasti pri določanju delovne razredčitve antigena, uporabljenega v reakciji zaviranja G., ki temelji na zakasnitvi hemaglutinacijskega delovanja antigena z imunsko specifičnim serumom. neposredno G. uporablja se tudi za približno diagnozo nekaterih virusnih bolezni (konjska influenca, ptičja kuga, atipična kokošja kuga, račja gripa). posredno G.(RNHA) temelji na sposobnosti senzibiliziranih eritrocitov (z adsorpcijo antigena na njih), da aglutinirajo s homolognimi protitelesi imunskega seruma. Zaradi visoke občutljivosti in specifičnosti posrednega G. uporablja se za diagnosticiranje številnih virusnih, bakterijskih in rikecioznih bolezni. Obstaja več modifikacij posrednega G. reakcije inhibicije, zakasnitve, nevtralizacije protiteles itd. S pomočjo RNHA in njegovih modifikacij se tako protitelesa v krvnem serumu živali in ljudi (pri uporabi eritrocitov, senzibiliziranih z znanim antigenom) kot antigen (pri uporabi eritrocitov, senzibiliziranih z določenimi protitelesa) je mogoče zaznati. Za reakcijo uporabimo oprane eritrocite različnih živalskih vrst (najpogosteje eritrocite ovac in kokoši). Sposobnost eritrocitov, da adsorbirajo velike molekularne antigene beljakovinske narave, se poveča po njihovi obdelavi s taninom. Za podaljšanje roka uporabnosti eritrocitov jih konzerviramo s formalinom. Diagnostikumi, pridobljeni iz formaliziranih eritrocitov, lahko ohranijo svojo aktivnost dolgo časa. V prisotnosti že pripravljenih diagnostičnih eritrocitov je formulacija reakcije močno poenostavljena. V veterinarski praksi se RNGA uporablja za diagnosticiranje nekaterih (predvsem virusnih) bolezni živali - klasične kokošje kuge, atipične kokošje kuge, kravjih koz, konjske gripe, prašičje in račje gripe, puloroze - ptičjega tifusa itd. Glej tudi,.

Literatura:
Laboratorijske raziskave v veterinarski medicini, M., 1971;
Priročnik mikrobioloških in viroloških raziskovalnih metod, ed. M. O. Birger, 2. izd., M., 1973.

Veterinarski enciklopedični slovar. - M.: "Sovjetska enciklopedija". Glavni urednik V.P. Šiškov. 1981 .

Sopomenke:

Oglejte si, kaj je "HEMAGLUTINACIJA" v drugih slovarjih:

hemaglutinacija- hemaglutinacija... Pravopisni slovar

hemaglutinacija- gneča, aglutacija Slovar ruskih sinonimov. hemaglutinacija samostalnik, število sinonimov: 2 aglutinacija (3) … Slovar sinonimov

HEMAGLUTINACIJA- (iz hemo... in lat. agglutinatio vezava) vezava in obarjanje eritrocitov, suspendiranih v tekočini pod vplivom različnih dejavnikov, na primer protiteles, bakterij ali virusov. Hemaglutinacijski test se uporablja za diagnosticiranje ... ... Veliki enciklopedični slovar

Hemaglutinacija- proces lepljenja eritrocitov v s prostim očesom vidne agregate. G. vzrok: 1) At do eritrocitov in heterofilnih Ag; 2) Ab do Ag, tujek za eritrocite, adsorbiran na njihovi površini (glej pasivno reakcijo hemaglutinacije); 3) ... Mikrobiološki slovar

