COOMBSOVA REAKCIJA(R. R. A. Coombs, angleški imunolog, rojen leta 1921; sin.: Coombsov test, antiglobulinski test ) - imunološka reakcija za odkrivanje nepopolnih protiteles proti avto- in izoantigenom eritrocitov.
Reakcijo je leta 1908 razvil Moreshi (S. Moreschi), vendar je prejel široka uporabašele od leta 1945, potem ko je Coombs pokazal svojo vlogo pri ugotavljanju združljivosti pri transfuziji krvi, Rhesus konfliktu, diagnosticiranju avtoalergijskih in avtoimunskih stanj itd.
K. r. temelji na uporabi posebej pripravljenega pripravka v njem - antiglobulinskega seruma. V prisotnosti antiglobulinskega seruma pride do aglutinacije eritrocitov, obremenjenih z nepopolnimi protitelesi. Eritrociti, ki na svoji površini ne vsebujejo protiteles, ostanejo neaglutinirani.
K. r. pogosto se uporablja za: a) ugotavljanje stanja izosenzibilizacije, tj. odkrivanje izoprotiteles, ki se pojavijo med ponavljajočimi se transfuzijami krvi (glej Transfuzijo krvi) ali nosečnostjo (glej Nosečnost); b) izvajanje testa kompatibilnosti za hemotransfuzije; c) opredelitev različnih Rh faktorjev v eritrocitih (glej); d) odkrivanje avtoimunskih protiteles na eritrocitih bolnikov s pridobljeno hemolitično anemijo (glej) in drugimi avtoalergijskimi boleznimi (glej), pa tudi pri nekaterih okužbah, ki se pojavijo pri alergijska komponenta; e) odkrivanje izoimunskih protiteles, fiksiranih na eritrocitih otrok s hemolitično boleznijo novorojenčka (glej). K. r. Uporablja se tudi v forenzičnih in antropoloških raziskavah.
Glavno gradivo za uprizoritev K. r. so serum ali citrirana plazma in eritrociti bolnika. Obstajata dve različici reke K.: posredna in neposredna. S posredno K. p. preučite serum bolnika, v rezu določite prosto krožeča protitelesa. Z ravno črto K. p. preglejte rdeče krvne celice za prisotnost protiteles, fiksiranih na njih oblikovani elementi krvi.
Antiglobulinski serum za K. reko. pridobite z imunizacijo laboratorij. živali (kunci, koze, ovce itd.) z globulini, izoliranimi iz človeškega seruma s frakcioniranjem z etanolom, amonijevim sulfatom ali gelsko filtracijo na Sephadexu. Po prejemu antiglobulinskega seruma je potrebno odstraniti heteroaglutinirajoča protitelesa, ki so nastala pri imunizaciji živali s humanimi globulini. To dosežemo z adsorpcijo imunskega seruma z mešanico rdečih krvničk ljudi z drugačna skupina krvi ali razredčenje z njeno izotonično raztopino natrijevega klorida. V slednjem primeru mora biti titer heteroaglutininov nizek (1: 16 - 1: 32), tako da po redčenju antiglobulinski serum ostane dobra dejavnost v K. r.
Indirektna Coombsova reakcija
Posredna Coombsova reakcija poteka v dveh korakih. Prvo stopnjo izvajamo v posebej za to izdelanih majhnih epruvetah velikosti 4 X 0,5 cm, v vsako epruveto po tri kapljice seruma (celega, 1:2 itd.), v katerem ugotavljamo prisotnost protiteles. če obstaja sum, dodamo eno kapljico usedline eritrocitov znane antigenske sestave. Vsebino epruvete premešamo in postavimo v termostat pri t° 37° za 1 uro. Nato eritrocite trikrat speremo z izotonično raztopino natrijevega klorida. Druga stopnja je priprava 5% suspenzije opranih eritrocitov in povezava ene kapljice eritrocitov z eno kapljico antiglobulinskega seruma na beli (porcelanski) plošči z navlaženo površino. Obračunavanje rezultatov se izvaja do 10 minut. Izjema lažno pozitivni rezultati proizvedeno z delom kontrolne študije. Uporaba izotonična raztopina natrijevega klorida namesto antiglobulinskega seruma ne sme spremljati aglutinacija eritrocitov. Izvedba posrednega K. r. v zvezi z eritrociti znanega fenotipa vam izoantigeni omogočajo določitev specifičnosti protiteles. Na primer, študija bolnikovega seruma z eritrociti 0 (I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fua; 0(I), cDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, Fya je pokazala pozitiven rezultat z odvzemom krvi v 1. in 4. primeru; drugi vzorci krvi (2, 3, 5. primeri) so pokazali negativen rezultat. Serum vsebuje protitelesa anti-E. S pomočjo posrednega K. r. lahko se odkrijejo nepopolna protitelesa proti antigenom: C, D, E, c, e; K, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb itd. (glej Krvne skupine).
