يصبح التشخيص في الوقت المناسب لعدوى فيروس العوز المناعي البشري إجراءً بالغ الأهمية ، لأن العلاج المبكر يمكن أن يحدد إلى حد كبير التطور الإضافي للمرض ويطيل عمر المريض. في السنوات الأخيرة ، كان هناك تقدم كبير في مجال الكشف عن هذا المرض الرهيب: تم استبدال أنظمة الاختبار القديمة بأنظمة أكثر تقدمًا ، وأصبحت طرق الفحص أكثر سهولة ، وزادت دقتها بشكل كبير.
في هذه المقالة سوف نتحدث عن الأساليب الحديثة لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، والتي من المفيد معرفتها لعلاج هذه المشكلة في الوقت المناسب والحفاظ على نوعية الحياة الطبيعية للمريض.
طرق تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية
في روسيا ، لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، يتم تنفيذ إجراء قياسي يتضمن مستويين:
- نظام اختبار ELISA (تحليل الفرز) ؛
- النشاف المناعي (IB).
يمكن أيضًا استخدام طرق التشخيص الأخرى:
- اختبارات صريحة.
أنظمة اختبار ELISA
في المرحلة الأولى من التشخيص ، يتم استخدام اختبار الفحص (ELISA) للكشف عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، والذي يعتمد على بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية التي تم إنشاؤها في المختبرات التي تلتقط أجسامًا مضادة معينة يتم إنتاجها في الجسم استجابةً للعدوى. بعد تفاعلهم مع الكواشف (الإنزيمات) لنظام الاختبار ، يتغير لون المؤشر. علاوة على ذلك ، تتم معالجة تغييرات الألوان هذه على معدات خاصة ، والتي تحدد نتيجة التحليل الذي تم إجراؤه.
اختبارات ELISA هذه قادرة على إظهار النتائج في غضون أسابيع قليلة بعد إدخال عدوى فيروس نقص المناعة البشرية. لا يحدد هذا التحليل وجود الفيروس ، ولكنه يكتشف إنتاج الأجسام المضادة له. في بعض الأحيان ، في جسم الإنسان ، يبدأ إنتاج الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد أسبوعين بعد الإصابة ، ولكن في معظم الناس يتم إنتاجها في وقت لاحق ، بعد 3-6 أسابيع.
هناك أربعة أجيال من اختبارات ELISA بحساسيات مختلفة. في السنوات الأخيرة ، تم استخدام أنظمة اختبار الجيل الثالث والرابع بشكل متكرر ، والتي تعتمد على الببتيدات الاصطناعية أو البروتينات المؤتلفة ولديها قدر أكبر من الخصوصية والدقة. يمكن استخدامها لتشخيص عدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، ومراقبة انتشار فيروس نقص المناعة البشرية ، وضمان السلامة عند اختبار الدم المتبرع به. تبلغ دقة أنظمة اختبار ELISA من الجيل الثالث والرابع 93-99٪ (أكثر حساسية هي الاختبارات التي يتم إنتاجها في أوروبا الغربية - 99٪).
لإجراء اختبار ELISA ، يتم أخذ 5 مل من الدم من وريد المريض. بين الوجبة الأخيرة والتحليل يجب أن لا تقل عن 8 ساعات (كقاعدة عامة ، يتم إجراؤها في الصباح على معدة فارغة). يوصى بإجراء مثل هذا الاختبار في موعد لا يتجاوز 3 أسابيع بعد الإصابة المزعومة (على سبيل المثال ، بعد الجماع غير المحمي مع شريك جنسي جديد).
يتم الحصول على نتائج اختبار ELISA بعد 2-10 أيام:
- نتيجة سلبية: تشير إلى عدم وجود عدوى بفيروس نقص المناعة البشرية ولا تتطلب الإحالة إلى أخصائي ؛
- نتيجة سلبية خاطئة: يمكن ملاحظتها في المراحل المبكرة من العدوى (حتى 3 أسابيع) ، في المراحل المتأخرة من الإيدز مع كبت المناعة الشديد ومع تحضير الدم بشكل غير صحيح ؛
- نتيجة إيجابية خاطئة: يمكن ملاحظتها في بعض الأمراض وفي حالة تحضير الدم بشكل غير صحيح ؛
- النتيجة الإيجابية: تشير إلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، تتطلب إحالة المريض إلى أخصائي في مركز الإيدز.
لماذا يمكن أن يعطي اختبار ELISA نتائج إيجابية خاطئة؟
يمكن ملاحظة النتائج الإيجابية الكاذبة لاختبار ELISA لفيروس نقص المناعة البشرية مع المعالجة غير السليمة للدم أو في المرضى الذين يعانون من مثل هذه الحالات والأمراض:
- ورم نقيي متعدد؛
- الأمراض المعدية التي يسببها فيروس ابشتاين بار ؛
- الدولة بعد
- أمراض المناعة الذاتية؛
- على خلفية الحمل.
- الحالة بعد التطعيم.
للأسباب الموضحة أعلاه ، قد تكون الأجسام المضادة المتفاعلة غير النوعية موجودة في الدم ، والتي لم يكن إنتاجها ناتجًا عن عدوى فيروس العوز المناعي البشري.
في السنوات الأخيرة ، انخفض تواتر النتائج الإيجابية الخاطئة بشكل كبير بسبب استخدام أنظمة اختبار الجيل الثالث والرابع ، والتي تحتوي على بروتينات أكثر حساسية من الببتيد والترابط (يتم تصنيعها باستخدام الهندسة الوراثية المختبرية). بعد استخدام اختبارات ELISA هذه ، انخفض تكرار النتائج الإيجابية الكاذبة بشكل كبير وبلغ حوالي 0.02-0.5٪.
لا تعني النتيجة الإيجابية الخاطئة أن الشخص مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. في مثل هذه الحالات ، توصي منظمة الصحة العالمية بإجراء اختبار ELISA آخر (الجيل الرابع الإلزامي).
يتم إرسال دم المريض إلى مختبر مرجعي أو تحكيم يحمل علامة "تكرار" ويتم اختباره على نظام اختبار ELISA من الجيل الرابع. إذا كانت نتيجة التحليل الجديد سلبية ، فسيتم التعرف على النتيجة الأولى على أنها خاطئة (إيجابية كاذبة) ولا يتم تنفيذ IB. إذا كانت النتيجة إيجابية أو مشكوك فيها أثناء الاختبار الثاني ، يجب على المريض الخضوع لـ IB في 4-6 أسابيع لتأكيد أو دحض الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.
النشاف المناعي
لا يمكن إجراء تشخيص نهائي لعدوى فيروس العوز المناعي البشري إلا بعد الحصول على نتيجة النشاف المناعي الإيجابية (IB). لتنفيذه ، يتم استخدام شريط النيتروسليلوز ، حيث يتم تطبيق البروتينات الفيروسية.
يتم أخذ عينات الدم من أجل IB من الوريد. ثم يخضع لمعاملة خاصة ويتم فصل البروتينات الموجودة في مصله في هلام خاص حسب شحنته ووزنه الجزيئي (يتم التلاعب على معدات خاصة تحت تأثير مجال كهربائي). يتم وضع شريط النيتروسليلوز على هلام مصل الدم ويتم إجراء النشاف ("النشاف") في غرفة خاصة. تتم معالجة الشريط وإذا كانت المواد المستخدمة تحتوي على أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ، فإنها ترتبط بنطاقات المستضدات الموجودة على IB وتظهر كخطوط.
يعتبر IB إيجابيًا إذا:
- وفقًا لمعايير CDC الأمريكية - يوجد سطرين أو ثلاثة خطوط gp41 و p24 و gp120 / gp160 على الشريط ؛
- وفقًا لمعايير إدارة الغذاء والدواء الأمريكية - يوجد سطرين p24 و p31 وخط gp41 أو gp120 / gp160 على الشريط.
في 99.9٪ من الحالات ، تشير نتيجة IB الإيجابية إلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.
في حالة عدم وجود خطوط - IB سلبي.
عند تحديد الخطوط باستخدام gp160 و gp120 و gp41 ، يكون IB موضع شك. يمكن اكتشاف هذه النتيجة عندما:
- أمراض الأورام.
- حمل؛
- عمليات نقل الدم المتكررة.
في مثل هذه الحالات ، يوصى بإجراء دراسة ثانية باستخدام مجموعة من شركة أخرى. إذا بقيت النتيجة مشكوك فيها ، بعد IB إضافي ، فإن المتابعة ضرورية لمدة ستة أشهر (يتم إجراء IB كل 3 أشهر).