HEMAGLUTINACIJA- HEMAGLUTINACIJA, aglutinacija (zlepljanje) eritrocitov pri mešanju s homolognimi serumi. Če človeške eritrocite nadomestimo s serumom iste osebe, potem s stresanjem dobimo enotno suspenzijo. Če rdeče krvne celice ene osebe ... ... Velika medicinska enciklopedija

hemaglutinacija- Pojav, ki je osnova metode za določanje protiteles, ki temelji na njihovi aglutinaciji eritrocitov kot rezultat vezave na antigene samih eritrocitov ali na druge antigene, umetno pritrjene na površino eritrocitov. ... ... Priročnik tehničnega prevajalca- (hem + aglutinacija) aglutinacija eritrocitov ... Veliki medicinski slovar

Hemaglutinacija- iz grščine. haima kri in lat. agglutinatio aglutinacija), proces aglutinacije in kasnejše sedimentacije rdečih krvnih celic; povzročajo hemaglutinini (glej. Hemaglutinini), bakterije in virusi, povzročitelji, ki se lahko adsorbirajo na ... ... Velika sovjetska enciklopedija

hemaglutinacija- lepljenje (aglutinacija) eritrocitov. Razvija se tudi s transfuzijo nezdružljive krvi.

Hemaglutinacijska reakcija (RHA)

RGA temelji na dejstvu, da se nekatere vrste bakterij in virusov lahko adsorbirajo na površini eritrocitov različnih vrst živali (in ptic), zaradi česar se ti zlepijo in tvorijo aglutinacijo. (neposredno RGA).

Adsorpcija antigena (bakterije, virusi) na površini eritrocitov se ne kaže vedno s tvorbo vidne oborine; poleg tega je RGA nespecifičen, ker lahko eritrociti iste živalske vrste adsorbirajo različne antigene.

Reakcija pasivne (posredne) hemaglutinacije (RPHA) je specifična. Za njegovo nastavitev se predhodno pripravi eritrocitni diagnostik (eritrociti, na katerih je adsorbiran antigen). V ta namen sterilno odvzamemo ovnovo (ali petelinovo) kri, jo defibriniramo in s 3-5-kratnim centrifugiranjem večkrat speremo v raztopini fosfatnega pufra (pH 7,2). Supernatant odstranimo, koncentracijo eritrocitov uravnamo na 2,5 % (1:40). 2,5% suspenziji eritrocitov dodamo v enakem volumnu (1 ml ali 0,5 ml) suspenzijo bakterij proučevane mikrobne vrste v koncentraciji 5-10 milijard celic na 1 ml. Eritrociti zlahka adsorbirajo antigen polisaharidne narave. Za adsorpcijo antigena beljakovinske narave eritrocite predhodno obdelamo s taninom v razredčitvi 1: 20 000. Eritrocite v kombinaciji z dodanim antigenom pustimo za senzibilizacijo (adsorpcijo) 2 uri v termostatu (37 ° C) , nato ponovno centrifugiramo pri 3-4 tisoč obratih / min 5 minut z raztopino fosfatnega pufra (slika 9.13).

Nastali eritrocitni diagnostikum damo v epruvete (ali vdolbinice v ploščo iz pleksi stekla) in mu dodamo standardni imunski serum.

V pozitivnih primerih pride do RGA - izgube eritrocitov v obliki značilne kosmičaste ali zrnate usedline, razporejene po celotni površini dna epruvete (hemaglutinat). To pomeni, da je vrsta mikroba (antigena), ki se preučuje, specifična za protitelesa imunskega seruma. V negativnih primerih se nezlepljene rdeče krvničke usedejo na dno v obliki majhnega enakomernega kroga.

Za večjo zanesljivost rezultatov RPGA, zakasnitev reakcije(zaviranje) pojav hemaglutinacije(RZGA) ali njena modifikacija - reakcija nevtralizacije protiteles(RIA).

riž. 9.13. Reakcija pasivne hemaglutinacije (shema): Er - eritrociti: AG - antigen: AT - protitelo

Bistvo RZGA sestoji iz dejstva, da se reakcija aglutinacije nastavi s specifičnim diagnostičnim serumom in testiranim antigenom (kot antigen se uporablja proučevana vrsta mikroba). To zmes hranimo 1-2 uri pri 37°C, nato dodamo eritrocite. Če je testni antigen homologen diagnostičnim serumskim protitelesom, medsebojno delujejo in dodani eritrociti ne aglutinirajo – rezultat reakcije je pozitiven. Če testni antigen ni homologen s serumskimi protitelesi ali ga material ne vsebuje, potem dodani eritrociti adsorbirajo antigen in pride do RHA - izvid RHA je negativen, vrsta mikroba (antigena), ki se testira, ni ugotovljena.