Neposredna Coombsova reakcija
Glede na tehniko izvedbe direktna Coombsova reakcija ustreza drugi stopnji posredne K. r.: pacientove eritrocite (5% suspenzija), trikrat oprane z izotonično raztopino natrijevega klorida, kombiniramo z antiglobulinskim serumom. Neposredna K. r. izvesti, kadar obstaja razlog za domnevo, da so eritrociti preiskovanega bolnika in vivo že senzibilizirani s protitelesi. Pozitivna ravna črta K. r. služi kot diagnostični marker za hemolitična bolezen novorojenčki, zaradi preobčutljivosti ženskega telesa na fetalne antigene in prodiranja protiteles skozi placento v otrokovo telo, pa tudi s pridobljenimi hemolitična anemija.
zadaj Zadnja leta K. r. znatno izboljšala. Z njegovo pomočjo je mogoče ne le ugotoviti prisotnost protiteles na eritrocitih, temveč tudi določiti razred imunoglobulinov (glej). Če želite to narediti, uporabite serum proti določenim razredom imunoglobulinov: IgG, IgM, IgA. Izoimunska protitelesa proti Rh, Kell antigenom, Duffyjevim antigenom in drugim antigenom ter protitelesa toplega avtoimunskega tipa so običajno IgG. Hladna avtoimunska protitelesa, pa tudi izoimunska protitelesa proti Le in nekaterim drugim antigenom, praviloma pripadajo IgM. Samo redka avtoimunska protitelesa imajo naravo IgA (glejte Avtoprotitelesa).
Bibliografija: Dygin V. P. Avtoimunske bolezni na kliniki internih bolezni, L., 1970, bibliogr.; Blagajna-s k in y I. A. in Alekseev G. A. Klinična hematologija, M., 1970; Kosyakov P. N. ISO antigeni in človeška protitelesa v normalnih in patoloških pogojih, M., 1974, bibliogr.; V približno i v i n P. e. a. Hemolitične anemije, str. 93, str., 1971, bibliogr.; Klinični vidiki imunologije, ur. avtor P. G. H. Geli a. o., Oxford, 1975; Coombs R. R. A., M o u g a n t A. E. a. Race R. R. In vivo izosenzibilizacija rdečih krvničk pri dojenčkih s hemolitično boleznijo, Lancet, v. 1, str. 264, 1946.
Od številnih obstoječih antigenov v zdravniška praksa najvišjo vrednost dajemo trem vrstam krvnih aglutinogenov. Eden od njih je tip, ki je odgovoren za manifestacijo faktorja Rh: če je prisoten na membrani eritrocitov, se diagnosticira krvna skupina Rh +, če je odsoten - Rh-. Če v sestavo Rh-negativne krvi vstopijo eritrociti z Rh + aglutinogeni, telo sproži imunski odziv in začne proizvajati protitelesa proti temu antigenu, kar povzroči patološka stanja.
REFERENCA! Rh faktor je kompleksen večkomponentni sistem več deset antigenov. Najpogostejši med njimi so aglutinogeni tipa D (85% primerov), pa tudi E in C.