تفاعل البلمرة المتسلسل
يمكن لاختبار PCR اكتشاف الحمض النووي الريبي للفيروس. حساسيته عالية جدًا ويسمح باكتشاف الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في وقت مبكر يصل إلى 10 أيام بعد الإصابة. في بعض الحالات ، يمكن أن يعطي تفاعل البوليميراز المتسلسل نتائج إيجابية خاطئة ، لأن حساسيته العالية يمكن أن تتفاعل أيضًا مع الأجسام المضادة للعدوى الأخرى.
هذه التقنية التشخيصية باهظة الثمن وتتطلب معدات خاصة ومتخصصين مؤهلين تأهيلاً عالياً. هذه الأسباب لا تسمح بتنفيذها أثناء الاختبار الجماعي للسكان.
يستخدم PCR في مثل هذه الحالات:
- للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية عند الأطفال حديثي الولادة الذين ولدوا لأمهات مصابات بفيروس نقص المناعة البشرية ؛
- للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية في "فترة النافذة" أو في حالة وجود IB مشكوك فيه ؛
- للسيطرة على تركيز فيروس نقص المناعة البشرية في الدم.
- لدراسة دم المتبرع.
فقط من خلال اختبار PCR ، لا يتم تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية ، ولكن يتم إجراؤه كطريقة تشخيصية إضافية لحل النزاعات.
طرق صريحة
أصبح أحد الابتكارات في تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية اختبارات سريعة ، يمكن تقييم نتائجها في غضون 10-15 دقيقة. يتم الحصول على النتائج الأكثر كفاءة ودقة من خلال اختبارات الكروماتوغرافيا المناعية على أساس مبدأ التدفق الشعري. وهي عبارة عن شرائط خاصة يوضع عليها الدم أو سوائل الاختبار الأخرى (اللعاب والبول). في وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ، بعد 10-15 دقيقة ، يظهر شريط ملون وشريط تحكم في الاختبار - نتيجة إيجابية. إذا كانت النتيجة سلبية ، يظهر خط التحكم فقط.
كما هو الحال مع اختبارات ELISA ، يجب تأكيد نتائج الاختبار السريع عن طريق تحليل IB. عندها فقط يمكن تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.
هناك مجموعات سريعة للاختبار المنزلي. تم اعتماد اختبار OraSure Technologies1 (الولايات المتحدة الأمريكية) من قِبل إدارة الأغذية والعقاقير (FDA) ، وهو متاح بدون وصفة طبية ، ويمكن استخدامه للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية. بعد الاختبار وفي حالة النتيجة الإيجابية ينصح المريض بالخضوع لفحص في مركز متخصص لتأكيد التشخيص.
لم تتم الموافقة على الاختبارات المتبقية للاستخدام المنزلي من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية ويمكن أن تكون نتائجها موضع شك كبير.
على الرغم من حقيقة أن الاختبارات السريعة أقل دقة من اختبارات ELISA من الجيل الرابع ، إلا أنها تستخدم على نطاق واسع لإجراء اختبارات إضافية على السكان.
يمكنك إجراء اختبار لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية في أي عيادة ، أو المستشفى الإقليمي المركزي أو في مراكز الإيدز المتخصصة. على أراضي روسيا ، يتم احتجازهم بسرية تامة أو بدون الكشف عن هويتهم. يمكن لكل مريض أن يتوقع تلقي المشورة الطبية أو النفسية قبل التحليل أو بعده. سيتعين عليك دفع تكاليف اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية فقط في المؤسسات الطبية التجارية ، وفي العيادات والمستشفيات العامة يتم إجراؤها مجانًا.
للحصول على معلومات حول كيفية الإصابة بعدوى فيروس نقص المناعة البشرية والأساطير الموجودة حول احتمالات الإصابة ، اقرأ
... يعتمد تشخيص أي مرض معدي على مقارنة البيانات الوبائية والسريرية والمخبرية ، ويمكن أن تؤدي المبالغة في قيمة إحدى مجموعات هذه البيانات إلى أخطاء في التشخيص.
يشمل تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية مرحلتين:
أنامنصة - إثبات الحقيقة الفعلية للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية
;
ثانيًامنصة - تحديد مرحلة المرض
.
إثبات حقيقة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية
إن إثبات حقيقة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية نفسه (أي تحديد الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية) ، بدوره ، يشمل أيضًا مرحلتين:
أنا مرحلة- مقايسة الممتز المناعي المرتبط(اذا كان): طريقة ELISA هي الفحص (الانتقائي) - اختيار الأفراد المصابين المفترض ، أي أن الغرض منها هو تحديد الأفراد المشتبه بهم وفحص الأفراد الأصحاء ؛ يتم الكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية باستخدام أجسام مضادة أخرى للأجسام المضادة المرغوبة (الأجسام المضادة ضد الأجسام المضادة الأخرى). يتم تمييز هذه الأجسام المضادة "المساعدة" بإنزيم. يجب أن تكون جميع اختبارات الفحص حساسة للغاية حتى لا يفوت المريض. لهذا السبب ، فإن خصوصيتها ليست عالية جدًا ، أي أن ELISA يمكن أن تعطي استجابة إيجابية ("ربما تكون مريضة") في الأشخاص غير المصابين (على سبيل المثال ، في المرضى الذين يعانون من أمراض المناعة الذاتية: الروماتيزم ، الذئبة الحمامية الجهازية ، إلخ). يتراوح تواتر النتائج الإيجابية الخاطئة عند استخدام أنظمة اختبار مختلفة من 0.02 إلى 0.5٪. إذا أعطت ELISA لشخص ما نتيجة إيجابية ، فعند تأكيد حقيقة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، من الضروري إجراء مزيد من الفحص. عند إجراء ELISA في 3-5٪ من الحالات ، من الممكن الحصول على نتائج سلبية خاطئة - إذا حدثت العدوى مؤخرًا نسبيًا ولا يزال مستوى الأجسام المضادة منخفضًا جدًا ، أو في المرحلة النهائية من المرض ، والتي تتميز بأضرار جسيمة في جهاز المناعة مع ضعف شديد في عملية تكوين الجسم المضاد. لذلك ، في ظل وجود بيانات تشير إلى الاتصال بأشخاص مصابين بفيروس نقص المناعة البشرية ، عادة ما يتم إجراء دراسات متكررة بعد شهرين إلى ثلاثة أشهر.
المرحلة الثانية - مناعي(في تعديل لطخة ويسترن ، لطخة ويسترن): هي طريقة أكثر تعقيدًا وتعمل على تأكيد حقيقة الإصابة. لا تكتشف هذه الطريقة الأجسام المضادة المعقدة لفيروس نقص المناعة البشرية ، ولكن الأجسام المضادة لبروتيناتها الهيكلية الفردية (p24 ، gp120 ، gp41 ، إلخ). تعتبر نتائج التجلط المناعي إيجابية إذا تم اكتشاف أجسام مضادة لثلاثة بروتينات على الأقل ، أحدها مشفر بواسطة الجينات env ، والآخر بواسطة جينات gag ، والثالث بواسطة جينات pol. إذا تم اكتشاف أجسام مضادة لبروتين أو بروتينين ، فإن النتيجة تعتبر مشكوك فيها وتتطلب تأكيدًا. في معظم المختبرات ، يتم تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية إذا تم اكتشاف الأجسام المضادة لبروتينات p24 و p31 و gp4l و gpl20 / gp160 في وقت واحد. جوهر الطريقة: يتم تدمير الفيروس إلى مكونات (مستضدات) ، والتي تتكون من بقايا الأحماض الأمينية المتأينة ، وبالتالي فإن جميع المكونات لها فجر يختلف عن بعضها البعض ؛ بعد ذلك ، باستخدام الرحلان الكهربائي (التيار الكهربائي) ، يتم توزيع المستضدات على سطح الشريط - إذا كانت هناك أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في مصل الاختبار ، فسوف تتفاعل مع جميع مجموعات المستضدات ، ويمكن اكتشاف ذلك.
يجب تذكرهاأن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية تظهر في 90-95٪ من المصابين في غضون 3 أشهر بعد الإصابة ، في 5-9٪ من المصابين تظهر الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد 6 أشهر ، وفي 0.5-1٪ من المصابين تظهر أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في وقت لاحق. في مرحلة الإيدز ، قد ينخفض عدد الأجسام المضادة ، حتى تختفي تمامًا.
