תעודת רישום מס' RZN 2016/3905 מיום 04.04.2016
מַטָרָה
ערכת הריאגנטים "Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigenic for RPHA" (SED-Vi) נועדה לזהות נוגדנים ל-Vi-antigen של הגורם הגורם לקדחת הטיפוס בדם אנושי על ידי בדיקת ההמגלוטינציה הפסיבית (RPHA).
הגדר מאפיין
עקרון הפעולה
בנוכחות נוגדנים לגורם הסיבתי של קדחת טיפוס, נצפית המגלוטינציה של אריתרוציטים של עוף עם רגישות ל-Vi-antigen, מה שמוביל להיווצרות "מטריה" של אריתרוציטים מיושב בתחתית בארות בצורת U של הצלחת. . בהיעדר נוגדנים לגורם הסיבתי של קדחת הטיפוס, אריתרוציטים מיושמים יוצרים "נקודה".
קבע הרכב
| שם מגיב | תיאור | כמות בסט |
|---|---|---|
| Diagnosticum אריתרוציט Salmonella Vi-antigenic, יבש 6% (SED) | אריתרוציטים עוף מפורמלים שעברו רגישות לאנטיגן S.typhi Vi. מסה היגרוסקופית יבשה של צבע חום. לאחר פירוק - השעיה של צבע אדום-חום. | בקבוקון 1, מ-0.6 מ"ל |
| סלמונלה אבחנתית נספג בסרום, קולטן Vi, יבש (מדולל 1:20, (K+)) | סרום ארנב נספג סלמונלה, קולטן Vi, מדולל 1:20. מסה נקבובית היגרוסקופית יבשה בצבע לבן. לאחר ההמסה, זהו נוזל צלול צהבהב או חסר צבע. | בקבוקון אחד, מ-0.3 מ"ל |
| חומר דילול לדוגמא (RID) | נוזל כחול-סגול שקוף. | בקבוקון 1, 10 מ"ל |
| תמיסת חיץ פוספט (PBS) | נוזל שקוף חסר צבע. | בקבוקון 1, 10 מ"ל |
| צלחת פולימר לשימוש חד פעמי לתגובות אימונולוגיות | פלטת פולימר חד פעמית לתגובות אימונולוגיות עשויה פוליסטירן שקוף חסר צבע. | 1 PC. |
מאפיינים אבחונים
יש לאגד את דיאגנוסטיקום ב-RPHA עם סרום אבחנתי נספג סלמונלה, קולטן Vi, יבש (בדילול של 1:20), עד לטיטר המצוין על תווית הסרום. הרמה המותנית של מאפייני האבחון של סרום הדם של אנשים בריאים צריכה להיחשב כדילול של סרום שאינו גבוה מ-1:20. זמן הניתוח הוא 3040 דקות. הערכה מיועדת לחקר 42 סרחי דם באפשרות ההקרנה או 10 סרחי דם באופציה של טיטרציה.
אמצעי זהירות
הערכה מיועדת לאבחון מבחנה בלבד. החומרים הכלולים ברכיבי הערכה אינם פעילים ובטוחים. בעת עבודה עם הערכה, יש להקפיד על SP 1.3.2322-08 ו-SanPiN 2.1.7.2790-10.
ציוד וחומרים נוספים
ציוד, חומרים, פתרונות:
- מכשירי פיפטה 1-ערוץ עם נפח מינון משתנה 5-40 μl; 40 - 200 μl; 200 - 1000 μl ו-1000 - 5000 μl;
- מכשירי פיפטה 8 או 12 ערוצים עם נפח מינון משתנה 5-40 μl ו-40-200 μl;
- מים מזוקקים (GOST 6709-72).
ניתוח דגימות
דגימות סרום הדם שנחקרו מאוחסנות בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס למשך לא יותר מ-3 ימים מרגע דגימת הדם. מותר לאחסן מי גבינה במצב קפוא בטמפרטורה שאינה עולה על מינוס 18 מעלות צלזיוס למשך לא יותר משנה. לפני השימוש, הדגימות מופשרות בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס ומערבבים בניעור. אסור להקפיא מחדש. אין להשתמש בדגימות עם גידול חיידקים והמוליזה. לפני הגדרת התגובה, סרום הבדיקה מחומם ב-56 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
ביצוע ניתוח
הכנת סרום אבחון בקרה (K+)
הכן תמיסת עבודה של סרום נספג סלמונלה אבחנתי, קולטן Vi, יבש (מדולל 1:20) מ-0.3 מ"ל (K+). לשם כך, 0.3 מ"ל של תמיסת חיץ פוספט (PBS) מתווסף לתוכן הבקבוקון עם K+. ניתן לחלק את כמות הסרום הנותרת ולאחסן בהקפאה בטמפרטורה שאינה עולה על מינוס 18 מעלות צלזיוס למשך לא יותר מ-6 חודשים.
הכנת אבחון לסלמונלה אריתרוציטים (SED)
כדי להכין דילול עבודה של תרחיף סלמונלה אריתרוציט diagnosticum, מוסיפים 0.6 מ"ל מים מזוקקים לתכולת הבקבוקון עם 6% SED יבש ומניחים להידרציה למשך שעתיים בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס. לאחר מכן מוסיפים לתמיסה 2.4 מ"ל של תמיסת חיץ פוספט (PBS). תמיסת העבודה מאוחסנת בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס למשך לא יותר מחודש אחד. אסור להקפיא.