Način nastavitve PH A je, da vzamejo enake količine in zmešajo diagnostični imunski serum z različnimi razredčinami testnega materiala (želenega antigena), pustijo kontaktno 1-2 uri, nato dodajo eritrocite, senzibilizirane z določenim (znanim) antigenom, specifičnim za serum. protitelesa (eritrocitni diagnostikum). Ko želeni antigen reagira s serumskimi protitelesi, se ta nevtralizirajo in dodani eritrociti ne pride do aglutinacije, RHA ne pride – rezultat PHA je pozitiven. Če testni material ne vsebuje antigena, specifičnega za protitelesa uporabljenega seruma, protitelesa ne bodo nevtralizirana. Zato se ob dodajanju eritrocitnega diagnostika pojavi aglutinacija (hemaglutinacija) eritrocitov, rezultat RHA pa je negativen. Nevtralizacijski test protiteles je zelo občutljiva metoda za dokazovanje antigena ne samo v suspenziji živih (ali ubitih) bakterij, ampak tudi v suspenziji zmletega tkiva različnih organov, nativnih in segretih izločkov ter izločkov obolelega organizma.

1. Hemaglutinacijska reakcija

(RGA)

metoda za odkrivanje in identifikacijo virusov, ki temelji na sposobnosti določenih virusov, da selektivno lepijo eritrocite določenih živalskih vrst.

RHA temelji na pojavu adhezije eritrocitov, ki nastane pod vplivom različnih dejavnikov. Razlikujemo neposredno in posredno hemaglutinacijo. Pri neposredni reakciji hemaglutinacije se eritrociti zlepijo, ko se nanje adsorbirajo določeni antigeni, na primer virusi.

V seroloških študijah se uporablja reakcija inhibicije neposredne hemaglutinacije, ko virus, izoliran od bolnika, nevtraliziramo s specifičnim imunskim serumom in nato kombiniramo z rdečimi krvničkami. Odsotnost hemaglutinacije kaže na ujemanje virusa in uporabljenega imunskega seruma.

Posredno hemaglutinacijsko reakcijo (pasivno hemaglutinacijo) opazimo, ko eritrocitom, predhodno obdelanim (senzibiliziranim) z različnimi antigeni, dodamo imunski serum ali pacientov serum, ki ima ustrezna protitelesa. Obstaja specifična vezava eritrocitov, njihova pasivna hemaglutinacija.

Reakcija indirektne ali pasivne hemaglutinacije je po občutljivosti in specifičnosti boljša od drugih seroloških metod in se uporablja pri diagnozi okužb, ki jih povzročajo bakterije, rikecije in protozoji.

Metoda določanja reakcije indirektne hemaglutinacije je sestavljena iz več stopenj. Najprej eritrocite speremo z izotonično raztopino natrijevega klorida, nato pa po potrebi (pri uporabi antigenov beljakovinske narave) obdelamo z raztopino tanina 1: 20.000 in senzibiliziramo s topnimi antigeni. Po izpiranju s pufrano izotonično raztopino natrijevega klorida je eritrocitni antigen pripravljen za uporabo. Testne serume razredčimo z izotonično raztopino natrijevega klorida v epruvetah ali posebnih plastičnih ploščah z luknjami, nato vsaki razredčini seruma dodamo eritrocitni diagnostik. Rezultati reakcije indirektne hemaglutinacije se upoštevajo glede na naravo usedline eritrocitov, ki nastane na dnu epruvete. Rezultat reakcije se šteje za pozitiven, pri katerem eritrociti enakomerno pokrivajo celotno dno epruvete. Z negativno reakcijo se eritrociti v obliki majhnega diska ali "gumba" nahajajo na sredini dna epruvete.

uporaba RHA

RGA se uporablja za indikacijo (odkrivanje) virusov v okviru indikativne diagnostike, za titracijo virusov s hemaglutinacijskimi lastnostmi (določitev hemaglutinacijskih enot - AE).