في علم المناعة ، هناك شيء مثل "نافذة مصلية" - الفترة من الإصابة إلى ظهور مثل هذا العدد من الأجسام المضادة التي يمكن اكتشافها. بالنسبة لفيروس نقص المناعة البشرية ، تستمر هذه الفترة عادة من 2 إلى 12 أسبوعًا ، وفي حالات نادرة أطول. خلال "النافذة المصلية" ، يكون الشخص سليمًا وفقًا للاختبارات ، لكنه في الواقع مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. لقد ثبت أن الحمض النووي لفيروس نقص المناعة البشرية يمكن أن يكون في الجينوم البشري لمدة ثلاث سنوات على الأقل دون ظهور علامات النشاط ولا تظهر الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية (علامات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية).
خلال هذه الفترة ("النافذة المصلية") ، من الممكن التعرف على شخص مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية وحتى بعد أسبوع إلى أسبوعين من الإصابة باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل(PCR).هذه طريقة حساسة للغاية - نظريًا ، يمكن اكتشاف حمض نووي واحد لكل 10 مل من الوسط. جوهر الطريقة هو كما يلي: باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل ، يتم الحصول على العديد من نسخ الحمض النووي (الفيروس عبارة عن حمض نووي - DNA أو RNA - في غلاف بروتيني) ، والتي يتم اكتشافها بعد ذلك باستخدام الإنزيمات أو النظائر المسمى ، وكذلك من خلال هيكل مميز. يعد تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) طريقة تشخيص باهظة الثمن ، لذلك لا يتم استخدامه للفحص بشكل روتيني.
تحديد مرحلة المرض
في قلب الإيدز، أولاً وقبل كل شيء ، تدمير الخلايا اللمفاوية التائية المساعدة ، والتي تتميز بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة - مجموعات التمايز - مثل CD4. في هذا الصدد ، فإن تشخيص ومراقبة تطور المرض مستحيل بدون السيطرة على التجمعات السكانية الفرعية T-helper ، والتي تتم بسهولة أكبر باستخدام فارز الخلايا بالليزر.
لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية الخفيفةعدد الخلايا اللمفاوية التائية هو مؤشر متغير للغاية. بشكل عام ، تم العثور على انخفاض في عدد خلايا CD4 (المطلقة والنسبية) لدى الأفراد الذين حدثت إصابتهم بفيروس نقص المناعة البشرية منذ عام على الأقل. من ناحية أخرى ، في المراحل المبكرة من العدوى ، غالبًا ما يزداد عدد مثبطات T (CD8) بشكل حاد في كل من الدم المحيطي والعقد الليمفاوية المتضخمة.
مع الإيدز الشديدالغالبية العظمى من المرضى لديهم عدد إجمالي منخفض من الخلايا اللمفاوية التائية (أقل من 1000 لكل 1 ميكرولتر من الدم ، بما في ذلك الخلايا الليمفاوية CD4 - أقل من 22 لكل 1 ميكرولتر ، بينما تظل القيمة المطلقة لمحتوى CD8 ضمن النطاق الطبيعي). وفقًا لذلك ، يتم تقليل نسبة CD4 / CD8 بشكل حاد. يتم تقليل استجابة الخلايا اللمفاوية التائية في المختبر لمستضدات وميتوجينات معيارية بما يتفق بدقة مع عدد CD4 المنخفض نسبيًا.
للإيدز المتقدمتتميز بلمفوبيا عامة ، قلة العدلات ، قلة الصفيحات (على التوالي ، انخفاض في عدد الخلايا الليمفاوية ، العدلات والصفائح الدموية) ، فقر الدم. قد تكون هذه التغييرات نتيجة للتثبيط المركزي لتكوين الدم بسبب هزيمة الأعضاء المكونة للدم بالفيروس ، وكذلك تدمير المناعة الذاتية للمجموعات السكانية الفرعية للخلية على الأطراف. بالإضافة إلى ذلك ، يتميز الإيدز بزيادة معتدلة في كمية غلوبولين جاما مع زيادة سائدة في محتوى IgG. المرضى الذين يعانون من أعراض حادة للإيدز غالبًا ما يكون لديهم مستويات مرتفعة من IgA. في بعض مراحل المرض ، يرتفع مستوى علامات الإيدز مثل 1 ميكروغلوبولين ، مضاد للفيروسات الحامضية ، 1-ثيموسين بشكل ملحوظ. يحدث الشيء نفسه مع إفراز النوبترين الحر ، وهو مستقلب من الضامة. ليس من الممكن بعد تقييم الأهمية النسبية لكل اختبار من الاختبارات المدرجة ، والتي يتزايد عددها باستمرار. لذلك ، يجب أخذها في الاعتبار عند التفاعل مع علامات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، سواء المناعية أو الخلوية. يتميز اختبار الدم السريري بنقص الكريات البيض ، قلة اللمفاويات (على التوالي ، انخفاض في عدد الكريات البيض والخلايا الليمفاوية).
المرحلة 1 - " مرحلة الحضانة»
- لم يتم الكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد ؛ يتم تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في هذه المرحلة على أساس البيانات الوبائية ويجب تأكيدها مختبريًا من خلال الكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية ، ومستضداته ، والأحماض النووية لفيروس نقص المناعة البشرية في مصل دم المريض ؛
المرحلة 2 - " مرحلة المظاهر الأولية»
- في هذه الفترة يوجد بالفعل إنتاج الأجسام المضادة :؛
المرحلة 2 أ - " بدون أعراض ظاهرة»
- تتجلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية فقط من خلال إنتاج الأجسام المضادة ؛
المرحلة 2B - " عدوى فيروس نقص المناعة البشرية الحادة دون مرض ثانوي»
- في دم المرضى ، الخلايا الليمفاوية ذات البلازما العريضة - يمكن اكتشاف "الخلايا أحادية النواة" وغالبًا ما يتم ملاحظة انخفاض عابر في مستوى الخلايا الليمفاوية CD4 (لوحظ وجود عدوى إكلينيكية حادة في 50-90٪ من الأفراد المصابين في الحالة الأولى 3 أشهر بعد الإصابة ؛ بداية فترة العدوى الحادة ، كقاعدة عامة ، تسبق الانقلاب المصلي ، أي ظهور الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية) ؛
المرحلة 2B - " عدوى فيروس نقص المناعة البشرية الحادة مع الأمراض الثانوية»
- على خلفية انخفاض مستوى الخلايا الليمفاوية CD4 ونقص المناعة الناتج ، تظهر أمراض ثانوية من مسببات مختلفة (التهاب اللوزتين ، الالتهاب الرئوي الجرثومي والمتكيس الرئوي ، داء المبيضات ، عدوى الهربس ، إلخ) ؛
المرحلة 3 - " كامن»
- استجابة لتطور نقص المناعة ، يتم تعديل الاستجابة المناعية في شكل تكاثر مفرط لخلايا CD4 ، يليها انخفاض تدريجي في مستوى الخلايا الليمفاوية CD4 ، بمعدل 0.05-0.07x109 / لتر سنويًا ؛ تم العثور على الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم.
المرحلة 4 - " مرحلة الأمراض الثانوية»
- استنفاد الخلايا الليمفاوية CD4 ، يتم تقليل تركيز الأجسام المضادة للفيروس بشكل كبير (اعتمادًا على شدة الأمراض الثانوية ، تتميز المراحل 4A ، 4B ، 4C) ؛
المرحلة 5 - " المرحلة النهائية»
- عادة انخفاض في عدد خلايا CD4 التي تقل عن 0.05 × 109 / لتر ؛ يتم تقليل تركيز الأجسام المضادة للفيروس بشكل كبير أو قد لا يتم اكتشاف الأجسام المضادة.
يتم إجراء تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية لإجراء تشخيص نهائي. إذا كان المريض متأكدًا من الإصابة ، فلا يجب عليك العلاج الذاتي: يجب عليك استشارة أخصائي.
تحت ستار الإيدز ، يمكن إخفاء العديد من الأمراض التي يمكن علاجها بالذهاب إلى الطبيب. تعد اختبارات العدوى من أكثر طرق التشخيص شيوعًا وأوائلها.
يستمر تحديد درجة الإصابة في المختبر بفحص الدم بواسطة ELISA أو PCR.
فيما يتعلق بتدهور المؤشرات الوبائية للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، أصبح التعرف المبكر على المرض ذا أهمية كبيرة. يقوم الطبيب بإجراء تشخيص تفريقي لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، ويجمع المعلومات الوبائية عن المرض.
في عملية دراسة طرق العدوى ، يقوم المختص بإجراء دراسات مثل:
- دراسة آلية تطور الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ؛
- تشخيص الأمراض المصاحبة.