הצהרת RPHA במהלך בדיקת סרום הדם
סרת ההקרנה מדוללת בבארות הצלחת באופן הבא:
- דילולים ראשוניים של 1:20 מוכנים בבארות הראשונות של הטבליה, תחילה מוסיפים להם 190 μl של תמיסת RIP, ולאחר מכן 10 μl של הסרה הנחקרת. כל סרום מתווסף עם קצה נפרד ומופיע בקפידה (במקרה זה, צבע התמיסה בבארות צריך להשתנות מכחול-סגול לירוק לאחר הוספת הסרה);
- דילול סקר של 1:40 מוכנים בבארות השניות, תחילה מכניסים 25 μl של תמיסת PBS לתוכם, ולאחר מכן 25 μl של סרה מדוללת מראש ופיפטציה בזהירות.
עם כל הגדרה של RPHA, יש צורך לבצע קביעת בקרה של K + titer. לשם כך, 50 μl של תמיסת PBS מתווספים ל-8 בארות בשורה ארוכה. לאחר מכן, 50 μl של תמיסת עבודה K+ (1:20) מתווספת לבאר הראשונה, מובלת בקפידה ומועברת לבארות הבאות, 50 μl כל אחת, מקבלת דילול פי 2 מ- 1:40 עד 1:5120. בעוד 4 בארות, 50 μl של תמיסת PBS מתווסף כדי לשלוט ב-SED על היעדר hemagglutination ספונטני.
לתוך כל בארות הטבליה עם דילול סקר של הסרה הנחקרת (פרט לראשון המכיל RIP) והבקרות, הוסף 25 μl של SED. מערבבים את תרחיף SED בבקבוק או באמבטיה לפני השימוש!הטבליה מנערת ביסודיות ומשאירה אותה בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס למשך 30 עד 40 דקות עד לשקיעה מלאה של אריתרוציטים בבקרה.
הצהרת RPHA במהלך טיטרציה של סרום הדם הנחקר
טיטרציה של הסרה הנחקר ופתרון העבודה K+ מתבצע בשורות קצרות של הצלחת. שורה קצרה נוספת משמשת לשליטה בהיעדר המגלוטינציה ספונטנית של ה-EDS.
בבארות הראשונות של שורות קצרות לטיטרציה של סרום הבדיקה, מוסיפים 180 μl של תמיסת RIP. כל שאר הבארות מלאות ב-50 μl של תמיסת PBS.
20 μl של סרה הבדיקה מתווספים לבארות עם תמיסת RIP (מתקבל דילול 1:10). כל סרום מתווסף עם קצהו ומטפטף בזהירות (צבע התמיסה בבארות אמור להשתנות מכחול-סגול לירוק). לאחר מכן, 50 μl מועברים מהבארות הראשונות לבארות הבאות של השורות, תוך קבלת דילולים פי שניים מ- 1:20 עד 1:1280. בסוף הטיטרציה, 50 μl של פתרונות מוסרים מהבארות האחרונות.
עם כל הגדרה של RPHA, יש צורך לבצע קביעת בקרה של K + titer. לשם כך, 50 μl של תמיסת PBS מתווספים ל-8 בארות בשורה ארוכה. לאחר מכן, 50 μl של תמיסת עבודה K+ (1:20) מתווספת לבאר הראשונה, מובלת בקפידה ומועברת לבארות הבאות, 50 μl כל אחת, מקבלת דילול פי 2 מ- 1:40 עד 1:5120.
כדי לשלוט על האבחון על היעדר hemagglutination ספונטני, 50 μl של תמיסת PBS מתווספים לכל בארות של שורה קצרה.
בכל הבארות (למעט הבארות הראשונות של כל שורה עבור הסרה הנחקרת המכילה RIP) הוסף 25 μl של SED. מערבבים את תרחיף SED בבקבוק או באמבטיה לפני השימוש! הטבליה מנערת ביסודיות ומשאירה אותה בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס למשך 30 - 40 דקות עד לשקיעה מלאה של אריתרוציטים בבקרה.
חשבונאות ופרשנות תוצאות
התחשבנות בתוצאות בהקרנה של סרום דם
ההתחשבנות בתוצאות מתבצעת בסולם מותנה של ארבעה הצלבות. טיטר הסרום הוא הדילול שלו, שנותן hemagglutination על ידי לפחות 3 (+++) הצלבות.
- ++++ (4+) - אריתרוציטים צמודים יוצרים "מטריה" הפוכה בתחתית החור, קצוותיו נושרים;
- +++ (3+) - אריתרוציטים צמודים יוצרים "מטריה" הפוכה בתחתית החור, הקצוות שלו אחידים;
- ++ (2+) - יחד עם אריתרוציטים מצטברים, יש בתחתית החור משקעים בצורת "טבעת" קטנה של אריתרוציטים לא צמודים;
- + (1+) - רוב האריתרוציטים אינם צמודים ומתיישבים בצורה של "טבעת" קטנה;
- (-) - אריתרוציטים לא צמודים יוצרים "נקודה" בתחתית הבאר.