Adsorpcija virusa

Osnova pojava aglutinacije, ki jo povzročajo virusi, je adsorpcija virusov na površini eritrocitov, ki jo spremlja lepljenje (aglutinacija) slednjih in obarjanje.

Antigen za RGA

Kot antigen za RHA se vzame vsak material (patološki material v obliki suspenzije iz organov, material okužene KME, tkivne kulture ipd.), v katerem pričakujemo prisotnost virusa. Material mora biti tekoč, brez velikih delcev.

Postavitev okvirnega RGA

Za določitev približne RGA nanesemo eno kapljico snovi, ki vsebuje virus, na čisto in dobro razmaščeno stekleno stekelce, ji dodamo eno kapljico 5% suspenzije eritrocitov in premešamo s stekleno palčko.

Ocena odziva RGA

Reakcijo ocenite s križci (plusi). Pri ocenjevanju reakcije v križnicah je pozornost namenjena naravi usedline. Če so se eritrociti usedli v tankem sloju enakomerno po dnu epruvete (v obliki dežnika), reakcijo ocenimo s štirimi križci.

2. Reakcija inhibicije hemaglutinacije- serološka reakcija, ki temelji na sposobnosti protiteles, da preprečijo aglutinacijo eritrocitov s hemaglutinacijskimi vrstami virusov (adenovirusi, arbovirusi, nekateri enterovirusi, virusi influence in parainfluence, ošpic, reovirusi). Specifična protivirusna protitelesa sodelujejo s površinskimi molekulami hemaglutininov virionov teh virusov in blokirajo njihovo vezavo na komplementarne molekule membrane eritrocitov.

V zadnjem času se reakcija pogosto uporablja v kliničnih viroloških laboratorijih za določanje titrov specifičnih protiteles proti določenim virusom, pa tudi za serološko identifikacijo in tipizacijo izolatov virusa iz kliničnega materiala bolnikov. Uporaba je nekoliko omejena zaradi prisotnosti v krvnem serumu ljudi nespecifičnih zaviralcev virusov, pa tudi naravnih protiteles - aglutininov.

Reakcija inhibicije hemaglutinacije (RTGA). Kljub imenu je princip reakcije v marsičem podoben PH virusov, saj temelji na sposobnosti AT, da veže različne viruse in jih nevtralizira ter onemogoča aglutinacijo eritrocitov. Vizualno se ta učinek kaže v "zaviranju" hemaglutinacije. RTHA se uporablja pri diagnozi virusnih okužb za identifikacijo specifičnih antihemaglutininov in identifikacijo različnih virusov po njihovih hemaglutininih, ki kažejo lastnosti Ag.

Reakcija inhibicije hemaglutinacije

(RTGA)

metoda za identifikacijo virusa ali odkrivanje protivirusnih protiteles v bolnikovem krvnem serumu, ki temelji na pojavu odsotnosti aglutinacije eritrocitov s pripravkom, ki vsebuje virus, v prisotnosti krvnega seruma, imunega nanj.

Reakcija inhibicije hemaglutinacije. Mehanizem in praktična uporaba.

