Mikrobiologia z techniką badań mikrobiologicznych - pneumokoki. Infekcja pneumokokowa Jak pneumokoki mogą poważnie zaszkodzić zdrowiu lub co osłabia układ odpornościowy

Klasyfikacja naukowa gronkowca:
Domena:
Typ: Firmicutes (firmicutes)
Klasa: pałeczki
Zamówienie: Lactobacillales (Lactobacilli)
Rodzina: Streptococcaceae (paciorkowce)
Pogląd: Pneumokoki (Streptococcus pneumoniae)
Międzynarodowa nazwa naukowa: Streptococcus pneumoniae

Pneumokoki (łac. Streptococcus pneumoniae) to kulista lub jajowata bakteria należąca do rodziny paciorkowców (Streptococcaceae).

Inne nazwy pneumokoków: diplococcus Weikselbauma, diplococcus Frenkla.

Pneumokoki są najczęstszym czynnikiem wywołującym choroby, takie jak -. Śmiertelność zapalenia płuc wynosi do 5% przypadków. Inne choroby o etiologii pneumokokowej obejmują zapalenie ucha, zapalenie zatok, zapalenie krtani, zapalenie tchawicy, zapalenie oskrzeli, zapalenie opon mózgowych, posocznicę i inne. Szczególnie infekcja pneumokokowa często powoduje zaostrzenie chorób oskrzelowo-płucnych u dzieci.

Charakterystyka paciorkowców

Podobnie jak inne rodzaje paciorkowców, pneumokoki najczęściej występują w parach, czasem układając się w łańcuchy. Wielkość bakterii wynosi 0,5-1,25 mikrona. Behawioralnie zakażenie pneumokokowe jest nieruchome, beztlenowe, Gram-dodatnie. Szybka reprodukcja następuje wraz ze wzrostem dwutlenku węgla. Podstawą pneumokoków jest peptydoglikan wraz z białkami powierzchniowymi, węglowodanami, lipoproteinami i kwasami teichojowymi, a wszystko to w ochronnej, silnej kapsułce polisacharydowej, która zapobiega opsonizacji.

Klasyfikacja pneumokoków obejmuje do 100 szczepów tych bakterii.

Choroby, które mogą powodować pneumokoki

Najczęstsze choroby o charakterze pneumokokowym to:

  • septyczne zapalenie stawów;
  • zapalenie ucha środkowego;
  • (nieżyt nosa (katar), zapalenie zatok, zapalenie sitowia, zapalenie kości klinowej i zapalenie zatok czołowych);
  • Zapalenie płuc (pozaszpitalne);

Do najpopularniejszych chorób pneumokokowych należą: zapalenie płuc (około 70%), zapalenie ucha środkowego (około 25%), zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych (od 5 do 15%) oraz zapalenie wsierdzia (około 3%).

Ponadto zakażenie pneumokokowe może łączyć się z istniejącymi chorobami innych rodzajów infekcji - itp.

Jak inaktywować pneumokoki?

Bakteria pneumokokowa ginie, gdy:

  • ich leczenie roztworami środków antyseptycznych i dezynfekujących;
  • ekspozycja na środki przeciwbakteryjne.

W jaki sposób przenosi się pneumokoki? Warunki, w których dana osoba zaczyna chorować na chorobę pneumokokową, zwykle składają się z dwóch części - narażenia na infekcję i osłabienia odporności. Jednak człowiek może poważnie zachorować przy zwykłym kontakcie z tego typu bakteriami, gdy ich ilość w powietrzu jest w wysokim stężeniu.

Rozważ najpopularniejsze sposoby zarażenia się pneumokokami:

Jak pneumokoki mogą dostać się do organizmu?

Trasa powietrzna. Główną drogą zakażenia infekcją pneumokokową jest droga powietrzna. Przyczyną większości jest kaszel i osoba znajdująca się w pobliżu. Podstępność infekcji pneumokokowej polega na tym, że jej nosiciel często nie jest świadomy swojej roli, ponieważ. może nie wywoływać żadnych objawów u nosiciela. Warto również zauważyć, że w tym okresie w powietrzu, zwłaszcza w pomieszczeniach, wzrasta stężenie m.in. Dlatego pierwszymi ofiarami są osoby, które często przebywają lub pracują w zatłoczonych miejscach.

Ścieżka pyłowo-powietrzna. Kurz, w tym kurz domowy, składa się z wielu cząstek – pyłków roślin, sierści zwierząt, drobinek obranej skóry i papieru, a także wirusów, bakterii, grzybów i innych infekcji. Innym czynnikiem sprzyjającym zakażeniu jest obecność człowieka w pomieszczeniach, w których sprząta się niewiele lub rzadko.

Kontaktowo-domowy sposób. Większość rodzajów infekcji nie umiera samoistnie, dlatego używanie tych samych przyborów kuchennych i artykułów higieny osobistej z osobą chorą zwiększa ryzyko zachorowania.

droga hematogenna. Do zakażenia dochodzi, gdy krew osoby wejdzie w kontakt z zakażonym przedmiotem. Częstymi pacjentami są osoby przyjmujące narkotyki w formie iniekcji.

ścieżka medyczna. Do zakażenia dochodzi podczas używania np. podczas rutynowego badania skażonego sprzętu/instrumentów medycznych.

W jaki sposób pneumokoki mogą poważnie zaszkodzić zdrowiu człowieka lub co osłabia układ odpornościowy?

Jak powiedzieliśmy, drugim czynnikiem przyczyniającym się do rozwoju choroby pneumokokowej jest osłabiony układ odpornościowy, który pełni funkcję ochronną organizmu. Tak więc, kiedy infekcja dostanie się do organizmu, układ odpornościowy wytwarza specjalne przeciwciała, które docierając do źródła infekcji lub usuwając infekcję, zatrzymują ją i niszczą. Jeśli układ odpornościowy jest osłabiony, nie ma nikogo, kto mógłby zwalczyć infekcję, z wyjątkiem leków.

Rozważ główne przyczyny osłabionej odporności:

  • Obecność chorób przewlekłych - każda choroba w organizmie o postaci przewlekłej wskazuje, że układ odpornościowy nie radzi sobie z nią samodzielnie, a choroba stopniowo szkodzi zdrowiu;
  • Obecność innych chorób zakaźnych - zapalenie zatok, choroby oskrzelowo-płucne;
  • Niewystarczająca ilość witamin i minerałów w organizmie ();
  • Złe nawyki - palenie, narkotyki;
  • Siedzący tryb życia;
  • Brak zdrowego snu, chroniczne zmęczenie;
  • Nadużywanie niektórych leków, zwłaszcza antybiotyków;
  • Bardzo często infekcję pneumokokową przynoszą do domu dzieci - ze szkoły i przedszkola. Ułatwia to bliski kontakt między dziećmi, a także nie w pełni rozwinięta odporność. Ponadto, jeśli w domu nie są przestrzegane pewne środki zapobiegawcze, choroba rozwija się u dorosłych.

Grupy ryzyka

Rozważmy grupę ludzi, którzy są narażeni na zwiększone ryzyko zachorowania na chorobę pneumokokową:

  • Osoby starsze, od 60 roku życia i dzieci;
  • Osoby pracujące w miejscach zatłoczonych - pracownicy biurowi, kierowcy i konduktorzy komunikacji miejskiej, pracownicy dużych przedsiębiorstw, pracownicy placówek medycznych, pracownicy domów pomocy społecznej i placówek oświatowych, personel wojskowy.
  • Osoby cierpiące na przewlekłe choroby i układy, a także choroby takie jak cukrzyca, rozedma płuc, choroby nerek, HIV.
  • Osoby spożywające napoje alkoholowe, palacze.
  • Osoby lubiące spacerować w mroźną i/lub chłodno-wilgotną pogodę bez nakrycia głowy, w krótkich kurtkach, cienkich spodniach i innych ubraniach, w wyniku których organizm narażony jest na wychłodzenie.
  • Osoby, które miały inne choroby zakaźne - SARS, ostre infekcje dróg oddechowych, grypę i inne.

Objawy pneumokoków

Objawy (obraz kliniczny) chorób pneumokokowych są bardzo rozległe iw dużej mierze zależą od miejsca (narządu), w którym doszło do zakażenia, szczepu pneumokoków, stanu zdrowia człowieka i stanu jego odporności.

Typowe objawy pneumokoków mogą obejmować:

  • , złe samopoczucie i;
  • Trudności w oddychaniu, kichanie, duszność;
  • Podwyższona i wysoka temperatura ciała;
  • , czasem silny;
  • , naruszenie świadomości;
  • Światłowstręt;
  • Naruszenie zmysłu węchu;
  • , czasem z ;
  • Wszystkie typy - i;
  • Choroby układu oddechowego: zapalenie gardła, zapalenie krtani, zapalenie tchawicy, zapalenie oskrzeli i zapalenie płuc;

Powikłania pneumokoków:

  • Zapalenie mięśnia sercowego - zapalenie wsierdzia;
  • Ropne zapalenie ucha;
  • Zmniejszenie lub utrata głosu lub słuchu;
  • ropień płucny;
  • Posocznica;
  • upośledzenie umysłowe;
  • Sztywność ruchów;
  • Padaczka;
  • Śmierć.

Ważny! Niektóre powikłania kliniczne mogą niekiedy towarzyszyć człowiekowi do końca życia.

Diagnostyka pneumokoków

Badanie na obecność pneumokoków zwykle pobiera się z wymazów z jamy ustnej i gardła (w przypadku chorób górnych dróg oddechowych), plwociny z nosa i krwi.

W związku z tym wyróżnia się następujące testy i metody badania organizmu z infekcją pneumokokową:

  • Posiew bakteriologiczny plwociny i wymazów pobranych z jamy nosowej i gardła;
  • narządy wewnętrzne;
  • płuca;

Jak leczyć pneumokoki? Leczenie pneumokoków zwykle składa się z kilku punktów:

1. Terapia antybakteryjna;
2. Wzmocnienie układu odpornościowego;
3. Przywrócenie prawidłowej mikroflory jelitowej, która jest zwykle zaburzana przez stosowanie leków przeciwbakteryjnych;
4. Detoksykacja organizmu;
5. Leki przeciwhistaminowe - przepisywane dzieciom z alergią na antybiotyki;
6. Terapia objawowa;
7. Przy jednoczesnej chorobie i innych chorobach przeprowadza się również ich leczenie.