تهدف طرق تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية إلى اكتشاف الأجسام المضادة في ELISA ، وعندما يتم تأكيد التشخيص ، يقوم الاختصاصي بعمل توضيحي مع المريض حول امتثاله للقواعد من أجل تجنب انتشار المرض.
يتم إجراء اختبار الإيدز للأطفال المولودين لأمهات مصابات بعد أن يتلقين العلاج المضاد للفيروسات العكوسة. تكتشف اختبارات الفحص الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية 1 و 2.
اللطخة المناعية مؤكد ويكشف عن الأجسام المضادة لبروتينات فيروس نقص المناعة البشرية.
يتيح التشخيص المبكر لنقص المناعة للمريض تغيير نمط حياته في وقت قصير وبدء العلاج وتلقي المساعدة النفسية. تساعد الشكاوى المميزة للمريض الطبيب دائمًا على الاشتباه في مرض الإيدز وإرسال دم المريض إلى المختبر للبحث.
اختبارات الجيل الرابع السريعة لمرض الإيدز
يسمح لك التشخيص المختبري لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، الذي يتم إجراؤه باختبارات الجيل الرابع ، بتحديد المرض في المرحلة الحادة من المرض. إن اختبار Determine HIV-1/2 Ag / Ab Combo حساس للغاية للمستضدات والأجسام المضادة في مصل المريض. خصوصية الدراسة هي 99.19٪ لخط Ab و 99.64٪ لخط Ag ، ويتم تحديد القيمة التنبؤية الإيجابية في حدود 55٪.
يتم تحديد حساسية الفحص من خلال تحديد النتائج المعروفة سابقًا. عند تلقي بيانات موجبة ، يصل احتمال وجود أرقام خاطئة إلى 45٪.
في المنزل ، يتم إجراء اختبار مسحة الفم. الفحص مريح وبسيط وغير مؤلم للمريض. يستخدم شريط الاختبار ImmunoChrom-½-Express للتحليل ويوفر نتيجة مستقرة إذا اتبع المريض التعليمات التي تأتي مع الدواء. إذا تم العثور على خطين أرجواني متطابقين في منطقة الاختبار ومنطقة التحكم ، يعتبر الاختبار إيجابيًا. يتم فك شفرة وجود شريط واحد كنتيجة سلبية للتحليل.
الوقت المستغرق في الدراسة من 15 إلى 30 دقيقة.
تشخيص المرض في فترة الحضانة
تحدث هزيمة الجهاز المناعي عندما يدخل الفيروس جسم المريض. تختلف فترة الحضانة خلال 3 أشهر.
بعد الاتصال غير المرغوب فيه والخطير مع الشريك ، من الضروري إجراء اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل ، وبناءً على النتائج ، استخلاص استنتاج حول وجود عدوى فيروس نقص المناعة البشرية في الجسم. المدة القصوى لبدء تشخيص نقص المناعة هي 8-9 أشهر ، وفي حالات استثنائية تمتد إلى سنتين.
من أجل التشخيص النهائي للمرض ، يتم إجراء الدراسة خلال العام ؛ كل 3 أشهر يتبرع المريض بالدم لفيروس نقص المناعة البشرية. يقلل الاتصال الفوري بأخصائي بعد اتصال خطير من احتمالية الإصابة بنسبة 90٪.
للتشخيص المختبري للفترة المبكرة من المرض ، يتم استخدام طريقة تفاعل البلمرة ، والتي تحدد الأحماض النووية. يتم فك رموز نتائج التحليل في غضون ساعات قليلة ، مع الحفاظ على إخفاء الهوية بالكامل.
يتم إجراء اختبار MP-HIV الإبداعي لفيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز في المنزل ، بعد 4 أسابيع من التعرض للخطر. تكتشف شرائط الاختبار الأجسام المضادة لفيروس HIV رقم 1 و 2.
طرق التشخيص السريع لمرض الإيدز عند الأطفال
يتم فحص الأطفال المولودين لأمهات مصابات بفيروس الإيدز. لا يتم دائمًا تأكيد الطرق المصلية لإثبات المرض عند الأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 5-18 شهرًا ، ولكن النتيجة لها قيمة إيجابية لاحقة في اللطخة المناعية.
تسمح لك طريقة PCR شديدة الحساسية بتحديد وجود فيروس الإيدز في جسم الطفل.
تم العثور على الحمض النووي للعامل الممرض في الطفل في الشهر الأول من العمر. تم تصميم نظام الكشف عن فيروس نقص المناعة لتحديد تركيز RNA الممرض.
الدم الكامل أو البقع الجافة مناسبة للتحليل. يتم وضع العينة في أنبوب اختبار مع مادة حافظة EDTA بنسبة 1:20. قم بتخزين المادة في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية لمدة يومين ، مما يمنع تجمد الدم.
يتم الحصول على عينات الدم المجففة عن طريق وضع سائل كامل على ورق خاص. يتم تخزين المواد المستخدمة في التشخيص عند درجة حرارة لا تزيد عن 8 درجات مئوية. مدة استخدام البطاقات لا تتجاوز 8 أشهر.
يتم فحص المولود وأخذ التحليل بالشروط التالية: يومين بعد الولادة ، في عمر شهرين ، بعد 3-6 أشهر. يشير الكشف عن الجين الفيروسي لفيروس نقص المناعة البشرية بعد ساعات قليلة من الولادة إلى إصابة الجنين خلال فترة ما قبل الولادة. يمكن أن تحدث العدوى أثناء الولادة أو أثناء الرضاعة الطبيعية للطفل.
تشير البيانات التي تؤكد وجود الحمض النووي للفيروس في عينتين من عينات المراقبة إلى تطور عدوى فيروس العوز المناعي البشري لدى الطفل.
تلغى ملاحظة المستوصف بعد تلقي اختبارات سلبية بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل بعد 4 أشهر من ولادة الطفل.
أخطاء البحث
إن التحليل الإيجابي الكاذب لوجود فيروس نقص المناعة في دم المريض لأسباب عديدة يشوه دقة تحديد المرض. تكمن الأخطاء في انتظار المريض أثناء الاختبار في المنزل.
تظهر نتيجة خاطئة عندما يعاني المريض من حالات مثل التفاعل التبادلي ، والحمل ، والمتبرعين بالدم ، والعدوى بفيروس الأنفلونزا ، وأمراض الجهاز التنفسي ، وأمراض المناعة الذاتية ، والسرطان ، والتصلب.
تساهم الحساسية في إنتاج مستضدات غريبة على جسم المريض. يتم التعرف عليها من قبل نظام الاختبار بنتيجة خاطئة. تساهم العدوى الفيروسية والفطرية في التحديد الخاطئ لوجود فيروس الإيدز.
يجب معالجة العدوى ثم اختبارها للكشف عن الإيدز. للحصول على نتيجة نوعية للدراسة ، يجب على المريض إخبار الطبيب عن الأمراض المصاحبة والعلاج الذي يتم تنفيذه.
التشخيص بواسطة ELISA
يظهر الطيف الكلي للأجسام المضادة المكتشفة بواسطة المقايسة المناعية الإنزيمية في 95٪ من الأشخاص المصابين بفيروس الإيدز. توفر النتيجة المزدوجة الإيجابية في ELISA وجود مرحلة تأكيدية ثانية - اختبار لطخة مناعية. وهو يتألف من دراسة الأجسام المضادة وعلاقتها بتركيبات البروتين الفردية للعامل الممرض. دراسة ELISA لها تفاعلين: أنزيمية ومناعة. يعتمد التحليل على تفاعل الأجسام المضادة والمستضدات.
حدد باستمرار الأجسام المضادة ، والمجمع المناعي ، ونشاط الإنزيم. يقوم الاختصاصي بفك شفرات بيانات التحليل. تشير القيم السلبية إلى عدم وجود إصابة بفيروس نقص المناعة البشرية لدى المريض.
في حالة عدم وجود أجسام مضادة وعدوى حديثة ، يحدد الطبيب نتيجة سلبية خاطئة.
إذا لم يتم تخزين عينات من مادة لدراسة الفيروس بلا مبالاة ، فقد تكون المؤشرات التي تم الحصول عليها خاطئة.
الاختبار الذي يتم إجراؤه بعد تلقيح المريض إيجابي وقد لا يكون موثوقًا به.
يجب تحضير مخفف المصل بشكل صحيح ، وتنظيف الأطباق المستعملة ، وشراء صبغة عالية الجودة.