Mnogi virusi imajo sposobnost aglutinacije eritrocitov strogo določenih vrst sesalcev in ptic. Tako virusi gripe in mumpsa aglutinirajo eritrocite kokoši, morskih prašičkov in ljudi, adenovirusi pa aglutinirajo eritrocite podgan in miši. V zvezi s tem so za njihovo odkrivanje v materialu bolnikov ali celičnih kulturah, zarodkih in živalih dali reakcija hemaglutinacije(RGA). Da bi to naredili, v vdolbinicah tablet pripravimo dvakrat večje razredčitve materialov in tekočin, ki vsebujejo virus, in jim dodamo suspenzije eritrocitov, opranih z izotonično raztopino NaCl. Za nadzor spontane aglutinacije se eritrociti zmešajo z enako količino izotonične raztopine NaCl. Mešanice inkubiramo v termostatu pri temperaturi 37°C ali pri sobni temperaturi.

Rezultati RHA se upoštevajo glede na naravo aglutinacije eritrocitov po 30-60 minutah, ko se običajno popolnoma oborijo v kontroli. Pozitivna reakcija je označena s plusi. »++++« je usedlina v obliki dežnika, »+++« je usedlina z vrzelmi, »++« je usedlina z velikimi vrzelmi, »+« je kosmičasta usedlina, obdana z območjem zlepljenih eritrocitov, in “–” – enako ostro izražen sediment eritrocitov v obliki “gumba” kot pri kontroli

Ker je specifična za skupino, RGA ne omogoča določitve vrste virusov. Identificirajo se z reakcije inhibicije hemaglutinacije(RTGA). Za njegovo nastavitev se uporabljajo znani imunski protivirusni serumi, ki se razredčijo v izotonični raztopini natrijevega klorida v dvakratni padajoči koncentraciji in vlijejo v jamice. Vsaki razredčitvi se doda enaka količina tekočine, ki vsebuje virus. Kontrola je suspenzija virusa v izotonični raztopini natrijevega klorida. Plošče z mešanico serumov in virusa hranimo v termostatu 30 minut ali pri sobni temperaturi 2 uri, nato pa vsaki dodamo suspenzijo eritrocitov. Po 30 minutah se določi titer nevtralizirajočega seruma (to je njegova največja razredčitev), ki je povzročila zakasnitev aglutinacije eritrocitov.

RTGA se uporablja pri serološki diagnostiki virusnih bolezni, zlasti gripe in adenovirusnih okužb. Bolje ga je postaviti na enak način kot pH, s seznanjenimi serumi. Štirikratno povečanje titra protiteles v drugem serumu potrdi domnevno diagnozo.

3. Serološko testiranje vam omogoča, da postavite diagnozo v primeru odkrivanja specifičnih protiteles v serumu bolnikov. Za serološke reakcije uporabljamo parne serume, ki jih vzamemo v prvih dneh od začetka bolezni in po 1 do 3 tednih, vendar jih preučujemo sočasno. Povečanje titra protiteles za 4-krat ali več ima diagnostično vrednost. RTGA, RN, RSK, RTGads, RIF, RIA, ELISA se nastavijo z antigeni (diagnostikumi), pripravljenimi iz referenčnih sevov ustreznih virusov.

4. Parno - to pomeni, da se kri odvzame dvakrat z določenim časovnim intervalom. Z zvišanjem titra protiteles se ugotovi, da je prišlo do okužbe. Če se titer protiteles ne spremeni, pomeni, da so ta protitelesa v telesu že dlje časa, sveže okužbe ni.

Največja diagnostična vrednost je študija parnih serumov, odvzetih živalim na začetku in koncu bolezni (v intervalu 14-21 dni). Serum zberemo v sterilne epruvete in shranimo za analizo.