Leczenie chorób pneumokokowych w każdym przypadku rozpoczyna się od wizyty u lekarza i pacjenta poddawanego diagnostyce. Należy to zrobić, aby wykluczyć inne rodzaje infekcji, a także sprawdzić oporność (podatność) infekcji na określony lek przeciwbakteryjny.

Przed rozważeniem antybiotyków na chorobę pneumokokową należy wziąć pod uwagę ich interakcję (oporność).

Odporność na antybiotyki

Lekarze zauważają niezbyt korzystny trend w leczeniu infekcji pneumokokowej. I tak z roku na rok na całym świecie obserwuje się oporność (oporność) pneumokoków na leki przeciwbakteryjne z grupy penicylin i tetracyklin oraz makrolidy, a oporność na antybiotyki stopniowo wzrasta. Najbardziej odporne pneumokoki występują w Ameryce, Europie Zachodniej, Azji, najmniej w Niemczech, Holandii. Jeśli mówimy o powierzchownych przyczynach, to w dużej mierze ułatwiła to dostępność antybiotyków dla każdej osoby, nawet bez recepty. Faktem jest, że niewłaściwie dobrane antybiotyki lub przebieg terapii tą grupą leków przyczyniają się do rozwoju infekcji pewnej odporności na te leki w przyszłości, bakterie mutują, rozwijają się ich nowe szczepy. W niektórych krajach, takich jak Niemcy, po prostu nie można kupić antybiotyków bez recepty, dlatego wiele chorób zakaźnych o charakterze bakteryjnym jest łatwiejszych do leczenia, a liczba powikłań, a co za tym idzie, zgonów jest znacznie mniejsza.

Największą oporność pneumokoków na terenie Rosji i Ukrainy obserwuje się w stosunku do tetracykliny (40%) i ko-trimoksazolu (50%).

1. Terapia antybakteryjna

Ważny! Przed zastosowaniem antybiotyków koniecznie skonsultuj się z lekarzem.

W nawiasach po nazwie antybiotyku podano procent oporności bakterii na lek (w Rosji w latach 2002-2012).

Antybiotyki przeciwko pneumokokom do użytku wewnętrznego: Amoksycylina i klawulanian amoksycyliny (0,5%), wankomycyna (1%), lewofloksacyna (1%), ryfampicyna (1%), klindamycyna (2%), cefotaksym (2%), cefepim (2%), cyprofloksacyna (2%), makrolidy (od 7 do 26% - "", "Klarytomycyna", "Midekamycyna", "Spiramycyna", "") , Chloramfenikol (5%), „Penicylina” (29%), „” (40%), „Ko-trimoksazol” (50%).

Przebieg antybiotykoterapii jest ustalany indywidualnie przez lekarza prowadzącego. Zwykle jest to 5-10 dni.

Antybiotyki przeciw pneumokokom do stosowania miejscowego: Bioparox, Hexoral.

Ważny! Często lekarz do leczenia choroby wybiera kombinację 2 leków przeciwbakteryjnych, które należy przyjmować w tym samym czasie.

2. Wzmocnienie układu odpornościowego

Aby wzmocnić układ odpornościowy i pobudzić jego pracę, w połączeniu z antybiotykami zalecany jest odbiór - immunostymulanty: Immunal, IRS-19, Imudon.

Naturalnym immunostymulantem jest występująca w dużych ilościach w składzie żurawina i rokitnik zwyczajny.

3. Przywrócenie prawidłowej mikroflory jelitowej

Przyjmując leki przeciwbakteryjne dostają się również do jelit, niszczą korzystną mikroflorę, która przyczynia się do prawidłowego wchłaniania pokarmu oraz uczestniczy w innych ważnych procesach życiowych organizmu. Dlatego w ostatnim czasie coraz popularniejsze staje się stosowanie przy przyjmowaniu leków przeciwbakteryjnych probiotyków, które przywracają prawidłową mikroflorę jelitową.

Wśród probiotyków można wyróżnić: „Acipol”, „Bifiform”, „Linex”.

4. Odtruj organizm

Infekcja pneumokokowa, znajdując się wewnątrz organizmu, zatruwa go produktami jego życiowej aktywności. Zatrucie zakaźnymi enzymami przyczynia się do pogorszenia przebiegu choroby, powodując objawy takie jak nudności, wymioty, utrata sił, omamy i delirium.

Aby usunąć produkty przemiany materii z organizmu, zalecana jest terapia detoksykacyjna, która obejmuje:

  • picie dużej ilości płynów (do 3 litrów płynów dziennie, najlepiej z dodatkiem witaminy C);
  • płukanie nosa i gardła słabym roztworem soli fizjologicznej lub roztworem furacyliny;
  • przyjmowanie leków detoksykacyjnych: „Atoxil”, „Albumin”, „Enterosgel”.

5. Leki przeciwhistaminowe

Leki przeciwhistaminowe są przepisywane, jeśli podczas przyjmowania antybiotyków dana osoba ma reakcję alergiczną - swędzenie skóry, wysypkę, zaczerwienienie i inne objawy.

Wśród leków przeciwhistaminowych można wyróżnić: „”, „”, „Cetrin”.

6. Terapia objawowa

Aby zatrzymać objawy chorób pneumokokowych i złagodzić ich przebieg, zalecana jest terapia objawowa.

Przy wysokiej temperaturze ciała: chłodne okłady na czoło, szyję, nadgarstki, pachy. Wśród narkotyków można zidentyfikować - „”, „”.

Na przekrwienie błony śluzowej nosa- leki zwężające naczynia krwionośne: Knoxprey, Farmazolin.

Ważny! Przed użyciem środków ludowej należy skonsultować się z lekarzem.

Pneumokoki zostały po raz pierwszy opisane przez R. Kocha (1871).

Morfologia. Pneumokoki to diplokoki, w których zwrócone do siebie boki komórek są spłaszczone, a przeciwległe boki wydłużone, dzięki czemu mają lancetowaty kształt przypominający płomień świecy (patrz ryc. 4). Rozmiar pneumokoków wynosi 0,75-0,5 × 0,5-1 μm, są one ułożone parami. W płynnych pożywkach często tworzą krótkie łańcuchy, przypominające paciorkowce. Prevmococci są nieruchome, nie mają zarodników, tworzą w ciele torebkę otaczającą oba ziarniaki. Kapsułka zawiera substancję termoodporną antyfaginę (która chroni pneumokoki przed fagocytozą i działaniem przeciwciał). Podczas wzrostu na sztucznych pożywkach pneumokoki tracą kapsułkę. Pneumokoki są Gram-dodatnie. Bakterie Gram-ujemne znajdują się w starych kulturach.

uprawa. Pneumokoki są fakultatywnymi beztlenowcami. Rosną w temperaturze 36-37°C i pH 7,2-7,4. Są wymagające pod względem pożywek, ponieważ nie są w stanie syntetyzować wielu aminokwasów, dlatego rosną tylko na pożywkach z dodatkiem białka natywnego (krew lub surowica). Na agarze z serum tworzą kolonie małe, delikatne, dość przezroczyste. Na agarze z krwią rosną wilgotne zielonkawo-szare kolonie otoczone zieloną strefą, która jest wynikiem przemiany hemoglobiny w methemoglobinę. Pneumokoki dobrze rosną w bulionie z dodatkiem 0,2% glukozy oraz w bulionie z serwatką. Wzrost w pożywkach płynnych charakteryzuje się rozproszonym zmętnieniem i pylącym osadem na dnie.

Właściwości enzymatyczne. Pneumokoki mają dość wyraźną aktywność sacharolityczną. Rozkładają: laktozę, glukozę, sacharozę, maltozę, inulinę z tworzeniem kwasu. Nie fermentować mannitolu. Ich właściwości proteolityczne są słabo wyrażone: koagulują mleko, nie upłynniają żelatyny i nie tworzą indolu. Pneumokoki rozpuszczają się w żółci. Rozszczepianie inuliny i rozpuszczanie w żółci jest ważną cechą diagnostyczną, która odróżnia Streptococcus pneumoniae od Streptococcus pyogenes.

czynniki chorobotwórcze. Pneumokoki wytwarzają hialuronidazę, fibrynolizynę itp.

powstawanie toksyn. Pneumokoki wytwarzają endotoksyny, hemolizynę, leukocidynę. Zjadliwość pneumokoków jest również związana z obecnością antyfaginy w otoczce.

Struktura antygenowa i klasyfikacja. W cytoplazmie pneumokoków znajduje się antygen białkowy wspólny dla całej grupy, aw otoczce antygen polisacharydowy. Według antygenu polisacharydowego wszystkie pneumokoki dzielą się na 84 serowary. Serowary I, II, III są najczęstszymi patogenami dla ludzi.

Pneumokoki należą do grupy drobnoustrojów niestabilnych. Temperatura 60°C niszczy je w ciągu 3-5 minut. Są dość odporne na niskie temperatury i suszenie. W wysuszonej plwocinie zachowują żywotność do 2 miesięcy. Na pożywce pozostają nie dłużej niż 5-6 dni. Dlatego przy uprawie konieczne jest dosiewanie co 2-3 dni. Konwencjonalne roztwory środków dezynfekcyjnych: 3% fenol sublimowany w rozcieńczeniu 1:1000 niszczą je w kilka minut.

Pneumokoki są szczególnie wrażliwe na optochinę, która zabija je w rozcieńczeniu 1:100 000.

Podatność zwierząt. Człowiek jest naturalnym żywicielem pneumokoków. Jednak pneumokoki mogą powodować choroby u cieląt, jagniąt, prosiąt, psów i małp. Spośród zwierząt doświadczalnych białe myszy są bardzo wrażliwe na pneumokoki.

Źródła infekcji

Trasy transmisji. W powietrzu, może być w powietrzu.

Brama wejściowa. Błona śluzowa górnych dróg oddechowych, oczu i uszu.