تتجلى نتيجة الانقلاب المناعي الإيجابية من خلال توليفة من نطاقي GP 41 و GP 120 ومستضد. يتم الإشارة إلى النتيجة السلبية من خلال عدم وجود نطاقات.
عند تكوين استنتاج تشخيصي ، يتم أخذ نتائج الاختبار ومؤشرات فحص المريض في المستشفى والمسح الوبائي للمريض في الاعتبار.
تم تصميم الأول للتعرف على جميع الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية ، والثاني لتحديد الأفراد غير المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية ، ولكنهم أعطوا رد فعل إيجابي أثناء اختبار الفحص. لذلك ، تعتبر اختبارات الفحص حساسة للغاية ، أي تقريبًا لا توجد نتائج سلبية خاطئة ، والاختبارات التأكيدية محددة للغاية ، أي تقريبًا لا توجد نتائج إيجابية خاطئة. توفر هذه الاختبارات معًا نتائج دقيقة وموثوقة يمكنها اكتشاف منتجات الدم الملوثة وتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. ومع ذلك ، هناك عوامل بيولوجية تقلل من دقة هذه الاختبارات ؛ من الممكن أيضًا حدوث أخطاء معملية. لذلك ، يجب أن يكون لدى كل مختبر يقوم باختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية برنامج مراقبة جودة لا تشوبه شائبة لهذه الاختبارات. يجب ألا ننسى أن موثوقية الاختبارات المعملية لا تصل أبدًا إلى مائة بالمائة وأن نتائجها يجب دائمًا اعتبارها إضافة إلى التشخيص السريري.
فترة النافذة والكشف المبكر عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية:
يبدأ إنتاج الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد الإصابة مباشرة ، لكن وقت ظهورها يعتمد على العديد من العوامل ، على وجه الخصوص ، على حالة الجهاز المناعي للمريض وخصائص الفيروس. من المهم ملاحظة أن الأجسام المضادة قد تكون موجودة بالفعل في الدم مبكرًا بعد الإصابة ، لكن تركيزها أقل من حد الكشف لبعض الطرق (فترة النافذة). كشفت أنظمة الاختبار الأولى عن وجود أجسام مضادة في جميع الأشخاص المصابين بعدوى فيروس العوز المناعي البشري تقريبًا بعد 6-12 أسبوعًا من الإصابة. تكتشف أحدث أنظمة الاختبار ، بما في ذلك مصيدة الجيل الثالث ELISA ، الأجسام المضادة بعد 3-4 أسابيع من الإصابة. يمكن تقصير الوقت بين العدوى وتشخيص عدوى فيروس العوز المناعي البشري ببضعة أيام باستخدام طرق الكشف عن مستضد فيروس العوز المناعي البشري ، وبضعة أيام أخرى باستخدام طرق الكشف عن الحمض النووي الريبي لفيروس العوز المناعي البشري. إذا تم استخدام جميع الطرق الموصوفة ، فيمكن تحديد تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية لدى معظم المرضى في وقت مبكر يصل إلى 2-3 أسابيع بعد الإصابة. أنظمة الاختبار المتاحة تجاريًا لفحص الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية لديها حساسية عالية جدًا وتقريباً نفس الحساسية ، كافية للكشف عن غالبية الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية (ما يسمى الحساسية الوبائية). ومع ذلك ، تختلف أنظمة الاختبار المختلفة في الحساسية التحليلية ، أي في القدرة على اكتشاف المستويات المنخفضة من الأجسام المضادة التي تحدث قبل اكتمال الانقلاب المصلي.
توجد أنظمة اختبار مصممة لاكتشاف الأجسام المضادة لـ IgM لفيروس نقص المناعة البشرية ، ولكنها لا تستخدم على نطاق واسع في التشخيص المبكر لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، حيث لا يتم دائمًا إنتاج الأجسام المضادة IgM مبكرًا بعد الإصابة. تكتشف بعض أنظمة اختبار الجيل الثالث في وقت واحد الأجسام المضادة IgM و IgG لفيروس نقص المناعة البشرية ولديها حساسية تحليلية أعلى.
أنظر أيضا:الكشف عن حالة فيروس نقص المناعة البشرية دون ندم ، انحراف الحاجز ، تمدد الأوعية الدموية: تهديد خفي للصحة ، فحص ما قبل الولادة ؛ تشوهات الكروموسومات ، الحول الكامن (الحول الكامن ، Heterophoria) ، المخاطر الخفية: النساء وأمراض القلب ، الزهري الكامن (الزهري اللاتيني) ، بروتوكول Realtime RT-PCR CDC للكشف عن الأنفلونزا A (H1N1) واختباره ، طحن الأسنان (صرير الأسنان) ، الحذر : مسببات الحساسية الخفية
|
التشخيص المختبري لعدوى فيروس العوز المناعي البشري
عند تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، يتم استخدام 4 مجموعات من الطرق:
1. تحديد وجود فيروس أو مستضداته أو نسخ الحمض النووي الريبي في مواد من مريض أو مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية
التشخيصات المصلية على أساس الكشف عن الأجسام المضادة المحددة للسطح (gp 120 و gp 41) والداخلية (ص 18 و ص 24) بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية.
3. تحديد المرضي (النوعي) لتغيرات عدوى فيروس العوز المناعي البشري في جهاز المناعة.
التشخيص المختبري للعدوى الانتهازية (الأمراض المرتبطة بالإيدز).
1. التشخيصات الفيروسية.المواد المستخدمة في عزل فيروس نقص المناعة البشرية هي الخلايا اللمفاوية التائية في الدم ، وخلايا الدم البيضاء في نخاع العظم ، والعقد الليمفاوية ، وأنسجة المخ ، واللعاب ، والسائل المنوي ، والسائل النخاعي ، وبلازما الدم.
تُستخدم المادة التي تم الحصول عليها لإصابة الثقافة المستمرة للخلايا اللمفاوية التائية (H9). يتم تنفيذ مؤشر فيروس نقص المناعة البشرية في زراعة الخلايا عن طريق CPP (تكوين البسيط) ، وكذلك عن طريق التألق المناعي ، الفحص المجهري الإلكتروني ، عن طريق نشاط النسخ العكسي الواضح.
تتيح طرق البحث الحديثة اكتشاف خلية ليمفاوية مصابة واحدة لكل 1000 خلية.
يتم الكشف عن المستضدات الفيروسية في الخلايا اللمفاوية التائية المصابة باستخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة
في السنوات الأخيرة ، كان تحديد عدد نسخ الحمض النووي الريبي لفيروس العوز المناعي البشري في بلازما الدم بواسطة طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PTCR) ، أو ما يسمى بالحمل الفيروسي ، أمرًا حاسمًا لتحديد تشخيص وشدة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.
إذا كان الحمل الفيروسي في المرضى الذين لا يتلقون العلاج أقل من حد الكشف (وهذا أقل من 5000 نسخة من RNA لفيروس HIV في 1 مل من البلازما) ، فهذا يشير إلى عدم تقدم أو تقدم بطيء. درجة الإصابة ضئيلة. يشير الحمل الفيروسي العالي (أكثر من 10000 نسخة من الحمض النووي الريبي في 1 مل من البلازما) في المرضى الذين يعانون من أقل من 300 خلية ليمفاوية من ثاني أكسيد الكربون في 1 ميكرولتر دائمًا إلى تطور المرض.
التشخيص المصلي. في الوقت الحاضر ، حصلت على أكبر توزيع.
المواد المراد استكشافها: 5 مل. الدم المعالج بالهيبارين ، والذي يمكن حفظه في الثلاجة لمدة 6-8 ساعات قبل تسليمه إلى المختبر ، ولكن لا يتم تجميده.
لغرض التشخيص المصلي للإيدز ، يتم استخدام طرق فحص الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم مع مقايسات الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) بشكل أساسي.
هذه طريقة فحص. يعتمد مبدأ العملية على المبدأ الكلاسيكي لـ ELISA المباشر. الممتز المناعي عبارة عن أقراص من البوليسترين مع مستضد معين للفيروس معطّل معطّل يتم الحصول عليه من فيروس نقص المناعة البشرية أو صناعيًا.
ثم يضاف المصل المختبَر في التخفيف. يتم الحضانة في الآبار مع المستضد. بعد ربط AG بـ AT ، يتم غسل البروتينات غير المرتبطة ثلاث مرات ، ثم يتم إضافة اتحاد من الأجسام المضادة إلى الغلوبولين المناعي البشري مع ملصق إنزيمي إلى الآبار.
