Oznaczanie ilości glikoprotein we krwi. Całkowite białko surowicy

Białko. Białko to, mające względną masę cząsteczkową 65 000 D, jest syntetyzowane w wątrobie. Stężenie albumin w osoczu krwi utrzymuje się na wysokim poziomie ze względu na względną nieprzepuszczalność ścian naczyń krwionośnych dla tego białka. Ten gradient stężeń jest ważny dla utrzymania stałej objętości osocza krwi. Normalna zawartość: 3,5 - 5,5 g% (SI: 33-55/l). Białko jest syntetyzowane w wątrobie. Albumina nie zawiera reszt węglowodanowych, jest utworzona przez jeden długi łańcuch polipeptydowy z dużą liczbą aminokwasów dikarboksylowych i ma ładunek ujemny. Dlatego zatrzymuje wiele dodatnich jonów sodu i tworzy większość ciśnienia osmotycznego krwi.

Wyjątkowość jego budowy przestrzennej polega na tym, że potrafi tworzyć miejsca wysoce i nisko specyficzne do wiązania różnych cząsteczek, odwracalnie łączy się z bilirubiną, kwasami tłuszczowymi, jonami wapnia, chlorem, substancjami leczniczymi. Zmienność strukturalna i funkcjonalna jest źródłem dodatkowych zdolności funkcjonalnych, w szczególności możliwości tworzenia buforowego układu przeciwutleniacz-proutleniacz.

Oznaczanie jej stężenia w surowicy krwi jest ważnym wskaźnikiem diagnostycznym w praktyce laboratoryjnej. Spadek stężenia prowadzi do wyraźnego zaburzenia metabolicznego. Hipoalbuminemia jest spowodowana następującymi czynnikami:

Osłabienie syntezy albumin procesów bioenergetycznych, wyczerpanie układów enzymatycznych;

Naruszenie wykorzystania białka przez tkanki przy jednoczesnym wzroście jego rozkładu;

Naruszenie dynamicznej równowagi białek krwi i tkanek;

Wykorzystanie białka do celów energetycznych z naruszeniem metabolizmu energii i węglowodanów;

Pocenie się albumin do przestrzeni śródmiąższowych z powodu zwiększonej przepuszczalności komórek śródbłonka naczyń włosowatych;

Utrata białka przez nerki, rany i oparzenia;

Naruszenie wchłaniania białka z powodu uszkodzenia przewodu żołądkowo-jelitowego.

Lizozym - białko jest wydzielane we wszystkich organizmach, od wirusów po ludzi. Znajduje się w ludzkiej surowicy krwi, łzach i wydzielinach z nosa. Białko z m.m. 14000D. Działa na peptydoglikany gr + bpkterium, dlatego nazywana jest muramidazą, czyli rozkłada główną substancję ściany komórkowej – mureinę. Hydrolizuje wiązania 1,4-glikozydowe pomiędzy N-acetylomuraminą i N-acetyloglukozaminą. Ustalona jest jego trzeciorzędowa struktura. Jest to globularne białko składające się ze 129 aminokwasów zawierające 4 mostki dwusiarczkowe. 30% to helisa alfa, 70% to struktura beta. Lizozym jest szybko syntetyzowany, gromadzi się w lizosomach i przedostaje się do środowiska w zależności od różnych bodźców. Jego działanie na błony śluzowe jest szczególnie duże. W surowicy krwi jest mniej aktywny ze względu na samoasocjację w środowisku humoralnym. Ale daje surowicy krwi 50% aktywność bakteriobójczą. Lizozym zwiększa krzepliwość krwi, ma zdolność wiązania amin biogennych i innych substancji biologicznie czynnych, bierze udział w wielu procesach fizjologicznych, wspomaga produkcję przeciwciał.

C - białko reaktywne (CRP)- swoją nazwę zawdzięcza zdolności do wchodzenia w reakcję wytrącania z C - polisacharydem pneumokokowym. W surowicy krwi osób zdrowych jest niewielka - do 5 mg / ml. Występuje w wielu chorobach, którym towarzyszy stan zapalny, martwica tkanek, jest najbardziej czułym markerem, wzrasta 20-100 razy i do 1000 w ciągu pierwszych 6-8 godzin. Ma ważną wartość diagnostyczną w reumatyzmie, zawale mięśnia sercowego iw tym przypadku jest bardziej czułym testem niż ROE, leukocytoza.

CRP może występować w postaci pentapeksyny, mającej 5 identycznych nieglikozylowanych podjednostek, połączonych ze sobą niekowalencyjnie za pomocą m.m. 100 000 D, a także w postaci neo-SRP. Pentamer CRP jest przekształcany w monomer, neo-CRP, który indukuje proces zapalny. Jest to wielofunkcyjne białko ostrej fazy, które odgrywa decydującą rolę w stanach zapalnych, w ochronie przed obcymi antygenami, w procesach autoimmunologicznych: wiąże się z bakteryjnymi polisacharydami, glikolipidami, co prowadzi do aktywacji układu dopełniacza na drodze klasycznej, bierze udział w regulacji funkcji komórek immunokompetentnych. CRP aktywuje monocyty, reguluje czynność neutrofili, wzmaga fagocytozę, indukuje chemotaksję i produkcję superoksydazy.

Haptoglobina (Hp) - glikoproteina, tworzy silny kompleks z hemoglobiną i dzięki temu chroni organizm przed utratą żelaza. HP stanowi 1,2 - 1,4% całkowitej ilości białek serwatkowych. Udowodniono 2 rodzaje haptoglobiny: Hp 1-1 z m.m. 85 tys. D, stała sedymentacji 4,5 S i Hp 11 s m.m. 165 tys. D, stała sedymentacji 7 S. Typ Hp 1-1 u homozygot jest chemicznie jednorodny, jest w stanie związać jedną cząsteczkę hemoglobiny (Hb), a Hp 2 - 2 homozygotyczne i Hp 2-1 heterozygotyczne związać 2 cząsteczki hemoglobiny. Masa cząsteczkowa kompleksu Hp. Hb 1-1 155 tys D, a masa kompleksów Hp. Нb 2-2 i Нр.Нb 2-1 na 310 tys. D. Dziedziczenie Нр zależy od 2 autosomalnych genów Нр 1 i Нр 2, które tworzą białka z 2 typów łańcuchów peptydowych: łańcuchów a i B. Łańcuch B ma taką samą ruchliwość dla wszystkich fenotypów, łańcuch a różni się w zależności od typu HP: łańcuch a1 ma wysoką ruchliwość, a łańcuch a2 jest wolny. Homozygoty Hp 1-1 mają tylko łańcuch 1, Hp 2-2 tylko łańcuch a2, a heterozygoty Hp 1-2 mają łańcuchy a1 i a2 w równych proporcjach. Typy są dziedziczone, więc fenotypowanie jest stosowane w praktyce kryminalistycznej.

Haptoglobina jest reagentem ostrej fazy, jej zawartość wzrasta niespecyficznie w odpowiedzi na różne bodźce patologiczne. Jest kompleksowany z wieloma substancjami powstającymi podczas rozpadu komórek i jest naturalnym inhibitorem katepsyny B. Kompleks Hp.Hb jest peroksydazą i wraz z ceruloplazminą hamuje peroksydację.

Ceruloplazmina (Cp) - zawierająca miedź glikoproteina osocza krwi, ma czwartorzędową strukturę, składa się z 8 podjednostek. Cp zawiera 6-7 jonów miedzi, co stanowi 95% całej miedzi w organizmie, Cp ją transportuje, a miedź odgrywa znaczącą rolę w tworzeniu struktury czwartorzędowej. W tworzeniu aktywnego centrum. Polimorfizm genetyczny Zob. Głównym źródłem syntezy Cp jest wątroba, ale niektóre tkanki są również zdolne do jej produkcji: limfocyty, komórki śledziony, tkanka mózgowa i oskrzela. Syntetyzowany jest gen Cp o długości 65 kb, zlokalizowany na chromosomie 3, zawiera 20 egzonów.

Funkcje Cp są różnorodne:

Jest ferroksydazą - utlenia żelazo 2-wartościowe do żelaza 3-wartościowego, które jest włączane do transferyny. Transferyna transportuje żelazo do szpiku kostnego, gdzie syntetyzowany jest hem. Zatem Cp promuje hematopoezę przez aktywność ferrooksydazy;

Działa antyoksydacyjnie, nasila wiązanie utlenionych jonów żelaza z transferyną - wyklucza je z reakcji peroksydacji, Cp usuwa radiotoksyny, konserwuje układ krwiotwórczy i tym samym zwiększa przeżywalność organizmu;

Śr znacznie wzrasta w surowicy krwi w różnych chorobach zakaźnych, ma działanie przeciwzapalne;

Śr reguluje poziom amin biogennych w organizmie, bierze udział w metabolizmie amin biogennych – mediatorów układu nerwowego, reguluje poziom norepinefryny, adrenaliny, serotoniny.

Transferyna (Tf) - glikoproteina zawierająca żelazo z m.m. 76-80 kDa. Cząsteczka jest skręcona i ma 2 domeny kuliste, z których każda ma miejsce wiązania żelaza. Kompleks metal-białko jest stabilny. Syntezę przeprowadza się z genu transferyny, który znajduje się na chromosomie 3, jest syntetyzowany w hepatocytach. Transferyna otrzymuje energię z hemoglobiny. Stare erytrocyty są wychwytywane przez makrofagi, które pod wpływem działania hemeoksykinazy uwalniają żelazo z pierścienia protoporfiryny i przekazują je transferynie.

Transferyna znajduje się podczas elektroforezy we frakcji B - globuliny, występuje w 3 lub więcej stanach genetycznych. Kompleks transferyny z żelazem zmienia kolor na pomarańczowy, tutaj żelazo występuje w postaci 3-wartościowej. Stężenie u zdrowych osób wynosi od 200 do 400 mg%. Zidentyfikowano 19 rodzajów Tf, różniących się wielkością ładunku białkowego cząsteczki, składem aminokwasowym i liczbą cząsteczek kwasu sialowego. Typy są związane z cechami dziedzicznymi. Zwykle Tf jest wysycone żelazem w 1/3, dodatkowa ilość żelaza, która może wiązać się z transferyną, to nienasycona (utajona) zdolność wiązania żelaza przez surowicę krwi.

W osoczu zdrowej osoby transferyna występuje w 4 formach molekularnych: 1. Apotransferyna - niezwiązana z żelazem; 2. Monoiron transferyna C - żelazo zajmuje jedno miejsce wiązania w domenie C-końcowej. 3. Monoiron transferrin N - żelazo tylko w miejscu N. 4. Dizhelezisty transferyna - żelazo w domenach C i N.

Transferyna w surowicy jest źródłem żelaza dla wszystkich komórek organizmu. Do wejścia żelaza do komórek istnieją specjalne mechanizmy - receptor transferyny, składa się z 2 domen z m.m. 180 kDa. Wiązanie 2 cząsteczek transferyny jest możliwe na każdej domenie. Poziom ekspresji receptora odzwierciedla zapotrzebowanie komórki na pobieranie żelaza, które jest określone przez szybkość podziału komórki. Gdy transferyna jest przyłączona do receptora, kompleks ulega endocytozie i żelazo jest uwalniane z transferyny przy niskim pH. Następnie żelazo jest transportowane przez błonę endosomalną do wewnątrzkomórkowej puli żelaza, a kompleks apotransferyna-receptor wraca na zewnętrzną powierzchnię komórki za pomocą pęcherzyków wewnątrzkomórkowych. Receptor pozostaje włączony do błony, podczas gdy apotransferyna jest uwalniana do środowiska.

Wzrost poziomu transferyny obserwuje się przy niedoborze żelaza, może poprzedzać rozwój anemii.Spadek poziomu transferyny obserwuje się w wielu procesach przewlekłych, z marskością wątroby, utratą białka podczas oparzeń, zespołem nerczycowym i zapaleniem żołądka i jelit , nowotwory złośliwe.

Hemoglobina- w swoim składzie zawiera również żelazo, stanowi molekularną podstawę funkcji oddechowych krwi, transportuje tlen i dwutlenek węgla. Masa cząsteczkowa wynosi 66 kDa, kształt cząsteczki jest kulisty. Hemoglobina jest dobrze rozpuszczalna w wodzie. Hemoglobina składa się z białka globiny i hemu (ferroprotoporfiryny) połączonych ze sobą niekowalencyjnie. Klejnot to płaska cząsteczka z jonem żelaza w środku jądra protoporfiryny. Białko hemoglobiny - globina składa się z 2 łańcuchów alfa i 2 łańcuchów B, tj. tworzy tetramer wewnątrz jamy, w który zamieniane są niepolarne grupy aminokwasów. Chronią molekułę od wewnątrz przed kontaktem z wodą i stabilizują molekułę jako całość. Poziom hemoglobiny wynosi normalnie 132-164 g/l, wzrasta wraz z niedotlenieniem, przy przewlekłej niewydolności płuc. Wrodzone wady serca, utrata płynności ciała, zatrucie gazem węglowym. Zmniejsza się wraz z zaburzeniem zdolności wchłaniania żelaza, ostrym krwawieniem, hemolizą, szpiczakiem kostnym, zwłóknieniem, osteoblastami, rakiem, uszkodzeniem nerek.

mioglobina- chromoproteina, zawarta w mięśniu sercowym i mięśniach szkieletowych, dlatego jej zawartość we krwi wzrasta wraz z zawałem mięśnia sercowego i uszkodzeniem mięśni. Wartość jego oznaczania występuje w pierwszych godzinach zawału mięśnia sercowego (IFM), zwłaszcza w przebiegu nietypowym, w tym przypadku wzrost mioglobiny występuje po 2-3 godzinach u 92% pacjentów, po 5 godzinach u 100%. Spadek stężenia występuje w różnych typach, co ma wartość prognostyczną. Typ 1 - lityczny - charakteryzuje się jednym szczytem wzrastającego stężenia ze stopniowym spadkiem o 16-36 godzin. Jest to typowe dla niepowikłanego przebiegu IFM. Typ 11 - gorączkowy przebiega w postaci spazmatycznych zmian od dużej liczby do normalnej w ciągu pierwszych 24 godzin. Typ 111 - stały charakteryzuje się stałą wysoką zawartością mioglobiny z niewielkimi wahaniami. Obserwuje się go w IFM powikłanym zakrzepowym zapaleniem wsierdzia.

Składniki układu dopełniacza- to nie jedno białko, ale złożony system białek, obejmujący około 20 oddziałujących na siebie składników: C1, C2, C3..... C9, czynnik B, czynnik D oraz szereg białek regulatorowych. Wszystkie te składniki są rozpuszczalnymi białkami o m.m. od 24 000 do 400 000 D krążących we krwi i płynie tkankowym. Większość z nich jest nieaktywna, dopóki nie zostanie aktywowana przez odpowiedź immunologiczną (z udziałem przeciwciał) lub bezpośrednio przez inwazyjny mikroorganizm.

Jednym z możliwych skutków aktywacji dopełniacza jest sekwencyjne połączenie tzw. późnych składników (C5, C6, C6, C7, C8 i C9) w duży kompleks białkowy. Powoduje lizę komórek (kompleks lityczny lub atakujący błonę). Agregacja późnych składników następuje w wyniku szeregu następujących po sobie reakcji aktywacji proteolitycznej z udziałem wczesnych składników (C1, C2, C3, C4, czynnik b i czynnik D). Większość z tych wczesnych składników to proenzymy. Sekwencyjnie aktywowane przez proteolizę. Kiedy którykolwiek z tych proenzymów jest rozszczepiany, staje się aktywnym enzymem proteolitycznym i rozszczepia następny proenzym i tak dalej. Ponieważ wiele aktywowanych składników wiąże się ściśle z błonami, większość tych zdarzeń ma miejsce na powierzchni komórki.