Choroby u ludzi. Pneumokoki mogą wywoływać choroby zapalne o różnej lokalizacji. Specyficzne dla pneumokoków są:

1) płatowe zapalenie płuc; 2) pełzający wrzód rogówki;

Najczęstszą chorobą jest krupowe zapalenie płuc, które dotyczy jednego, rzadziej dwóch lub trzech płatów płuc. Choroba jest ostra, towarzyszy jej wysoka gorączka, kaszel. Zwykle kończy się krytycznie.

Odporność. Po chorobie pozostaje niestabilna odporność, ponieważ zapalenie płuc charakteryzuje się nawrotami.

Zapobieganie. Sprowadza się to do środków sanitarnych i zapobiegawczych. Specyficzna profilaktyka nie została opracowana.

Leczenie. Stosuje się antybiotyki - penicylinę, tetracyklinę itp.

Pytania kontrolne 1. Morfologia pneumokoków. Uprawa i właściwości enzymatyczne.

2. Jakie czynniki determinują patogeniczność pneumokoków i co chroni pneumokoki przed fagocytozą?

3. Jakie są główne bramy zakażenia pneumokokami. Jakie choroby wywołują pneumokoki?

Badania mikrobiologiczne

Cel badania: wykrycie pneumokoków.

Materiał badawczy

1. Flegma (zapalenie płuc).

2. Śluz z gardła (zapalenie migdałków).

3. Wyładowanie z wrzodu (pełzający wrzód rogówki).

4. Wydzielina z ucha (zapalenie ucha środkowego).

5. Ropa (ropień).

6. Punktowy punkt opłucnej (zapalenie opłucnej).

7. Krew (podejrzenie sepsy).

Metody zbierania materiałów

Metody zbierania materiałów

1 (Lepiej jest wziąć poranną plwocinę (przy specyficznym zapaleniu płuc plwocina ma rdzawy kolor).)

Podstawowe metody badawcze

1. Mikroskopijny.

2. Mikrobiologiczne.

3. Biologiczne.

Postęp badań

Pierwszy dzień badań

Pierwszy dzień badań

próbka biologiczna. Trochę (3-5 ml plwociny) emulguje się w sterylnym bulionie, 0,5 ml tej mieszaniny wstrzykuje się dootrzewnowo białej myszy. Po 6-8 godzinach myszy wykazują oznaki choroby. W tym czasie pneumokoki można już wykryć w wysięku z jamy brzusznej. Wysięk pobiera się sterylną strzykawką. Wykonuje się z niego rozmazy, barwi się metodą Grama i bada pod mikroskopem. Aby wyizolować czystą kulturę, wysięk posiewa się na agar z surowicą. Jeśli mysz umrze lub zachoruje, krew jest hodowana z serca na agarze z surowicą w celu wyizolowania czystej kultury. Uprawy są umieszczane w termostacie.

Przyspieszona metoda oznaczania rodzaju pneumokoków(reakcja mikroaglutynacji). 4 krople wysięku z jamy brzusznej zakażonej myszy nakłada się na szkiełko. Surowicę aglutynującą typu I dodaje się do pierwszej kropli, surowicę typu II do drugiej, typu III do trzeciej, a izotoniczny roztwór chlorku sodu (kontrolny) do czwartej.

Surowice typu I i II są wstępnie rozcieńczane w stosunku 1:10, a surowice typu III - 1:5. Wszystkie krople miesza się, suszy, utrwala i barwi rozcieńczoną magentą. Przy pozytywnym wyniku w jednej z kropli odnotowuje się agregację drobnoustrojów (aglutynację).

Drugi dzień badań

Hodowle są wyjmowane z termostatu, badane, az podejrzanych kolonii wykonuje się rozmazy. W przypadku obecności Gram-dodatnich diplokoków lancetowatych w rozmazach, na skosie agarowym z surowicą izolowano 2-3 kolonie w celu uzyskania czystej hodowli. Uprawy są umieszczane w termostacie. Z bulionu sporządza się rozmazy, barwi się metodą Grama i bada pod mikroskopem.

Trzeci dzień badania Uprawy są usuwane z termostatu. Sprawdź czystość kultury - wykonaj rozmazy, barwienie metodą Grama i mikroskop. Jeśli w wyizolowanej hodowli obecne są Gram-dodatnie diplokoki lancetowate, wyizolowaną hodowlę identyfikuje się poprzez inokulację:

1) na pożywce Hissa (laktoza, glukoza, sacharoza, maltoza) wysiew odbywa się w zwykły sposób - przez wstrzyknięcie do pożywki;

2) na podłożu z inuliną; 3) na pożywce z optochiną;

4) umieść próbkę z żółcią.

Test inuliny. Badaną kulturę wysiewa się na pożywkę zawierającą inulinę i nalewkę lakmusową i umieszcza w termostacie. Po 1824 h zbiory usuwa się z termostatu. W obecności pneumokoków podłoże zmienia kolor na czerwony (paciorkowce nie zmieniają konsystencji i koloru podłoża).

Oznaczanie wrażliwości na optochinę. Wyizolowaną hodowlę wysiewa się na 10% agarze z krwią zawierającym optochinę 1:50 000. Pneumokoki, w przeciwieństwie do paciorkowców, nie rosną na podłożach zawierających optochinę.

Test żółciowy. 1 ml badanej hodowli bulionowej wlewa się do probówek aglutynacyjnych. Do jednej z nich dodaje się kroplę żółci króliczej, druga probówka służy jako kontrola. Obie probówki umieszcza się w termostacie. Po 18-24 godzinach dochodzi do lizy pneumokoków, co wyraża się w oczyszczeniu mętnego bulionu. W próbie kontrolnej zawiesina pozostaje mętna.

Próbkę z żółcią można umieścić na gęstej pożywce. W tym celu ziarno suchej żółci nakłada się na kolonię pneumokoków hodowanych na płytkach z agarem i surowicą - kolonia rozpuszcza się - znika.

Czwarty dzień badania Zanotować wyniki (Tabela 26).

Tabela 26. Różnicowanie pneumokoków od paciorkowców jadowitych

Notatka. do - rozkład węglowodanów z tworzeniem kwasu.

Obecnie serologiczne metody badawcze (RSK i RIGA) są szeroko stosowane do oznaczania przeciwciał paciorkowcowych. Określenie grupy i serowaru wyizolowanej hodowli przeprowadza się za pomocą przeciwciał fluorescencyjnych.

Oznaczanie zjadliwości pneumokoków. Codzienną bulionową hodowlę pneumokoków rozcieńcza się 1% wodą peptonową od 10"2 do 10"8, po 0,5 ml każdego rozcieńczenia podaje się dwóm białym myszom. Hodowlę, która spowodowała śmierć myszy w rozcieńczeniu 10 -7 ocenia się jako zjadliwą, w rozcieńczeniu 10 -4 -10 -

6 jest uważany za umiarkowanie zjadliwy. Kultura, która nie spowodowała śmierci myszy, jest azjadliwa.

Pytania kontrolne

1. Jakie znasz metody izolowania czystej kultury pneumokoków?

2. Które zwierzę jest najbardziej podatne na pneumokoki?

3. Jakie reakcje poddaje się wysiękowi zakażonej myszy iw jakim celu?

4. Od jakich przedstawicieli ziarniaków ropotwórczych należy różnicować pneumokoki i jakim testem?

5. Jak określić zjadliwość pneumokoków? Ćwiczenia

Sporządź schemat badania plwociny, wskazując jego etapy w ciągu dnia.

Pożywki

Agar z surowicą(patrz rozdział 7).

Bulion z serwatki(patrz rozdział 7).

agar z krwią(patrz rozdział 7).

Hiszpańskie media(suchy).

Pożywka testowa inuliny. Do 200 ml wody destylowanej dodać 10 ml inaktywowanej surowicy bydlęcej, 18 ml nalewki z lakmusu i 3 g inuliny. Sterylizować przepływającą parą wodną w temperaturze 100°C przez 3 kolejne dni. Bulion żółciowy (patrz rozdział 7).

Rozdział 16

Rodzaj Neisseria obejmuje dwa rodzaje drobnoustrojów chorobotwórczych dla człowieka: N. meningitidis i N. gonorrhoeae. Neisseria meningitidis zostały wyizolowane z płynu mózgowo-rdzeniowego pacjenta przez Vekselbauma (1887).

Morfologia. Meningokoki to sparowane ziarniaki, składające się z dwóch ziarniaków w kształcie fasoli, leżących wklęsłymi bokami do siebie, ich zewnętrzne ściany są wypukłe (patrz ryc. 4). Rozmiar każdego ziarniaka wynosi 0,6-0,8 × 1,2-1,5 µm. Są polimorficzne. Meningokoki są nieruchome, nie mają zarodników, tworzą kapsułkę. Gram-ujemne. W czystych kulturach znajdują się one w tetradach iw postaci pojedynczych ziarniaków w przypadkowej kolejności, aw rozmazach przygotowanych z płynu mózgowo-rdzeniowego częściej ułożone są parami. W materiale ropnym znajdują się wewnątrz leukocytu.

uprawa. Meningokoki to aeroby. Są wymagające w stosunku do pożywek, namnażają się tylko na podłożach zawierających białko natywne (surowica, krew). Rosną w temperaturze 36-37°C (wzrost zatrzymuje się przy 25°C), pH 7,4-7,6. Ich rozmnażanie wymaga wilgotnego środowiska i zwiększonej ilości dwutlenku węgla (czynnika stymulującego ich wzrost). Wysiew należy wykonać na świeżo przygotowanym podłożu.

Na gęstych pożywkach meningokoki tworzą małe, 2-3 mm średnicy, delikatne, przezroczyste, niebieskawe, lepkie kolonie. W bulionie z surowicą meningokoki powodują lekkie zmętnienie i niewielki osad. Świeżo wyizolowane szczepy w formie S. Stare kultury mogą dysocjować, tworząc szorstkie kolonie w kształcie litery R.

Właściwości enzymatyczne. Biochemicznie meningokoki są mało aktywne. Rozkładają glukozę i maltozę, tworząc kwas. Nie wyrażają się ich właściwości proteolityczne (nie ścinają mleka, nie rozcieńczają żelatyny).