Coombsov test se izvaja le ob prisotnosti neposrednih indikacij. Skupni seznam Razlogi za predpisovanje Coombsovega testa:
- načrtovanje in vodenje nosečnosti (starši imajo različne Rh);
- darovanje in priprava na transfuzijo krvi (neujemanje Rh krvi ni nič manj škodljivo kot neujemanje v sistemu AB0);
- načrtovano kirurški poseg(v primeru nadomestitve izgube krvi s transfuzijo krvi);
- diagnoza hemolitičnih bolezni.
Natančnejše indikacije so odvisne od vrste študije, ki se izvaja.
Neposredni Coombsov test
Neposredni test odkrije protitelesa na površini rdečih krvničk. To je potrebno za diagnozo obstoječega hemolitične patologije:
- avtoimunski (eritrociti in hemoglobin se uničijo kot posledica napada lastnih protiteles telesa);
- medicinski ( patološki proces začne nekaj jemati zdravila kinidin ali prokainamid);
- po transfuziji (z neusklajenostjo krvne skupine med transfuzijo), pa tudi v obliki Rh konflikta med nosečnostjo (eritroblastoza novorojenčkov).
REFERENCA! Hemolitična anemija je bolezen, povezana s prezgodnjim uničenjem rdečih krvnih celic zaradi hemolize, kar vodi do nezadostne nasičenosti krvi s kisikom in hipoksije možganov in / ali notranjih organov.
Hemolizo krvnih elementov opazimo pri onkoloških, infekcijskih, revmatskih boleznih, tako da lahko neposredni Coombsov test uporabimo kot dodatno pravno sredstvo diagnostiko patološko stanje. Vredno si je zapomniti: negativen pomen analiza ne izključuje možnosti hemolize, vendar je razlog za dodatni pregled.
Indirektni Coombsov test
Za preprečevanje patoloških situacij se pogosteje uporablja posredni test. Pomaga pri odkrivanju protiteles v krvni plazmi, kar je potrebno za oceno združljivosti transfuzije in diagnosticiranje tveganj Rh konflikta med nosečnostjo.
Več kot 80% ljudi ima pozitiven Rh faktor (Rh +), manj kot 20% pa je Rh negativnih. Če Rh- mati razvije Rh+ otroka, njeno telo začne proizvajati protitelesa, ki napadajo fetalne rdeče krvne celice in povzročajo hemolizo.
Glede na to, da odstotek zakonskih zvez z "različnim rezusom" doseže 12-15%, bi moralo biti tveganje za hemolitično bolezen novorojenčka visoko, vendar v resnici le pri 1 od 25. podobnih primerih pri ženskah opazimo pojav preobčutljivosti (za 200 uspešnih porodov, 1 primer hemolitične patologije). To je deloma posledica dejstva, da prvi Rh-pozitivni otrok običajno ne povzroči odprte agresije materinega telesa; velika večina primerov se pojavi pri drugem in naslednjih otrocih. Velja enako načelo kot pri konvencionalni senzibilizaciji na določen alergen.
Ob prvem stiku ne pride do reakcije. Telo se le seznani z novim antigenom zanj, proizvaja protitelesa razreda IgM, ki so odgovorna za hiter imunski odziv, vendar redko prodrejo skozi placentno pregrado v otrokovo kri. Vse patološke reakcije se pokažejo ob ponovnem "srečanju", ko se v telesu začnejo proizvajati protitelesa. razreda IgG, zlahka prodrejo v krvni obtok ploda in začnejo proces hemolize.
Indirektni Coombsov test med nosečnostjo omogoča odkrivanje prisotnosti protiteles v materinem telesu in pravočasno prepoznavanje začetni fazi preobčutljivost. Pozitiven odgovor zahteva registracijo z mesečno študijo titra protiteles in obvezno hospitalizacijo 3-4 tedne pred porodom.
REFERENCA! Nezdružljivost faktorja Rh na noben način ne vpliva na stanje matere, hemolitična bolezen se razvije le pri otroku. IN hudi primeri in če ni pravočasnega odziva, lahko plod umre v maternici ali takoj po rojstvu.