תוצאה חיובית נחשבת להמגלוטינציה של אריתרוציטים עמוסים ב-Vi-antigen ב-3 הצלבות לפחות (+++).
בקרת האיכות של הדיאגנוסטיקום היא 4 בארות של שורת הבקרה, שבהן נוספו רק תמיסת PBS ו-SED. לא אמורה להיות המגלוטינציה ספונטנית בבארות אלו - התגובה היא שלילית (-). אחרת, יש לחזור על המחקר. אם המגלוטינציה מופיעה במהלך שלב מחדש, אזי התרופה אינה בשימוש.
יש להתייחס לסרה עם תוצאה שלילית כמי שאינה מכילה נוגדנים לאנטיגן Vi בטיטר אבחנתי של 1:40 ומטה.
סרומים שנותנים תוצאה חיובית בדילול של 1:40 יש לבחון מחדש בגרסה עם טיטרציה בסרום לביסוס הטיטר שלו.
התחשבות בתוצאות בעת טיטרציה של סרת דם
טיטר הסרום הוא הדילול שלו, שנותן hemagglutination על ידי לפחות 3 (+++) הצלבות.
בקרת האיכות של האבחון היא בארות השורה לבקרת SED. לא אמורה להיות המגלוטינציה ספונטנית בבארות אלו - התגובה היא שלילית (-). אחרת, יש לחזור על המחקר. אם המגלוטינציה מופיעה במהלך שלב מחדש, אזי התרופה אינה בשימוש.
תעודת רישום מס' RZN 2016/3905 מיום 04.04.2016
מַטָרָה
ערכת הריאגנטים "Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigenic for RPHA" (SED-Vi) נועדה לזהות נוגדנים ל-Vi-antigen של הגורם הגורם לקדחת הטיפוס בדם אנושי על ידי בדיקת ההמגלוטינציה הפסיבית (RPHA).
הגדר מאפיין
עקרון הפעולה
בנוכחות נוגדנים לגורם הסיבתי של קדחת טיפוס, נצפית המגלוטינציה של אריתרוציטים של עוף עם רגישות ל-Vi-antigen, מה שמוביל להיווצרות "מטריה" של אריתרוציטים מיושב בתחתית בארות בצורת U של הצלחת. . בהיעדר נוגדנים לגורם הסיבתי של קדחת הטיפוס, אריתרוציטים מיושמים יוצרים "נקודה".
קבע הרכב
| שם מגיב | תיאור | כמות בסט |
|---|---|---|
| Diagnosticum אריתרוציט Salmonella Vi-antigenic, יבש 6% (SED) | אריתרוציטים עוף מפורמלים שעברו רגישות לאנטיגן S.typhi Vi. מסה היגרוסקופית יבשה של צבע חום. לאחר פירוק - השעיה של צבע אדום-חום. | בקבוקון 1, מ-0.6 מ"ל |
| סלמונלה אבחנתית נספג בסרום, קולטן Vi, יבש (מדולל 1:20, (K+)) | סרום ארנב נספג סלמונלה, קולטן Vi, מדולל 1:20. מסה נקבובית היגרוסקופית יבשה בצבע לבן. לאחר ההמסה, זהו נוזל צלול צהבהב או חסר צבע. | בקבוקון אחד, מ-0.3 מ"ל |
| חומר דילול לדוגמא (RID) | נוזל כחול-סגול שקוף. | בקבוקון 1, 10 מ"ל |
| תמיסת חיץ פוספט (PBS) | נוזל שקוף חסר צבע. | בקבוקון 1, 10 מ"ל |
| צלחת פולימר לשימוש חד פעמי לתגובות אימונולוגיות | פלטת פולימר חד פעמית לתגובות אימונולוגיות עשויה פוליסטירן שקוף חסר צבע. | 1 PC. |
מאפיינים אבחונים
יש לאגד את דיאגנוסטיקום ב-RPHA עם סרום אבחנתי נספג סלמונלה, קולטן Vi, יבש (בדילול של 1:20), עד לטיטר המצוין על תווית הסרום. הרמה המותנית של מאפייני האבחון של סרום הדם של אנשים בריאים צריכה להיחשב כדילול של סרום שאינו גבוה מ-1:20. זמן הניתוח הוא 3040 דקות. הערכה מיועדת לחקר 42 סרחי דם באפשרות ההקרנה או 10 סרחי דם באופציה של טיטרציה.
אמצעי זהירות
הערכה מיועדת לאבחון מבחנה בלבד. החומרים הכלולים ברכיבי הערכה אינם פעילים ובטוחים. בעת עבודה עם הערכה, יש להקפיד על SP 1.3.2322-08 ו-SanPiN 2.1.7.2790-10.
ציוד וחומרים נוספים
ציוד, חומרים, פתרונות:
- מכשירי פיפטה 1-ערוץ עם נפח מינון משתנה 5-40 μl; 40 - 200 μl; 200 - 1000 μl ו-1000 - 5000 μl;
- מכשירי פיפטה 8 או 12 ערוצים עם נפח מינון משתנה 5-40 μl ו-40-200 μl;
- מים מזוקקים (GOST 6709-72).