Patogeniczność meningokoków wynika z obecności otoczki uniemożliwiającej fagocytozę, pilusów sprzyjających przyczepianiu się drobnoustroju do powierzchni komórek nabłonka oraz tworzeniu enzymów: hialuronidazy i neuraminidazy.

powstawanie toksyn. Kiedy komórki bakteryjne ulegają zniszczeniu, uwalniana jest silna, odporna na ciepło endotoksyna, która jest lipopolisacharydem ściany komórkowej. W chorobie znajduje się we krwi i płynie mózgowo-rdzeniowym pacjentów. Nasilenie choroby często zależy od ilości nagromadzonej toksyny.

Struktura antygenowa. Według antygenu polisacharydowego (otoczkowego), meningokoki dzielą się na serogrupy: A, B, C, D, X, Y U-135 29E (łącznie dziewięć serogrup).

Według klasyfikacji międzynarodowej główne grupy to A, B i C. Meningokoki grupy A często wywołują procesy uogólnione i mają największe znaczenie epidemiologiczne. Meningokoki grupy B i C powodują sporadyczne choroby. Pozostałe serogrupy były mało badane.

Odporność na środowisko. Meningokoki są niestabilne. Temperatura 70°C niszczy je po 2-3 minutach, 55°C – po 5 minutach. W przeciwieństwie do innych ziarniaków z tej grupy nie tolerują niskich temperatur i są szczególnie wrażliwe na wahania temperatury.

Zwykłe stężenia roztworów dezynfekujących szybko je niszczą.

Podatność zwierząt. W warunkach naturalnych zwierzęta nie są wrażliwe na meningokoki. Ale kiedy meningokoki są wstrzykiwane małpom podtwardówkowo, mogą zachorować.

Infekcja dootrzewnowa świnek morskich i białych myszy powoduje ich śmierć w wyniku działania endotoksyny.

Źródła infekcji. Chory człowiek i bakterionośnik.

Trasy transmisji. Główna trasa jest powietrzna.

Choroby u ludzi:

1) zapalenie nosogardła;

2) meningokokemia;

3) epidemiczne zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych.

Patogeneza. Gdy znajdą się na błonie śluzowej nosogardzieli, meningokoki mogą się tam zlokalizować, powodując nosicielstwo lub powodując ostre zapalenie nosogardzieli. Jeśli wnikają do naczyń limfatycznych, krwionośnych i uogólniają się, powodują głębokie zmiany w narządach miąższowych w wyniku działania endotoksyn. rozwija się meningokokemia. Wraz z przenikaniem meningokoków do opon mózgowych dochodzi do ropnego zapalenia - zapalenia opon mózgowych. W meningokokowym zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych płyn mózgowo-rdzeniowy jest mętny (w przeciwieństwie do gruźliczego zapalenia opon mózgowych). Podczas nakłucia lędźwiowego płyn wypływa strumieniem z powodu zwiększonego ciśnienia wewnątrzczaszkowego. Zjawiska oponowe charakteryzują się bólem głowy, sztywnością karku, wymiotami itp. Zapalenie opon mózgowych występuje częściej u dzieci. U dorosłych infekcja jest częściej ograniczona do nosicielstwa lub zapalenia nosogardzieli.

Odporność. Odporność poinfekcyjna jest napięta, wywołują ją opsoniny, przeciwciała wiążące dopełniacz i bakteriobójcze. Przebieg choroby zależy od intensywności powstawania przeciwciał przeciwko antygenom polisacharydowym i białkowym.

Zapobieganie. Sprowadza się to do wczesnego wykrywania nosicieli, izolacji pacjentów z zapaleniem nosogardzieli. Pacjenci podlegają hospitalizacji.

Specyficzna profilaktyka. Opracowano szczepionkę chemiczną, składającą się z polisacharydów serogrup A i C. Immunoglobulina jest stosowana w profilaktyce doraźnej.

Leczenie. Leki przeciwbakteryjne - penicylina, chloramfenikol, ampicylina.

Pytania kontrolne

1. Jakie są właściwości morfologiczne meningokoków?

2. Na jakich podłożach hoduje się meningokoki i jakie warunki są niezbędne do ich rozmnażania?

3. Jaka jest aktywność biochemiczna meningokoków i ich odporność w środowisku zewnętrznym?

4. Jakie choroby wywołują meningokoki?

5. Na podstawie jakiego antygenu meningokoki dzielą się na serogrupy?

Pneumokoki (synonim: Pneumococcus Talamon - Frankel, Streptococcus lanceolatus Pasteur, Micrococcus pneumoniae, Diplococcus pneumoniae Frankel, Streptococcus pneumoniae) to lancetowate diplokoki wyizolowane z ludzkiego zapalenia płuc. Otwarty w 1881 roku przez L. Pasteura i niezależnie przez G. M. Sternberga w USA. Etiologiczny związek pneumokoków z ludzkim zapaleniem płuc ustalili Frenkel i Weikselbaum (A. Frankel, A. Weichselbaum) w 1884 r.

Pneumokoki wyizolowane z ciała człowieka lub zwierzęcia to ziarniaki owalne lub lancetowate, ułożone parami; wybarwione dodatnio według Grama, o wielkości około 1 mikrona. Każda para jest otoczona grubą kapsułką, wykrywaną przez barwienie eozyną [Mackey i McCartney (T. J. Mackie, J. E. McCartney)]. Pneumokoki zwykle rosną na sztucznych pożywkach w postaci łańcuchów. Łańcuch u pneumokoków jest zwykle krótszy niż u paciorkowców ropotwórczych. W hodowlach pneumokoki są mniej lancetowate, a bardziej okrągłe, nieruchome i nie tworzą zarodników. Torebka pneumokokowa jest wyraźnie widoczna na preparatach z wysięków zwierząt i ludzi, gdy rośnie na pożywkach, do których dodaje się krew, surowicę krwi lub płyn puchlinowy, ale jest słabo widoczna, gdy rośnie na zwykłych pożywkach. Pneumokoki są tlenowcami lub względnymi beztlenowcami, łatwo barwią się konwencjonalnymi barwnikami anilinowymi i są Gram-dodatnie, chociaż w starszych kulturach stają się Gram-ujemne.

Wzrost pneumokoków na konwencjonalnych pożywkach jest słaby, ale znacznie poprawia się, gdy do pożywki dodaje się glukozę (0,1%), krew, surowicę lub płyn puchlinowy. Pneumokoki dobrze rosną w atmosferze zawierającej 5-10% dwutlenku węgla. Optymalna temperatura wzrostu to 37°, maksymalna 42°, minimalna 25°. Pneumokoki są wrażliwe na zmiany pH pożywki; optymalne pH to 7,8, graniczna kwasowość to 6,5, a zasadowość to 8,3. Na agarze odżywczym rosną pneumokoki, tworząc małe kolonie o średnicy 1 mm, delikatne, półprzezroczyste, przypominające krople rosy, nie zlewające się ze sobą. Kolonie pneumokoków na specjalnych pożywkach, takich jak agar z krwią (5%), są małe, wilgotne, przezroczyste, z dobrze odgraniczonymi brzegami, wykazują α-hemolizę, wydają się być otoczone zielonkawą, przebarwioną strefą, podobną do obserwowanej przy wzroście paciorkowców jadowitych (Streptococcus viridans) na agarze z krwią.

Podczas wzrostu na kolorowych pożywkach pneumokoki fermentują węglowodany, tworząc kwas, ale bez gazu. Ważną cechą wyróżniającą pneumokoki jest fermentacja inuliny (paciorkowiec zielony nie ma zdolności rozkładania inuliny). Pneumokoki wykazują zdolność do szybkiej autolizy pod wpływem soli kwasów żółciowych. Żółć lub sole żółciowe rozpuszczają pneumokoki, co również odróżnia je od paciorkowców.

Pneumokoki są bardziej niż wiele innych drobnoustrojów wrażliwe na bakteriobójcze działanie chininy i niektórych jej pochodnych. Na przykład optochina (etylohydrokupreina) zabija pneumokoki w stężeniu 1:500 000, a paciorkowce w stężeniu 1:5000.

Pneumokoki szybko tracą swoją zjadliwość, gdy są przechowywane na konwencjonalnych pożywkach, ale mogą przetrwać miesiące w zimnie w suszonej próżniowo śledzionie białej myszy, która zmarła na posocznicę pneumokokową. Białe myszy i króliki są najbardziej wrażliwe na pneumokoki, świnki morskie są niewrażliwe, a koty, psy, kury i gołębie są wysoce odporne. Pneumokoki nie wytwarzają prawdziwej toksyny, ale tworzą hemolizyny, które są aktywne przeciwko owcom, świnkom morskim i ludzkim erytrocytom, a także hialuronidazę, lenkocydynę i substancję martwiczą. Zjadliwość pneumokoków nie zależy od wskazanych formacji toksycznych, ale od obecności określonej rozpuszczalnej substancji właściwej dla pneumokoków odpowiedniego typu.

Pneumokoki zawierają kilka antygenów. W głębi komórki drobnoustroju znajduje się składnik nukleoproteinowy związany ze specyficznością gatunkową. Bliżej powierzchni znajduje się specyficzny gatunkowo polisacharyd (antygen C) - antygen somatyczny, który jest immunologicznie identyczny u wszystkich pneumokoków. Blisko powierzchni komórki bakteryjnej znajduje się również białko specyficzne dla typu (antygen M), podobne do antygenu M hemolitycznych paciorkowców. Torebka powierzchowna składa się w całości lub w części z polisacharydu specyficznego dla każdego rodzaju pneumokoków i jest ściśle związana z wirulencją żywego drobnoustroju. Antygen ten - hapten polisacharydowy lub specyficzna substancja rozpuszczalna (SSS) - jest specyficzny dla typu i służy do różnicowania typów immunologicznych pneumokoków.

Każdy typ ma indywidualną strukturę antygenową i wirulencję. Pneumokoki wyizolowane z zapalenia płuc dzieli się na podstawie reakcji immunologicznych na typy I, I, III i IV. Pneumokoki typu IV są immunologicznie heterogenne. Ten typ obejmuje wszystkie pneumokoki, które nie należą do pierwszych trzech typów. Typowanie pneumokoków było kiedyś ważne ze względu na fakt, że efekt seroterapii zapalenia płuc określoną surowicą był bezpośrednio zależny od rodzaju patogenu.