Centralnym składnikiem tej kaskady proteolitycznej jest składnik C3. Jego aktywacja przez rozszczepienie jest główną reakcją całego łańcucha układu dopełniacza. Można go aktywować w sposób klasyczny i alternatywny. W obu przypadkach C3 jest cięte przez konwertazę C3. Dwa różne szlaki prowadzą do powstania różnych konwertaz C3. Konwertaza C3 rozszczepia C3 na 2 fragmenty - duży C3b i C3a. C3b - wiąże się z błoną komórki docelowej i konwertazą C3. W efekcie powstaje duży kompleks enzymatyczny o zmodyfikowanej specyficzności – konwertaza C5. Następnie konwertaza C5 rozszczepia C5 iw ten sposób inicjuje składanie kompleksu litycznego z późnych składników C5 do C9. Każdy aktywowany enzym rozszczepia wiele cząsteczek następnego proenzymu. Kaskada aktywacji wczesnych składników działa jak wzmacniacz: każda cząsteczka aktywowana na początku całego łańcucha prowadzi do powstania wielu składników litycznych.

Funkcje białek układu dopełniacza: 1. Opsonizacja - czyli przyłączanie się do m.o. łączą się z nimi różne molekuły będące ligandami i komórki jednojądrzaste z określonymi receptorami - wszystko to wzmaga fagocytozę. 2. Udział w reakcjach zapalnych, aktywacja układu dopełniacza prowadzi do uwolnienia z bazofilów tkankowych substancji biologicznie czynnych, które stymulują odpowiedź zapalną. 3. C3a może powodować migrację neutrofilów do miejsca zapalenia, indukując ich przyczepianie się do śródbłonka naczyniowego, wywołując w nich wybuch oddechowy i degranulację. 4. C5a sprzyja chemotaksji, agregacji i degranulacji neutrofili oraz tworzeniu wolnych rodników tlenowych. 5. Funkcja cytotoksyczna lub lityczna. W końcowej fazie aktywacji dopełniacza powstaje kompleks atakujący błonę (MAC), który atakuje błonę komórkową bakterii i ją niszczy.

Alfa 2 - makroglobulina- inhibitor proteazy, reguluje aktywność różnych enzymów proteolitycznych (Każda podjednostka ma dwa polipeptydy łańcuchtrypsyny, chymotrypsyny, trombiny, kalikreiny, plazminy). Makroglobulina alfa znacznie różni się od innych białek surowicy. To jest glikoproteina m.m. 716000 - 725 000D, składa się z 2 niekowalencyjnie połączonych podjednostek. Cząsteczka zawiera wapń i magnez. Makroglobulina alfa2 jest odporna na temperaturę, wrażliwa na kwaśne reakcje środowiska. W temperaturze 40 stopni C aktywność jest zachowana. Jest syntetyzowana w wątrobie, obecna w surowicy krwi, w płynie zewnątrzkomórkowym, maziowym, owodniowym, mózgowo-rdzeniowym, limfatycznym. Utrata tego białka jest śmiertelna.

Makroglobulina alfa 2 odpowiada za do 12% aktywności hamującej krwi. Tworzenie kompleksu między enzymem a inhibitorem jest złożoną, wieloetapową reakcją. W pierwszym etapie aktywna proteaza reaguje z makroglobuliną alfa 2, powstaje luźne wiązanie, w etapie 11 enzym rozszczepia wiązanie peptydowe, co prowadzi do zmiany konformacyjnej makroglobuliny alfa 2, a w etapie 111 do proteaza kowalencyjnie przyłącza się do określonego miejsca w cząsteczce makroglobuliny alfa 2. Prowadzi to do powstania zwartej struktury, do faktycznego wychwytu proteazy i jej zablokowania, tj. tak jakby alfa makroglobulina łapie enzym w swoją pułapkę i pozbawia proteazy aktywności proteolitycznej, dlatego nazywana jest restryktorem proteazy, a nie inhibitorem.

Poziom makroglobuliny alfa 2 jest obniżony w wirusowym zapaleniu wątroby, we wczesnych stadiach oparzeń. Wzrost obserwuje się w zespole nerczycowym u pacjentów z cukrzycą. Białko odgrywa szczególną rolę w nowotworach złośliwych. Przy daleko zaawansowanym procesie jego poziom spada 2-5 razy na tle wzrostu masy guza.

Fibrynogen - glikoproteina z m.m. 340000D, składa się z 3 tysięcy aminokwasów, ma 2 dimery w każdych 3 łańcuchach polipeptydowych. Fibrynogen jest wytwarzany przez komórki miąższowe wątroby i dostaje się do krwioobiegu. Fibrynogen pod wpływem trombiny jest przekształcany w fibrynę przez rodzaj proteolitycznej fragmentacji cząsteczki. Najpierw trombina odszczepia 2 peptyd A od cząsteczki fibrynogenu, tworząc wadliwe monomery fibryny - monomery des A. Następnie odcina się 2 peptydy B. Pojawiają się monomery A-B lub kompletne monomery fibryny.

Fibrynopeptydy A czasami pojawiają się we krwi - wskazuje to na wykrzepianie wewnątrznaczyniowe. Pozostała cząsteczka fibrynogenu - fibryna - monomer nabywa zdolność łączenia się z własnym rodzajem i tworzenia fibryny - polimeru, który reprezentuje żel. Montaż monomerów przechodzi przez etapy powstawania dimerów, które w sieciowaniu podłużnym i poprzecznym tworzą polimery fibrynowe – protofibryle, a następnie nici fibrynowe. Zakrzep z takiej fibryny jest łatwo rozpuszczany przez fibrynolizynę i nie może zapewnić pełnej homeostazy. Powoduje to krwawienie i słabe gojenie się ran.

2.4. Oznaczanie poszczególnych białek surowicy krwi

2.4.1. Oznaczanie haptoglobiny

Zasada metody: Haptoglobina w surowicy tworzy kompleks z roztworem hemoglobiny, który jest wytrącany przez rywanol. Zawartość haptoglobiny w surowicy krwi określa się fotometrycznie na podstawie poziomu hemoglobiny pozostałej w roztworze.

Odczynniki:

1. Rivanol. Dodać 15 ml wody destylowanej do 100 mg rivanolu, wstrząsać do całkowitego rozpuszczenia.

2. Hemoglobina. Dodać 10 ml wody destylowanej do 100 mg hemoglobiny, wstrząsać i wirować przez 10 minut przy 3000 obr./min w celu usunięcia agregatów.

3. roztwór siarczanu amonu 10%.

Postęp definicji: Do badania konieczne jest umieszczenie 3 próbek: eksperymentalnej, kontrolnej i standardowej.

Do badanej próbki dodaje się 0,3 ml wody destylowanej, 0,5 ml niezhemolizowanej surowicy, 0,2 ml roztworu hemoglobiny i miesza.

Do próbki kontrolnej dodaje się 0,5 ml wody destylowanej, 0,5 ml surowicy krwi i miesza. Obie próbki inkubuje się przez 10 minut w temperaturze pokojowej, po czym dodaje się 3 ml roztworu rivanolu.

Do standardowej próbki dodaje się 2,8 ml wody destylowanej i 0,2 ml hemoglobiny, miesza. Po 5 minutach wszystkie trzy próbki wiruje się przy 3000 obr./min przez 6-7 minut. Dodać 0,2 ml 10% roztworu siarczanu amonu do supernatantu i inkubować przez 60 minut w temperaturze pokojowej.

Ocena wyniku; obliczenia przeprowadza się według wzoru:

X \u003d ((Ec - (Eo - Ek) x2) / Ec, TO należy poprawić

gdzie X to stężenie haptoglobiny g/l; Ес, Ео, Ек – gęstość optyczna próbek wzorcowych, doświadczalnych, kontrolnych.

MUZEUM "PIERWSZY MIEJSKI SZPITAL KLINICZNY RATUNKÓW"

PÓŁNOCNY PAŃSTWOWY UNIWERSYTET MEDYCZNY

PRZEBIEG KLINICZNEJ DIAGNOSTYKI LABORATORYJNEJ

Białko całkowite, jego znaczenie i metody oznaczania

Wykonywane przez lekarza stażystę:

Gernet MM

Archangielsk, 2008

Wstęp

Klasyfikacja

Białka osocza

albuminy

Globuliny

Wartość kliniczna i diagnostyczna

Hipoproteinemia

hiperproteinemia

Metody oznaczania białka całkowitego w surowicy krwi

Spis wykorzystanej literatury

Wstęp

Białka to wysokocząsteczkowe związki organiczne zawierające azot, składające się z ponad 20 rodzajów alfa-aminokwasów. Warunkową granicą między dużymi polipeptydami a białkami jest masa cząsteczkowa 8000-10000. Białka osocza są syntetyzowane głównie w wątrobie, komórkach plazmatycznych, węzłach chłonnych, śledzionie i szpiku kostnym.

Ludzkie osocze krwi zawiera ponad 100 różnych białek, różniących się pochodzeniem i funkcją. Z 9-10% suchej pozostałości osocza krwi białka stanowią 6,5-8,5%.

Klasyfikacja

Proste (białka) (zawierają tylko aminokwasy)

Kompleks (białka) (aminokwasy i składniki nieaminokwasowe: hem, pochodne witamin, lipidy lub węglowodany)

Fibrylarny (stanowiący wiele gęstych tkanek)

Globularne (albuminy (4-5%), globuliny (2-3%), fibrynogen (0,2-0,4%)

Istnieją następujące klasy funkcjonalne białek:

Białka transportowe (transferyna)

Białka ostrej fazy (białko C-reaktywne)

Białka fazy innej niż ostra (albumina, transferyna)

Dopełniacz i czynniki krzepnięcia (dopełniacz C4, czynnik VIII)

Enzymy (amylaza)

Antyenzym (antytrombina III)

Proteohormony (insulina)

Immunoglobuliny (IgG)

Białka, których funkcje nie są dobrze poznane (kwas alfa-glikoproteinowy)

Fizjologiczną funkcją białek osocza jest utrzymanie koloidowego ciśnienia osmotycznego, pojemności buforowej osocza, aw niektórych przypadkach odkładanie (magazynowanie) cząsteczek lipidów, produktów przemiany materii, hormonów, substancji leczniczych i mikroelementów. Niektóre białka osocza pełnią funkcję enzymatyczną, immunoglobuliny zapewniają odporność humoralną. Składniki dopełniacza i białko C-reaktywne są ważne dla realizacji oporności nieswoistej, zwłaszcza w przypadku infekcji bakteryjnych. Równowaga między czynnikami krzepnięcia a inhibitorami zapewnia, że krew jest normalnie płynna i szybko krzepnie w przypadku urazu.

Białka osocza

albuminy:

Znormalizowana wartość to 56,5 - 66,8 (albumina w surowicy krwi stanowi około 60% białka całkowitego. Albuminy są syntetyzowane w wątrobie (około 15g/dobę), ich okres półtrwania wynosi około 17 dni. Ciśnienie onkotyczne osocza wynosi 65 -80% dzięki albuminie.Albumy pełnią ważną funkcję transportu wielu substancji biologicznie czynnych, w szczególności hormonów.Mają zdolność wiązania się z cholesterolem, bilirubiną.Znaczna część wapnia we krwi jest również związana z albuminami.Albuminy są w stanie łączyć z różnymi lekami.

Możliwe są zarówno zmiany jakościowe, jak i ilościowe albumin w osoczu krwi. Zmiany jakościowe albuminy są bardzo rzadkie ze względu na jednorodny skład tej frakcji białkowej; zmiany ilościowe objawiają się hiper- i hipoalbuminemią.

Hiperalbuminemię obserwuje się przy odwodnieniu w przypadku ciężkich obrażeń, z rozległymi oparzeniami, cholerą.

Hipoalbuminemia jest pierwotna (u noworodków na skutek niedojrzałości komórek wątroby) i wtórna, spowodowana różnymi stanami patologicznymi podobnymi do tych, które powodują hipoproteinemię. Hemodylucja może również odgrywać rolę w obniżaniu stężenia albumin, na przykład podczas ciąży. Spadkowi zawartości albuminy poniżej 22-24 g/l towarzyszy rozwój obrzęku płuc.)

globuliny:

Alfa 1 - 3,5 - 6,0 (głównymi składnikami tej frakcji są α 1 -antytrypsyna, α 1 - lipoproteina, kwaśna α 1 - glikoproteina) (Zmiany frakcji α 1 - globulin obserwuje się w stanach ostrych, podostrych, zaostrzeniach przewlekłych procesy zapalne; uszkodzenie wątroby; wszystkie procesy rozpadu tkanek lub proliferacji komórek.Obserwuje się spadek frakcji α 1 - globulin przy niedoborze α 1 - antytrypsyny, hipo - α 1 - lipoproteinemia.)

Alfa 2 - 6,9 - 10,5 (frakcja zawiera α 2 - makroglobulinę, haptoglobinę, alipoproteiny A, B (apo-A, apo-B), C, ceruloplazminę) (wzrost frakcji α 2 - globulin obserwuje się we wszystkich typach ostrych procesów zapalnych, zwłaszcza o wyraźnym charakterze wysiękowym i ropnym (zapalenie płuc, ropniak opłucnej, inne rodzaje procesów ropnych); choroby związane z zaangażowaniem tkanki łącznej w proces patologiczny (kolagenoza, choroby autoimmunologiczne, choroby reumatyczne); nowotwory złośliwe ; w fazie rekonwalescencji po oparzeniach termicznych; zespół nerczycowy; hemoliza krwi in vitro. Spadek frakcji obserwuje się w cukrzycy, zapaleniu trzustki (czasami), żółtaczce wrodzonej pochodzenia mechanicznego u noworodków, toksycznym zapaleniu wątroby. α 2 - globuliny obejmują większość białek ostrej fazy, a wzrost ich zawartości odzwierciedla nasilenie reakcji stresowej i procesów zapalnych w tego typu patologiach.

Beta - 7,3 - 13,0 (frakcja β zawiera transferynę, hemopeksynę, składniki dopełniacza, immunoglobuliny i lipoproteiny) (wzrost frakcji beta-globulin wykrywa się w pierwotnych i wtórnych hiperlipoproteinemiach, chorobach wątroby, zespole nerczycowym, krwawiących wrzodach żołądka, niedoczynności tarczycy Zmniejszona zawartość beta-globulin jest wykrywana w lipoproteinemii gopo-beta.

Gamma - 12,8 - 19,0 (frakcja γ zawiera Ig (IgG, IgA, IgM IgD, IgE), dlatego obserwuje się wzrost zawartości γ-globulin podczas reakcji układu odpornościowego, gdy wytwarzane są AT i autoprzeciwciała: z infekcjami wirusowymi i bakteryjnymi, stanami zapalnymi, kolagenozą, niszczeniem tkanek i oparzeniami. Znaczna hipergammaglobulinemia, odzwierciedlająca aktywność procesu zapalnego, jest charakterystyczna dla przewlekle czynnego zapalenia wątroby i marskości wątroby. Wzrost frakcji γ - globulin obserwuje się w 88-92% pacjentów z przewlekłym aktywnym zapaleniem wątroby (a u 60-65% pacjentów jest bardzo wyraźne - do 26 g/l i więcej). Niemal takie same zmiany obserwuje się u pacjentów z wysoce aktywną i zaawansowaną marskością wątroby, podczas gdy często zawartość γ-globuliny przewyższa zawartość albumin, co jest uważane za zły znak prognostyczny.

W niektórych chorobach możliwa jest zwiększona synteza białek, które wchodzą do frakcji γ-globuliny, a we krwi pojawiają się patologiczne białka - paraproteiny, które są wykrywane za pomocą elektroforezy. Immunoelektroforeza jest potrzebna do wyjaśnienia natury tych zmian. Podobne zmiany obserwuje się w szpiczaku mnogim, chorobie Waldenströma.

Spadek zawartości γ-globulin ma charakter pierwotny i wtórny.