ניתוח דגימות
דגימות סרום הדם שנחקרו מאוחסנות בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס למשך לא יותר מ-3 ימים מרגע דגימת הדם. מותר לאחסן מי גבינה במצב קפוא בטמפרטורה שאינה עולה על מינוס 18 מעלות צלזיוס למשך לא יותר משנה. לפני השימוש, הדגימות מופשרות בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס ומערבבים בניעור. אסור להקפיא מחדש. אין להשתמש בדגימות עם גידול חיידקים והמוליזה. לפני הגדרת התגובה, סרום הבדיקה מחומם ב-56 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
ביצוע ניתוח
הכנת סרום אבחון בקרה (K+)
הכן תמיסת עבודה של סרום נספג סלמונלה אבחנתי, קולטן Vi, יבש (מדולל 1:20) מ-0.3 מ"ל (K+). לשם כך, 0.3 מ"ל של תמיסת חיץ פוספט (PBS) מתווסף לתוכן הבקבוקון עם K+. ניתן לחלק את כמות הסרום הנותרת ולאחסן בהקפאה בטמפרטורה שאינה עולה על מינוס 18 מעלות צלזיוס למשך לא יותר מ-6 חודשים.
הכנת אבחון לסלמונלה אריתרוציטים (SED)
כדי להכין דילול עבודה של תרחיף סלמונלה אריתרוציט diagnosticum, מוסיפים 0.6 מ"ל מים מזוקקים לתכולת הבקבוקון עם 6% SED יבש ומניחים להידרציה למשך שעתיים בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס. לאחר מכן מוסיפים לתמיסה 2.4 מ"ל של תמיסת חיץ פוספט (PBS). תמיסת העבודה מאוחסנת בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס למשך לא יותר מחודש אחד. אסור להקפיא.
הצהרת RPHA במהלך בדיקת סרום הדם
סרת ההקרנה מדוללת בבארות הצלחת באופן הבא:
- דילולים ראשוניים של 1:20 מוכנים בבארות הראשונות של הטבליה, תחילה מוסיפים להם 190 μl של תמיסת RIP, ולאחר מכן 10 μl של הסרה הנחקרת. כל סרום מתווסף עם קצה נפרד ומופיע בקפידה (במקרה זה, צבע התמיסה בבארות צריך להשתנות מכחול-סגול לירוק לאחר הוספת הסרה);
- דילול סקר של 1:40 מוכנים בבארות השניות, תחילה מכניסים 25 μl של תמיסת PBS לתוכם, ולאחר מכן 25 μl של סרה מדוללת מראש ופיפטציה בזהירות.
עם כל הגדרה של RPHA, יש צורך לבצע קביעת בקרה של K + titer. לשם כך, 50 μl של תמיסת PBS מתווספים ל-8 בארות בשורה ארוכה. לאחר מכן, 50 μl של תמיסת עבודה K+ (1:20) מתווספת לבאר הראשונה, מובלת בקפידה ומועברת לבארות הבאות, 50 μl כל אחת, מקבלת דילול פי 2 מ- 1:40 עד 1:5120. בעוד 4 בארות, 50 μl של תמיסת PBS מתווסף כדי לשלוט ב-SED על היעדר hemagglutination ספונטני.
לתוך כל בארות הטבליה עם דילול סקר של הסרה הנחקרת (פרט לראשון המכיל RIP) והבקרות, הוסף 25 μl של SED. מערבבים את תרחיף SED בבקבוק או באמבטיה לפני השימוש!הטבליה מנערת ביסודיות ומשאירה אותה בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס למשך 30 עד 40 דקות עד לשקיעה מלאה של אריתרוציטים בבקרה.
הצהרת RPHA במהלך טיטרציה של סרום הדם הנחקר
טיטרציה של הסרה הנחקר ופתרון העבודה K+ מתבצע בשורות קצרות של הצלחת. שורה קצרה נוספת משמשת לשליטה בהיעדר המגלוטינציה ספונטנית של ה-EDS.
בבארות הראשונות של שורות קצרות לטיטרציה של סרום הבדיקה, מוסיפים 180 μl של תמיסת RIP. כל שאר הבארות מלאות ב-50 μl של תמיסת PBS.
20 μl של סרה הבדיקה מתווספים לבארות עם תמיסת RIP (מתקבל דילול 1:10). כל סרום מתווסף עם קצהו ומטפטף בזהירות (צבע התמיסה בבארות אמור להשתנות מכחול-סגול לירוק). לאחר מכן, 50 μl מועברים מהבארות הראשונות לבארות הבאות של השורות, תוך קבלת דילולים פי שניים מ- 1:20 עד 1:1280. בסוף הטיטרציה, 50 μl של פתרונות מוסרים מהבארות האחרונות.
עם כל הגדרה של RPHA, יש צורך לבצע קביעת בקרה של K + titer. לשם כך, 50 μl של תמיסת PBS מתווספים ל-8 בארות בשורה ארוכה. לאחר מכן, 50 μl של תמיסת עבודה K+ (1:20) מתווספת לבאר הראשונה, מובלת בקפידה ומועברת לבארות הבאות, 50 μl כל אחת, מקבלת דילול פי 2 מ- 1:40 עד 1:5120.
כדי לשלוט על האבחון על היעדר hemagglutination ספונטני, 50 μl של תמיסת PBS מתווספים לכל בארות של שורה קצרה.