يتم الكشف عن تكوين مركب AG + AT محدد عن طريق إدخال ركيزة للإنزيم (محلول أورثوفينيلين ديامين وبيروكسيد الهيدروجين).
نتيجة لذلك ، يتغير لون الوسيط بما يتناسب مع كمية الأجسام المضادة. تؤخذ نتائج الدراسة في الاعتبار على مقياس الطيف الضوئي.
يجب إجراء مزيد من التحقيق في مصل الدم التي تحتوي على أجسام مضادة خاصة بالفيروس وفقًا لـ ELISA عن طريق النشاف المناعي.
النشاف المناعي هو اختبار تأكيدي ، حيث يكتشف الأجسام المضادة لبروتينات فيروس نقص المناعة البشرية المختلفة.
يعتمد على التجزئة الأولية بالوزن الجزيئي (الفصل) لبروتينات فيروس العوز المناعي البشري عن طريق الرحلان الكهربائي للهلام متعدد الأكريلاميد متبوعًا بنقل المستضدات إلى غشاء النيتروسليلوز. ثم يتم وضع مصل الاختبار على الغشاء. في هذه الحالة ، تشكل الأجسام المضادة معقدًا مع مستضد معين (gp.120 ، gp.41 ، p.24 ، p.18). المرحلة الأخيرة من الدراسة هي الكشف عن الأجسام المضادة لبروتينات فيروس نقص المناعة البشرية المختلفة.
للقيام بذلك ، تتم إضافة الأجسام المضادة ضد البروتينات البشرية الموصوفة بإنزيم أو ملصق نظائر مشعة إلى النظام.
وهكذا ، في مصل المريض ، يتم الكشف عن الأجسام المضادة الخاصة بالفيروس لجميع أو معظم مستضدات فيروس نقص المناعة البشرية (أو لا يتم اكتشافها).
3. دراسات الحالة المناعية.تهدف إلى تحديد:
1) انخفاض في نسبة خلايا CD4 / CD8 (في N 2 و> ، مع الإيدز - 0.5 و<);
2) انخفاض في محتوى خلايا CD4 (<200 клеток/мл.);
3) وجود إحدى العلامات المختبرية ، بما في ذلك فقر الدم ، قلة الكريات البيض ، قلة الصفيحات ، قلة اللمفاويات.
4) زيادة تركيز Ig A و Ig G في مصل الدم.
5) انخفاض في استجابة تحبيب الانفجار للخلايا الليمفاوية للميتوجينات ؛
6) عدم وجود رد فعل الجلد GTZ على العديد من المستضدات.
7) زيادة مستوى المركبات المناعية المنتشرة.
السابق 1234567891011 التالي
عرض المزيد:
الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية 1/2- مكونات بلازما الدم ، ذات الطبيعة البروتينية ، والتي تمنع تكاثر الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية وتبطل تأثيرها السلبي تمامًا.
ما هو اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية 1/2 (الفحص)
تحليل فحص الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية 1،2 - نظام الاختبارات الذي يسمح لك بتحديد الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة. بالإضافة إلى ذلك ، هناك ما يسمى بالفحوصات التأكيدية (المساعدة) ، وتتمثل مهمتها في التعرف على الأفراد غير المصابين بالفيروس ، ولكن لديهم رد فعل إيجابي للفيروس أثناء الفحص.
يتمثل جوهر دراسة التحري عن عدوى فيروس العوز المناعي البشري في تحديد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة.
السمة المميزة لها هي زيادة الحساسية - أكثر من 99.5٪. خصوصية الاختبار هي أن الفحص يمكن أن يعطي نتيجة إيجابية خاطئة إذا كان جسم المريض يحتوي على أجسام مضادة ذاتية.
يمكن الكشف عن نتيجة مماثلة في حالة مريض مصاب بمرض كبدي أو تطعيم ضد الإنفلونزا أو وجود أي مرض فيروسي حاد. بناءً على ذلك ، من أجل الحصول على نتائج دقيقة ، جنبًا إلى جنب مع الفحص ، من المعتاد إجراء الاختبار التأكيدي المذكور أعلاه.
مؤشرات للتحليل
في الممارسة الطبية ، هناك مجموعة واسعة إلى حد ما من مؤشرات الفحص.
يجوز للمريض الاتصال بالمختبر إذا:
- اشتباه في الإصابة (إذا كان هناك اتصال وثيق مع حامل لعدوى فيروس العوز المناعي البشري) ؛
- مع فقدان الوزن والحمى.
- الالتهاب الرئوي ، وهو غير قابل للعلاج التقليدي ؛
- الأمراض ذات الطبيعة المزمنة التي نشأت لأسباب غير معروفة ؛
- استعدادا لعملية جراحية
- نقل الدم؛
- الحمل وتنظيم الأسرة ؛
- مع التهاب الغدد الليمفاوية.
- الجنس العرضي.
الأشخاص الذين يقعون في فئة الخطر الخاصة: مدمنو المخدرات والأشخاص الذين يعيشون حياة جنسية مختلطة.
كيف يتم فحص الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية 1/2
يتضمن الإجراء الامتثال لعدد من القواعد الضرورية:
- يجب على المريض التبرع بالدم حصريًا على معدة فارغة (يُسمح بشرب الماء) ؛
- يجب أن تكون قد مرت ثماني ساعات على الأقل منذ الوجبة الأخيرة ؛
- يجب إخبار الطبيب عن الأدوية التي يتناولها المريض ومعرفة الجرعة (إذا لم يكن هناك احتمال حتى للإلغاء على المدى القصير) ؛
- إذا كان المريض قادرًا على تأخير استخدام الأدوية ، فمن المستحسن القيام بذلك قبل 10-15 يومًا من يوم التلاعب ؛
- في اليوم السابق لبدء الاختبار ، يُنصح المريض برفض تناول الأطعمة المقلية أو الدهنية ، كما يُحظر شرب المشروبات الكحولية والدخان والحد من المجهود البدني الشاق.
وتجدر الإشارة إلى أن الفحوصات المخبرية لوجود العدوى لدى الأطفال الذين ولدوا لأمهات يحملن فيروس نقص المناعة لها خصائصها الخاصة.
نظرًا لأنه في الأشهر الأولى من حياة الطفل ، قد تكون الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية موجودة في دمه ، فمن المستحيل الحصول على صورة موضوعية للحالة الصحية للمولود بناءً على نتائج التحليل ، وحتى نتيجة سلبية لا يعني على الإطلاق أن الفيروس لا يستطيع اختراق حاجز المشيمة.
للحصول على بيانات دقيقة ، يجب إجراء الاختبار في غضون 36 شهرًا بعد ولادة الطفل.
خدمات في اتجاه "التشخيصات الحديثة"
عيادات في اتجاه "التشخيصات الحديثة"
هناك هدفان عريضان ولكن محددان جيدًا للاختبار أو الكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية - اكتشاف الحالة والمراقبة. في تحديد الحالات ، فإن الخطوة الأولى هي توضيح حالة فيروس نقص المناعة البشرية لكل فرد معين من أجل بدء العلاج المناسب أو المتابعة مع التدابير المناسبة.
الغرض من المراقبة الوبائية هو تقييم انتشار فيروس نقص المناعة البشرية وتوزيع حالات العدوى واتجاهاتها في مجموعة أو مجموعة سكانية بأكملها.
تعد حساسية اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية مقياسًا لقدرته على الكشف الدقيق عن هذه الأجسام المضادة في العينة ، في حين أن خصوصية الاختبار هي مقياس لقدرته على تأكيد عدم وجود الأجسام المضادة بدقة عند عدم وجود أي أجسام مضادة في العينة.
من الناحية المثالية ، يجب أن تصل حساسية ونوعية الاختبار إلى 100٪. في الممارسة العملية ، لا يوجد اختبار بيولوجي يلبي هذا المطلب ، ومع ذلك فإن اختبارات الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية هي من بين الاختبارات الأكثر حساسية وتحديدًا المتاحة حاليًا.
يتكون التشخيص المختبري للإيدز من إجراء الدراسات الفيروسية والمصلية والمناعية للمواد المأخوذة من مرضى يشتبه في إصابتهم بالإيدز.
في الدراسات الفيروسية ، يمكن استخدام المزارع الأولية لخلايا الدم أحادية النواة لعزل الفيروس.