Istnieją trzy główne typy pierwotnej hipogammaglobulinemii: fizjologiczna (u dzieci w wieku 3-5 miesięcy), wrodzona i idiopatyczna. Przyczynami wtórnej hipogammaglobulinemii mogą być liczne choroby i stany, które prowadzą do wyczerpania układu odpornościowego.

Porównanie kierunku zmian zawartości albumin i globulin ze zmianami zawartości białka ogólnego daje podstawę do wniosku, że hiperproteinemia częściej wiąże się z hiperglobulinemią, podczas gdy hipoproteinemia jest najczęściej spowodowana hipoalbuminemią. W przeszłości szeroko stosowano obliczanie stosunku albumina-globulina, czyli stosunku wielkości frakcji albuminy do wielkości frakcji globuliny. Zwykle liczba ta wynosi 2,5-3,5. U pacjentów z przewlekłym zapaleniem wątroby i marskością wątroby współczynnik ten spada do 1,5, a nawet do 1 z powodu spadku zawartości albumin i wzrostu frakcji globulin. W ostatnich latach coraz więcej uwagi poświęca się oznaczaniu zawartości prealbumin, zwłaszcza u krytycznie chorych resuscytowanych pacjentów, którzy są żywieni pozajelitowo. Spadek stężenia prealbuminy jest wczesnym i czułym testem niedoboru białka w organizmie pacjenta.)

Stosunek A/G jest powszechnie stosowany jako wskaźnik stosunku albumin do globulin.

Zmiany tego współczynnika można zaobserwować w marskości wątroby, kłębuszkowym zapaleniu nerek, zespole nerczycowym, ostrym zapaleniu wątroby, toczniu rumieniowatym układowym.

Stężenie białek w osoczu krwi zależy od stosunku szybkości ich syntezy do wydalania z organizmu oraz objętości dystrybucji.

W wątrobie powstaje wiele białek, komórki plazmatyczne i limfocyty syntetyzują immunoglobuliny, makrofagi - białka układu dopełniacza. Bierna utrata białek o niskiej masie cząsteczkowej zachodzi przez kłębuszki nerkowe i ścianę jelita. Niektóre z tych białek są ponownie wchłaniane lub wchłaniane i rozkładane w błonie śluzowej jelit. Większość białek osocza po wchłonięciu przez pinocytozę jest katabolizowana w komórkach śródbłonka naczyń włosowatych lub fagocytach jednojądrzastych.

Fizjologiczne role białek krwi są liczne, główne z nich są następujące:

· Utrzymują ciśnienie koloidowo-onkotyczne, utrzymując objętość krwi, wiążąc wodę i zatrzymując ją, zapobiegając wydostawaniu się jej z krwioobiegu;

Weź udział w procesach krzepnięcia krwi;

· Utrzymują stałość pH krwi, tworząc jeden z systemów buforowych krwi;

Łącząc się z wieloma substancjami (ChS, bilirubina itp.), a także z lekami, dostarczają je do tkanek.

Utrzymuj prawidłowy poziom kationów we krwi, tworząc z nimi związki nie ulegające dializie (na przykład 40-50% wapnia w surowicy jest związane z białkami; znaczna część żelaza, miedzi, magnezu i innych pierwiastków śladowych jest również związana z białka);

· Odgrywają ważną rolę w procesach odpornościowych;

Służyć jako rezerwa aminokwasów;

· Pełnią funkcję regulacyjną (hormony, enzymy i inne biologicznie aktywne substancje białkowe).

Wartość kliniczna i diagnostyczna

Normoproteinemia - prawidłowa zawartość białka całkowitego

Hipoproteinemia - niski poziom białka całkowitego

Hiperproteinemia - wysoka zawartość białka

Hipoproteinemia

1. Niewystarczające spożycie białka pokarmowego, zwykle obserwowane przy niedożywieniu, głodzeniu, nowotworach, zwężeniu przełyku, upośledzeniu funkcji przewodu pokarmowego (z powodu pogorszenia trawienia i wchłaniania białkowych składników pokarmu), np. przy długotrwałym procesy zapalne jelit.

Według A.A. Pokrovsky'ego nawet niezrównoważony skład aminokwasowy pożywienia może czasami prowadzić do hipoproteinemii.

Aby zapewnić prawidłowe procesy życiowe, organizm wykorzystuje frakcję albuminową białek osocza krwi. Przy zwiększonym spożyciu albumin (głównie powodujących onkotyczne ciśnienie krwi) rozwija się tzw. obrzęk onkotyczny lub głodowy. Ogólnie rzecz biorąc, każdemu spadkowi zawartości białka w osoczu krwi poniżej 5 g% często towarzyszy hipoproteinemiczny obrzęk tkanek.

2. Zmniejszenie procesów biosyntezy białek (przewlekłe miąższowe zapalenie wątroby, choroby ostre i przewlekłe, przedłużone procesy ropienia, nowotwory złośliwe, ciężka tyreotoksykoza itp.).

3. Utrata białka przez organizm podczas ostrych i przewlekłych krwawień, z gwałtownie zwiększoną przepuszczalnością ścian naczyń włosowatych (z ich toksycznym uszkodzeniem, gdy białka krwi są uwalniane do tkanek), z krwotokami, powstawaniem rozległych wysięków, wysięków w surowicach ubytki i obrzęki.

Uwalnianie białek (głównie albumin) z krwioobiegu następuje, gdy filtr nerkowy jest zaburzony z powodu organicznych chorób nerek (zwłaszcza nerczycy i amyloidozy), w których białko prawie zawsze znajduje się w moczu, a także w oparzeniach.

4. Defektoproteinemia (albuminemia) - wrodzony brak lub niedostateczna zawartość ceruloplazminy w osoczu krwi w chorobie Wilsona.

5. U kobiet w okresie laktacji iw ostatnich miesiącach ciąży.

6. Zespół nerczycowy

7. Kwashiorkor (ostry niedobór białka)

8. Zespół soli retencyjnej

hiperproteinemia

1. Poważne odwodnienie

2. Z pogrubieniem krwi z powodu niewielkiej utraty płynów, co dzieje się z obfitą biegunką, wzmożoną potliwością, nieustępliwymi wymiotami, moczówką prostą, cholerą, niedrożnością jelit, uogólnionym zapaleniem otrzewnej, ciężkimi oparzeniami, pozbawieniem wody.

3. W przewlekłym zapaleniu wielostawowym oraz niektórych i niektórych przewlekłych procesach zapalnych.

4. Uporczywą hiperproteinemię do 12 g% i powyżej obserwuje się w szpiczaku mnogim (plazmacoma), makroglobulinemii Vandelströma, w której pojawiają się dodatkowe ogniska w płaskich kościach czaszki i powstawanie „nieprawidłowych”, patologicznych białek - paraprotein.

Hipoproteinemia jest prawie zawsze związana z hipoalbuminemią, a hiperproteinemia z hiperglobulinemią.

Organizm kompensuje hipoalbuminemię hiperglobulinemią (nawet jeśli nie dochodzi do podrażnienia układu siateczkowo-śródbłonkowego) w celu utrzymania poziomu koloidalnego ciśnienia osmotycznego. Przeciwnie, wzrost globulin jest kompensowany przez hipoalbuminemię.

Ważną wartością diagnostyczną jest wyjaśnienie zależności ilościowych pomiędzy poszczególnymi frakcjami surowicy krwi. Ich badania pozwalają różnicować choroby nawet przy niezmienionej zawartości białka ogólnego w surowicy.

Metody oznaczania białka całkowitego w surowicy krwi

Wartości referencyjne stężenia białka całkowitego w surowicy krwi - 65-85 g/l

1. Azot

2. Oznaczanie ciężaru właściwego surowicy

3. Masa (grawimetryczna), gdy białka krwi są wytrącane, suszone do stałej masy i ważone na wadze analitycznej.

4. Refraktometryczny

5. Kolorymetryczny

6. Neflometryczny

7. Polarymetryczny

8. Spektrometryczny

1. Refraktometr IRF - 454 B2M

przeznaczony jest do oznaczania białka w surowicy krwi, płynie mózgowo-rdzeniowym, kontroli stężenia leków, pomiaru gęstości moczu.

2. Kobas integra – Całkowity białko gen .2

Zasada testu: Dwuwartościowa miedź reaguje w roztworze alkalicznym z wiązaniami peptydowymi białek, tworząc charakterystyczny purpurowy kompleks biuretowy.

3. Oznaczanie frakcji białkowych surowicy krwi metodą elektroforezy na filmie z octanu celulozy.

Roztwór buforowy przeznaczony jest do elektroforetycznego rozdziału białek surowicy krwi na membranach z octanu celulozy z późniejszym densytometrycznym oznaczeniem frakcji białkowych.

ZASADA METODY

Zasada rozdziału elektroforetycznego białek opiera się na różnej prędkości ruchu cząsteczek białka surowicy krwi w stałym polu elektrycznym o określonym natężeniu. Oddzielone frakcje białkowe barwi się barwnikiem. Intensywność barwy frakcji białkowych jest proporcjonalna do ich liczby.

ANALIZOWANE PRÓBKI

Surowica wolna od hemolizy, lipemii i żółtaczki. Frakcje białkowe surowicy krwi są stabilne w szczelnie zamkniętej probówce w temperaturze 18-25 przez 8 godzin, w temperaturze 2-8 przez 3 dni, w temperaturze 20 przez 1 miesiąc.

ANALIZA

1. Przeprowadzenie elektroforezy

1.1. ostrożnie połóż suche membrany na powierzchni buforu do elektroforezy, unikając ich szybkiego zanurzenia, i trzymaj do całkowitego zwilżenia. Delikatnie osuszyć zwilżone membrany między arkuszami grubej bibuły filtracyjnej, zapobiegając ich wysychaniu. Przed nałożeniem próbek pożądane jest przeprowadzenie fazy preforezy. W tym celu należy umieścić membranę w komorze do elektroforezy i włączyć prąd w wybranym trybie na 10 minut. Fazę preforezy można zastąpić przedłużonym moczeniem membrany w roztworze buforowym (kilka godzin).

1.2. za pomocą aplikatora nanieść analizowane próbki surowicy krwi w odległości 2-3 cm od krawędzi katody membrany. Umieścić membranę w komorze elektroforetycznej i podłączyć prąd.

2. Przetwarzanie elektroferogramu

2.1. barwnik Crimson S.

Po wyłączeniu prądu ostrożnie przenieść membranę do roztworu barwnika na 3-5 minut, następnie dwukrotnie na 3 minuty do 5-7% roztworu kwasu octowego (do wybielenia tła).

1.2. przetworzyć elektroforegram za pomocą skanera i programu komputerowego.

4. Test tymolowy

Zasada metody:

Beta-globuliny, gamma-globuliny i lipoproteiny w surowicy wytrąca się przy pH 7,55 za pomocą odczynnika tymolowego. W zależności od ilości i wzajemnego stosunku frakcji białkowych podczas reakcji dochodzi do zmętnienia, którego intensywność mierzy się turbidymetrycznie.

Wartość kliniczna i diagnostyczna:

Test tymolowy jest bardziej odpowiedni do badania czynnościowego wątroby niż próbki oporne na koloidy. Uważa się, że jest ona pozytywna w 90-100% przypadków choroby Botkina (już w stadium przedmózgowym iw postaci anikterycznej) oraz w toksycznym zapaleniu wątroby. Reakcja jest pozytywna w posthepatitis i postnecrotic, zwłaszcza żółtaczkowej marskości wątroby (w przeciwieństwie do innych postaci marskości), chorobach kolagenowych, malarii i infekcjach wirusowych. W przypadku żółtaczki obturacyjnej jest ona (w 75% przypadków) ujemna, co ma różnicową wartość diagnostyczną.

W przypadku żółtaczki obturacyjnej test staje się pozytywny tylko wtedy, gdy proces jest skomplikowany przez miąższowe zapalenie wątroby. W różnicowaniu żółtaczki obturacyjnej od żółtaczki miąższowej duże znaczenie ma zastosowanie testu tymolowego z testem Bursteina (dla beta- i pre-betalipoprotein).

W przypadku żółtaczki miąższowej oba testy są dodatnie, w przypadku żółtaczki obturacyjnej test tymolowy jest ujemny, a test Burshteina jest wyraźnie dodatni.

Spis wykorzystanej literatury

1. Białka specyficzne w klinicznej diagnostyce laboratoryjnej: pytania i odpowiedzi. - Töpfer G., Toma R., Tsavta B., M., 2004. - 96s

MUZEUM "PIERWSZY MIEJSKI SZPITAL KLINICZNY RATUNKÓW"

PÓŁNOCNY PAŃSTWOWY UNIWERSYTET MEDYCZNY

PRZEBIEG KLINICZNEJ DIAGNOSTYKI LABORATORYJNEJ

Białko całkowite, jego znaczenie i metody oznaczania

Wykonywane przez lekarza stażystę:

Gernet MM

Archangielsk 2008

WSTĘP

Klasyfikacja

Białka osocza

albuminy

Globuliny

Wartość kliniczna i diagnostyczna

Hipoproteinemia

hiperproteinemia

Metody oznaczania białka całkowitego w surowicy krwi

Spis wykorzystanej literatury

WSTĘP

Ludzkie osocze krwi zawiera ponad 100 różnych białek, różniących się pochodzeniem i funkcją. Z 9-10% suchej pozostałości osocza krwi białka stanowią 6,5-8,5%.

Klasyfikacja

Proste (białka) (zawierają tylko aminokwasy)

Kompleks (białka) (aminokwasy i składniki nieaminokwasowe: hem, pochodne witamin, lipidy lub węglowodany)

Fibrylarny (stanowiący wiele gęstych tkanek)

Globularne (albuminy (4-5%), globuliny (2-3%), fibrynogen (0,2-0,4%)

Istnieją następujące klasy funkcjonalne białek:

Białka transportowe (transferyna)

Białka ostrej fazy (białko C-reaktywne)

Białka fazy innej niż ostra (albumina, transferyna)

Dopełniacz i czynniki krzepnięcia (dopełniacz C4, czynnik VIII)

Enzymy (amylaza)

Antyenzym (antytrombina III)

Proteohormony (insulina)

Immunoglobuliny (IgG)

Białka, których funkcje nie są dobrze poznane (kwas alfa-glikoproteinowy)

Belosocze krwi k

albuminy:

Hiperalbuminemię obserwuje się przy odwodnieniu w przypadku ciężkich obrażeń, z rozległymi oparzeniami, cholerą.

globuliny:

Alfa 1 - 3,5 - 6,0 (główne składniki tej frakcji to b 1 -antytrypsyna, b 1 - lipoproteina, kwaśna b 1 - glikoproteina) (Zmiany frakcji b 1 - globuliny obserwuje się w ostrym, podostrym, zaostrzeniu przewlekłego procesy zapalne; uszkodzenie wątroby; wszystkie procesy rozpadu tkanek lub proliferacji komórek.Obserwuje się spadek frakcji b 1 - globulin z niedoborem b 1 - antytrypsyny, hipo - b 1 - lipoproteinemia.)

Alfa 2 - 6,9 - 10,5 (frakcja zawiera b 2 - makroglobulinę, haptoglobinę, alipoproteiny A, B (apo-A, apo-B), C, ceruloplazminę) (wzrost frakcji b 2 - globuliny obserwuje się we wszystkich typach ostrych procesy zapalne, zwłaszcza o wyraźnym charakterze wysiękowym i ropnym (zapalenie płuc, ropniak opłucnej, inne rodzaje procesów ropnych); choroby związane z zaangażowaniem tkanki łącznej w proces patologiczny (kolagenoza, choroby autoimmunologiczne, choroby reumatyczne); nowotwory złośliwe; w etap rekonwalescencji po oparzeniach termicznych zespół nerczycowy hemoliza krwi in vitro Spadek frakcji obserwuje się w cukrzycy, zapaleniu trzustki (czasami), żółtaczce wrodzonej pochodzenia mechanicznego u noworodków, toksycznym zapaleniu wątroby B 2 - globuliny obejmują większość białek ostrej fazy Wzrost ich zawartości odzwierciedla nasilenie reakcji stresowej i procesów zapalnych w tego typu patologiach.