בכל הבארות (למעט הבארות הראשונות של כל שורה עבור הסרה הנחקרת המכילה RIP) הוסף 25 μl של SED. מערבבים את תרחיף SED בבקבוק או באמבטיה לפני השימוש! הטבליה מנערת ביסודיות ומשאירה אותה בטמפרטורה של 16 עד 25 מעלות צלזיוס למשך 30 - 40 דקות עד לשקיעה מלאה של אריתרוציטים בבקרה.
חשבונאות ופרשנות תוצאות
התחשבנות בתוצאות בהקרנה של סרום דם
ההתחשבנות בתוצאות מתבצעת בסולם מותנה של ארבעה הצלבות. טיטר הסרום הוא הדילול שלו, שנותן hemagglutination על ידי לפחות 3 (+++) הצלבות.
- ++++ (4+) - אריתרוציטים צמודים יוצרים "מטריה" הפוכה בתחתית החור, קצוותיו נושרים;
- +++ (3+) - אריתרוציטים צמודים יוצרים "מטריה" הפוכה בתחתית החור, הקצוות שלו אחידים;
- ++ (2+) - יחד עם אריתרוציטים מצטברים, יש בתחתית החור משקעים בצורת "טבעת" קטנה של אריתרוציטים לא צמודים;
- + (1+) - רוב האריתרוציטים אינם צמודים ומתיישבים בצורה של "טבעת" קטנה;
- (-) - אריתרוציטים לא צמודים יוצרים "נקודה" בתחתית הבאר.
תוצאה חיובית נחשבת להמגלוטינציה של אריתרוציטים עמוסים ב-Vi-antigen ב-3 הצלבות לפחות (+++).
בקרת האיכות של הדיאגנוסטיקום היא 4 בארות של שורת הבקרה, שבהן נוספו רק תמיסת PBS ו-SED. לא אמורה להיות המגלוטינציה ספונטנית בבארות אלו - התגובה היא שלילית (-). אחרת, יש לחזור על המחקר. אם המגלוטינציה מופיעה במהלך שלב מחדש, אזי התרופה אינה בשימוש.
יש להתייחס לסרה עם תוצאה שלילית כמי שאינה מכילה נוגדנים לאנטיגן Vi בטיטר אבחנתי של 1:40 ומטה.
סרומים שנותנים תוצאה חיובית בדילול של 1:40 יש לבחון מחדש בגרסה עם טיטרציה בסרום לביסוס הטיטר שלו.
התחשבות בתוצאות בעת טיטרציה של סרת דם
טיטר הסרום הוא הדילול שלו, שנותן hemagglutination על ידי לפחות 3 (+++) הצלבות.
בקרת האיכות של האבחון היא בארות השורה לבקרת SED. לא אמורה להיות המגלוטינציה ספונטנית בבארות אלו - התגובה היא שלילית (-). אחרת, יש לחזור על המחקר. אם המגלוטינציה מופיעה במהלך שלב מחדש, אזי התרופה אינה בשימוש.
ההתחלה הפעילה של האבחון היא אנטיגן V הקבוע על פני השטח של אריתרוציטים. בעת אינטראקציה עם סרה המכילה נוגדנים לאנטיגן Vee, נצפית התופעה של צמיחת אריתרוציטים.
טופס שחרור
מיוצר בסט 1 בקבוק עם דיאגנוסטיקום - 3 מ"ל, קולטן סלמונלה אבחנתי נספג Vee Dry בצורת lyophilisate מ-0.1 מ"ל 1 בקבוק; תמיסת נתרן כלורי 0.9% - 2 בקבוקים של 8 מ"ל; טבליה לתגובות אימונולוגיות לשימוש חד פעמי - 1 pc.
מתחם
כמות ריאגנטים:
Diagnosticum erythrocyte salmonella V-antigenic, שהוא תרחיף של 0.75% של אריתרוציטים אנושיים O (I) מפורמלים ורגישים עם V-antigen מקבוצת הדם בתמיסת חיץ פוספט (pH-7.2 ± 0.2; ריכוז - 0.06 מול/ליטר) . חומר משמר - פורמלין. השעיה הומוגנית של צבע חום ללא פתיתים; בעת השקיעה נוצרות 2 שכבות: משקע חום צפוף של אריתרוציטים ונוזל סופרנטנט צהבהב שקוף 1 בקבוקון-3 מ"ל.
קולטן סלמונלה אבחנתי בסרום Vee dry - מסה הומוגנית מלבן עם גוון חום עד בז'. בקבוק אחד - מ-0.1 מ"ל.
תמיסת תחזוקה - תמיסת נתרן כלורי 0.9% - נוזל צלול וחסר צבע, pH 6.5 עד 7.5. 2 בקבוקים - 8 מ"ל.
פלטה תחתונה עגולה לשימוש חד פעמי לתגובות אימונולוגיות - מורכבת מ-8 שורות שכל אחת מהן כוללת 12 בארות עם תחתית שקופה, חסרת צבע ועגולה. 1 PC.
יש להצמיד את דיאגנוסטיקום ב-RPHA עם סרום של קולטן אבחנתי סלמונלה B יבש בדילול לא נמוך מ-1/2 מהטיטר שלהם, אך לא פחות מ-1/160. אין להצמיד את דיאגנוסטיקום על-ידי סלמונלה אבחנתית ספיגה יבשה ל-RA: קולטן O 9 - בדילול של 1:40 ומעלה, קולטן H d - בדילול של 1:10 ומעלה.