Opis

Komplet za diagnostiko parvovirusne bolezni prašičev je namenjen odkrivanju antigena parvovirusa v suspenziji notranjih organov abortiranih plodov v hemaglutinacijskem testu (HA) in specifičnih protiteles v krvnem serumu prašičev, pa tudi novorojenih pujskov (pred odvzemom kolostrum) v testu inhibicije hemaglutinacije (HA). Reakcija poteka z mikrometodo v jamicah polistirenskih plošč. polistirenske plošče s 96 jamicami za imunološke reakcije; antigen specifično inaktiviran, s hemaglutinacijsko aktivnostjo najmanj 1:128; specifični serum z aktivnostjo v RTGA najmanj 1:256; serum je normalen (negativna kontrola).

Čas analize:

RGA - 2,5-3,5 ure, RTGA - 3,5-4,5 ure (brez časa za pripravo gradiva za študijo).

Načelo metode:

Reakcija hemaglutinacije (RHA) temelji na adheziji eritrocitov, suspendiranih v tekočini, pod vplivom hemaglutinacijskih lastnosti virusa in nastanku ohlapne oborine v obliki dežnika. Bistvo RTGA je nevtralizacija hemaglutinacijskih lastnosti virusa s specifičnimi protitelesi v krvnem serumu, zaradi česar se eritrociti ne zlepijo skupaj in se usedejo na dno ter tvorijo gosto oborino v obliki gumba. .

Pogoji shranjevanja

Set hranimo v suhem in temnem prostoru pri temperaturi od 2 do 8°C. Po raztapljanju lahko komponente kompleta hranite zamrznjene 1 mesec, ponovno zamrzovanje ni dovoljeno.

Uporabno do datuma

Eritrociti (ali delci lateksa) z adsorbiranimi antigeni na njih interagirajo z ustreznimi protitelesi krvnega seruma, kar povzroči, da se eritrociti zlepijo in izpadejo na dno epruvete ali celice v obliki nazobčane usedline. Z negativno reakcijo se eritrociti usedejo v obliki gumba. Reakcija aglutinacije se lahko izvede v mikrovariantah v celicah plošče s 96 vdolbinicami za imunološke študije s koničnim dnom. V vdolbinice tablete dodamo 0,05 ml FSB (pH 7,2-7,4) in pripravimo dvakratne razredčitve testiranih krvnih serumov od 1:2 in več. Nato vsaki celici dodamo 0,005 ml suspenzije glivnih celic v koncentraciji 100.000 glivnih celic na 1 ml. Tableto nežno pretresemo in inkubiramo 2 uri v termostatu pri 37 °C in nato 16-18 ur pri 4 °C. Kot negativno kontrolo uporabimo normalni (negativni) krvni serum in FSB. Rezultati reakcije se upoštevajo z mikroskopom in vizualno ter se določijo v križih po naslednji shemi: (++++) - popolna razsvetlitev tekočine in nastanek aglutinata na dnu luknje v obliki obrnjenega "dežnika", pri stresanju se "dežnik" zlomi na kosmiče; (+++) - nepopolna osvetlitev tekočine in dobro definiran "dežnik"; (++) - opazno razsvetljenje tekočine, "dežnik" je izražen zmerno; (+) - komaj opazno tekoče razsvetljenje, "dežnik" je šibko izražen; (-) - rezultat negativen, tekočina ni postala bistra, na dnu vdolbinice se tvori oborina v obliki gumba, z rahlim stresanjem nastane enotna suspenzija. Titer protiteles je bil vzet kot zadnja razredčitev testnega seruma, v katerem je prišlo do aglutinacije vsaj dveh križnic (++).

Reakcija aglutinacije- to je imunska reakcija interakcije antigena s protitelesi v prisotnosti elektrolitov, antigen pa je v korpuskularnem stanju (eritrociti, bakterije, delci lateksa z adsorbiranimi antigeni). Med aglutinacijo se korpuskularni antigeni zlepijo s protitelesi, kar se kaže s tvorbo kosmičaste oborine. Nastanek kosmičev nastane zaradi dejstva, da imajo protitelesa dva aktivna centra, antigeni pa so polivalentni, tj. imajo več antigenskih determinant. RA se uporablja za identifikacijo patogena, izoliranega iz pacientovega materiala, kot tudi za odkrivanje protiteles proti patogenu v bolnikovem krvnem serumu (na primer reakcije Wright in Huddleson pri brucelozi, Vidalova reakcija pri tifusu in paratifusu). ).