Priprava na postopek in njegovo izvedbo
Uporablja se za diagnozo venske krvi. Posebna dolgotrajna priprava na Coombsov test ni potrebna. Pred odvzemom krvi iz vene za analizo poskusite upoštevati standardna pravila:
- opustite alkohol za 3 dni, zdravila(če je možno);
- načrtujte zadnji obrok pozneje kot 8 ur pred odvzemom krvi za analizo;
- opustite kajenje, fizični, duševni in čustveni stres v 1 uri;
- Pred postopkom popijte kozarec čiste negazirane vode.
Raziskovalna metoda temelji na reakciji hemaglutinacije.
Pri izvajanju neposrednega testa vzorec krvi izpostavimo vnaprej pripravljenemu antiglobulinskemu serumu z znanimi indikatorji, zmes nekaj časa hranimo in preverimo aglutinate, ki nastanejo ob prisotnosti protiteles na eritrocitih. Raven aglutinatov se diagnosticira z uporabo aglutinacijskega titra.
Indirektni test Coombs ima podobno tehniko, vendar bolj zapleteno zaporedje dejanj. V izločeni krvni serum vbrizgamo antigene eritrocite (z Rh faktorjem) in šele po teh manipulacijah dodamo antiglobulinski serum za diagnozo in titer aglutinatov.
Rezultati raziskav
Običajno tako neposredno kot posredni Coombsov test mora dati negativen rezultat:
- negativen neposredni test kaže, da v krvi ni specifičnih protiteles proti Rh faktorju, povezanih z rdečimi krvnimi celicami, in ne morejo biti vzrok za hemolizo
- negativen indirektni test pokaže, da tudi v krvni plazmi ni prostih protiteles proti Rh faktorju; dejstvo kaže na združljivost krvi darovalca s krvjo prejemnika (ali krvjo matere in otroka) glede na Rh faktor.
Pozitiven Coombsov test kaže na Rh senzibilizacijo telesa, kar je glavni razlog Rh konflikt v primeru transfuzije krvi ali pri nošenju otroka z drugačnim Rh statusom. V tem primeru rezultati ostanejo nespremenjeni 3 mesece (življenjska doba eritrocitov). Če je vzrok postala avtoimunska hemolitična anemija, lahko pozitiven test bolnika preganja več let (v nekaterih primerih vse življenje).
REFERENCA! Antiglobulinski test je drugačen visoka občutljivost, vendar ima malo informacij. Ne registrira aktivnosti hemolitičnega procesa, ne določa vrste protiteles in ne more ugotoviti vzroka patologije. Da bi dobili popolnejšo sliko, mora lečeči zdravnik predpisati dodatne raziskave(krvna mikroskopija, splošna in biokemična analiza, revmatski testi, ESR, ravni železa in feritina).
Stopnja preobčutljivosti ima lahko kvalitativni izraz (od "+" do "++++") ali kvantitativno - v obliki napisa:
- 1: 2 - nizka vrednost, ne predstavlja nevarnosti;
- 1:4 - 1:8 - začetek razvoja imunološke reakcije; ne predstavlja nevarnosti, vendar zahteva stalno spremljanje;
- 1:16 -1:1024 - svetla oblika preobčutljivosti, ukrepati je treba takoj.
Razlog za pozitiven test je lahko:
- transfuzija netipizirane krvi (ali z napako pri tipkanju), ko se Rh faktor darovalca in prejemnika ne ujemata;
- Rhesus konflikt med nosečnostjo (če se sestava krvnih antigenov pri očetu in materi ne ujema);
- avtoimunska hemolitična anemija - prirojena (primarna) in sekundarna, ki je posledica nekaterih bolezni (Evansov sindrom, infekcijska pljučnica, sifilis, hladna hemoglobinurija, limfom);
- hemolitična reakcija na zdravilo.
Nobene od naštetih težav bolnik ne more rešiti brez zdravstvena oskrba. V vseh primerih bo potrebno nujno posvetovanje, registracija ali nujna hospitalizacija.
POZOR! V redkih primerih je možen lažno pozitiven Coombsov test. Razlog za to so lahko pogoste transfuzije krvi, pa tudi številne bolezni: revmatoidni artritis, eritematozni lupus, sarkoidoza. Tudi ta pojav lahko opazimo po odstranitvi vranice, pa tudi v primeru kršitve poteka reakcije (pogosto tresenje vsebine, prisotnost kontaminantov).