אינדיקציות לשימוש
נועד לזהות בדם אנושי נוגדנים ספציפיים לאנטיגן V של סלמונלה טיפוס בתגובה של המאגלוטינציה פסיבית (RPHA).
משטר המינון ושיטת היישום
דגימות סרום דם אנושי משמשות כדגימות מנותחות.
הדגימה המנותחת מאוחסנת בתנאים המונעים צמיחת חיידקים בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס למשך לא יותר מ-72 שעות. הקפאה מותרת, יש להפשיר דגימות מנותחות קפואות בטמפרטורת החדר לפני הבדיקה.
אסור לבצע ניתוח של דגימות עם המוליזה חמורה, גידול חיידקים, כמו גם של דגימות המאוחסנות לאורך זמן ללא הקפאה או הקפאה מחדש.
אָנָלִיזָה
הכנת פתרונות ל-RPHA.
יבש בקבוקונים פתוחים עם סרום של קולטן סלמונלה אבחנתי נספג V והוסף 1 מ"ל מתמיסת נתרן כלורי 0.9% המצורפת, ובכך לקבל דילול של 1:10, שהוא דילול עבודה.
בקבוקון פתוח עם סרום של קולטן סלמונלה אבחנתי נספג V יבש בדילול של 1:10 בצורה סגורה ניתן לאחסן בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס למשך חודש אחד.
Diagnosticum מוכן לשימוש. לפני פתיחת הבקבוקון עם הדיאגנוסטיקום, נער בעדינות עד לקבלת תרחיף הומוגני. מומלץ לחזור על ניעור במהלך הפעולה.
ניתן לאחסן בקבוקון פתוח עם אבחנה בצורה סגורה בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס למשך חודש אחד.
תמיסה של 0.9% נתרן כלורי. מוכן לשימוש.
ביצוע RPHA.
כאשר שולטים במספר כלשהו של סרומים מנותחים, חובה להגדיר את השורה הראשונה של האגלוטינציה עם סרום של קולטן B אבחנתי סלמונלה נספג.
לייצור RPHA משתמשים בטבליה לתגובות אימונולוגיות של שימוש חד פעמי. דילולים סדרתיים של הסרום המנותח מוכנים ב-0.05 מ"ל של תמיסת 0.9% נתרן כלוריד המצורפת החל מ-1:10 עד 1:2560 וסדרה 1 של דילול סדרתי כפול של הסרום של הקולטן האבחנתי לסלמונלה Wi. יבש, החל מדילול של 1:10, עד פי שניים מהטיטר המצוין על התווית של הבקבוקונים של הסרום הזה.
0.025 מ"ל של דיאגנוסטיקום מתווסף לכל אחת מהבארות עם דילול בסרום.
בקרות חובה הן:
1. בקרת סרום של קולטן סלמונלה אבחנתי
סרום יבש מנותח, אשר בדילול של 1:10 בנפח של 0.05 מ"ל תורם
בשתי בארות בקרה.
2. בדיקת היעדר אגלוטינציה ספונטנית של הדיאגנוסטיקום, עבורה מוסיפים 0.025 מ"ל מהדיאגנוסטיקום לשתי בארות המכילות 0.05 מ"ל של תמיסת נתרן כלורי 0.9%.
הטאבלט מנער ומניחים למשך 1.5-2.0 שעות בתרמוסטט בטמפרטורה של (37+1) מעלות צלזיוס.
חשבונאות לתוצאות
התגובה נלקחת בחשבון על פי מערכת ארבעת הצלבים:
4+ - כל אריתרוציטים צמודים ומכסים באופן שווה את תחתית החור;
3+ - כמעט כל אריתרוציטים צמודים. על הרקע שלהם, יש טבעת לא בולטת של אריתרוציטים מושבעים לא צמודים;
3+ - יחד עם אגלוטינאט אחיד בתחתית החור יש משקעים של אריתרוציטים לא צמודים בצורה של "טבעת" או "כפתור" קטנה;
1+ - רוב האריתרוציטים אינם צמודים ומתיישבים בצורת "טבעת" קטנה עם קצוות חלקים או "כפתורים" במרכז תחתית החור.
(-) - אין סימני צבירה. אריתרוציטים התיישבו בצורה של "רינגלט" קטן עם קצוות חלקים או כפתורים במרכז הבאר או בתחתית הצינור.
תגובה של לפחות 3+ נחשבת לחיובית.
התוצאות המתקבלות ב-RPHA יכולות להיחשב אמינות אם הסרום של הקולטן האבחנתי לסלמונלה B יבש 1:10 השיג תוצאה חיובית בדילול של לא פחות מ-14 מהטיטרים שלהם, וב-2 בארות עם הסרום המנותח ועם סרום של קולטן סלמונלה אבחנתי נספג B יבש בדילול 1:10 לא צריכים להיות פתיתים ומשקעים; בבארות עם תמיסת נתרן כלורי 0.9% ודיאגנוסטיקום - התגובה שלילית.
טיטר הנוגדנים של הסרום המנותח נחשב לדילול האחרון של הסרום, מה שעדיין נותן אגלוטינציה חיובית של אריתרוציטים.
פרשנות של תוצאות.