Beta - 7,3 - 13,0 (frakcja b zawiera transferynę, hemopeksynę, składniki dopełniacza, immunoglobuliny i lipoproteiny) (wzrost frakcji beta-globuliny wykrywa się w pierwotnych i wtórnych hiperlipoproteinemiach, chorobach wątroby, zespole nerczycowym, krwawiących wrzodach żołądka, niedoczynności tarczycy. Zmniejszona zawartość beta-globulin jest wykrywana w lipoproteinemii gopo-beta.

Gamma - 12,8 - 19,0 (g-frakcja zawiera Ig (IgG, IgA, IgM IgD, IgE), dlatego wzrost zawartości g-globulin obserwuje się podczas reakcji układu odpornościowego, kiedy wytwarzane są AT i autoprzeciwciała: z infekcjami wirusowymi i bakteryjnymi, stanami zapalnymi, kolagenozą, niszczeniem tkanek i oparzeniami. Znaczna hipergammaglobulinemia, odzwierciedlająca aktywność procesu zapalnego, jest charakterystyczna dla przewlekle czynnego zapalenia wątroby i marskości wątroby. Wzrost frakcji g-globuliny obserwuje się u 88 -92% pacjentów z przewlekłym aktywnym zapaleniem wątroby (a u 60-65% pacjentów jest bardzo wyraźne - do 26 g/l i więcej). Prawie takie same zmiany obserwuje się u pacjentów z wysoce aktywną i zaawansowaną marskością wątroby , przy tym wszystkim zawartość g-globuliny często przewyższa zawartość albuminy, co jest uważane za zły znak prognostyczny.

W niektórych chorobach możliwa jest zwiększona synteza białek, które wchodzą do frakcji g-globuliny, a we krwi pojawiają się patologiczne białka - paraproteiny, które są wykrywane przez elektroforezę. Immunoelektroforeza jest potrzebna do wyjaśnienia natury tych zmian. Podobne zmiany obserwuje się w szpiczaku mnogim, chorobie Waldenströma.

Spadek zawartości g-globulin ma charakter pierwotny i wtórny.

Stosunek A/G jest powszechnie stosowany jako wskaźnik stosunku albumin do globulin.

Zmiany tego współczynnika można zaobserwować w marskości wątroby, kłębuszkowym zapaleniu nerek, zespole nerczycowym, ostrym zapaleniu wątroby, toczniu rumieniowatym układowym.

Stężenie białek w osoczu krwi zależy od stosunku szybkości ich syntezy do wydalania z organizmu oraz objętości dystrybucji.

Fizjologiczne role białek krwi są liczne, główne z nich są następujące:

· Utrzymują ciśnienie koloidowo-onkotyczne, utrzymując objętość krwi, wiążąc wodę i zatrzymując ją, zapobiegając wydostawaniu się jej z krwioobiegu;

Weź udział w procesach krzepnięcia krwi;

· Utrzymują stałość pH krwi, tworząc jeden z systemów buforowych krwi;

Łącząc się z wieloma substancjami (ChS, bilirubina itp.), a także z lekami, dostarczają je do tkanek.

· Odgrywają ważną rolę w procesach odpornościowych;

Służyć jako rezerwa aminokwasów;

· Pełnią funkcję regulacyjną (hormony, enzymy i inne biologicznie aktywne substancje białkowe).

DOwartość linico-diagnostyczna

Normoproteinemia - prawidłowa zawartość białka całkowitego

Hipoproteinemia - zmniejszone białko całkowite

Hiperproteinemia - wysoka zawartość białka

Hipoproteinemia

Według A.A. Pokrovsky'ego nawet niezrównoważony skład aminokwasowy pożywienia może czasami prowadzić do hipoproteinemii.

4. Defektoproteinemia (albuminemia) - wrodzony brak lub niedostateczna zawartość ceruloplazminy w osoczu krwi w chorobie Wilsona.

5. U kobiet w okresie laktacji iw ostatnich miesiącach ciąży.

6. Zespół nerczycowy

7. Kwashiorkor (ostry niedobór białka)

8. Zespół soli retencyjnej

hiperproteinemia

1. Poważne odwodnienie

3. W przewlekłym zapaleniu wielostawowym oraz niektórych i niektórych przewlekłych procesach zapalnych.

4. Uporczywą hiperproteinemię do 12 g% i powyżej obserwuje się w szpiczaku mnogim (plazmacoma), makroglobulinemii Vandelströma, w której w płaskich kościach czaszki pojawiają się dodatkowe ogniska i powstawanie „nieprawidłowych”, patologicznych białek - paraprotein.

Hipoproteinemia jest prawie zawsze związana z hipoalbuminemią, a hiperproteinemia z hiperglobulinemią.

Metody oznaczania białka całkowitego w surowicy krwi

Wartości referencyjne stężenia białka całkowitego w surowicy krwi - 65-85 g/l

1. Azot

2. Oznaczanie ciężaru właściwego surowicy

3. Masa (grawimetryczna), gdy białka krwi są wytrącane, suszone do stałej masy i ważone na wadze analitycznej.

4. Refraktometryczny

5. Kolorymetryczny

6. Neflometryczny

7. Polarymetryczny

8. Spektrometryczny

1. Refraktometr IRF - 454 B2M

przeznaczony jest do oznaczania białka w surowicy krwi, płynie mózgowo-rdzeniowym, kontroli stężenia leków, pomiaru gęstości moczu.

2. Kobasintegra - Całkowitybiałkogen.2

Zasada testu: Dwuwartościowa miedź reaguje w roztworze alkalicznym z wiązaniami peptydowymi białek, tworząc charakterystyczny purpurowy kompleks biuretowy.

3. Oznaczanie frakcji białkowych surowicy krwi metodą elektroforezy na filmie z octanu celulozy.

Roztwór buforowy przeznaczony jest do elektroforetycznego rozdziału białek surowicy krwi na membranach z octanu celulozy z późniejszym densytometrycznym oznaczeniem frakcji białkowych.

ZASADA METODY

ANALIZOWANE PRÓBKI

ANALIZA

1. Przeprowadzenie elektroforezy

1.2. za pomocą aplikatora nanieść analizowane próbki surowicy krwi w odległości 2-3 cm od krawędzi katody membrany. Umieścić membranę w komorze elektroforetycznej i podłączyć prąd.

2. Przetwarzanie elektroferogramu

2.1. barwnik Crimson S.

Po wyłączeniu prądu ostrożnie przenieść membranę do roztworu barwnika na 3-5 minut, następnie dwukrotnie na 3 minuty do 5-7% roztworu kwasu octowego (do wybielenia tła).

1.2. przetworzyć elektroforegram za pomocą skanera i programu komputerowego.

4. Test tymolowy

Zasada metody:

Wartość kliniczna i diagnostyczna:

W przypadku żółtaczki miąższowej oba testy są dodatnie, w przypadku żółtaczki obturacyjnej test tymolowy jest ujemny, a test Burshteina jest wyraźnie dodatni.

Zspis wykorzystanej literatury

1. Białka specyficzne w klinicznej diagnostyce laboratoryjnej: pytania i odpowiedzi. - Töpfer G., Toma R., Tsavta B., M., 2004. - 96s

Streszczenie rozprawyw medycynie na temat Wartość diagnostyczna oznaczania trofoblastycznej B1-glikoproteiny i produktów peroksydacji lipidów w ocenie stanu układu płodowo-łożyskowego w stanie przedrzucawkowym

MINISTERSTWO ZDROWIA FEDERACJI ROSYJSKIEJ

MOSKWA AKADEMIA MEDYCZNA im. I.M. SECHENOW

Jako rękopis UDC 618.3-008.6-07:618.36

ALEKSANDROW LEONID SEMI, HIV

ZNACZENIE DIAGNOSTYCZNE OZNACZANIA TROFOBLASTOWEJ B-GLIKOPROTEINY I PRODUKTÓW PŁCI W OCENIE STANU UKŁADU PŁODNIOWO-ŁOŻYSKOWEGO W GESTOZIE

14.00.01 - położnictwo i ginekologia

Moskwa - 1992

Praca została wykonana na cześć I.M. Sechenova

Moskiewska Akademia Medyczna

Opiekun: Oficjalni przeciwnicy:

doktor nauk medycznych, profesor N.M. Pobedinsky

doktor nauk medycznych, profesor E.A. Czernucha

doktor nauk medycznych, profesor I.B. Manukhin

Organizacja wiodąca: MONIAG Ministerstwa Zdrowia Federacji Rosyjskiej

Obrona odbędzie się „” _ 1992

o - ■ - godzinach na posiedzeniu specjalistycznej Rady D 074.05.02 Moskiewskiej Akademii Medycznej. ICH. Sechenov (Moskwa, ul. B. Pirogovskaya, 2/6).

Rozprawa znajduje się w bibliotece Moskiewskiej Akademii Medycznej. ICH. Sechenov (Moskwa, plac Zubovskaya, 1)

Sekretarz naukowy Rady Specjalistycznej, doktor nauk medycznych

JESTEM. Szełutko

GOSUAD?-: :j la

SHi>i "iviw ä G: g, A

OGÓLNY OPIS PRACY

Pilność problemu. Pomimo znacznych postępów w położnictwie, problem ciąży powikłanej stanem przedrzucawkowym jest jednym z najbardziej istotnych, ponieważ stan przedrzucawkowy jest jednym z pierwszych miejsc w strukturze zachorowalności i śmiertelności matek i okołoporodowych (Savelyeva G.M., 1991, Repina M. A. ., 1991) Częstość występowania powikłań otrzewnowych, w zależności od ciężkości stanu przedrzucawkowego, waha się od 7,7% do 44,4% (Karshunina JI.M., Kagenyuk Yu.A., 1984, Sokolsky Ya. P., 1981), oraz pomimo ostatnich postępów nie wykazuje stałej tendencji spadkowej. Dlatego badanie patogenezy niewydolności płodowo-łożyskowej w stanie przedrzucawkowym, opracowanie odpowiednich metod wczesnego diagnozowania naruszeń stanu płodu ma ogromne znaczenie. Z tego punktu widzenia badanie specyficznych antygenów łożyskowych, w szczególności trofoblastycznej glikoproteiny B1 (TBG), ma niewątpliwe znaczenie teoretyczne i praktyczne. Ponieważ łożysko jest narządem specyficznym dla okresu embrionalnego, stężenie TBG w surowicy może pozwolić na obiektywną ocenę zmiany określonego stanu biochemicznego zachodzącego w czasie ciąży. Dostępne dane na temat dynamiki zawartości TBG w nieskomplikowanym procesie estacyjnym oraz w stanie przedrzucawkowym są dość sprzeczne.

W ostatnich latach wykazano istotną rolę w patogenezie wielu chorób endokrynno-metabolicznych oraz patologicznych stanów rozregulowania procesu wolnorodnikowego utleniania lipidów (LPO). Stanowi układu peroksydacji lipidów w stanie przedrzucawkowym poświęcono szereg prac (Ganina A.A., 1985, Grishchenko VI i in., 1986, Kushch I.B., 1986, Lebedenko B.C., 1987), jednak w przeważającej części obiekt przedmiotem badań była surowica krwi lub błona erytrocytów, a tylko w nielicznych pracach badano proces LPO w elementach strukturalnych trofoblastu. Ponadto brakuje kompleksowych badań pozwalających na ocenę stanu układu łożyskowo-płodowego w stanie przedrzucawkowym pod różnymi kątami, w związku z czym zasadne wydaje się zbadanie zależności między dynamiką procesów TBG i peroksydacji lipidów a hormonalną funkcją zespół płodowo-łożyskowy.

Cel i zadania badania. Celem pracy jest doskonalenie metod diagnozowania stanu układu płodowo-łożyskowego w stanie przedrzucawkowym. Zgodnie z celem wyznaczono następujące zadania:

1. Zbadanie zawartości TBG w surowicy krwi w dynamice ciąży fizjologicznej;

2. Identyfikacja cech zmian poziomu TBG w czasie ciąży powikłanych stanem przedrzucawkowym o różnym nasileniu w dynamice, określenie wpływu różnych objawów klinicznych stanu przedrzucawkowego na poziom TBG w surowicy;

3. Określić cechy zmian TBG podczas rozwoju niewydolności płodowo-łożyskowej w stanie przedrzucawkowym;

4. Zbadanie wpływu różnych objawów klinicznych stanu przedrzucawkowego na funkcję wytwarzania hormonów przez zespół płodowo-łożyskowy;

5. Poznanie cech regulacji reakcji peroksydacji lipidów w łożysku oraz stanu układu antyoksydacyjnego krwi w stanie przedrzucawkowym o różnym nasileniu, ich zależności od postaci i czasu trwania stanu przedrzucawkowego oraz rozwoju płodu -niewydolność łożyska.

Nowość naukowa. Po raz pierwszy w naszym kraju przeprowadzono badanie zawartości TBG w surowicy krwi w dynamice fizjologicznej ciąży od 8 do 42 tygodnia z dwutygodniową przerwą, zawartość TBG w surowicy krwi badano w dynamika w czystych i złożonych postaciach stanu przedrzucawkowego. Ujawniono charakter interakcji między procesem LPO w łożysku a aktywnością układu antyoksydacyjnego krwi w stanie przedrzucawkowym o różnym nasileniu, zależność tych procesów od postaci i czasu trwania stanu przedrzucawkowego, ich stan w niewydolności płodowo-łożyskowej.

Teoretyczne i praktyczne znaczenie pracy. Kompleksowe badanie stanu układu płodowo-łożyskowego w stanie przedrzucawkowym o różnym nasileniu pozwala poszerzyć dotychczasową wiedzę na temat patogenezy rozwoju niewydolności płodowo-łożyskowej w stanie przedrzucawkowym, ocenić diagnostyczne i prognostyczne znaczenie kompleksowego określenia TBG, estriolu, progesteronu i kortyzolu we krwi kobiet w ciąży ze stanem przedrzucawkowym, aby naukowo uzasadnić zastosowanie terapii antyoksydacyjnej w przypadku gestozy.

Podstawowe przepisy dotyczące obrony.

1. Powikłanie ciąży stanem przedrzucawkowym powoduje zmiany patologiczne w stanie płodowo-łożyskowym

homeostaza, wyrażona z naruszeniem syntezy TBG, funkcji hormonalnej łożyska, związku układów pro- i antyoksydacyjnych.

2. Podczas ciąży fizjologicznej zawartość TBG w surowicy wzrasta stopniowo do 36 tygodnia ciąży, po czym do czasu porodu poziom ten spada. Rozwojowi stanu przedrzucawkowego towarzyszy spadek poziomu TBG i charakter jego dynamiki. Ujawnione naruszenia są bezpośrednio zależne od ciężkości stanu przedrzucawkowego i jego cech klinicznych. Rozwojowi niewydolności płodowo-łożyskowej towarzyszy również obniżenie poziomu TBG w surowicy, co może być wykorzystane w kompleksowej diagnostyce stanu układu łożyskowo-płodowego w stanie przedrzucawkowym.

3. Stan przedrzucawkowy prowadzi do zaburzeń funkcji hormonalnej układu płodowo-łożyskowego, których stopień i charakter zależy od cech klinicznych choroby i odzwierciedla stadia zaburzeń kompensacyjno-adaptacyjnych w układzie matka-łożysko-płód.

4. Rozwojowi stanu przedrzucawkowego towarzyszy zaburzenie równowagi układu pro- i antyoksydacyjnego, którego charakter zależy od obrazu klinicznego choroby. Łagodna postać stanu przedrzucawkowego charakteryzuje się aktywacją reakcji peroksydacji lipidów w łożysku i kompensacyjnym wzrostem aktywności antyoksydacyjnej krwi; z umiarkowanymi i ciężkimi postaciami choroby, na tle wyraźniejszego nasilenia peroksydacji lipidów w łożysku.