Diagnostyka mikrobiologiczna pneumokoków polega na badaniu mikroskopowym i izolacji pneumokoków na sztucznych pożywkach. O typowej przynależności pneumokoków decydują: reakcja pęcznienia torebek, reakcja mikroaglutynacji na szkle (metoda Sabina) oraz reakcja aglutynacji makroskopowej. Jeśli z jakiegoś powodu nie można użyć białej myszy, plwocinę lub inny materiał patologiczny zaszczepia się na bulion krwi z glukozą, który jest następnie używany jako antygen w tych samych reakcjach immunologicznych.

Pneumokoki częściej niż w środowisku człowieka znajdują się na błonach śluzowych jamy ustnej i górnych dróg oddechowych. Pneumokoki przenoszone są drogą kropelkową. Pneumokoki typu IV są znacznie bardziej powszechne niż typy I, II i III. Ostatnio szczepienie pneumokokami gwałtownie spadło w zapaleniu płuc, podczas gdy szczepienie gronkowcami znacznie wzrosło. Wraz ze znacznym spadkiem inokulacji pneumokoków, aw konsekwencji spadkiem ich znaczenia jako czynników etiologicznych, zaczęto izolować w większych ilościach Escherichia coli, enterokoki, proteus i inne mikroorganizmy.

Nabyta odporność na pneumokoki jest oczywiście związana z antygenem otoczkowym, który po immunizacji ustanawia wyraźną korelację oporności z odpowiedzią przeciwciał na ten antygen. Zobacz także Bakterie.

MINISTERSTWO ZDROWIA FEDERACJI ROSYJSKIEJ PAŃSTWOWY UNIWERSYTET MEDYCZNY W KAZANIE ZAKŁAD MIKROBIOLOGII

PNEUMOKOKTY

Kazań 1999

UDC 576.851.21(07)

Opublikowane decyzją Centralnej Rady Koordynacyjno-Metodologicznej Kazańskiego Państwowego Uniwersytetu Medycznego.

Opracowany przez:

(Kierownik Katedry Mikrobiologii, doktor nauk medycznych, profesor O.K. Pozdeev, asystent Katedry Mikrobiologii, dr E.R. Fedorova.

Recenzenci:

Kierownik Katedry Epidemiologii, Kazański Państwowy Uniwersytet Medyczny, doktor nauk medycznych, profesor nadzwyczajny M.Sz. Shafeev, kierownik Katedry Epidemiologii Kazańskiej Państwowej Akademii Medycznej, doktor nauk medycznych, profesor V.E. Grigoriew.

Pneumokoki /OK Pozdeev, ER Fiodorow-Kazań: KSMU, 1999. - 14 sek.

Kopiując, rozpowszechniając, publikując tekst lub jego część na swoich zasobach, przyjmujesz na siebie odpowiedzialność zgodnie z obowiązującym prawem.

Wyłącznie do użytku osobistego (art. 18, art. 26 ustawy Federacji Rosyjskiej „O prawie autorskim i prawach pokrewnych”). Komercyjne powielanie jest zabronione.

Kazański Państwowy Uniwersytet Medyczny, 1999

Pneumokoki (Streptococcus pneumoniae) zostały po raz pierwszy zidentyfikowane przez Pasteura (1881) podczas prac nad szczepionką przeciwko wściekliźnie i początkowo uważano je za czynnik sprawczy wścieklizny. Etiologiczną rolę mikroorganizmu w rozwoju zapalenia płuc u ludzi udowodnili Frenkel i Weichselbaum (1884). Bakterie zasiedlają organizmy ludzkie i zwierzęce i zaliczane są do grupy tzw. paciorkowców „ustnych”. Są głównymi czynnikami sprawczymi zapalenia płuc, mogą również powodować zapalenie opłucnej, zapalenie opon mózgowych, pełzające wrzody rogówki, ropne zapalenie ucha środkowego, stany septyczne i inne choroby. W IX wydaniu Burgey Bacteria Key (1994) pneumokoki zaliczane są do 17. grupy „ziarniaki Gram-dodatnie”.

Epidemiologia uszkodzeń. Pneumokoki są jednym z głównych czynników sprawczych bakteryjnego zapalenia płuc rejestrowanych poza szpitalami (2-4 przypadki na 1000 osób); Rocznie na świecie obserwuje się co najmniej 500 000 zachorowań na pneumokokowe zapalenie płuc (rzeczywista wartość jest znacznie wyższa). Najbardziej podatne na zakażenie są dzieci i osoby starsze. Rezerwuarem zakażenia są pacjenci i nosiciele (20-50% dzieci w wieku przedszkolnym i 20-25% dorosłych); główną drogą transmisji jest kontakt; podczas epidemii również drogą powietrzną. Szczyt zachorowań występuje w zimnych porach roku. W zdecydowanej większości przypadków kliniczne formy infekcji rozwijają się, gdy odporność organizmu jest osłabiona (w tym z powodu stresu zimna), a także na tle innej patologii (niedokrwistość sierpowatokrwinkowa, choroba Hodgkina, zakażenie wirusem HIV, szpiczak, cukrzyca, stany po splenektomii itp.) Lub alkoholizm. Warianty 1, 2 i 3 mają największe znaczenie epidemiologiczne w patologii dorosłych; u dzieci - 1, 2, 3 i 14 opcji. Zjadliwość serowarów w kolejności malejącej - 3, 1, 2, 5, 7 i 8 opcji. Białe myszy są wrażliwe na pneumokoki (po zarażeniu umierają z powodu posocznicy w ciągu jednego dnia), cielęta, jagnięta, prosięta, psy i małpy.

Morfologia. Pneumokoki są nieruchome, nie tworzą zarodników, mają lekko wydłużony kształt, przypominający kontury płomienia świecy. W rozmazach z materiału klinicznego są one ułożone parami, z których każda jest otoczona grubą torebką. W rozmazach z pożywek mogą być ułożone w krótkie łańcuchy i być bardziej zaokrąglone. Na prostych nośnikach tworzą cienką kapsułkę; jego rozwój jest stymulowany przez wprowadzenie krwi, surowicy lub płynu puchlinowego. Tworzenie się kapsułek jest najbardziej widoczne w bakteriach typu III. Po ułożeniu w łańcuchy kapsułka może być wspólna.

właściwości kulturowe. Pneumokoki tlenowe lub fakultatywne beztlenowce; podczas uprawy preferowane są warunki kapnofilne (5-10% CO2). Chemoorganography i rosną dobrze na podłożu z krwią lub surowicą, uzupełnionym dodatkiem 0,1% glukozy. Mogą rosnąć w temperaturze 28-42°C, optymalna to 37°C. Optymalne pH -7,6-7,8. Na gęstych podłożach tworzą delikatne, półprzezroczyste, dobrze odgraniczone kolonie o średnicy około 1 mm. Czasami mogą być płaskie z centralnym wcięciem; podobnie jak inne paciorkowce, kolonie nigdy się nie łączą

pomiędzy nimi. Na agarze z krwią tworzą małe, przezroczyste kolonie o zielonkawo-szarym zabarwieniu. Centrum kolonii jest ciemniejsze, obrzeża jaśniejsze. Pod kolonią i na jej obrzeżach widoczna jest strefa a-hemolizy w postaci zielonkawej strefy przebarwionej (w wyniku przejścia hemoglobiny do methemoglobiny). Kolonie pneumokoków typu III często mają konsystencję śluzu, ich wielkość dochodzi do 2 mm. Są niejasne, mogę się ze sobą łączyć. Tworzą kolonie w formie S i R. Podczas przejścia z formy S do formy R tracą zdolność do syntezy kapsułki. Na płynnych podłożach z surowicą i 0,2% glukozą dają jednolite zmętnienie i mały kłaczkowaty osad. Przy dłuższej uprawie osad wzrasta.

Zrównoważony rozwój. Pneumokoki należą do grupy drobnoustrojów niestabilnych. W suchej plwocinie utrzymują się do dwóch miesięcy. Może być przechowywany przez długi czas w niskich temperaturach; w temperaturze 60 ° C umierają w ciągu 3-5 minut. 3% roztwór kwasu karbolowego zabija je w ciągu 1-2 minut. Optochina (w stężeniu 1:100 000) i żółć są szkodliwe dla pneumokoków, które służą do identyfikacji bakterii.

Pneumokoki różnią się od innych mikroorganizmów szeregiem właściwości (tab. 1).

Tabela 1 Właściwości biochemiczne pneumokoków

Podłoże testowe

Wynik

Podłoże testowe

Wynik

Wzrost w 100°C

rafinoza

Średni z 6,5% Nad

a-hemoliza

B-hemoliza

Trehaloza

Fosfataza

hipurowy

β-galaktozydaza

Glicerol

Oznaczenia: „+” - 90% lub więcej szczepów jest pozytywnych;

(+) - 80-89% szczepów jest pozytywnych;

d - 21-79% szczepów jest pozytywnych;

(-) - 11-20% szczepów jest pozytywnych;

„- - 90% lub więcej szczepów jest negatywnych.