אנשים שיש להם נוגדנים ל-V-antigen בדילול של 1:40 ומעלה נחשבים חשודים לנשא חיידקי טיפוס כרוני. עם זאת, בשל העובדה שלא ניתן לבצע את האבחנה רק על בסיס מחקר סרולוגי, יש צורך בבדיקה בקטריולוגית מעמיקה.
אמצעי זהירות לשימוש
סרום אבחנתי קולטן סלמונלה נספח Vee הכלול בערכה אינו פעיל יבש.
יש להשבית את הסרה לניתוח ב-56 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
הסרה שיש לנתח, כמו גם הריאגנטים, הציוד והמכשירים במגע איתם, עלולים להיות חומר זיהומי וצריך לטפל בהם בזהירות:
- עבודה בכפפות גומי;
- בעת פיפטציה יש צורך להשתמש במכשירים אוטומטיים;
- בסיום העבודה יש לטפל בסרה המנותחת ובריאגנטים במגע איתם, המכשירים, בתמיסת חיטוי;
- נגב את הציוד לפני ואחרי העבודה עם אלכוהול אתילי 96%.
תוצאות ניתוח אובייקטיביות מובטחות בתנאים הבאים:
- אחסון כל הריאגנטים של הערכה צריך להתבצע בטמפרטורה של 2 עד 8 מעלות צלזיוס;
- אין להשתמש בריאגנטים שפג תוקפם;
- אין להשתמש בריאגנטים של הערכה אם אין סימון מתאים על האריזה שלהם;
- עבור RPHA השתמש בריאגנטים הכלולים בערכה זו בלבד.
2. אבחון
4.מחיידקים שהושמדו (בידוד של Ag ספציפי)
אריתרוציטים HBs diagnosticum
2. אבחון
4.השעיה של אר.כבשים שטופלו בטאנין ומשקעים א\g HBs
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום הדם
Diagnosticum gp120
2. אבחון
4.הפרד a\g excit. HIV
5. כדי לזהות נגיף ל-HIV
טטנוס אריתרוציט אבחון
2. אבחון
4.השעיה של אר.כבשים שטופלו בטאנין עם עירור של טטנוס
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום הדם (לעירור טטנוס
אנטיגן קרדיוליפין למיקרו-משקעים
2. אבחון
4.חילוץ של שברי שומנים מלב שור בריא
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום הדם
אנטיגן טרפונמל עם אולטרסאונד
2. אבחון
4. מתוך אקס מת. עַגֶבֶת
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום הדם
Corpuscular tularemia diagnosticum
2. אבחון
4. של חלקיקי פתוגן בודדים
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום הדם
אבחון דיזנטריה
2. אבחון
4. השעיה מהרוג מ\ o
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום המטופל
Erythrocyte diagnosticum מ-Shigella Sonne
2. אבחון
4. השעיה של כבשה, מטופלת בטונין
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום הדם
דיאגנוסטיקום מסלמונלה טיפימוריום
2. אבחון
4. מתוך אקס מת. סלמונלה
5. לזהות נוגדנים ספציפיים בסרום הדם
סרומים
סרום סוס אנטי-גנגרני 5000 IU
2.סרום
4. מסרום הדם של hyperimm.סוסים עם גז מעורר גנגרנה טוקסואיד
6. פרנטרלית, לאחר בדיקה עם גלובולין 1:100
אימונוגלובולין אנושי רגיל
2.סרום
4. מסרום דם תורם
5.form-e pass. ספֵּצִיפִי נרכש אומנויות. אממ
6. פרנטרלית
סרום אנתרקס מזרז
2.סרום
4. מסרום הדם של בעלי חיסון יתר a\g excit.sib. כיבים
6. תגובת משקעים (RP)
סוג סרום בוטולינום - A 400 IU
2.סרום
5. לזהות אנטיגן ספציפי בחומר הבדיקה
6. תגובת נטרול (RN)
אנתרקס גלובולין
2.סרום
4. מנסיוב הדם של בעלי חיים שעברו חיסון יתר, כמו כיבים מעוררים
5.form-e pass. ספֵּצִיפִי נרכש אומנויות. אממ
6. פרנטרלית
סרום המוליטי
2.סרום
4. מהנסיוב של בעלי חיים בעלי חיסון יתר עם אריתרוציטים של בעלי חיים ממין אחר
5. לזהות אנטיגן ספציפי בחומר הבדיקה
סרום צפיפות כולרה אוגאווה
2.סרום
4. מסרום הדם של בעלי חיים שעברו חיסון יתר
5. לזהות אנטיגן ספציפי בחומר הבדיקה
סרום טולרמיה זוהר
2.סרום
4. מנסיוב הדם של בעלי חיים בעלי חיסון יתר a\g tular excitable.