Zatwierdzenie klinicznych wyników pracy. Prace prowadzono na Oddziale Położnictwa i Ginekologii I Wydziału Lekarskiego Moskiewskiej Akademii Medycznej. ICH. Sieczenow. Na temat rozprawy ukazała się jedna praca drukowana, dwie zostały przyjęte do publikacji. Artykuły odzwierciedlają główne założenia pracy doktorskiej. Zatwierdzenie rozprawy nastąpiło 13 maja 1992 r. na zebraniu pracowników Kliniki Położnictwa i Ginekologii I Wydziału Lekarskiego.

Zakres i struktura pracy. Rozprawa składa się ze wstępu, przeglądu piśmiennictwa, ogólnego opisu badań własnych, omówienia wyników, wniosków, zaleceń praktycznych oraz spisu piśmiennictwa. Praca jest przedstawiona na 109 stronach maszynopisu, ilustrowana 13 rysunkami i 50 tabelami. Indeks literacki zawiera 169 źródeł krajowych i 105 zagranicznych.

Ogólna charakterystyka kliniczna badanych pacjentów. W celu wykonania postawionych w pracy zadań wykonano: badanie kliniczne, analizę danych z wywiadu, przebieg i prowadzenie ciąży i porodu, stan noworodków u 318 kobiet. Selekcji kobiet w ciąży dokonano metodą losowania. Wszystkie badane kobiety podzielono na dwie główne grupy: grupę kontrolną stanowiło 198 kobiet z ciążą niepowikłaną, grupę główną - 120 kobiet, u których ciąża była powikłana stanem przedrzucawkowym o różnym nasileniu.

Charakterystyka grupy kontrolnej. 198 pacjentów w wieku od 17 do 40 lat. Ankietę przeprowadzono w zakresie od 8 do 42 tygodni z dwutygodniową przerwą. Do grupy kontrolnej nie włączono ciężarnych z „wysokim ryzykiem” stanu przedrzucawkowego z powodu współistniejącej patologii somatycznej i wysokiego wskaźnika zakaźnego. Najczęściej w wywiadzie badanych kobiet z grupy kontrolnej występowały: ospa wietrzna – 14,64%, odra – 17,11%, grypa – 26,26%, SARS – 34,84%.

Drogą rodną naturalną urodziło 178 kobiet, w tym 170 (89,9%) główką, 8 miednicą. Przez cesarskie cięcie urodziło 20 ciężarnych.

Wszystkie dzieci urodziły się z oceną Apgar w pierwszej minucie życia - 7-8 pkt, w 5 minucie - 8-9 pkt. Masa ciała noworodków wahała się od 3000 do 4500 g (średnia 3650+74,30 g). Okres połogu w okresie połogu i wczesny okres noworodkowy u noworodków przebiegał bez powikłań.

Charakterystyka_grupy_głównej. główny

grupę stanowiło 120 pacjentek, u których ciąża była powikłana stanem przedrzucawkowym o różnym nasileniu. Ocenę ciężkości choroby przeprowadzono zgodnie z systemem punktowym (Instrukcje metodyczne Ministerstwa Zdrowia ZSRR, 1987). W zależności od ciężkości stanu przedrzucawkowego kobiety z grupy głównej podzielono na trzy podgrupy: podgrupa I obejmowała 42 ciężarne z łagodnym stanem przedrzucawkowym, podgrupa II obejmowała 43 ciężarne z umiarkowanym stanem przedrzucawkowym, a podgrupa III obejmowała 35 ciężarnych ze stanem przedrzucawkowym.

ciężka postać gestozy. Badanie przeprowadzono w 23-24, 31-32, 35-36, 37-38, 39-40 tygodniu. Wszyscy ankietowani byli w wieku od 16 do 41 lat. Spośród przeniesionych chorób zakaźnych najczęściej w grupie głównej występowały: odra – 22,5%, grypa – 30,8%, szkarlatyna – 20,8%, przewlekłe zapalenie migdałków – 16,7%. Ogólnie wyższy wskaźnik zakaźności odnotowano w grupie głównej. U 62 (51?6%) ciężarnych. stan przedrzucawkowy rozwinął się na tle patologii pozagenitalnej: dystonia wegetatywno-naczyniowa typu nadciśnieniowego - u 32 (26,7%), nadciśnienie I-II stopnia - u 9 (7,5%), przewlekłe odmiedniczkowe zapalenie nerek - u 19 (15,8%), reumatyczne zapalenie rdzenia kręgowego - w 2 (1,7%). Najczęściej, bo u 77,14% patologię pozagenitalną obserwowano w podgrupie III. Przebieg tej ciąży, oprócz stanu przedrzucawkowego, był powikłany groźbą poronienia u 16 ciężarnych (13,3%), groźbą przedwczesnego porodu – u 6 (5%), niedokrwistością – u 30 ("%%)", ostrymi infekcjami dróg oddechowych - u 12 (105) Podczas badania ciężarnych z grupy głównej wykryto skurcz naczyń siatkówki: w podgrupie 1 – u 2 kobiet (4,76%), w grupie II – u 7 (16,28%), w grupie III - u 17 pacjentek (48,%).w celu określenia stanu funkcji białkootwórczej wątroby i metabolizmu tłuszczów oznaczono zawartość białka ogólnego i cholesterolu w surowicy krwi matki (tab. 1). wskazują na niższą zawartość białka całkowitego i wyższą zawartość cholesterolu we krwi ciężarnych z ciężkimi postaciami stanu przedrzucawkowego.

Wśród dzieci urodzonych o czasie przewlekłe niedotlenienie wewnątrzmaciczne płodu rozpoznano u 21 noworodków, niedożywienie wewnątrzmaciczne – u 11,

niedojrzałość morfofunkcjonalna - u 11. Najczęściej, w 57%, rozwój niewydolności płodowo-łożyskowej obserwowano u kobiet z podgrupy III.

Drogą rodną naturalną urodziło 91 kobiet, w położeniu główkowym 88, w położeniu miednicowym 4. Operację przyłożenia kleszczyków położniczych wykonano w dwóch przypadkach: z powodu ostrego niedotlenienia płodu oraz w związku z ciężką postacią nefropatii. Poród drogą brzuszną odbył się u 28 kobiet. Analiza wykazała wzrost częstości porodów brzusznych w podgrupach II i III. Zwiększenie częstotliwości

poród brzuszny związany był głównie z nieskutecznością złożonej terapii stanu przedrzucawkowego odpowiednio 6,98% i 37,14%. Średnia masa noworodków w podziale na podgrupy wynosiła odpowiednio: 3515+-94,8 g, 3472+87,19 g i 3042+-79,15 g.

Tabela 1

Główna grupa

Grupa kontrolna I podgrupa. II podgrupa III podgrupa

Białko ogółem 65,26+-0,54 64,75+-2,01 61,50+-1,16 57,21+-1,28*

Cholesterol 7,50+-0,54 8,14+-0,49 8,60+-0,24* 9,26+-0,62*

*p 0,05 w porównaniu z grupą kontrolną.

Udział TBG w dynamice ciąży fizjologicznej. Przebadano łącznie 198 ciężarnych z ciążą niepowikłaną. Próbki krwi pobierano od każdego pacjenta od 1 do 3 razy, w odstępie 2 tygodni, w przeliczeniu na 8 do 42 tygodni. Wyniki przedstawiono na ryc. nr 1. Odnotowano postępujący wzrost stężenia TBG do 36 tygodnia ciąży, a następnie spadek do 42 tygodnia. Zawartość TBG w okresie 7-8 tygodni wynosiła 36±4,10 µg/ml. Ponadto do 26 tygodnia poziom TBG gwałtownie wzrósł do 135,68 ± 9,09 µg/ml. Dwutygodniowy wzrost wahał się od 10,0 do 33,4%. Nie było istotnej statystycznie różnicy pomiędzy każdym kolejnym okresem (p>0,05). W 27-28 i 31-32 tygodniu nastąpił spadek stężenia TBG w surowicy odpowiednio o 8,2% (p>0,05) i 3,9% (p>0,05). Większa zawartość białka

stopniowo wzrastało do 157,06 ± 11,74 μg/ml, osiągając maksimum w 36. tygodniu ciąży. Szybkość dwutygodniowego wzrostu stężenia TBG była wyraźnie obniżona i wynosiła 4,7-6,2% w III trymestrze ciąży.

Po 36 tygodniach poziom TBG nieznacznie obniżył się o 40 tygodni do 137,06±10,93 µg/ml (o 14% (p>0,05)). Następnie, po 42 tygodniach, nastąpił gwałtowny spadek poziomu białka do 99,59 ± Ö,59 µg/ml (p<0.05).

W analizie indywidualnej występuje znaczna zmienność zawartości TBG w surowicy krwi, tak więc w okresie 7-8 tygodni jej wahania mieściły się w przedziale od 15,60 do 54,60 μg/ml, a w okresie 35 -36 tygodni - 112,42237,50 μg / ml, dzięki czemu definicję TBG należy przeprowadzić dynamicznie.

Badając korelacyjną zależność poziomu TBG w surowicy od masy ciała płodu przy urodzeniu, odnotowano umiarkowaną zależność korelacyjną = 0,583.

Uzyskane wyniki pozwalają stwierdzić, że możliwe jest wykorzystanie oznaczenia stężenia TBG w surowicy do kontroli przebiegu ciąży.

Zawartość TBG w różnych manifestacjach klinicznych gestozy. Na podstawie uzyskanych wyników (ryc. 2) stwierdzono, że zawartość TBG w ciąży powikłanej łagodnym stanem przedrzucawkowym nie różni się istotnie od jej poziomu w ciąży prawidłowej. Stężenie TBG istotnie różniło się od grupy kontrolnej jedynie w okresie 23-24 tygodni i wynosiło 89,5±63 µg/ml (p<0.05). Затем уровень белка прогрессивно нарастал до 36 недель беременности, достигая 160.43+-14.92 (в среднем на 57.8% (р<0.05)), после чего происходило его снижение к сроку родов до 137.38+-41.42 мкг/мл (на 41.42% (р<0.05)). Более выраженное снижение уровня ТБГ в исследуемые сроки наблюдалось во II подгруппе. В 23-24 недели уровень его в сыворотке крови составил 74.0+-9.98 мкг/мл, что на 14.3% ниже, чем в I подгруппе (р<0.05), и на 36.32% чем в контрольной группе (р<0.05). Далее концентрация ТБГ увеличивалась к 36 неделям до 137.33+-30.03 мкг/мл, достигая своего «пика» (р<0.05), формируя своеобразное «плато». В III подгруппе концентрация белка в сроке 23-24 недели составила 22.75+-0.9 мкг/мл и была в 4 раза ниже, чем в I подгруппе, и в 5.1 раза ниже, чем в контрольной группе. Далее уровень ТБГ нарастал, составив в 35-36 недель 114.50+-37.21 мкг/мл,

Stopień światła -g-

Średni stopień

Ciężki stopień -X-

Czysta forma Połączona forma

czyli 4,2 razy. Do 37-38 tygodnia poziom białka utrzymywał się na prawie niezmienionym poziomie 112,75-»-11,97 µg/ml (p>0,05), po czym obniżył się do czasu porodu do 88,17±7,17 µg/ml (p<0.05). На рис.2 приведены данные исследования, содержания ТБГ при «чистой» и сочетанной форме гестоза.

Analiza wyników wskazuje, że „czyste” i mieszane formy gestozy na ogół charakteryzują się mniejszym wydzielaniem TBG w porównaniu z ciążą fizjologiczną. Najniższy poziom TBG obserwowano w złożonej postaci stanu przedrzucawkowego.

W grupie kobiet, które urodziły płody w terminie z objawami niedożywienia wewnątrzmacicznego, poziom TBG był wystarczająco obniżony w porównaniu z grupą kontrolną (p<0.05) и составил 86.25+-26.87 мкг/мл. Развитие хронической внутриутробной гипоксии характеризовалось снижением содержания ТБГ до 100.14+-17.52 мкг/мл (р<0.05). Уровень ТБГ в сыворотке крови женщин, родивших детей с признаками морфофункциональной незрелости составил 106.70»-12.56 мкг/мл. Из доношенных новорожденных основной группы 28 родились в состоянии средней тяжести и 7 - в тяжелом состоянии. Уровень ТБГ в этих группах составил соответственно 130.67+-12.99 мкг/мл (р>0,05) i 92,67 ± 7,51 µg/ml (str<0.05).

Analizując zależność stężenia TBG od czasu trwania gestozy zauważono, że w grupie ciężarnych z wczesnym początkiem gestozy (w 23-24 tyg. (P<0.05) от содержания его в крови беременных с поздним началом гестоза (в 36-40 нед.).

W grupie głównej nie stwierdzono korelacji między masą urodzeniową płodu a poziomem TBG w surowicy krwi (r=0,067). Uzyskane wyniki pozwalają uznać, że obniżenie zawartości TBG w stanie przedrzucawkowym jest niekorzystnym objawem diagnostycznym i pozwala na wykorzystanie jej oznaczania w surowicy krwi matki jako jednej z metod w kompleksowej diagnostyce stanu układu płodowo-łożyskowego oraz przewidywanie wyniku porodu i płodu.

Wpływ objawów klinicznych stanu przedrzucawkowego na zawartość hormonów kompleksu łożyskowo-płodowego. Wyniki analizy dynamiki zawartości estriolu, progesteronu i kortyzolu we krwi matki wykazały, że jak

fizjologicznym procesem ciążowym jest postępujący wzrost zawartości tych hormonów. Tak więc zawartość estriolu od 23-24 tygodni. pod koniec ciąży wzrosła z 46,21±7,23 nmol/l do 121,76±13,07 nmol/l (2,63 razy (p<0.05)), прогестерона с 87.31+-4.25 нмоль/л до 197.91+-20.26 нмоль/л (в 2.27 раза (р<0.05)), кортизола с 821.44+-81.61 нмоль/л до 1081.08+-89.05 нмоль/л (в 1.32 раза (р<0.05)) (рис.3,4,5).

W ciąży powikłanej łagodnym stanem przedrzucawkowym wystąpiło nieznaczne obniżenie zawartości estriolu, progesteronu we krwi matki w porównaniu z grupą kontrolną. Należy jednak zaznaczyć, że w przeciwieństwie do grupy kontrolnej nastąpił spadek stężenia progesteronu po 38 tygodniach. ciąży, jak również stabilizację wzrostu estriolu w tym samym czasie (ryc. 3.4). Zawartość kortyzolu w podgrupie I do 36 tygodnia praktycznie nie odbiegała od normy, natomiast w 37-38 i 39-40 tygodniu uległa obniżeniu (ryc. 5).

W podgrupie II na tle wyraźniejszego spadku zawartości estriolu odnotowano wzrost poziomu progesteronu i kortyzolu w stosunku do grupy kontrolnej, jednak towarzyszyło temu obniżenie ich poziomu we krwi matki po 38 tygodniu ciąży (tab. nr 3,4,5).

Rozwój ciężkiej postaci gestozy charakteryzował się wyraźnym spadkiem stężenia estriolu i progesteronu we wszystkich badanych okresach (ryc. 3, 4). Poziom kortyzolu utrzymywał się nieco poniżej normy do 36 tygodnia ciąży, po czym nastąpił gwałtowny spadek jego stężenia (ryc. 5).