Najlažji način za postavitev RA je reakcija na steklu, to je približna RA, s katero določimo povzročitelja, izoliranega od bolnika. Pri nastavitvi reakcije na stekelcu se nanese diagnostični aglutinacijski serum (v razredčini 1:10 ali 1:20), nato pa se uvede kultura bolnika. Reakcija je pozitivna, če se v kapljici pojavi kosmičasta oborina. V bližini je postavljena kontrola: namesto seruma se nanese kapljica raztopine natrijevega klorida. Če je diagnostični aglutinacijski serum neadsorbiran 1, potem ga razredčimo (na titer – razredčino, do katere naj pride do aglutinacije), t.j. dajte razširjeno RA v epruvete z naraščajočimi razredčinami aglutinacijskega seruma, ki jim dodamo 2-3 kapljice suspenzije patogena, izoliranega od bolnika. Aglutinacija se upošteva glede na količino usedline in stopnjo zbistrenosti tekočine v epruvetah. Reakcija se šteje za pozitivno, če opazimo aglutinacijo v razredčitvi blizu titra diagnostičnega seruma. Reakcijo spremljajo kontrole: serum, razredčen z izotonično raztopino natrijevega klorida, mora biti prozoren, suspenzija mikrobov v isti raztopini mora biti enakomerno motna, brez usedline.

Za določitev protiteles proti patogenu v bolnikovem krvnem serumu se uporablja razširjena RA. Ko ga damo v epruvete, pacientov krvni serum razredčimo in v epruvete dodamo enako količino suspenzije diagnosticuma (suspenzijo ubitih mikrobov). Po inkubaciji določimo največjo razredčino seruma, pri kateri je prišlo do aglutinacije, t.j. nastane oborina (serumski titer). V tem primeru pride do reakcije aglutinacije z O-diagnosticumom (bakterije, ubite s segrevanjem, ki zadržijo termostabilen O-antigen) v obliki drobnozrnate aglutinacije. Aglutinacijska reakcija s H-diagnosticumom (bakterije, ki jih ubije formalin, obdrži toplotno labilen flagelarni H-antigen) je grobozrnata in poteka hitreje.

Reakcija indirektne (pasivne) hemaglutinacije(RNGA ali RPGA) je vrsta RA. Ta metoda je zelo občutljiva. S pomočjo RNGA je mogoče rešiti dve nalogi: določiti protitelesa v bolnikovem krvnem serumu, ki mu je dodan antigenski eritrocitni diagnostik, to so eritrociti, na katerih so adsorbirani znani antigeni; določiti prisotnost antigenov v testnem materialu. V tem primeru se reakcija včasih imenuje reakcija povratne indirektne hemaglutinacije (RONGA). Pri določanju stopnje se testnemu materialu doda protitelesni eritrocitni diagnostik (eritrociti, na površini katerih so adsorbirana protitelesa). Eritrociti v tej reakciji delujejo kot nosilci in so pasivno vključeni v tvorbo imunskih agregatov. S pozitivno reakcijo pasivno zlepljeni eritrociti prekrijejo dno jamice z enakomerno plastjo z nazobčanimi robovi ("dežnik"); v odsotnosti aglutinacije se eritrociti kopičijo v osrednji vdolbini luknje in tvorijo kompakten "gumb" z ostro definiranimi robovi.

Reakcija koaglutinacije uporablja se za odkrivanje patogenih celic (antigenov) z uporabo protiteles, adsorbiranih na Zlati stafilokok, ki vsebuje protein A. Protein A ima afiniteto do Fc fragmenta imunoglobulinov. Zaradi tega se protitelesa vežejo na stafilokok posredno preko fragmenta Fc, fragmenti Fab pa so usmerjeni navzven in lahko interagirajo z ustreznimi mikrobi, izoliranimi od bolnikov. V tem primeru se oblikujejo kosmiči.