5. לזהות אנטיגן ספציפי בחומר הבדיקה
אימונוגלובולין נגד דלקת קרציות אנושית
2.סרום
4. מסרום דם תורם
5.form-e pass. ספֵּצִיפִי נרכש אומנויות. אממ
6. פרנטרלית
סרום אבחון של ESNO
2.סרום
4. מסרום הדם של בעלי חיים שעברו חיסון יתר עם נגיפי ESNO
5. לזהות אנטיגן ספציפי בחומר הבדיקה
אימונוגלובולין אנושי נגד הפטיטיס B
2.סרום
4. מסרום דם של תורם מחוסן נגד הפטיטיס B
5.form-e pass. ספֵּצִיפִי נרכש אומנויות. אממ
6. פרנטרלית
סרום אנטיגלובולין מסומן עם פרקוקסידאז
2.סרום
4. מסרום הדם של בעלי חיים שעברו חיסון יתר
5. לזהות אנטיגן ספציפי בחומר הבדיקה (HIV)
אימונוגלובולין כלבת
2.סרום
4. מסרום דם תורם
5.form-e pass. ספֵּצִיפִי נרכש אומנויות. אממ
ערכת ריאגנטים Diagnosticum Salmonella VI-antigenic מיועדת לזיהוי בסרום דם אנושי של נוגדנים ספציפיים לאנטיגן V של סלמונלה טיפוס בתגובה של המאגלוטינציה פסיבית (RPHA).
תכונות הערכה
2.1. עקרון השיטה.
העיקרון הפעיל של Diagnosticum Salmonella VI-antigenic הוא אנטיגן V המקובע על פני השטח של אריתרוציטים. בעת אינטראקציה עם סרה המכילה נוגדנים לאנטיגן Vee, נצפית התופעה של צמיחת אריתרוציטים.
2.2. הרכב הסט
| ריאגנטים | כַּמוּת |
| Diagnosticum erythrocytic Salmonella V-antigenic נוזל- מייצג תרחיף 1% של פורמלין ורגיש עם Vi-antigen Salmonella טיפוס אריתרוציטים של כבשים בתמיסת חיץ פוספט (pH 7.2 + 0.2; ריכוז 0.06 מול/ליטר). השעיה הומוגנית של צבע חום ללא פתיתים; בעת שקיעה נוצרות 2 שכבות: משקע חום צפוף של אריתרוציטים וסופרנטנט צהבהב שקוף | בקבוק אחד - 6 מ"ל |
| קולטן סלמונלה אבחנתי בסרום Vee יבש -מסה הומוגנית מלבן עם גוון חום ועד בז' | בקבוק אחד - מ-0.1 מ"ל |
| 1% השעיה של אריתרוציטים כבשים רשמיים ולא רגישים- השעיה הומוגנית של צבע חום ללא פתיתים; בעת שקיעה נוצרות 2 שכבות: משקע חום צפוף של אריתרוציטים וסופרנטנט צהבהב שקוף | בקבוקון 1 - |
| תמיסה לדילול סרום והגדרת RPHA -תמיסת נתרן כלורי 0.9% היא נוזל צלול וחסר צבע, pH 6.5 עד 7.5 | 2 בקבוקים - 8 מ"ל כל אחד |
| צלחת תחתית עגולה לתגובות אימונולוגיות לשימוש חד פעמי -מורכב מ-8 שורות, שכל אחת מהן כוללת 12 חורים עם תחתית שקופה, חסרת צבע, עגולה | 1 PC |
מאפיינים אנליטיים ודיאגנוסטיים.
3.1. יש לאגד את דיאגנוסטיקום ב-RPHA עם סרום של קולטן אבחנתי סלמונלה B יבש בדילול של לפחות 1:160.
הרמה המותנית של מאפייני האבחון של סרום הדם של אנשים בריאים צריכה להיחשב כדילול של סרום שאינו גבוה מ-1:20.
3.2. זמן הניתוח הוא שעתיים.
3.3. הסט מיועד ל-8 הגדרות.
אמצעי זהירות
בעת עבודה עם הערכה, עליך לפעול לפי "כללי התכנון, אמצעי זהירות, תברואה תעשייתית, משטר אנטי-מגיפי והיגיינה אישית בעבודה במעבדות (מחלקות, מחלקות) של מוסדות סניטריים ואפידמיולוגיים של מערכת משרד החינוך. בריאות ברית המועצות (M., 1981).
יש להתייחס לסרום המנותח, כמו גם את הריאגנטים שבמגע איתם, כבעלי פוטנציאל זיהומי, המסוגלים לאחסן או להעביר לטווח ארוך של HIV, נגיף הפטיטיס או כל גורם אחר של זיהום ויראלי - יש לטפל בהם בזהירות :
- עבודה בכפפות גומי;
- בעת פיפטציה יש צורך להשתמש בפיפטות אוטומטיות;
- בסיום העבודה יש לטפל בסרה המנותחת ובריאגנטים במגע איתם, המכשירים, בתמיסת חיטוי
- נגב את הציוד לפני ואחרי העבודה עם 70% אלכוהול אתילי.
יש להשבית את הסרום המנותח ב-56 0 C למשך 30 דקות.
הסרום האבחנתי הנספג לסלמונלה Vee dry inactivated כלול בערכה.
תוצאות ניתוח אובייקטיביות מובטחות בתנאים הבאים:
- אחסון כל הריאגנטים של הערכה צריך להתבצע בטמפרטורה של 2 עד 8 0 С;
- אין להשתמש בריאגנטים שפג תוקפם;
- אין להשתמש בריאגנטים של הערכה אם הם אינם מסומנים בהתאם על האריזה שלהם;
- עבור RPHA, השתמש בריאגנטים הכלולים רק בערכה זו.
Vi-Diagnosticum
דיאגנוסטיקום וי
Vi-אנטיגן