Podwyższona zawartość kortyzolu we krwi kobiet z podgrupy II może prawdopodobnie świadczyć o naprężeniu mechanizmów adaptacyjnych mających na celu utrzymanie homeostazy w ustroju. Spadek poziomu tego hormonu w podgrupie III jest prawdopodobnie związany z wyczerpywaniem funkcji kory nadnerczy zarówno matki, jak i głównie płodu, co znacznie zmniejsza jej zdolności adaptacyjne w okresie śród- i noworodkowym. Przekonującym tego dowodem jest ujawniony spadek poziomu kortyzolu we krwi matek, które urodziły dzieci w stanie umiarkowanym i ciężkim. Stężenie kortyzolu wynosiło odpowiednio 961,04 ± 59,85 nmol/l i 912,77 ± 34,25 nmol/l (tab. 2).

Niewydolność płodowo-łożyskowa charakteryzowała się niskim poziomem hormonów (tab. 2). Analiza danych uzyskanych z badania porównawczego stanu hormonalnego ciężarnych z „czystą” i złożoną postacią stanu przedrzucawkowego (ryc. 3, 4, 5) wykazała, że najniższe stężenia hormonów obserwowano w złożonej postaci stanu przedrzucawkowego podczas rozwój choroby na tle przewlekłego odmiedniczkowego zapalenia nerek i nadciśnienia tętniczego stopnia 1-P (tabela nr 3). Uzyskane dane pozwalają stwierdzić, że połączona gestoza ma bardziej niekorzystny wpływ na funkcję układu płodowo-łożyskowego.

Czas trwania choroby miał wyraźny wpływ na stężenie badanych hormonów we krwi. Wraz z wydłużaniem się czasu trwania stanu przedrzucawkowego obniżała się zawartość wszystkich hormonów w surowicy krwi (tab. 4). Tak więc czas trwania stanu przedrzucawkowego jest jednym z głównych kryteriów określających stopień jego nasilenia.

W konsekwencji powikłanie ciąży ze stanem przedrzucawkowym prowadzi do rozwoju zaburzeń hormonalnych w układzie matka-łożysko-płód, których nasilenie zależy od ciężkości choroby.

Stopień światła -g-

Umiarkowane ■ -□-Poważne --x- -

Czysta forma Połączona forma

Stopień światła -g-

Średni stopień □ ■

ciężki x-

Czysta forma Ag-

Połączona forma

1250 1200 -1150 1100 N 1050 1000 950 900 -850 -800 ? 50

Stopień światła -g-

Średni stopień

Ciężki stopień -x-

Czysta forma Połączona forma

Tabela 2

ciąża fizjologiczna przewlekła. niedotlenienie wewnątrzmaciczne hipotrofia wewnątrzmaciczna płodu niedojrzałość morfofunkcjonalna

estriol 121,76+13,07 66,90+7,68* 77,11+13,47* 67,15+9,56*

progesteron 197,91+20,26 151,94+27,79 129,29+16,49* 144,85+19,34

kortyzol 1081,08+89,05 916,12+34,25 923,12+78,53 1120,31+102,11

R<0.05 при сравнении с контрольной группой

Tabela 3

ciąża niepowikłana II 121,76+13,07 197,91+20,26 1081,08+89,05

stan przedrzucawkowy na tle VVD typu nadciśnieniowego 14 79,02+7,64* 157,54+13,39 914,36+54,10

stan przedrzucawkowy na tle nadciśnienia 1-11 st. b 71,68+13,95* 132,51+14,21* 1239,10+160,60

stan przedrzucawkowy na tle przewlekłego odmiedniczkowego zapalenia nerek II 62,84+6,62* 104,46+11,31* 965,09+53,06

R<0.05 при сравнении с контрольной группой

Tabela 4

p estriol nmol/l progesteron nmol/l kortyzol nmol/l

20-24 tydzień 15 68,84+-8,14 133,35+-19,69 904,42+-80,72

25-30 tygodni 14 71,78+-9,45 148,35+-18,92 953,45+-60,14

30-35 tygodni 15 76,39+-8,80 196,04+-36,87 962,16+-65,37

36-40 tygodni 12 98,57+-13,05 229,16+-39,59 988,57+-61,65

Р1-Р2>0,05 р|-р2>0,05 р!-р2>0,05 Р2-Рз>0,05 р1-рз<0.05 р]-рз>0,05 P|-P3>0,05 P2-P3>0,05 p]-p4>0,05 P1~P4<0.05 РГР4<0.05 Р2-Р4<0.05

Zmiany procesów peroksydacji w łożysku a aktywność antyoksydacyjna krwi. Zbadano 40 ciężarnych w okresie 39-40 tygodni. Spośród nich II z ciążą niepowikłaną (grupa kontrolna) i 29 ze stanem przedrzucawkowym o różnym nasileniu (grupa główna). Wszystkie kobiety z grupy głównej podzielono na dwie podgrupy: I obejmowała 13 ciężarnych z łagodnym stanem przedrzucawkowym, II - 16 z umiarkowanym i ciężkim stanem przedrzucawkowym. Stan procesów peroksydacji lipidów w łożysku oceniano na podstawie zawartości dialdehydu malonowego (MDA) w tkance łożyska. Określono stosunek ceruloplazmina/transferyna jako wskaźnik charakteryzujący stan układu antyoksydacyjnego krwi w surowicy.

W grupie kontrolnej zawartość MDA w łożysku wynosiła 0,520 ± 0,30 nmol/mg białka. W grupie ciężarnych ze stanem przedrzucawkowym poziom MDA w łożysku wzrastał wraz ze wzrostem nasilenia stanu przedrzucawkowego. W podgrupie I stężenie MDA w homogenacie łożyska wynosiło 0,564+0,052 nmol/mg białka (p>0,05), w podgrupie II było to 0,648+-0,38 nmol/mg białka (p<0.05). Полученные результаты свидетельствуют об активации процессов ПОЛ непосредственно

w tkance łożyska z gestozą. Ponadto procesowi aktywacji LPO w łożysku, wraz ze wzrostem nasilenia stanu przedrzucawkowego towarzyszy wzrost poziomu cholesterolu we krwi i postępujący spadek stężenia estriolu, który wykazuje działanie antyoksydacyjne.

Wraz ze wzrostem intensywności peroksydacji lipidów w łożysku ujawniły się zmiany w układzie antyoksydacyjnym krwi. W grupie kontrolnej amplituda sygnału ZPR ceruloplazminy wynosiła średnio 3,57 ± 0,37 cm.<0.05). Во II подгруппе содержание церулоплазмина в сыворотке крови снижалось, о чем свидетельствует низкая средняя величина амплитуды ЗПР-сигнала - 2.43+-0.46 см (на 61.4%) (р<0.05). Средняя величина спектра амплитуды ЗПР в контрольной группе для трансферина составила 5.01+-0.61 см. В I подгруппе было отмечено повышенное содержание трансферина, что проявлялось в увеличении средней величины амплитуды ЗПР-спектра до 7.00+-0.87 см (на 29%) относительно контрольной группы (р>0,05). Wraz ze wzrostem nasilenia stanu przedrzucawkowego zmniejszała się zawartość transferyny we krwi. W podgrupie II średnia wartość amplitudy widma ZPR wyniosła 4,08±0,79 (o 42% mniej niż w podgrupie I) (p<0.05). Соотношение церулоплазмин/трансферин для контрольной группы составило 0.71+-0.27. При гестозе легкой степени (I подгруппа) наблюдалось повышение этого соотношения до 0.95+-0.16 (р>0,05), co wskazuje na aktywację układu antyoksydacyjnego krwi. W podgrupie II wskaźnik ten uległ obniżeniu – 0,60±0,03 (p<0.05), причем происходило, в основном, за счет уменьшения содержания церулоплазмина. Интенсификация процессов ПОЛ в плаценте при легкой степени заболевания сопровождается активацией антиоксидантной системы крови, при средней и тяжелой - снижением ее активности, что неблагоприятно сказывается на состоянии клеточных мембран структурных элементов трофобласта и хориона.

Tak więc jedną z głównych przyczyn rozwoju niewydolności łożyska jest zachwianie równowagi systemów pro- i antyoksydacyjnych. Tak więc rozwojowi przewlekłego wewnątrzmacicznego niedotlenienia płodu i niedożywienia wewnątrzmacicznego w obserwowanych przypadkach towarzyszyła aktywacja procesów peroksydacji lipidów w łożysku – zawartość MDA odpowiednio 0,629 + 0,033 (p<0.05) и 0.537+-0.093 нмоль/мг белка (р>0,05). Na

w przewlekłym wewnątrzmacicznym niedotlenieniu płodu stosunek ceruloplazmina/transferyna był nieco wyższy od normy – 0,86±0,10 (p>0,05). Rozwojowi niedożywienia wewnątrzmacicznego towarzyszył spadek aktywności antyoksydacyjnej krwi - 0,61±0,08 (p>0,05).

Porównawcza ocena danych uzyskanych dla „czystej” i złożonej postaci gestozy wykazała, że formy złożone charakteryzują się podwyższoną zawartością MDA w łożysku i niższą wartością stosunku ceruloplazmina/transferyna, odpowiednio 0,608±0,045 nmol/ mg białka, 0,69±0,15 (p>0,05) i 0,58±0,033 nmol/mg białka, 0,98±0,16 (p>0,05). Potwierdza to wcześniej opublikowane dane o wyraźniejszym patologicznym wpływie złożonych postaci stanu przedrzucawkowego na stan kompleksu płodowo-łożyskowego.

Stwierdzono związek między czasem trwania choroby a stopniem aktywności układów pro- i antyoksydacyjnych. Gdy w 36-40 tygodniu pojawiły się pierwsze objawy stanu przedrzucawkowego, wzrost zawartości MDA w łożysku był nieznaczny - 0,570±0,044 nmol/mg białka i towarzyszył mu wzrost aktywności antyoksydacyjnych układów krwi (ceruloplazmina/ współczynnik transferyny - 1,098+-0,24). Wydłużeniu czasu trwania choroby towarzyszyło wyraźniejsze nasilenie procesów peroksydacji lipidów i zmniejszenie aktywności antyoksydacyjnej krwi. Tak więc na początku gestozy w 20-24 tygodniu zawartość MDA w łożysku wynosiła 0,635 ± 0,05 nmol/mg białka (p.<0.05). Следовательно, длительность течения гестоза является одним из самых важных показателей степени его тяжести. Таким образом, развитие гестоза сопровождается интенсификацией реакций ПОЛ в плаценте и снижение антиоксидантной активности крови при средней и тяжелой форме гестоза. Нарушение во взаимодействии про- и антиоксидантных систем приводит к нарушению функций клеточных мембран структурных элементов трофобласта, нарушение синтеза гормонов и белков, способствуя развитию фето-плацентарной недостаточности.

1. Wystąpienie stanu przedrzucawkowego w czasie ciąży powoduje zmianę homeostazy płodowo-łożyskowej, co wyraża się naruszeniem syntezy TBG, funkcji hormonalnej łożyska, zależności między układami pro- i antyoksydacyjnymi.

2. W czasie ciąży fizjologicznej zawartość TBG w surowicy wzrasta progresywnie do 36 tygodnia ciąży 4,28-krotnie, po czym jej poziom obniża się do terminu porodu; tempo wzrostu stężenia TBG przez dwa tygodnie w I i II trymestrze wynosi 10,0-33,4%, w III trymestrze 4,7-6,2%.

3. Występowaniu stanu przedrzucawkowego podczas ciąży towarzyszy spadek poziomu TBG w surowicy i naruszenie natury jego dynamiki. Ujawnione naruszenia są bezpośrednio zależne od ciężkości stanu przedrzucawkowego. Rozwój gestozy na tle patologii pozagenitalnej charakteryzuje się niższym poziomem TBG niż w „czystej” postaci.

4. Rozwojowi niewydolności płodowo-łożyskowej w stanie przedrzucawkowym towarzyszy spadek zawartości TBG w surowicy krwi o 22,7-30,06% w porównaniu z normą, co umożliwia wykorzystanie oznaczenia poziomu TBG w surowicy w kompleksie diagnostyka stanu niewydolności płodowo-łożyskowej w stanie przedrzucawkowym.

5. Rozwój stanu przedrzucawkowego prowadzi do zmniejszenia produkcji estriolu i progesteronu przez zespół płodowo-łożyskowy, którego nasilenie jest wprost proporcjonalne do ciężkości choroby. Najbardziej wyraźne zmiany stanu hormonalnego są charakterystyczne dla ciężkiego stanu przedrzucawkowego i jego postaci złożonych.

6. Przy umiarkowanym stanie przedrzucawkowym następuje wzrost poziomu kortyzolu w porównaniu z normą z „szczytem” w 36 tygodniu ciąży. W ciężkiej postaci następuje spadek poziomu kortyzolu w dynamice, co tłumaczy się wyczerpaniem możliwości funkcjonalnych kompleksu płodowo-łożyskowego.

7. Łagodna postać stanu przedrzucawkowego charakteryzuje się aktywacją LPO w łożysku, podczas gdy zawartość MDA w homogenacie łożyska wzrasta o 8,46%; i kompensacyjny wzrost aktywności przeciwutleniającej krwi (stosunek ceruloplazminy/transferyny wzrasta o 33,8%).

8. W umiarkowanej i ciężkiej postaci choroby, na tle wyraźniejszego nasilenia peroksydacji lipidów i wzrostu zawartości MDA w łożysku o 24,6%, następuje spadek aktywności antyoksydacyjnej krwi, o czym świadczy spadek stosunku ceruloplazminy do transferyny o 15,5%. Występowanie stanu przedrzucawkowego na tle patologii pozagenitalnej charakteryzuje się większą intensywnością peroksydacji lipidów w łożysku i niższą aktywnością antyoksydacyjną krwi niż jej „czysta” postać.

9. Niedoczynności funkcji kompleksu łożyskowo-płodowego w stanie przedrzucawkowym towarzyszy wzrost zawartości produktów LPO w łożysku o 3,27-20,96%, co wskazuje na pewną rolę aktywacji LPO w patogenezie niewydolności płodowo-łożyskowej .

1. Oznaczenie stężenia TBG w surowicy może służyć jako dodatkowe badanie diagnostyczne do oznaczania zawartości TBG podczas ciąży donoszonej o 20-30%, może wskazywać ■ na rozwój niewydolności płodowo-łożyskowej i niekorzystny przebieg porodu dla płód.

2. Oznaczanie zawartości dialdehydu malonowego w łożysku, którego poziom wzrasta o prawie 20% wraz z rozwojem niewydolności łożyska, może być wykorzystane do retrospektywnej diagnostyki stanu łożyska w stanie przedrzucawkowym.

3. Dla określenia stanu układu łożyskowo-płodowego w stanie przedrzucawkowym pouczające jest oznaczenie estriolu, progesteronu i kortyzolu w surowicy krwi matki. Synchroniczny spadek ich poziomu w surowicy krwi świadczy o wyczerpaniu funkcji i rozwoju niewydolności układu płodowo-łożyskowego.

Nr 7, s. 18-22 (współautor Pobedinsky N.M., Razmanikhina N.I., Vengerov Yu.Yu., Starovoitova TA)

3. Zmiany niektórych parametrów biochemicznych i biofizycznych podczas ciąży powikłanej gestozą (współautor Pobedinsky N.M., Razmanikhina N.I., Ostrakhovich E.A., Soodaeva S.K.) - przyjęty do publikacji w czasopiśmie Obstetrics and Gynecology ".

Wyślij swoją dobrą pracę w bazie wiedzy jest prosta. Skorzystaj z poniższego formularza

Studenci, doktoranci, młodzi naukowcy, którzy korzystają z bazy wiedzy w swoich studiach i pracy, będą Wam bardzo wdzięczni.

Hostowane na http://www.allbest.ru/

INSTYTUCJA EDUKACYJNA FEDERALNEGO BUDŻETU PAŃSTWA

WYŻSZE WYKSZTAŁCENIE ZAWODOWE

„PAŃSTWOWA AKADEMIA ROLNICZA IZHEVSK”

WYDZIAŁ MEDYCYNY WETERYNARYJNEJ

Wydział Chemii

Test

w biochemii zwierząt

Temat: "Białko całkowite surowicy krwi. Metody oznaczania, znaczenie kliniczne i diagnostyczne, cechy szczególne"

Ukończone przez: Kurochkina V.S.