Reakcija inhibicije hemaglutinacije (HITA) uporablja se pri diagnozi virusnih okužb in samo okužb, ki jih povzročajo hemaglutinacijski virusi. Ti virusi vsebujejo na svoji površini beljakovino - hemaglutinin, ki je odgovoren za reakcijo hemaglutinacije (RHA), če jo dodamo eritrocitnim virusom. RTGA je blokiranje virusnih antigenov s protitelesi, zaradi česar virusi izgubijo sposobnost aglutinacije rdečih krvnih celic.

Coombsova reakcija - RA za odkrivanje nepopolnih protiteles. Pri nekaterih nalezljivih boleznih, kot je bruceloza, v krvnem serumu bolnika krožijo nepopolna protitelesa proti povzročitelju. Nepopolna protitelesa imenujemo blokiranje, ker imajo eno mesto za vezavo antigena in ne dveh, kot polna protitelesa. Zato se ob dodajanju antigenskega diagnostika nepopolna protitelesa vežejo na antigene, vendar jih ne zlepijo. Za manifestacijo reakcije dodamo antiglobulinski serum (protitelesa proti človeškim imunoglobulinom), kar bo povzročilo aglutinacijo imunskih kompleksov (antigenski diagnostik + nepopolna protitelesa), ki nastanejo v prvi fazi reakcije.

Indirektna Coombsova reakcija se uporablja pri bolnikih z intravaskularno hemolizo. Pri nekaterih od teh bolnikov najdemo nepopolna monovalentna protitelesa proti rezusu. Posebej interagirajo z Rh-pozitivnimi eritrociti, vendar ne povzročajo njihove aglutinacije. Zato sistemu anti-Rh protitelesa + Rh-pozitivni eritrociti dodamo antiglobulinski serum, ki povzroči aglutinacijo eritrocitov. Z uporabo Coombsove reakcije se diagnosticirajo patološka stanja, povezana z intravaskularno lizo eritrocitov imunskega izvora, na primer hemolitična bolezen novorojenčka zaradi Rhesus konflikta.

RA za določanje krvnih skupin temelji na aglutinaciji eritrocitov s protitelesi imunskega seruma proti antigenom krvnih skupin A (II), B (III). Kontrola je serum, ki ne vsebuje protiteles, t.j. serumske krvne skupine AB (IV) in antigeni eritrocitov skupin A (P) in B (III). Kot negativno kontrolo se uporabljajo eritrociti skupine 0(I), ker nimajo antigenov.

Za določitev Rh faktorja se uporabljajo anti-Rh serumi (vsaj dve različni seriji). V prisotnosti antigena Rh na membrani proučevanih eritrocitov pride do aglutinacije teh celic.

Hemadsorpcijska reakcija(RGAD). Hemadsorpcija je povezava eritrocitov s površino celic, prizadetih z virusom, ki temelji na razmerju receptorjev virusa, ki se nahajajo na površini prizadete celice, z receptorji eritrocitov, kar vodi do njihove medsebojne adhezije, podobne reakciji hemaglutinacije. Prednost te reakcije je, da postane pozitivna še preden se pojavijo izrazite citopatske spremembe v okuženih celicah.

Obstajajo razlike v vrsti adsorpcije (difuzna, žariščna), vrsti sorbiranih eritrocitov (človeški, opičji, morski prašički itd.), Temperaturi, pri kateri poteka reakcija (37 ° C, 0 ° C), prisotnosti elucije (da, ne) . G. se lahko upočasni s predhodno inkubacijo z virusom okuženih celic z antiserumom, kospecifičnim za virus. Inhibicijska reakcija G. se uporablja za identifikacijo virusov.