V zadnjih letih se je med bolniki različnih starosti povečalo število krvnih bolezni, za njihovo diagnozo pa različne metode in sredstva. Coombsov test je klinično preskušanje krvi, namen njegovega izvajanja pa je identificirati določene organizme, ki ogrožajo zdravje ljudi.
Protitelesa se lahko držijo in rezultat je lahko kršitev stanja imunski sistem. Neposredni Coombsov test je antiglobulinski test, ki se izvaja za odkrivanje protiteles, pritrjenih na površino rdečih krvnih celic.
Običajno se strokovnjaki zatečejo k testu protiteles v naslednjih primerih:
- Potreba po transfuziji krvi. Iz šolskega tečaja anatomije je znano, da ima lahko oseba eno od štirih krvnih skupin. Izvajanje antiglobulinskega testa vam omogoča, da ugotovite možnost transfuzije krvi v drug organizem. Lahko rečemo, da lahko bolnik postane darovalec za transfuzijo le, če njegova kri ustreza tipu bolnika, to je, da vsebuje enake antigene. V primeru, da imata pacient in darovalec razlike v antigenih, lahko to privede do uničenja transfundiranih celic s strani imunskega sistema. To lahko povzroči razvoj hude bolezni in zapleti, in celo smrt. Ravno zaradi tega razloga pomembno vlogo priloženo iskanju želeno vrsto krvi, ko je potrebna transfuzija.
- Ugotavljanje tveganja za Rh senzibilizacijo. sodobna medicina definira Rh kot antigen, njegova popolna definicija pa je pojem "Rh faktor". Zahvaljujoč Coombsovemu testu je mogoče diagnosticirati prisotnost protiteles proti Rh faktorju v krvi žensk med. V primeru, če bodoča mamica ima negativen Rh faktor in oče je pozitiven, potem lahko nerojeni otrok podeduje katerega koli od njih. Če se pri nerojenem otroku odkrije pozitiven Rh faktor, se poveča tveganje za nastanek Rh senzibilizacije - to je proces mešanja krvi in matere med nosečnostjo ali porodom.
V primeru, da obstaja nezdružljivost med skupino matere in otroka, potem imunski sistem žensko telo začne plod dojemati kot tujek in nanj izvaja vse vrste napadov. Posledica tega je lahko razvoj hude patologije pri otroku, ki se imenuje eritroblastoza. V nekaterih primerih v odsotnosti učinkovito zdravljenje smrt ploda nastopi v maternici ali takoj po rojstvu.
V nekaterih primerih se Coombsov test izvaja za odkrivanje avtoimunskih hemolitikov.
Takšna bolezen je precej redka in se kaže v tvorbi eritrocitnih antigenov lastnega telesa.
Strokovnjaki razlikujejo dve vrsti Coombsovih vzorcev, od katerih se vsak uporablja za posebne namene.
Neposredni test. Direktni test v medicinski praksi imenujemo tudi direktni antiglobulinski test in z njegovo pomočjo je mogoče diagnosticirati protitelesa, pritrjena na površino. V nekaterih primerih se proizvodnja takšnih protiteles v človeškem telesu pojavi kot posledica napredovanja različnih ali uporabe zdravil, kot so:
- kinidin
- metildop
- prokainamid
Nevarnost takšnih protiteles je v tem, da lahko povzročijo razvoj in imajo uničujoč učinek na. Včasih se uporabi Coombsov test, ko je treba ugotoviti vzroke za razvoj patologij, kot sta anemija in.
Coombsov test- analizo za odkrivanje protiteles, pritrjenih na površino ali raztopljenih v plazmi. Z njegovo pomočjo se odkrije imunizacija in protitelesa proti rdečim krvnim celicam. Drugo ime je antiglobulinski test. Zgodi se neposredno in posredno.
pri direktni antiglobulinski test zazna protitelesa, fiksirana na površini eritrocitov. Izvaja se s sumom na druge avtoimunske bolezni, po jemanju zdravil (metildopa, penicilin, kinin) in.