Student III roku FZO

Specjalność: „Weterynaria”

Sprawdzono: k.b. doktor habilitowany, profesor nadzwyczajny

Berestow D.S.

Iżewsk 2013

Wstęp

Aplikacja

Wstęp

W żywych komórkach zachodzi synteza wielu cząsteczek organicznych, wśród których główną rolę odgrywają polimeryczne makrocząsteczki - białka, kwasy nukleinowe, polisacharydy. Białka odgrywają szczególną rolę w życiu organizmów żywych. Od rodziców do dzieci przekazywana jest informacja genetyczna o specyficznej budowie i funkcjach wszystkich białek danego organizmu. Zsyntetyzowane białka pełnią funkcje transportowe, ochronne, strukturalne, uczestniczą w przekazywaniu sygnałów z jednej komórki do drugiej iw ten sam sposób realizują informacje dziedziczne.

Wiewiórki- wysokocząsteczkowe związki organiczne zawierające azot, składające się z ponad 20 rodzajów alfa-aminokwasów. Warunkową granicą między dużymi polipeptydami a białkami jest masa cząsteczkowa 8000-10000. Białka osocza są syntetyzowane głównie w wątrobie, komórkach plazmatycznych, węzłach chłonnych, śledzionie i szpiku kostnym.

1. Całkowite białko surowicy

Białka surowicy to dość liczna grupa białek różniących się budową, właściwościami fizykochemicznymi i funkcjami. Ich łączną ilość określa się metodą refraktometryczną lub biuretową, a poszczególne składniki metodą elektroforezy. W zależności od metody dystrybucji można otrzymać od 5 do 100 frakcji białkowych. Elektroforeza na bibułce w surowicy krwi oznacza 4-5 frakcji: albuminy, alfa (czasami alfa-1 i alfa-2), beta- i gamma globuliny, a elektroforeza w agarze, skrobi i żelach poliakryloamidowych - znacznie więcej (do 30).

Ilość białka całkowitego i stosunek poszczególnych frakcji w surowicy krwi zwierząt różnych gatunków waha się w pewnych granicach.

U młodych zwierząt całkowita zawartość białka jest niższa niż u dorosłych: u cieląt w wieku 1-10 dni - 56-70 g / l, nowonarodzonych prosiąt - 45-50, jagniąt - 46-54 g / l, patrz Załącznik (Tabela 1) ).

Osocze krwi zwierzęcej jest cieczą o gęstości 1,02 - 1,06. Wzrost gęstości krwi obserwuje się, gdy organizm jest odwodniony. Sucha pozostałość plazmy stanowi mniej niż 10%, a reszta to woda. Większość suchej pozostałości stanowią białka, których całkowite stężenie w osoczu wynosi 60-80 g/l. Suma stężeń albumin i globulin to stężenie białka całkowitego w osoczu krwi.

totalna proteina jest organicznym polimerem złożonym z aminokwasów. Różne białka biorą udział we wszystkich reakcjach biochemicznych naszego organizmu jako katalizatory, transportują różne substancje i leki, uczestniczą w obronie immunologicznej itp.

Całkowite stężenie białek w surowicy krwi określa pojęcie „białka całkowitego”.

totalna proteina- najważniejszy składnik metabolizmu białek w organizmie, to także całkowite stężenie albumin i globulin w surowicy krwi.

W organizmie wspólne białko pełni następujące funkcje:

Uczestniczy w krzepnięciu krwi;

Utrzymuje stałe pH krwi;

(przenoszenie tłuszczów, bilirubiny, hormonów steroidowych do tkanek i narządów) funkcja transportowa;

Uczestniczy w reakcjach immunologicznych i wielu innych funkcjach;

Stanowią rezerwę aminokwasów;

Pełnią funkcję regulacyjną w organizmie, gdyż wchodzą w skład hormonów i enzymów.

Wraz z odwodnieniem wzrasta stężenie białka całkowitego w osoczu krwi. Spadek stężenia białka całkowitego w osoczu krwi może wynikać z różnych przyczyn - niska zawartość białka w diecie, choroby nerek i wątroby, w których białko jest tracone z moczem, naruszenie wchłaniania składników odżywczych w przewodzie pokarmowym.

Fizjologiczną funkcją białek osocza jest utrzymanie koloidowego ciśnienia osmotycznego, pojemności buforowej osocza, aw niektórych przypadkach odkładanie (magazynowanie) cząsteczek lipidów, produktów przemiany materii, hormonów, substancji leczniczych i mikroelementów. Niektóre białka osocza pełnią funkcję enzymatyczną, immunoglobuliny zapewniają odporność humoralną. Składniki dopełniacza i białko C-reaktywne są ważne dla realizacji oporności nieswoistej, zwłaszcza w przypadku infekcji bakteryjnych. Równowaga między czynnikami krzepnięcia i inhibitorami utrzymuje płyn krwi w normalnym stanie i szybkie krzepnięcie w przypadku urazu.

Klasyfikacja:

Proste (białka) (zawierają tylko aminokwasy)

Kompleks (białka) (aminokwasy i składniki nieaminokwasowe (hem, pochodne witamin, lipidy lub węglowodany)

Fibrylarny (stanowiący wiele gęstych tkanek)

Globularne (albuminy (4-5%), globuliny (2-3%), fibrynogen (0,2-0,4%)

2. Metody oznaczania, znaczenie kliniczne i diagnostyczne, cechy szczególne

Metody oznaczania białka całkowitego w surowicy krwi:

1. Azometryczny;

2. Oznaczanie ciężaru właściwego surowicy;

3. Masa (grawimetryczna), gdy białka krwi są wytrącane, suszone do stałej masy i ważone na wadze analitycznej;

4. Refraktometryczny;

5. Kolorymetryczny;

6. Neflometryczny;

7. Polarymetryczny;

8. Spektrometryczny;

1. Refraktometr IRF - 454 B2M

przeznaczony jest do oznaczania białka w surowicy krwi, płynie mózgowo-rdzeniowym, kontroli stężenia leków, pomiaru gęstości moczu. wspólne zwierzęce białko krwi

2. Cobas integra - Total Protein Gen.2

Zasada testu: Dwuwartościowa miedź reaguje w roztworze alkalicznym z wiązaniami peptydowymi białek, tworząc charakterystyczny purpurowy kompleks biuretowy.

3. Oznaczanie frakcji białkowych surowicy krwi metodą elektroforezy na filmie z octanu celulozy.

Roztwór buforowy przeznaczony jest do elektroforetycznego rozdziału białek surowicy krwi na membranach z octanu celulozy z późniejszym densytometrycznym oznaczeniem frakcji białkowych.

Zasady metody

Analizowane próbki

Przeprowadzenie analizy

1. Przeprowadzenie elektroforezy

1.2. za pomocą aplikatora nanieść analizowane próbki surowicy krwi w odległości 2-3 cm od krawędzi katody membrany. Umieścić membranę w komorze elektroforetycznej i podłączyć prąd.

2. Przetwarzanie elektroferogramu

2.1. barwnik Crimson S.

Po wyłączeniu prądu ostrożnie przenieść membranę do roztworu barwnika na 3-5 minut, następnie dwukrotnie na 3 minuty do 5-7% roztworu kwasu octowego (do wybielenia tła).

1.2. przetworzyć elektroforegram za pomocą skanera i programu komputerowego.

4. Test tymolowy

Zasada metody

Wartość kliniczna i diagnostyczna:

W przypadku żółtaczki miąższowej oba testy są dodatnie, w przypadku żółtaczki obturacyjnej test tymolowy jest ujemny, a test Burshteina jest wyraźnie dodatni.

W celu określenia całkowitego białka w surowicy krwi zwierzęcia krew żylną pobiera się do specjalnej probówki z aktywatorem krzepnięcia, patrz Załącznik (Tabela 2). Przed oddaniem krwi zwierzę jest na diecie głodowej przez 8 godzin. Oddaj krew przed przyjęciem leków, które mogą mieć wpływ na wynik badania. Skład jakościowy białek osocza krwi jest bardzo zróżnicowany. Białko całkowite jest dzielone na odrębne frakcje metodą elektroforezy, polegającą na rozdzielaniu mieszanin białek na podstawie różnych wartości mas i ładunku właściwego jednego białka. Podczas rozdziału elektroforetycznego, w zależności od nośnika, liczba frakcji białkowych białka całkowitego nie jest taka sama. Mniejszą liczbę frakcji uzyskuje się podczas elektroforezy na bibule 5 frakcji, natomiast podczas elektroforezy na żelu agarowym, żelu poliakryloamidowym liczba frakcji białkowych może być znacznie większa do 20 frakcji. Główne frakcje to albuminy i globuliny.

albuminy są syntetyzowane w wątrobie i są prostymi białkami zawierającymi do 6 reszt aminokwasowych. Są dobrze rozpuszczalne w wodzie. Znormalizowana wartość to 56,5 - 66,8 (albumina w surowicy krwi stanowi około 60% białka całkowitego. Albuminy są syntetyzowane w wątrobie (około 15g/dobę), ich okres półtrwania wynosi około 17 dni. Ciśnienie onkotyczne osocza wynosi 65 -80% dzięki albuminie.Albumy pełnią ważną funkcję transportu wielu substancji biologicznie czynnych, w szczególności hormonów.Mają zdolność wiązania się z cholesterolem, bilirubiną.Znaczna część wapnia we krwi jest również związana z albuminami.Albuminy są w stanie łączyć z różnymi lekami.

Funkcja albumin:

Utrzymanie koloidalnego ciśnienia osmotycznego osocza:

Stałość stężenia jonów wodorowych;

Transport różnych substancji (bilirubina, kwasy tłuszczowe, związki mineralne i leki).

Albuminy osocza krwi można również uznać za pewną rezerwę aminokwasów do syntezy specyficznych białek witalnych w warunkach niedoboru białka w diecie. Albuminy zatrzymują wodę w krwioobiegu. Przy zapaleniu nerek albuminy, jako białka o najniższej masie cząsteczkowej, przenikają do moczu przede wszystkim z osocza krwi (masa cząsteczkowa albumin wynosi około 60 000 - 66 000). Zwykle albumina stanowi 35-55% całkowitej ilości białek osocza krwi.

Globuliny osocza to wiele różnych białek. Podczas elektroforezy poruszają się po albuminie. Związek z lipidami zapewnia kompleksowi globulin w stanie rozpuszczalnym i transportowym do różnych tkanek. Na podstawie ruchliwości elektroforetycznej globuliny dzieli się na b2-, b1-, c- i g-globuliny. (b- i c-globuliny są syntetyzowane w wątrobie i są aktywnymi nośnikami różnych substancji krwi). W okresie intensywnego wzrostu zwierzęcia we krwi następuje względny spadek poziomu albumin i odpowiedni wzrost poziomu b- i g-globulin. B-globuliny aktywnie oddziałują z lipidami krwi g-globuliny, najmniej ruchliwa i najcięższa frakcja wszystkich globulin, są syntetyzowane przez limfocyty B pochodzące z części komórek macierzystych szpiku kostnego lub przez utworzone z nich komórki plazmatyczne. Pełnią funkcję ochronną, będąc przeciwciałami ochronnymi (immunoglobulinami). U ptaków badano trzy klasy immunoglobulin: IgG, IgM, IgA, u ssaków jest ich pięć - IgG, IgM, IgE, IgD. IgA. Ilościowo we krwi dominuje IgG (80%). Metodą immunoelektroforezy z surowicy krwi wyodrębnia się do 30 frakcji białkowych. Wszystkie immunoglobuliny składają się z dwóch ciężkich łańcuchów polipeptydowych (M. m. 53 000-75 000) i dwóch łańcuchów lekkich (MM 22 500) połączonych trzema mostkami dwusiarczkowymi. Każdy typ immunoglobuliny jest w stanie specyficznie oddziaływać tylko z jednym specyficznym antygenem.

Surowica krwi nowonarodzonych cieląt, jagniąt, koźląt, prosiąt, źrebiąt praktycznie nie zawiera przeciwciał. Nowonarodzone zwierzęta nie są w stanie syntetyzować przeciwciał w pierwszych dniach życia. Pojawiają się dopiero po przedostaniu się siary do przewodu pokarmowego. Niezależną syntezę tych białek ochronnych obserwuje się w szpiku kostnym, śledzionie i węzłach chłonnych od 3 lub 4 tygodnia życia zwierzęcia. Dlatego tak ważne jest podawanie noworodkowi siary, która zawiera 10-20 razy więcej immunoglobulin niż zwykłe mleko. Immunoglobuliny Colostrum są w stanie przeniknąć bez rozszczepienia przez pinocytozę do ściany jelita i dostać się do krwioobiegu, tworząc ochronę organizmu (odporność siarową lub siarową).

Limfocyty T współpracują z limfocytami B w syntezie immunoglobulin, hamują reakcje immunologiczne i lizują różne komórki. We krwi limfocyty T stanowią 70%, limfocyty B - około 30%. Do syntezy immunoglobulin potrzebna jest również trzecia populacja komórek - makrofagi. Pełnią rolę podstawowych czynników ochrony niespecyficznej, dzięki zdolności wychwytywania i trawienia mikroorganizmów, antygenów, kompleksów immunologicznych oraz przekazywania o nich informacji limfocytom T i B. Makrofagi działają jako pośrednicy między wszystkimi uczestnikami procesu za pomocą wytwarzanych przez komórki limfokin i monokin.

Limfocyty B tworzą przeciwciała tylko w odpowiedzi na określone antygeny (bakterie, wirusy), które dostały się do organizmu. W tym celu struktura antygenu i receptora globuliny na powierzchni limfocytu muszą do siebie pasować, jak klucz do zamka.

Stężenie g-globulin wzrasta w surowicy krwi w przewlekłych chorobach zakaźnych, podczas szczepień i ciąży zwierząt.

Szereg białek osocza krwi pełni określone funkcje. Wśród nich należy wyróżnić białka takie jak transferyna, haptoglobina, ceruloplazmina, properdyna, układ dopełniacza, lizozym, interferon.

Transferryny to β-globuliny syntetyzowane w wątrobie. Wiążąc dwa atomy żelaza w cząsteczce białka, transportują ten pierwiastek do różnych tkanek, regulują jego stężenie i utrzymują w organizmie. W zależności od wielkości ładunku cząsteczki białka, składu aminokwasowego wyróżnia się 19 rodzajów transferryn, które są związane z dziedzicznością. Transferyny mogą mieć również bezpośrednie działanie bakteriologiczne. Stężenie transferryn w surowicy krwi wynosi około 2,9 g/l. Niski poziom transferyn w surowicy krwi może być spowodowany brakiem białka w diecie zwierzęcia.

Haptoglobina jest częścią b2-globuliny syntetyzowanej w wątrobie i zawiera miedź (0,3%). Ceruloplazmina wiążąc miedź zapewnia prawidłowy poziom tego mikroelementu w tkankach. Udział ceruloplazminy stanowi 3% ogólnej ilości miedzi w organizmie zwierzęcia. Działa jako enzym i utleniacz. Ceruloplazmina jest oksydazą adrenaliny, kwasu askorbinowego. Ważną cechą ceruloplazminy jest jej zdolność do utleniania żelaza w tkankach do Fe3+, odkładania go w tej postaci.