Struktura antygenowa. W pneumokokach znaleziono kilka rodzajów antygenów: polisacharyd, antygen 0-somatyczny znajdujący się w ścianie komórkowej; polisacharydowe otoczkowe antygeny K i białko M. Polisacharydowy antygen somatyczny jest podobny do substancji C innych paciorkowców. Zależność ta decyduje o podobieństwie budowy chemicznej kwasów rybutejchojowych związanych z fosforanem choliny. Antygeny otoczkowe mają również charakter polisacharydowy, składający się z powtarzających się w różnych kombinacjach monosacharydów: D-glukozy, D-galaktozy i L-ramnozy. Zgodnie ze strukturą antygenów otoczkowych pneumokoki dzielą się na 84 serowary. Należy pamiętać, że antygeny otoczkowe reagują krzyżowo z antysurowicami na antygeny paciorkowcowe grupy A i B, a także z surowicami na antygeny Klebsiella i Escherichia. Podczas przejścia z formy S do formy R antygeny otoczkowe są tracone. Do serotypowania pneumokoków wytwarza się surowice grupowe, oznaczone literami łacińskimi (A, B, C, D itd.) i serowarianty, oznaczone cyframi rzymskimi. Surowica aglutynująca III nie jest zawarta w mieszaninach surowicy. Jest wypuszczany osobno i nie może być rozmnażany. U ludzi najczęściej izolowane są pneumokoki serotypów I, II i III. Są najbardziej zjadliwe dla ludzi, więc reakcję aglutynacji ustala się początkowo przy użyciu surowic odpornościowych dla tych wariantów. Jeśli wynik jest negatywny, reakcję aglutynacji poddaje się mieszaninie surowic A, B, C itp. (aż do uzyskania pozytywnego wyniku), a następnie oddzielnymi antysurowicami. W celu szybszej identyfikacji serowarów stosuje się reakcję Neufelda (obrzęk immunologiczny torebki). Metoda opiera się na zdolności kapsułek pneumokoków do zwiększania objętości w obecności homologicznej surowicy odpornościowej, co jest rejestrowane za pomocą mikroskopii optycznej. Polisacharydy otoczkowe wykazują właściwości uczulające, objawiające się rozwojem reakcji nadwrażliwości typu późnego, wykrywanej testami skórnymi.

czynniki chorobotwórcze. Głównym czynnikiem jest otoczka, która chroni bakterie przed bakteriobójczym potencjałem fagocytów i odciąga je od działania opsonin. Szczepy nie otoczkowe są praktycznie niezjadliwe i są rzadkie. Większość puli anty-pneumokokowych AT to kapsułki AT do Ag. Ważną funkcją otoczki i białka M jest również zapewnienie adhezji do błony śluzowej. Niezbędna jest substancja C, która oddziałuje specyficznie z białkiem C-reaktywnym. Konsekwencją takiej odpowiedzi jest aktywacja kaskady komplementarnej i uwolnienie mediatorów ostrej fazy zapalenia; ich nagromadzenie w tkance płucnej stymuluje migrację fagocytów polimorfojądrowych. Powstawaniu silnych nacieków zapalnych towarzyszy naruszenie homeostazy tkanki płucnej i jej hepatyzacja. Pneumokoki wytwarzają endotoksyny, a- i b-hemolizyny (pneumolizyny), leukocidynę. a-pneumolizyna jest termolabilnym białkiem zdolnym do neutralizacji 0-streptolizyny,

substancja erytrogenna, neuraminidaza. Pneumokoki syntetyzują również szereg enzymów biorących udział w patogenezie zmian – muramidazę, hialuronidazę (sprzyja rozprzestrzenianiu się mikroorganizmów w tkankach), peptydazę (rozszczepia IgA).

Patogeneza zmian chorobowych. Biotopem pneumokoków są górne drogi oddechowe. Patogeneza większości zapaleń płuc obejmuje aspirację śliny zawierającej S. pneumoniae i przedostanie się bakterii do dolnych dróg oddechowych. Naruszenie ochronnych mechanizmów drenujących – wstrząs kaszlowy i klirens śluzowo-rzęskowy są niezbędne. U dorosłych częściej obserwuje się zmiany płatowe płuc, u dzieci i osób starszych dominują zmiany okołooskrzelowe lub ogniskowe. Powstawaniu silnych nacieków zapalnych towarzyszy naruszenie homeostazy tkanki płucnej i jej hepatyzacja. Zakażeniom najbardziej zjadliwym serowarem 3 może towarzyszyć tworzenie się jam w miąższu płuc. Z ogniska pierwotnego patogen może przenikać do jamy opłucnej i osierdzia lub rozsiewać się krwiopochodnie i powodować zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, zapalenie wsierdzia i zmiany stawowe.

Objawy kliniczne. Klasyczne pneumokokowe zapalenie płuc rozpoczyna się nagle; zwróć uwagę na wzrost temperatury ciała, kaszel z odkrztuszaniem i ból w klatce piersiowej. U osób osłabionych i starszych choroba rozwija się powoli, z lekką gorączką, zaburzeniami świadomości i objawami płucnej niewydolności serca. Paciorkowcowe zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych odnotowuje się we wszystkich grupach wiekowych; charakteryzują się gwałtownym początkiem ze wzrostem temperatury ciała, sztywnością mięśni karku, bólem głowy, nudnościami i wymiotami. Zmianom naczyniowym opon mózgowo-rdzeniowych często towarzyszy utrata przytomności; wśród dzieci iw starszym wieku śmiertelność może sięgać 80%. Hematogenne zmiany pneumokokowe, jak również zapalenie zatok, zapalenie wyrostka sutkowatego, zapalenie ucha środkowego, zapalenie wsierdzia i zapalenie otrzewnej są dość częste u osób z obniżoną odpornością (np. zakażonych wirusem HIV) lub pacjentów po splenektomii. Po przebyciu choroby rozwija się niestabilna odporność, która ma charakter typowo swoisty i wynika z pojawienia się przeciwciał przeciwko typowemu polisacharydowi otoczkowemu.

Leczenie. Podstawą terapii zakażenia pneumokokowego są antybiotyki – penicylina, tetracyklina, lewomycetyna, wankomycyna, ryfampicyna, ceftriakson.

Zapobieganie. Niespecyficzna profilaktyka zakażeń pneumokokowych ma na celu identyfikację pacjentów i nosicieli oraz ich późniejsze leczenie. W celu swoistej profilaktyki zakażenia, poliwalentną szczepionką polisacharydową Pneumovex 23 szczepiono dzieci powyżej drugiego roku życia, osoby dorosłe z grupy ryzyka oraz osoby zdrowe w czasie wybuchu choroby. Lek zawiera 23 otoczkowe antygeny polisacharydowe pneumokoków (1, 2, 3, 4, 5, 6B 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 1-9F, 19A, 20, 22F, 23F, 33F). antygeny

pneumokoki uzyskano z 90% szczepów wyizolowanych z krwi pacjentów z inwazyjną infekcją pneumokokową w USA i odpowiadających szczepom spotykanym w Rosji. Szczepienie przeprowadza się dwukrotnie w odstępie 5-8 lat.

Po szczepieniu powstaje sztuczna, czynna, specyficzna dla typu odporność.

Diagnostyka laboratoryjna. „Złotym standardem” jest izolacja patogenu. Należy pamiętać, że materiał trzeba szybko zbadać, bo. Bakterie są podatne na szybką autolizę ze względu na aktywność enzymów wewnątrzkomórkowych. Materiałem do badania jest plwocina, wysięk opłucnowy i inne wysięki, płyn mózgowo-rdzeniowy, krew, śluz z nosa i gardła, wydzielina z owrzodzeń oka, wydzielina z ucha, mocz, fragmenty narządów (w przypadku zgonu pacjenta). Sygnałową odpowiedź na infekcję pneumokokową można uzyskać, jeśli w rozmazach plwociny zostaną wykryte neutrofile i Gram-dodatnie lancetowate diplokoki (co najmniej 10 w każdym polu widzenia). W przeciwnym razie uciekaj się do izolacji patogenu.

Pierwszy etap badania. Materiał patologiczny poddaje się wstępnej bakterioskopii (z wyjątkiem krwi). Plwocinę umieszcza się na sterylnej szalce Petriego, myje, ropno-śluzową grudkę chwyta się pętlą, wciera na szklanym szkiełku, suszy i barwi według Grama. W rozmazie znajdują się Gram-dodatnie lancetowate lub owalne ziarniaki otoczone kapsułką (tworzenie kapsułek obserwuje się tylko u pneumokoków izolowanych od chorych i zakażonych zwierząt). Identyfikację otoczek pneumokokowych można przeprowadzić metodą Burri-Ginsa. Zaszczepianie materiału patologicznego przeprowadza się na 5-10% agarze z krwią lub surowicą i pożywce wzbogacającej (8-10% bulion z surowicą). Jeśli podejrzewa się posocznicę pneumokokową, 5-10 ml krwi pacjenta inokuluje się do 45-90 ml bulionu z surowicą. Płyn mózgowo-rdzeniowy, jeśli jest klarowny, odwirowuje się i kilkoma kroplami osadu zaszczepia się na pożywkę. Jako pożywkę wzbogacającą stosuje się półpłynny agar z surowicą. Hodowle inkubuje się w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Najlepszą metodą izolowania czystej kultury pneumokoków jest zakażenie białych myszy materiałem patologicznym. Plwocinę przemytą na płytce Petriego sterylną solą fizjologiczną rozciera się w sterylnym moździerzu sterylnym tłuczkiem lub tłuczkiem szklanym z dodatkiem soli fizjologicznej w stosunku 1:2-1:5. Zawiesinę osadza się, supernatant w ilości 0,5-1 ml podaje się białym myszom dootrzewnowo. W obecności pneumokoków w materiale myszy umierają w ciągu 72 godzin. W rozmazach narządów i krwi stwierdza się typowe pneumokoki. Narządy i krew są również hodowane na bulionie z surowicą i na płytkach Petriego z krwią lub agarem z surowicą.

Drugi etap badania. Zbadaj naturę wzrostu na pożywce. Na agarze z krwią kolonie pneumokoków są małe, okrągłe, gładkie

krawędzie, delikatne, otoczone strefą zazielenienia środowiska (co bardzo przypomina wzrost zielonych paciorkowców). Na agarze z surowicą kolonie są delikatne, półprzezroczyste i przezroczyste. Z bakterioskopią rozmazów barwionych metodą Grama. znaleźć Gram-dodatnie diplokoki bez kapsułek. Po bakterioskopii kolonie podejrzane o obecność pneumokoków hoduje się na skośnej surowicy lub agarze z krwią lub bulionie z surowicą. Mikroskopia rozmazów z pożywki wzbogacającej wraz z różnorodną mikroflorą może ujawnić ziarniaki Gram-dodatnie ułożone w pary lub krótkie łańcuchy. Materiał z pożywki wzbogacającej przenosi się do stałych pożywek odżywczych. Uprawy inkubuje się w temperaturze 37°C przez 24 godziny.