يعد عزل الفيروس والتعرف عليه أمرًا صعبًا منهجيًا ويمكن إجراؤه في المختبرات المتخصصة. إن أكثر طرق التشخيص فاعلية المستخدمة حاليًا في الفحوصات الجماعية الروتينية هي اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية. قد تظهر الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بنهاية الشهر الأول من الإصابة. قدمه عدد من المؤلفين ، يتطلب تطوير الانقلاب المصلي من 4-7 أسابيع إلى 6 أشهر أو أكثر. يعتبر وجود الأجسام المضادة بمثابة تشخيص للإيدز أو يشير إلى خطر الإصابة به.
الأجسام المضادة ليست فقط علامة مصلية للإيدز. تم الكشف عنها في المرحلة ما قبل السريرية للمرض ، وهي تسمح بالتشخيص المبكر للمرض. يكتسب وجودهم أهمية خاصة للكشف عن الناقلات.
يتم اكتشاف الأجسام المضادة لسنوات عديدة ، تقريبًا طوال الحياة. لقد أثبت الباحثون وجود توازي في اكتشاف الفيروس والأجسام المضادة له ، أي أن وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة يشير إلى احتمال كبير أن يكون الشخص حاملًا للفيروس.
يستمر إنتاج الأجسام المضادة لمستضد فيروس نقص المناعة البشرية ، التي ظهرت في فترة الحضانة ، بشكل مكثف مع تطور المرض ، حيث يتم تحفيز تهيج المستضدات بواسطة الفيروسات المنبعثة من الخلايا الليمفاوية المصابة ، وعن طريق المكونات التخريبية التي تدخل مجرى الدم أثناء تحلل الخلايا المصابة والخلايا الليمفاوية المصابة.
في الوقت نفسه ، يظل الفيروس الطافي المدمج في جينوم الخلايا المصابة بعيدًا عن الوصول إلى أجسام مضادة معينة. هذا يفسر الحقيقة التي تبدو متناقضة: كلما زاد عدد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في مصل الدم ، كان من الأسهل عزل الفيروس نفسه عن المريض.
يحدث هذا لأن الأجسام المضادة التي يتم إنتاجها استجابة لعدوى فيروسية لا يتم تحييدها وبالتالي ليس لها تأثير ملحوظ على الفيروس ، ولكنها موجودة ببساطة في الجسم مع الفيروس. للكشف عن الأجسام المضادة (AT) لفيروس الإيدز ، تم تطوير عدد من الاختبارات التي تسمح بإجراء البحوث على مستوى عالٍ من الخصوصية والحساسية. هذه هي طرق المقايسة المناعية الراديوية الصلبة ، الترسيب المناعي الإشعاعي ، التألق المناعي ، المقايسة المناعية الإنزيمية ، النشاف المناعي.
وجدت طرق مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) ، والتي تتميز بالحساسية العالية ، وإمكانية التسجيل الكمي والبصري لنتائج التفاعل ، على أوسع نطاق في الممارسة العملية ، مما يجعل الطريقة في متناول المختبرات من أي مستوى.
تستخدم ELISA أنظمة اختبار أجنبية ومحلية.
الدورة السريرية لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية والإيدز
يجب توخي الحذر مع الأطفال المولودين لأمهات مصابات. في حالة عدم وجود عيادة ، يعتبر الطفل مصابًا إذا استمرت AT إلى HIV بعد عام. عند الحصول على نتيجة إيجابية في ELISA ، من الضروري اختبار المصل الذي أعطى نتيجة إيجابية واحدة ثلاث مرات ، وتأكيد النتيجة الإيجابية في نظام مستقل - النشاف المناعي
لا يوفر اكتشاف AT في تفاعل ELISA معلومات كافية ، لأنه لا يشير إلى حالة الشخص ، ولكنه يشير فقط إلى الحضانة أو المرض أو وجود عدوى بدون أعراض.
يوفر النشاف المناعي مزيدًا من المعلومات ، نظرًا لأن وجود AT للعديد من مستضدات فيروس نقص المناعة البشرية هو سمة من سمات المرض الشديد ، في حين أن التفاعل مع 1-2 من المستضدات يكون أكثر تميزًا لعملية معدية خفيفة
إعلامي هو حساب عدد T (المساعدين) ونسبة T4 إلى Te (مثبطات) من الخلايا الليمفاوية ، والتي يتم تحديدها باستخدام الأجسام المضادة أحادية الكبونيل.
يمكن أن يكون المعيار المهم للمرض هو الزيادة الحادة في عدد الغلوبولين المناعي ، وخاصة A و V. في التحليل السريري العام للدم ، يمكن الإشارة إلى المرض عن طريق اللمفاويات ، قلة الكريات البيض ، الكريات الحمر ، قلة الصفيحات ، فرط الحمضات.
لا يجب أن تكون اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية المستخدمة في المراقبة الوبائية دقيقة مثل تلك المطلوبة للأغراض السريرية.
ومع ذلك ، في حالة انتشار فيروس نقص المناعة البشرية المنخفض للغاية بين السكان ، يجب إعادة اختبار جميع العينات الإيجابية في اختبارات إضافية.
يمكن أن يقترن جمع الدم من أجل اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية أو فحصه بتسجيل أسماء الأشخاص (جمع الاسم) ، أو يتم إجراؤه دون تسجيل الألقاب أو معلومات التعريف الفردية (جمع مجهول) (الجدول 1).
يتميز الفحص المجهول بدون معلومات تحديد الهوية بالنقاط التالية: استخدام عينات الدم التي تم جمعها لأغراض أخرى ؛ عدم الكشف عن هويته مضمون نظرًا لعدم جمع بيانات تحديد الهوية أو أخذها في الاعتبار ؛ لا يشترط الحصول على موافقة الموضوعات ؛ التواصل مع الاستشارة والخدمات الاجتماعية غير مطلوب ؛ أخيرًا ، والأهم من ذلك ، يتم تقليل الأخطاء في التقديرات الإحصائية ، اعتمادًا على مستوى مشاركة السكان.
على الرغم من أنه يمكن الحصول على بيانات أكثر دقة من اختبار فيروس نقص المناعة البشرية المجهول ، إلا أن هذه الطريقة لها العيوب التالية: لا يمكنها القضاء على تحيز الاختيار المحتمل ؛ البيانات المتعلقة بالسلوك شديد الخطورة والمتغيرات المهمة الأخرى غير متوفرة ولا يمكن جمعها بأثر رجعي ؛ لا يمكن إقامة اتصال مع الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية لإبلاغهم بحالتهم ؛ يمكن إجراء الفحص فقط في مجموعات من الأشخاص الذين يتم أخذ دمهم لأغراض أخرى.
في المناطق التي يُعتبر فيها انتشار فيروس نقص المناعة البشرية منخفضًا للغاية ، يجب أن تركز مراقبة الصحة العامة في المقام الأول على الأفراد أو السكان ذوي السلوكيات الأكثر خطورة. الشركاء الجنسيون
من الأسهل الحصول على الدم لاختبار فيروس نقص المناعة البشرية في هذه المجموعة المعرضة للخطر من المراكز المتخصصة في علاج الأمراض المنقولة جنسياً أو المرافق المماثلة.
إذا كان استخدام المخدرات عن طريق الوريد شائعًا أيضًا ، فيجب أخذ عينات الدم من متعاطي المخدرات في المرافق المتخصصة.
عادة ما يكفي جمع الدم مرة كل 3 أو 6 أشهر في الفئات الأكثر عرضة للخطر من المناطق الجغرافية التي تكون فيها هذه المجموعات بكثرة. قد يكون الاستثناء هو المجموعات المعرضة للخطر مثل متعاطي المخدرات عن طريق الحقن ، الذين قد يحتاجون إلى فحوصات أكثر تكرارًا.
تعمل منظمة الصحة العالمية حاليًا على تطوير نظام تصنيف المرض (التدريج) للبحوث السريرية ، والذي يمكن استخدامه أيضًا في تجارب العلاج ، والتي قد يكون لها أيضًا قيمة تنبؤية.
ومع ذلك ، لا يُقصد من مثل هذا النظام أن يحل محل التعريفات الحالية للإيدز المستخدمة في مراقبة الرعاية الصحية.
في الوقت الحالي ، يتم تطوير أنظمة المراقبة (الروتينية) لفيروس نقص المناعة البشرية في كل مكان.
يجب تكييف هذه الأنظمة مع الوضع الوبائي الحالي ؛ وبالتالي ، يجب بالضرورة أن تكون طرق أخذ العينات في المجتمعات ذات الانتشار المنخفض جدًا للفيروس مختلفة عن تلك المستخدمة حيث يكون الانتشار معتدلًا أو مرتفعًا.