Układ dopełniacza to kompleks białek serwatki o charakterze globuliny, który jest uważany za układ proenzymów, których aktywacja prowadzi do cytolizy, zniszczenia antygenu. Syntezę układu dopełniacza, liczącego do 25 różnych białek, przeprowadzają głównie fagocyty jednojądrzaste, a także histiocyty. Jest to złożony system efektorowy białek surowicy, który odgrywa ważną rolę w regulacji odpowiedzi immunologicznej i utrzymaniu homeostazy; pod względem filogenezy i ontogenezy powstał wcześniej niż układ odpornościowy. W ramach układu dopełniacza szczegółowo zbadano 11 składników. Kaskada reakcji enzymatycznych wyzwalanych przez kompleks antygen-przeciwciało i prowadzących do sekwencyjnej aktywacji wszystkich składników składnika, począwszy od pierwszego, nazywana jest klasyczną drogą aktywacji. Obejście, które charakteryzuje się aktywacją późniejszych składników dopełniacza, zaczynając od C3, nazywa się alternatywą. Zniszczenie komórki drobnoustroju następuje dopiero po aktywacji składnika C4. Białka końcowe układu dopełniacza, kolejno reagując ze sobą, są wprowadzane do podwójnej warstwy lipidów, uszkadzając błonę komórkową z tworzeniem kanałów błonowych, co prowadzi do zaburzeń osmotycznych, przenikania przeciwciał i dopełniacza do wnętrza komórki, a następnie przez lizę błon wewnątrzkomórkowych. Powszechnie przyjmuje się, że zawartość dopełniacza w surowicy krwi jest jednym z najbardziej obiektywnych wskaźników stanu niespecyficznych mechanizmów obronnych organizmu.

Properdyna jest glikoproteiną typu g-globuliny o masie cząsteczkowej około 184 000. Stanowi 0,3% całkowitej ilości białek surowicy krwi. Posiadając wysoką labilność termiczną, Propertydin ulega zniszczeniu w ciągu 30 minut w temperaturze 56°C. Miejsce syntezy properdyny nie zostało ostatecznie wyjaśnione. Prawdopodobnie w jej syntezie bierze udział tkanka limfatyczna. Properdyna wykazuje przede wszystkim działanie bakteriobójcze wobec drobnoustrojów Gram-ujemnych. Do manifestacji aktywności propertydyny wymagana jest obowiązkowa obecność pierwszych czterech składników dopełniacza oraz jonów magnezu, odpowiadających układowi properdyny. Ujawniono zależność między poziomem układu properdyny a stopniem odporności organizmu zwierzęcego.

Interferon jest białkiem o niskiej masie cząsteczkowej (M. m. 24 000-36 000), które jest syntetyzowane i wydalane przez komórki tkanek w odpowiedzi na przenikanie do nich wirusów. Z komórek interferon łatwo przenika do krwioobiegu i jest rozprowadzany do wszystkich narządów i tkanek. Po wniknięciu wirusa do komórki uwalniany jest jednoniciowy RNA i na jego podstawie syntetyzowany jest dwuniciowy RNA. Otrzymuje się w ten sposób RNA, które indukuje syntezę interferonu. Interferon wiąże się z błoną plazmatyczną innych komórek ciała i stymuluje ich zdolność do opierania się infekcjom wirusowym. Działanie przeciwwirusowe interferonu związane jest z jego zdolnością do aktywowania w komórkach syntezy inhibitorów i enzymów, które blokują translację wirusowego IRNA, a w konsekwencji reprodukcję wirusa. Interferon ma również właściwości immunoregulacyjne. Istnieją trzy rodzaje interferonów: a-interferon (leukocyt), który ma działanie przeciwwirusowe i antyproliferacyjne, przeciwnowotworowe; β-interferon (fibroblast), który ma głównie działanie przeciwnowotworowe i przeciwwirusowe; g-interferon (limfocytarny lub immunologiczny), który ma głównie właściwości immunomodulujące.

Fizjologiczne role białek krwi są liczne, główne z nich to:

Utrzymują ciśnienie koloidowo-onkotyczne, utrzymując objętość krwi, wiążąc wodę i zatrzymując ją, zapobiegając wydostawaniu się jej z krwioobiegu;

Weź udział w procesach krzepnięcia krwi;

Utrzymują stałość pH krwi, tworząc jeden z systemów buforowych krwi;

Łącząc się z wieloma substancjami (ChS, bilirubina itp.), a także z lekami, dostarczają je do tkanek.

Odgrywają ważną rolę w procesach odpornościowych;

Służyć jako rezerwa aminokwasów;

Pełnią funkcję regulacyjną (hormony, enzymy i inne biologicznie aktywne substancje białkowe).

Wartość kliniczna i diagnostyczna:

1) Normoproteinemia - prawidłowa zawartość białka całkowitego;

2) Hipoproteinemia – niska zawartość białka ogólnego;

3) Hiperproteinemia - wysoka zawartość białka;

Zmiana całkowitego białka krwi może być względna i bezwzględna.

hiperproteinemia:

1. Poważne odwodnienie.

3. W przewlekłym zapaleniu wielostawowym oraz niektórych i niektórych przewlekłych procesach zapalnych.

4. Uporczywą hiperproteinemię do 12% i więcej obserwuje się w szpiczaku mnogim (plazmacoma), makroglobulinemii Vandelstroma, w której pojawiają się dodatkowe ogniska w płaskich kościach czaszki i powstawanie „nieprawidłowych”, patologicznych białek - paraprotein.

Hipoproteinemia jest prawie zawsze związana z hipoalbuminemią, a hiperproteinemia z hiperglobulinemią.

Względna hiperproteinemia- związane ze zmniejszeniem objętości krwi krążącej w wyniku odwodnienia.

Bezwzględna hiperproteinemia- obserwuje się nadmierną syntezę patologicznych białek, zwiększone tworzenie immunoglobulin, zwiększoną syntezę białek w ostrej fazie zapalenia.

Oprócz zawartości białka całkowitego, w diagnostyce różnych procesów patologicznych ważne jest oznaczenie frakcji białkowych. Naruszenie optymalnego stosunku między nimi nazywa się dysproteinemią. Najbardziej wyraźne dysproteinemie występują, gdy narządy są uszkodzone, w których syntetyzowane są białka. Szczególnie często zmniejsza się ilość albumin (hipoalbuminemia), które pełnią ważne funkcje w utrzymaniu koloidalnego ciśnienia osmotycznego krwi, regulują wymianę wody między krwią a przestrzenią śródmiąższową, wiążą i transportują węglowodany, lipidy, hormony, witaminy i minerały .

Wzrost ilości albumin występuje rzadko – głównie przy odwodnieniu. Wraz ze zmianami ilości albumin zaburzony zostaje ich stosunek do globulin (zmienia się współczynnik albumina-globulina), który u zdrowych zwierząt wynosi od 0,7 do 1,0 (u psów 1,2).

Liczba alfa-globulin wzrasta w ostrych stanach zapalnych (reumatyzm, zapalenie płuc, zapalenie kłębuszków nerkowych, zapalenie stawów) oraz podczas zaostrzenia chorób o przewlekłym przebiegu (gruźlica, zapalenie wątroby), ponieważ do tej grupy należą białka „ostrej fazy” (białko C-reaktywne, ceruloplazmina , haptoglobina, alfa-1 antytrypsyna, alfa-2 makroglobulina, kwaśna alfa-1-glikoproteina). Ich poziom rzadko spada, najczęściej w ciężkich procesach dystroficznych w wątrobie, gdzie alfa-globulina jest częściowo syntetyzowana.

Wzrost liczby beta-globulin obserwuje się najczęściej w infekcjach o przebiegu przewlekłym, chorobach nerek (nerczyca, zapalenie kłębuszków nerkowych), marskości wątroby. Skład frakcji beta-globuliny obejmuje fibrynogen, którego wzrost zawartości występuje w płatowym zapaleniu płuc, odoskrzelowym zapaleniu płuc, białaczce, septycznym zapaleniu wsierdzia i zmniejszeniu chorób wątroby, w których jest syntetyzowany.

Frakcje gamma globulin zawierają większość przeciwciał (immunoglobulin), które zapewniają humoralną ochronę organizmu, dlatego ich ilość w surowicy krwi zależy od dojrzałości morfologicznej i funkcjonalnej przydatności immunoreaktywnej tkanki.

Niski poziom gamma globulin występuje u noworodków, zwłaszcza w pierwszej dobie życia, ponieważ nie przechodzą one przez barierę łożyskową, ale dostają się do organizmu tylko z siarą (fizjologiczny niedobór odporności), dlatego przy utrzymaniu ich poziomu jakość mleko, terminowość jego picia ma ogromne znaczenie, stan błony śluzowej jelita cienkiego. Synteza własnych immunoglobulin rozpoczyna się od 5-7 dnia życia i osiąga optymalny poziom dopiero w wieku 6 miesięcy, więc młode są podatne na wiele chorób (salmonelloza, paciorkowce, pastereloza, wirusowe zapalenie dróg oddechowych, zapalenie płuc). Spadek zawartości gamma globulin obserwuje się również w różnych chorobach, którym towarzyszą uszkodzenia układu odpornościowego (szpiczak, białaczka limfatyczna, choroba Gumboro), utrata immunoglobulin w nerczycy, zapaleniu jelit, przewlekłym krwawieniu, w wyniku zahamowania funkcjonowanie układu odpornościowego przez różne toksyny, leki (immunosupresanty).

Hipoproteinemia:

Niewystarczające spożycie białka pokarmowego, zwykle obserwowane przy niedożywieniu, głodzeniu, nowotworach, zwężeniu przełyku, dysfunkcji przewodu pokarmowego (z powodu pogorszenia trawienia i wchłaniania białkowych składników pokarmu), na przykład przy przedłużających się procesach zapalnych jelit .

Według A.A. Pokrovsky'ego nawet niezrównoważony skład aminokwasowy pożywienia może czasami prowadzić do hipoproteinemii.

Aby zapewnić prawidłowe procesy życiowe, organizm wykorzystuje frakcję albuminową białek osocza krwi. Przy zwiększonym spożyciu albumin (głównie powodujących onkotyczne ciśnienie krwi) rozwija się tzw. obrzęk onkotyczny lub głodowy. Każdemu spadkowi zawartości białka w osoczu krwi poniżej 5% często towarzyszy hipoproteinemiczny obrzęk tkanek.

4. Defektoproteinemia (albuminemia) - wrodzony brak lub niedostateczna zawartość ceruloplazminy w osoczu krwi w chorobie Wilsona.

5. U kobiet w okresie laktacji iw ostatnich miesiącach ciąży.

6. Zespół nerczycowy

7. Kwashiorkor (ostry niedobór białka)

8. Zespół soli retencyjnej

Względna hipoproteinemia- związane ze wzrostem objętości krążącej krwi z powodu wody (z bezmoczem, dekompensacją serca, zwiększoną syntezą hormonu antydiuretycznego podwzgórza).

Bezwzględna hipoproteinemia- obserwowane przy niedostatecznej podaży białek w organizmie w wyniku głodzenia, niedostatecznej syntezy białek w przewlekłych procesach zapalnych wątroby, wrodzonych zaburzeniach syntezy poszczególnych białek krwi, wzmożonym rozpadzie białek w organizmie i powstawaniu znacznych ilość wysięku.

Bibliografia

1. Babenko O. O., Savchenko T. G., Reznichenko L. V. Zapobieganie hipowitaminozie A w hodowli trzody chlewnej. / T. G. Savchenko. / Weterynarz. - Nr 12. - 2008. - S. 38 - 39.

2. Zaitsev S. Yu., Biochemia zwierząt / Yu. V. Konopatov - St. Petersburg: „Lan”, 2004., 384 s.

3. Severina E. S., Biochemistry 2. wydanie / E. S. Severina - M.: „Med” 2004., 184 s.

Aplikacja

Rodzaj zwierzęcia	Białko całkowite, g/l	Frakcje białek, w procentach
albuminy	Globuliny

Bydło

Patka. 2. Parametry biochemiczne surowicy krwi różnych gatunków zwierząt




Fosfatazy alkalicznej

Kinaza kreatyniny



Wodorowęglany
Bilirubina całkowita

Chlorki (Cl-)
cholesterol
Kreatynina




Globulina albuminy białkowej	55-75 26-40 21-37	57-80 24-38 24-47	62-82 28-39 29-49	57-79 25-38 24-46	58-83 23-40 39-60	59-78 27-37 32-50	61-75 23-36 27-44	54-83 24-46 15-28	55-70 35-44 17-35
Sód (Na+)
Mocznik

Hostowane na Allbest.ru

...

Podobne dokumenty

Powstają elementy krwi: erytrocyty, leukocyty, hemoglobina, hematokryt. Metoda liczenia erytrocytów na jednostkę objętości krwi w komorze Goryaeva, technika pobierania krwi. Funkcje: troficzne, wydalnicze, oddechowe, ochronne, korelacyjne.

praca praktyczna, dodano 10.09.2009

Wątroba jest najbardziej masywnym gruczołem w ciele zwierząt i ludzi. Klasyfikacja i cechy budowy wątroby u różnych gatunków zwierząt. Ukrwienie i funkcje wątroby, opis budowy zrazika wątrobowego, cechy szczególne. Budowa dróg żółciowych.

streszczenie, dodano 11.10.2010

Grupy krwi bydła jako podstawa procesu hodowlanego. Badanie grup krwi i wykorzystywanie ich do określania linii i ras. Wykorzystanie monitoringu immunogenetycznego i biotechnologii transplantacji zarodków w rozrodzie.

praca semestralna, dodano 08.02.2010

Cechy bioekologiczne i technologia agrotechniczna kukurydzy. Technologia produkcji białka paszowego z kukurydzy. Charakterystyka mikroorganizmów jednokomórkowych. Sprzęt używany do produkcji drożdży paszowych. Automatyzacja procesów produkcyjnych.

praca dyplomowa, dodano 14.06.2015

Współczesne koncepcje dotyczące układu odpornościowego i niespecyficznej odporności organizmu. Ocena stanu immunologicznego i terapii korygującej w kompleksowym leczeniu zwierząt chorych chirurgicznie. Cechy charakterystyczne immunogramu krwi w stanach zapalnych ropnych.

streszczenie, dodano 22.12.2011

Opis białek, tłuszczów, węglowodanów, witamin, składników mineralnych i pierwiastków śladowych. Ocena wartości odżywczej pasz. Metody badania metabolizmu organizmu zwierzęcego, oparte na prawie zachowania energii. Bilans azotu, węgla i energii u krowy.

streszczenie, dodano 15.06.2014

Ekonomiczne szkody powodowane przez muchy w hodowli zwierząt, środki i metody regulacji ich liczebności. Zasoby cennego białka paszowego w paszach nietradycyjnych oraz zagadnienia zagospodarowania ptasich odchodów. Hodowla i użytkowanie much domowych, jej rodzaje.

rozprawa, dodano 23.07.2010

Układ narządów krążenia krwi i limfy, czyli układ naczyniowy. Ogólna charakterystyka ukrwienia poszczególnych narządów. Złożone składniki krwi i ich główne funkcje. Układ limfatyczny ssaków. Przebieg i budowa naczyń limfatycznych.

streszczenie, dodano 19.06.2014

Cechy prac przygotowawczych na stanowisku przed zbiorem ziemniaków: określenie ogólnego stanu całej nasadzeń, stopnia rozwoju krzewów, ich podatności na zarazę ziemniaczaną. Metody określania przybliżonej wartości plonu. Technologia i termin zbioru.

artykuł, dodano 03.03.2010

Główne funkcje krwi: troficzne (odżywcze), wydalnicze (wydalnicze), oddechowe (oddechowe), ochronne termoregulacyjne, korelacyjne. Osocze krwi, białka osocza, niebiałkowe związki zawierające azot, bezazotowe substancje organiczne.

Oznaczanie ilości glikoprotein we krwi. Całkowite białko surowicy

Streszczenie rozprawyw medycynie na temat Wartość diagnostyczna oznaczania trofoblastycznej B1-glikoproteiny i produktów peroksydacji lipidów w ocenie stanu układu płodowo-łożyskowego w stanie przedrzucawkowym

Wyślij swoją dobrą pracę w bazie wiedzy jest prosta. Skorzystaj z poniższego formularza

Podobne dokumenty

Jesteśmy w sieciach społecznościowych

Kategorie