Eritrociti so bili senzibilizirani in vivo – protitelesa so nanje že trdno pritrjena, dodatek antiglobulinskega seruma (anti-IgG) pa povzroči slepitev senzibiliziranih celic, kar je vidno s prostim očesom.
Indirektni Coombsov test odkriva protitelesa proti eritrocitom v krvni plazmi, izvaja se pred transfuzijo krvi in med.
Protitelesa proti eritrocitom so vrsta avtoprotiteles, tj. protiteles proti lastnim tkivom. Avtoprotitelo se pojavi, ko je imunski sistem nenormalno reaktiven na določena zdravila, kot je npr visoki odmerki penicilin.
Eritrociti na svoji površini vsebujejo različne kemijske strukture(glikolipidi, saharidi, glikoproteini in proteini), v medicini imenovani antigeni. Človek od svojih staršev podeduje določen zemljevid antigenov na vsaki rdeči krvni celici.
Antigeni so združeni v skupine in poleg tega je kri razdeljena na več skupin - po sistemu AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Najbolj znana in pomembna pri delu zdravnika sta AB0 in Rh faktor (Rh).
sistem AB0
Rh-pripadnost osebe je določena s prisotnostjo teh antigenov. Posebej pomemben eritrocitni antigen je antigen D. Če je prisoten, potem govorijo o Rh pozitivna kri RhD, in če ni - približno Rh negativni Rhd.
Če se ustrezno protitelo pridruži antigenom eritrocitov, se eritrocit uniči - prišlo bo do hemoliza.
Indikacije
Glavna indikacija za neposrednoantiglobulinski test- Sum na hemolitično anemijo. Najpogosteje se izvaja s primarno avtoimunsko hemolitično anemijo, hemolizo z revmatičnim, tumorskim, nalezljive bolezni z zdravili povzročena hemoliza.
Če se anemija pojavi nekaj dni ali mesecev po transfuziji krvi ali ob dolgotrajni zlatenici pri novorojenčku, naredimo tudi neposredni Coombsov test.
posrednoopravljen antiglobulinski test pred transfuzijo krvi in med nosečnostjo Rh negativne ženske.
Avtoimunska hemolitična anemija
Avtoimunska hemolitična anemija (primarna) je klasična avtoimunska bolezen neznanih razlogov. Medsebojno delovanje znotraj imunskega sistema je moteno, kar vodi v dojemanje lastnih eritrocitov kot tujkov. V bezgavkah se sintetizirajo protitelesa razreda IgG (reagirajo pri t 37 ° C) in / ali IgM (pri t 40 ° C), ki, ko se pritrdijo na površino eritrocita, sprožijo številne encime (t sistem komplementa) in »preluknjajo« steno eritrocita, kar vodi do njegovega uničenja – hemolize.
Prvi simptomi so posledica uničenja rdečih krvnih celic in znižanja hemoglobina. Med njimi:
- utrujenost, splošna šibkost, razdražljivost
- dispneja
- bolečine v trebuhu in prsih, slabost
- temna barva urina
- bolečine v hrbtu
- ikterična obarvanost kože in sluznic
- zmanjšanje števila eritrocitov in
pozitiven neposredni rezultat Coombsov test 100% potrjuje diagnozo avtoimunske hemolitične anemije in dokazuje njen avtoimunski izvor. Hkrati negativni rezultat ne omogoča odstranitve diagnoze.
Sekundarna hemolitična anemija
Sekundarna avtoimunska hemolitična anemija in pozitiven Coombsov test sta lahko pri naslednjih boleznih:
- Evansov sindrom
- okužba s pljučnico
Pozitiven antiglobulinski test pri teh boleznih je eden od simptomov, ne pa diagnostični kriterij.
Hemolitična bolezen novorojenčka
Vzrok hemolitična bolezen novorojenčka nezdružljivost krvne skupine pri materi in plodu, v večini primerov po sistemu Rh, v posameznih primerih - po sistemu AB0, kazuistično - po drugih antigenih.
Rh-konflikt se razvije, če je pri Rh-negativni ženski plod od očeta podedoval Rh-pozitivno kri.