Trzeci etap badania. Na skosie agarowym z krwią pneumokoki tworzą delikatną, cienką, półprzezroczystą powłokę. Na bulionie serwatkowym pneumokoki powodują zmętnienie i lekki osad. W rozmazach ze stałych pożywek hodowlanych pneumokoki mogą mieć inny wygląd. Obok diplokoków o wydłużonym kształcie, ze spiczastymi zewnętrznymi końcami przypominającymi płomień świecy, występują komórki o prawidłowym owalnym i okrągłym kształcie. W hodowli bulionowej pneumokoki są często ułożone w łańcuchy. Na podstawie właściwości morfologicznych i kulturowych pneumokoków trudno je odróżnić od paciorkowców jadowitych, dlatego zaproponowano zestaw specjalnych testów do ich różnicowania:

Rozpuszczalność w żółci (test dezoksycholanowy);

Zdolność do rozkładu inuliny;

Wrażliwość na optochinę;

Reakcja aglutynacji ze swoistymi surowicami przeciw pneumokokom;

Zdolność do rozkładu glukozy, maltozy, sacharozy, laktozy, mannitolu, sorbitolu i salicyny.

Najbardziej przystępnymi metodami odróżniającymi pneumokoki od innych paciorkowców jest test z optochiną (hamuje ich wzrost); od zielonych paciorkowców wyróżniają się zdolnością do fermentacji inuliny, a także wrażliwością na żółć.

Test dezoksycholanowy. Po wstępnej bakterioskopii do probówki dodaje się 10 kropli izolowanej czystej kultury (najlepiej bulionu) z 5 kroplami sterylnej żółci bydlęcej. Kontrolę stanowi kultura wprowadzona do probówki z 5 kroplami soli fizjologicznej. Po 30-60 minutach inkubacji w temperaturze 37°C obserwuje się całkowitą lizę hodowli w postaci wyklarowania się w probówce żółcią, w probówce kontrolnej mieszanina pozostaje mętna. Należy pamiętać, że niezjadliwe kultury pneumokoków są odporne na żółć.

Odporność na żółć można również zbadać przez inokulację w 10% bulionie żółciowym. Materiał testowy dodaje się do pożywki, podczas gdy bulion staje się mętny. Po 24-godzinnej inkubacji w temperaturze 37°C obecność pneumokoków zostanie wskazana poprzez oczyszczenie bulionu w wyniku lizy bakterii.

Możesz także użyć krążków nasączonych 20% roztworem żółci. Krążki umieszcza się na wyhodowanej kulturze w naczyniu i inkubuje przez 1-2 godziny w temperaturze 37°C. W obecności pneumokoków kolonie ulegają lizie wokół krążka w odległości 1-2 mm.

Test inuliny. Hodowlę pneumokoków wysiewa się na pożywce z inuliną. W tym celu 200 ml sterylnej wody destylowanej, 18 ml nalewki lakmusowej i 3 g inuliny dodaje się do 100 ml surowicy bydlęcej ogrzewanej w temperaturze 56 ° C przez 30 minut, sterylizowanej przepływającą parą wodną przez 30 minut. Hodowle inkubuje się w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Pneumokoki rozkładają inulinę, powodując zaczerwienienie podłoża. Paciorkowiec zielony nie powoduje zaczerwienienia podłoża.

Test z optochiną. Badaną hodowlę pneumokoków inokuluje się do bulionu z optochiną w rozcieńczeniu 1:100 000 lub 1:200 000. Pneumokoki nie rosną w takim środowisku. Możliwe jest również określenie wrażliwości na optochinę poprzez inokulację na 10% agarze z krwią zawierającym optochinę w rozcieńczeniu 1:50 000. Kontrolą jest kultura na agarze z krwią. Pneumokoki nie rosną na podłożu z Optochinem, na podłożu kontrolnym obserwuje się wzrost pneumokoków. Można użyć krążków nasączonych 6 μg optochiny, które po inokulacji nanosi się na powierzchnię podłoża. U pneumokoków wokół krążka tworzy się strefa zahamowania wzrostu o średnicy co najmniej 18 mm.

Test wirulencji. Dzienną hodowlę pneumokoków hodowanych na bulionie serwatkowym rozcieńcza się 1% sterylną wodą peptonową (pH - 7,6) lub bulionem lekko zasadowym do 1:10. Rozcieńczoną hodowlę podaje się dootrzewnowo białym myszom o wadze 16-20 g w objętości 0,5 ml i obserwuje przez 72 godziny. Z narządów martwej myszy wykonuje się inokulację na pożywkę i bada mikroskopowo rozmazy-odciski. Wysoce zjadliwe kultury obejmują pneumokoki, które powodują śmierć myszy po wprowadzeniu kultury w rozcieńczeniu 1:10. Awirulentne kultury nie powodują śmierci myszy.

Serotypowanie pneumokoków. 18-godzinną hodowlę bada się w teście mikroaglutynacji Sabina. Na szklane szkiełko nanosi się 4 krople hodowli pneumokoków. Do 1 kropli dodać kroplę surowicy przeciwpneumokokowej typu 1, do 2 - surowicy typu II, do 3 - surowicy - 111, do 4 - kropli normalnej surowicy. Mieszaniny na szkle miesza się za pomocą ezy i bada pod lupą lub pod mikroskopem przy małym powiększeniu. W przypadku dodatnim aglutynację obserwuje się w jednej z pierwszych trzech kropli. Typ pneumokoków jest określany w reakcji aglutynacji ze specyficznymi surowicami aglutynującymi pierwszych trzech ustalonych typów. Hodowle, które nie aglutynują z tego typu surowicami są przypisywane do grupy X. Reakcja jest ustawiona w następujący sposób. Wlać 18-godzinną hodowlę bulionową w 0,5 ml do probówek. Następnie dodać równą objętość surowicy rozcieńczonej solą fizjologiczną w stosunku 1:5. Kontrole to 2 probówki, z których jedna zawiera zmieszaną kulturę testową

normalna surowica królicza, a druga - tylko kultura testowa. Zawartość probówek dokładnie wstrząsa się i umieszcza na 2 godziny w termostacie w temperaturze 37 °C, po czym przeprowadza się wstępne obliczenie reakcji. Ostateczne wyniki zapisuje się po dodatkowej inkubacji w temperaturze pokojowej przez 20 godzin. Aglutynację ocenia się na cztery plus, jeśli zawartość probówek jest całkowicie przezroczysta, a kultura aglutynacyjna jest gęstą warstwą, która nie pęka po wstrząśnięciu; o trzy plusy, jeśli przy całkowitym wyjaśnieniu zawartości probówki kultura aglutynująca łatwo rozpada się na kawałki; dwa plusy - jeśli nie następuje oświecenie, w mętnej zawartości probówki wyraźnie widać gołym okiem cząstki zlepionej kultury; z aglutynacją o jeden plus w probówce znajduje się drobnoziarnista mieszanina sklejonych pneumokoków. Przy negatywnej reakcji widocznej dla oka nie obserwuje się aglutynacji;

zawartość probówek po wstrząśnięciu ma jednolite zmętnienie.

Typowanie pneumokoków z grupy X przeprowadza się za pomocą grupy

surowice zawierające mieszaninę typowych surowic aglutynujących

w równych objętościach. Następujące surowice grupowe są przygotowywane przez

zmieszanie równych objętości nierozcieńczonego standardowego materiału diagnostycznego

surowice (Lund, 1960):

serowary A-1, II, IV, V, XVIII;

B - VI, VIII, XIX serowary;

C - VII, XX. serowary XXIV, XXXI, XL;

D - IX, XI, XVI, XXXVI. serowary XXXVII;

E-X, XXI. serowary XXXIII, XXXIX;

F-XII. XVII. serowary XXII, XXXVII, XXXII, XLI;

G - XIII, XXV. serowary XXIX, XXXIV, XXXV, XXXVIII, XLII, XLVII;

J-XLIII. serowary XLIV, XLV, XLVI.

Surowicę aglutynującą typu III stosuje się jako taką (bez mieszania z innymi typowymi surowicami) ze względu na trudność w uzyskaniu jej w odpowiednio wysokim mianie. Typowanie przeprowadza się dwuetapowo: najpierw za pomocą surowic grupowych, a następnie pojedynczych surowic z grupy, z którą uzyskano pozytywną reakcję. Serotypowanie pneumokoków jest wykorzystywane przede wszystkim do badań epidemiologicznych wyników swoistej seroterapii i seroprofilaktyki.

Mikroaglutynację pneumokoków metodą Sabina można uzyskać mieszając surowice przeciw pneumokokom z wysiękiem z jamy brzusznej myszy zakażonej plwociną pacjenta. Już cztery godziny po zakażeniu w wysięku stwierdza się czystą hodowlę pneumokoków, co daje dodatnią aglutynację Sabina.

Przyspieszone metody wykrywania i typowania pneumokoków. 1. Metoda Neufelda, czyli zjawisko pęcznienia torebki pneumokokowej. Jedna bryła świeżo izolowanej plwociny pacjenta jest nakładana na trzy

szkiełek nakrywkowych, do każdego z nich dodać kroplę nierozcieńczonej swoistej surowicy przeciw pneumokokom (typu 1, II, III) oraz kroplę błękitu Loefflera. Krople są dokładnie wymieszane, przykryte szklanym szkiełkiem z otworem posmarowanym wokół krawędzi wazeliną. Po dwóch minutach wiszące krople są badane pod mikroskopem z systemem zanurzeniowym. W przypadku dodatnim obserwuje się gwałtowny wzrost liczby kapsułek pneumokokowych. Z wynikiem negatywnym kapsułki są mało cenione. Reakcja pęcznienia jest specyficzna i nie daje pozytywnego wyniku w przypadku innych bakterii otoczkowych. Nie używam go do badania plwociny od pacjentów leczonych sulfonamidami i antybiotykami, tk. w takim przypadku można wyizolować otoczkowe pneumokoki.

2. Metoda wytrącania. Zagotuj 5-10 ml plwociny w łaźni wodnej, aż do uzyskania gęstego skrzepu. Skrzep rozciera się i dodaje niewielką ilość soli fizjologicznej, ponownie gotując przez kilka minut w celu wyekstrahowania określonego polisacharydu z pneumokoków. Zawiesinę odwirowuje się, a uzyskaną klarowną ciecz i specyficzne typowe surowice umieszcza się w probówkach do wytrącania, przeprowadza się reakcję wytrącania pierścieniowego. Pojawienie się pierścienia na styku cieczy wskazuje na wynik dodatni.