تتضمن هذه المراقبة مسوحات روتينية لسكان محددين بشكل جيد ويمكن الوصول إليهم.
يجب أولاً وقبل كل شيء أن تشمل المجموعات الأكثر عرضة للإصابة بالعدوى ، وفي كل مجموعة من هذه المجموعات ، يجب اختيار عدد ثابت محدد مسبقًا من الأفراد للفحص.
في السنوات الأخيرة ، أصبح الفحص المجهول في مجموعات يمكن ملاحظتها بغض النظر عن بيانات تحديد الهوية شائعًا بشكل متزايد كطريقة دقيقة وفعالة من حيث التكلفة للمراقبة الوبائية لعدوى فيروس العوز المناعي البشري في نظام الرعاية الصحية.
طرق التشخيص المختبري لفيروس نقص المناعة البشرية
في مختبر عالي التخصص يتم تنفيذ:
أ) تحديد الأجسام المضادة والمستضدات والمركبات المناعية المنتشرة في الدم ؛ زراعة الفيروس والكشف عن مادته الجينومية وإنزيماته ؛
ب) تقييم وظائف الارتباط الخلوي لجهاز المناعة.
ينتمي الدور الرئيسي إلى طرق التشخيص المصلي التي تهدف إلى تحديد الأجسام المضادة ، وكذلك المستضدات المسببة للأمراض في الدم والسوائل البيولوجية الأخرى في الجسم.
يتم إجراء اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية من أجل:
أ) سلامة عمليات نقل الدم وزرعه ؛
ب) المراقبة والاختبار لرصد انتشار الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ودراسة ديناميات انتشاره في مجموعة سكانية معينة ؛
ج) تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ، أي
هـ - الاختبار الطوعي لمصل الدم لأشخاص يبدو أنهم أصحاء أو مرضى يعانون من علامات وأعراض سريرية مختلفة مشابهة لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية أو الإيدز.
يعتمد نظام التشخيص المختبري لعدوى فيروس العوز المناعي البشري على مبدأ من ثلاث مراحل.
المرحلة الأولى هي الفحص ، المصمم لإجراء اختبارات الدم الأولية لوجود الأجسام المضادة لبروتينات فيروس نقص المناعة البشرية. المرحلة الثانية مرجعية - تسمح باستخدام تقنيات منهجية خاصة لتوضيح (تأكيد) النتيجة الإيجابية الأولية التي تم الحصول عليها في مرحلة الفرز. المرحلة الثالثة - الخبير ، تهدف إلى التحقق النهائي من وجود ونوعية علامات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية التي تم تحديدها في المراحل السابقة من التشخيص المختبري.
ترجع الحاجة إلى عدة مراحل من التشخيص المختبري في المقام الأول إلى الاعتبارات الاقتصادية.
في الممارسة العملية ، يتم استخدام العديد من الاختبارات لتحديد الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية بدرجة كافية من اليقين:
يتميز اختبار ELISA (ELISA) (مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم) للكشف عن المستوى الأول بحساسية عالية ، على الرغم من أن التحديد أقل من التالي ؛
لطخة مناعية (لطخة غربية) ، اختبار محدد للغاية والأكثر استخدامًا للتمييز بين HIV-1 و HIV-2 ؛
اختبار Antigenemia p25 ، فعال في المراحل الأولى من العدوى ؛
تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR).
في حالات الفحص الشامل لعينات الدم ، يوصى باختبار مخاليط من الأمصال من مجموعة من الأشخاص ، مجمعة بحيث لا يتجاوز التخفيف النهائي لكل عينة 1: 100.
إذا كان خليط المصل موجبًا ، يتم تحليل كل مصل من الخليط الإيجابي. لا تؤدي هذه الطريقة إلى فقدان الحساسية في كل من ELISA و immunoblot ، ولكنها تقلل من تكاليف العمالة وتكلفة الفحص الأولي بنسبة 60-80٪.
طرق المناعة
عدد مساعدي T ،
2. نسبة T4 و T8 ،
3. حالة فرط الحساسية ،
4. الوظيفة التعويضية لنظام الخلايا التائية.
يتجلى ذلك من خلال فرط إنتاج الغلوبولين المناعي ، ولديهم تقارب منخفض ويتم استهلاك مادة الجسم أكثر.
العيوب: تظهر متأخرة ، بعض المؤشرات المناعية قد تكون مصاحبة لعدوى أخرى.
الطرق السريرية - ربما. على غرار الأمراض الأخرى ، يتم تسجيل المظاهر الأكثر شيوعًا في مراحل لاحقة ، لذا فإن التشخيص السريري ليس فعالًا للغاية
الطريقة الرئيسية - المصلية - يتم تنفيذها على مرحلتين:
1- الفحص التحليلي - أخذ عينات من الأجسام المضادة الكلية لجميع بروتينات جهاز المناعة.
تعطي هذه المرحلة 95٪ نتائج صحيحة و 5٪ ايجابيات كاذبة.
2 - طريقة التأكيد - يتم فحص جميع العينات بطريقة تأكيدية. تسمح لك هذه التقنية باكتشاف الأجسام المضادة للبروتين الفيروسي.
نتيجة إيجابية ، عند اكتشاف أجسام مضادة لـ 3 بروتينات فيروسية على الأقل ، إذا كانت النتيجة 1 أو 2 مشكوك فيها وتتطلب فحصًا إضافيًا.
في التشخيص المصلي الأولي لعدوى فيروس العوز المناعي البشري ، يتم تحديد الأجسام المضادة الكلية باستخدام اختبارات الفحص - ELISA وتفاعلات التراص.
في المرحلة الثانية (التحكيم) ، يتم استخدام اختبار أكثر تعقيدًا - لطخة مناعية ، والتي لا تسمح فقط بتأكيد أو رفض النتيجة الأولية ، ولكن أيضًا للقيام بذلك على مستوى تحديد الأجسام المضادة للبروتينات الفردية للفيروس.
تفسير نتائج اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية
هناك عدد كبير نسبيًا من العوامل المختلفة التي تؤثر على نتيجة تحليل الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ، ومن بينها وقت التحليل بعد الإصابة المحتملة مهم.
في معظم الحالات ، يمكن اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد 6 إلى 12 أسبوعًا من الإصابة.
تسمى هذه الفترة من دخول الفيروس إلى الجسم حتى ظهور كمية قابلة للاكتشاف من الأجسام المضادة بفترة الانقلاب المصلي الإيجابي أو فترة "النافذة". هناك حالات نادرة من الأجسام المضادة التي تظهر بعد 6 أشهر من الإصابة ، ولا يوجد دليل على تقارير الكشف عن الأجسام المضادة إلا بعد عام واحد. حاليًا ، تستخدم خدمة التشخيص أجيالًا جديدة من طرق ELISA التي تسمح باكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد 3-4 أسابيع من الإصابة ، وتوليفات معينة من هذه الطرق ، ما يسمى بإستراتيجيات الاختبار ، تقلل فترة "النافذة" إلى 2-3 أسابيع ، أي.
تجعل من الممكن اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بمجرد أن تبدأ في إنتاجها في الجسم.
النتيجة السلبية تعني أنه لم يتم العثور على أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في دم الشخص.
تسمى هذه الحالة بالسلبية المصلية وعادة ما تعني أن الشخص غير مصاب.
النتيجة السلبية لا تعطي أي ضمانات للمستقبل. يذكر الدولة فقط وقت الفحص. هناك فرصة ضئيلة لإجراء المسح خلال فترة النافذة. لذلك ، إذا كان الشخص قد تعرض سابقًا لخطر الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية وتم اختباره سلبيًا ، فيجب إعادة اختباره بعد 6 أشهر على الأقل من حدث الخطر.
تعني النتيجة الإيجابية أنه تم العثور على الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في دم الشخص.
تسمى هذه الحالة الإيجابية المصلية - يصاب الشخص بفيروس نقص المناعة البشرية. من المهم أن نفهم أن النتيجة الإيجابية تشير فقط إلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية وليس الإيدز.
ومع ذلك ، من المهم للغاية مراجعة الطبيب للحصول على المشورة والمساعدة الطبية ، إذا لزم الأمر ، من أجل الحفاظ على نوعية حياة جيدة لفترة طويلة بعد تلقي نتيجة إيجابية.
نتيجة غير محددة. نادرًا ما تكون نتيجة اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية غير واضحة.
لا يستطيع المختبر معرفة ما إذا كان الشخص إيجابيًا أم سلبيًا. في مثل هذه الظروف ، من الضروري استشارة الطبيب وإجراء الفحص مرة أخرى.