Bolezen pri novorojenčku se razvije le, če je mati že razvila protitelesa proti ustreznim antigenom, kar se zgodi po prejšnjih nosečnostih, splavih, transfuzijah nezdružljive krvi. večina pogost vzrok sprožitev sinteze protiteles proti antigenom membrane eritrocitov - porod (feto-maternalna krvavitev). Prvi porodi praviloma potekajo brez zapletov, naslednji porodi pa so obremenjeni s hemolitično boleznijo novorojenčka v prvih dneh po rojstvu.
Simptomi hemolitične bolezni novorojenčka:
- porumenelost kože
- , in sluznico
- povečanje jeter in vranice
- motnje dihanja
- otekanje celega telesa
- vzbujanje in postopna depresija centralnega živčnega sistema
Anemija po transfuziji krvi
Indirektni Coombsov test opravimo pred transfuzijo krvi za oceno kompatibilnosti, neposredni Coombsov test pa po njej, če sumimo na potransfuzijsko hemolizo, tj. če imate simptome, kot so vročina, solzenje (preberite spodaj). Namen testa je odkriti protitelesa proti transfundiranim eritrocitom, ki so se vezala na prejemnikove eritrocite in so vzrok za posttransfuzijsko hemolizo ter prezgodnjo odstranitev darovalcev eritrocitov iz prejemnikovega (prejemnikovega) obtoka.
Simptomi:
- zvišanje telesne temperature
- izpuščaj na koži
- bolečine v hrbtu
- rdeča
- slabost
- omotica
Dešifriranje
Treba je spomniti, da so osnovna pravila za dekodiranje neposrednih in posrednih antiglobulinskih testov enaka. Razlika je le v lokaciji protiteles – v krvi ali že na eritrocitu.
- če direktni Coombsov test je negativen- pomeni, da se protitelo ne “usede” na eritrocite in je treba vzrok za simptome iskati naprej in opraviti indirektni Coombsov test
- če se odkrije pozitiven rezultat Coombsovega testa po transfuziji krvi, okužbah, zdravilih - pozitivnost traja do 3 mesece (življenjska doba eritrocitov 120 dni - 3 mesece)
- pozitiven rezultat antiglobulinskega testa avtoimunska bolezen traja več mesecev in celo let
Norma
- direktni Coombsov test - negativen
- indirektni Coombsov test - negativen
Kvalitativno se pozitiven rezultat meri v številu plusov od ena do štiri (+, ++, +++, ++++), kvantitativno pa v digitalni obliki - 1:16, 1:256 itd.
Slabosti antiglobulinskega testa
- ne more določiti vezavne moči antigena na protitelo
- neznano število vezanih protiteles
- ne določa vrste protiteles
- pozitiven Coombsov test ne bo pomagal ugotoviti njenega vzroka
- 0,5% zdravi ljudje imajo pozitiven vzorec Coombs brez znakov hemolitične anemije
- ni primeren za spremljanje uspešnosti zdravljenja, saj ne kaže na aktivnost hemolize eritrocitov
Dodatne raziskave
- krvni test za
- mikroskopija krvnega razmaza
- — ( , ), ( , )
- — 2. Pred 5-10-20 leti sem imel transfuzijo krvi, ali naj o tem povem zdravniku zdaj pred novo transfuzijo krvi?
ja Dejstvo, da ste prejeli transfuzijo krvi, mora biti znano vašemu zdravniku, saj to zdaj vpliva na pravilno razlago rezultatov preiskave. Pri prejemu tuje (čeprav večkrat testirane krvi) vedno obstaja možnost, da vaše telo razvije protitelesa proti transfuzirani krvi. Prav ta protitelesa bodo slab vpliv o zdravstvenem stanju. Pri kasnejših transfuzijah krvi mora zdravnik vedeti, da ste transfuzijo že prejeli, kar pomeni, da je bil čas za sintezo protiteles. Za nosečnice te informaciješe bolj relevantno.