3. Oznaczanie kapsułek pneumokokowych metodą Burri. Kroplę badanego materiału i kroplę atramentu nakłada się na koniec szkiełka podstawowego. Mieszaninę miesza się i wykonuje rozmaz, suszy na powietrzu i bez utrwalania mikroskopowo. Tło leku jest ciemno dymne, ciała drobnoustrojów i ich kapsułki nie są poplamione. Preparat sporządzony według Burriego można utrwalić mieszanką Nikiforowa, przemyć wodą, zabarwić fuksyną Tsilya, rozcieńczoną 1:3 przez 3-5 minut. Na ciemnym tle rozmazu wyróżniają się niezabarwione kapsułki, wewnątrz których znajdują się bakterie o jasnym szkarłatnym kolorze (metoda Gina).

Strona 40 z 91

Czynnikiem sprawczym płatowego zapalenia płuc (zapalenie płuc) jest pneumokok - Diplococcus pneumoniae, po raz pierwszy odkryty przez Pasteura w ślinie mężczyzny, który zmarł na wściekliznę (1881).
Morfologia i właściwości barwiące. Pneumokoki (ryc. 67 i 68 na wkładce) to sparowane ziarniaki, które mają wydłużony kształt przypominający lancet. Dlatego są inaczej nazywane diplokokami lancetowatymi. Tworząc krótkie łańcuchy, pneumokoki upodabniają się do paciorkowców, a zatem II. F. Gamaleya nazwał je Streptococcus lanceolatus. Rozmiar komórki waha się od 0,5X0,75 do 1X1,5 mikrona. Nie mają zarodników ani wici. Charakterystyczną cechą pneumokoków jest tworzenie kapsułki, która jest dobrze wyrażona w materiałach patologicznych (plwocina, krew itp.). Podczas uprawy na pożywce kapsułka jest tracona. Pneumokoki łatwo wychwytują barwniki anilinowe i wybarwiają się dodatnio według Grama.
Właściwości kulturowe i biochemiczne.

Ryż. 68. Pneumokoki w rozmazie plwociny.

Pneumokoki to tlenowce i fakultatywne beztlenowce. Optymalna temperatura wynosi około 37°. Hodować na podłożach zawierających białko zwierzęce (agar z krwią lub surowicą, ascitagar).
Na powierzchni agaru po 24 godzinach tworzą się małe kolonie, przypominające paciorkowce, ale mniejsze i bardziej przezroczyste.
Na skośnym agarze, przy obfitym zaszczepieniu, uzyskuje się bardzo delikatną przezroczystą powłokę, złożoną z najmniejszych, niescalających się kolonii, na bulionie - lekkie zmętnienie i niewielki łuszczący się osad.
Świeżo wyizolowane szczepy nie rosną na żelatynie. Stare laboratoryjne szczepy pneumokoków mogą wytwarzać małe, białawe kolonie już w temperaturze 18-22°C. Żelatyna nie jest upłynniona.
Dobrze rosną na mleku, zsiadając je z tworzeniem kwasu.
Na agarze z krwią wokół kolonii tworzy się strefa niepełnej hemolizy z zielonkawo-brązowym zabarwieniem podłoża.

Ryż. 67. Pneumokoki w czystej kulturze z bulionu.

Pneumokoki rozkładają sacharozę, rafinozę i laktozę. Najważniejszą cechą jest rozkład inuliny. Większość paciorkowców nie ma tej właściwości. Zjadliwe pneumokoki są rozpuszczalne w żółci.
Struktura antygenowa i typy serologiczne pneumokoków. Cytoplazma pneumokoków zawiera antygen białkowy wspólny dla wszystkich pneumokoków. Antygen ten determinuje ich specyficzność gatunkową. Kapsułka zawiera specyficzne antygeny polisacharydowe (hapteny), które różnią się składem chemicznym u różnych pneumokoków (antygeny typowe). Na podstawie tych typowych antygenów wszystkie pneumokoki dzieli się na trzy główne grupy (I, II, III) i czwartą połączoną grupę (grupa X), stosując reakcję aglutynacji i wytrącania. Grupa X obejmuje ponad 70 typów.
opór. Na sztucznych pożywkach pneumokoki szybko umierają (4-7 dni). Pod warstwą oleju wazelinowego w płynnych i półpłynnych podłożach zawierających białko zachowują żywotność przez 3-12 miesięcy.
Pneumokoki dobrze znoszą wysychanie: w suchej plwocinie w rozproszonym świetle utrzymują się do 2 miesięcy. Po podgrzaniu do 52-55 ° giną w ciągu 10 minut, w 60 ° - jeszcze szybciej. W roztworze kwasu karbolowego (3%) pneumokoki umierają w ciągu 1-2 minut.
Pneumokoki są szczególnie wrażliwe na optochinę. Pod wpływem tych ostatnich umierają w stężeniu 1: 1 000 000.
Powstawanie toksyn i patogeniczność dla zwierząt. Jad pneumokoków jest endotoksyną. Ze zwierząt laboratoryjnych białe myszy i króliki są bardziej wrażliwe na pneumokoki. Podanie pozajelitowe zjadliwych pneumokoków po 24-48 godzinach powoduje śmierć zwierząt z sepsą. Podczas sekcji zwłok stwierdza się wysięk włóknisty w miejscu wstrzyknięcia; śledziona jest powiększona i przekrwiona.
Patogeneza i choroby człowieka. Bramą wejściową zakażenia jest zwykle błona śluzowa gardła. Wprowadzenie pneumokoków do organizmu i ich penetracja do tkanki płucnej może najwyraźniej nastąpić zarówno przez układ limfatyczny i krążeniowy, jak i bezpośrednio przez rozgałęzienia oskrzeli. Najczęstszą chorobą jest krupowe zapalenie płuc, które charakteryzuje się nagłym początkiem, wysoką gorączką, czasami z dreszczami, bólem w boku przy oddychaniu, bólem głowy, czasami utratą przytomności, delirium, silnym pobudzeniem. W przyszłości pojawia się kaszel z charakterystyczną rdzawoczerwoną plwociną. W płucach zachodzi proces, który chwyta częściej jeden, rzadziej dwa lub trzy płaty.
Źródłem zakażenia jest osoba chora i bakterionośnik. Zakażenie z zewnątrz następuje zarówno drogą aerogenną – kropelkami z nośnika, jak i poprzez zakażenie pyłem. Pneumokoki mogą utrzymywać się w wysuszonej plwocinie przez długi czas (około 2 miesięcy) i przedostawać się do powietrza wraz z pyłem.
Podczas badania osób zdrowych patogenne pneumokoki często stwierdza się w nosogardzieli, więc nie wyklucza się możliwości autoinfekcji, a istotną rolę odgrywają czynniki osłabiające odporność organizmu, takie jak hipotermia.
Oprócz krupowatego zapalenia płuc pneumokoki powodują zapalenie ucha środkowego, opon mózgowo-rdzeniowych (meningitis), a także błony śluzowej nosa i zatok, ból gardła, pełzający wrzód rogówki i zapalenie woreczka łzowego.
Odporność. Przeniesione zapalenie płuc nie daje odporności. Choroba może nawracać więcej niż jeden raz. Wynika to z obecności wielu rodzajów pneumokoków oraz faktu, że przebyte zapalenie płuc zwiększa wrażliwość organizmu na pneumokoki.
Surowica wyleczonych pacjentów zawiera przeciwciała (aglutyniny itp.).
Do czasu kryzysu w zapaleniu płuc stężenie przeciwciał we krwi osiąga znaczne miano, a fagocytoza dramatycznie wzrasta (I. Ya. Chistovich). Na podstawie tych danych odporność w zapaleniu płuc należy rozpatrywać przede wszystkim jako fagocytarną, w której ważną rolę odgrywają przeciwciała (bakteriotropiny).
Diagnostyka mikrobiologiczna. Materiałem do badań w chorobach pneumokokowych jest plwocina, krew i ropa pobierane z różnych zmian chorobowych, rzadziej płyn mózgowo-rdzeniowy.
Materiał patologiczny (z wyłączeniem krwi) bada się bakterioskopowo, bakteriologicznie oraz zarażając białe myszy. Ta druga metoda musi być zastosowana, ponieważ materiał źródłowy, zwłaszcza plwocina, zawiera zazwyczaj obficie obcą mikroflorę, co przy bezpośrednim wysianiu materiału na pożywkę utrudnia izolację pneumokoków.
Rozmazy z plwociny, ropy itp. są barwione metodą Grama. Pod mikroskopem znajdują się lancetowate diplokoki, wybarwione metodą Grama, otoczone torebką.
Kultury izoluje się na agarze z krwią lub agarze ascig. Po 24-48 godzinach wzrostu w temperaturze 37° pojawiają się charakterystyczne kolonie w przypadku obecności pneumokoków. Kolonie wysiewa się na skośną surowicę lub agar z płynem puchlinowym, a wyizolowaną hodowlę sprawdza się pod kątem rozpuszczalności w żółci i zdolności do degradacji inuliny.
Zakażenie białej myszy jest najpewniejszym sposobem na wyizolowanie kultury pneumokoków. Materiał pobrany od pacjenta lub zwłok (plwocina, ropa, fragment narządu itp.) umieszcza się w sterylnym kubku, następnie rozciera w sterylnym moździerzu z 1-2 ml sterylnego bulionu i 0,5 ml tej zawiesiny wstrzykuje się dootrzewnowo białej myszy. Po śmierci myszy, która następuje w ciągu 12-48 godzin, pobiera się posiewy krwi z serca i prawie we wszystkich przypadkach uzyskuje się czystą kulturę pneumokoków.
Jeśli podejrzewa się posocznicę, 10-20 ml krwi inokuluje się do bulionu puchlinowego lub surowicy. Po wzbogaceniu z bulionu wykonuje się posiewy na agarze z krwią, a wyizolowaną czystą kulturę identyfikuje się na podstawie cech morfologicznych i biochemicznych.
specyficzna terapia i chemioterapia. Obecnie preparaty sulfanilamidowe i antybiotyki (penicylina, biomycyna, tetracyklina itp.) są z dużym powodzeniem stosowane w leczeniu płatowego zapalenia płuc.