3. Ali bodo vsi otroci bolni, če pride do neskladja Rh faktorja med materjo in otrokom?
Odvisno od tega, ali je otrok Rh-pozitiven ali negativen (RhD). Nosilci krvnih skupin I, II, III in IV so lahko Rh-pozitivni in negativni. V primeru, ko je mati Rh-negativna, otrok pa Rh-pozitiven, bodo protitelesa nastala že s prvo nosečnostjo, vendar šele po prvem porodu (ali prekinitvi nosečnosti) pride do neposrednega stika med krvjo mati in otrok. Izvajanje hemolitičnega učinka protiteles bo šele z drugo in naslednje rojstvo vodi do hemolitične bolezni pri novorojenčku.
Vsaka ženska z negativni Rh faktor je treba skrbno pregledati med nosečnostjo in po porodu preventivno zdravljenje za preprečitev pojava protiteles in nadaljnjih zapletov.
4. Ali je med nosečnostjo potrebno poznati krvno skupino moža pred izvedbo Coombsovega testa?
Med nosečnostjo je treba ne samo poznati, ampak tudi preveriti krvno skupino biološkega očeta otroka.
podatki
- prvič predlagan v Cambridgeu leta 1945
- prag občutljivosti - vsaj 300 fiksiranih molekul protiteles na enem eritrocitu
- število protiteles, ki sprožijo hemolizo - individualno za vsako osebo (od 16-30 do 300)
- dinamiko drugih laboratorijski indikatorji hemolitična anemija (hemoglobin, bilirubin, retikulociti) se lahko vrne v normalno stanje, Coombsov test pa ostane na isti ravni
Coombsov test je nazadnje spremenil: 16. marec 2018 avtor Marija Bodjan
Aglutinacijska reakcija za določanje anti-Rhesus protiteles (indirektna Coombsova reakcija)uporabiti pri bolnikih z intravaskularno hemolizo. Pri nekaterih od teh bolnikov najdemo protitelesa proti rezusu, ki so nepopolna, monovalentna. Posebej interagirajo z Rh-pozitivnimi eritrociti, vendar ne povzročajo njihove aglutinacije. Prisotnost takšnih nepopolnih protiteles ugotavljamo v indirektni Coombsovi reakciji. Da bi to naredili, sistemu anti-Rhesus protitelesa + Rh-pozitivni eritrociti dodamo antiglobulinski serum (protitelesa proti človeškim imunoglobulinom), kar povzroči aglutinacijo eritrocitov. Z uporabo Coombsove reakcije se diagnosticirajo patološka stanja, povezana z intravaskularno lizo eritrocitov imunskega izvora, na primer hemolitična bolezen novorojenčka: eritrociti Rh-pozitivnega ploda se združijo z nepopolnimi protitelesi proti Rh faktorju, ki kroži v krvi, ki prečka posteljica Rh-negativne matere.
Mehanizem. Težave pri odkrivanju nepopolnih (monovalentnih) protiteles so posledica dejstva, da ta protitelesa, ko se vežejo na epitope specifičnega antigena, ne tvorijo mrežaste strukture, reakcije med antigeni in protitelesi pa ne zaznamo z aglutinacijo, precipitacijo oz. drugi testi. Za identifikacijo nastalih kompleksov antigen-protitelo je treba uporabiti dodatne testne sisteme. Za odkrivanje nepopolnih protiteles, na primer proti Rh antigenu eritrocitov v krvnem serumu nosečnice, se reakcija izvede v dveh stopnjah: 1) eritrociti, ki vsebujejo Rh antigen, se dodajo dvakratnim razredčitvam testnega seruma. in hranimo pri 37 ° C eno uro; 2) eritrocitom, temeljito opranim po prvi stopnji, dodamo kunčji antihumani antiglobulinski serum (v predhodno titrirani delovni razredčini). Po inkubaciji 30 minut pri 37 °C se rezultati ocenijo glede na prisotnost hemaglutinacije (pozitivna reakcija). Potrebno je nadzorovati sestavine reakcije: 1) antiglobulinski serum + eritrociti, očitno senzibilizirani s specifičnimi protitelesi; 2) eritrociti, obdelani z normalnim serumom + antiglobulinski serum; 3) Rh negativni eritrociti obdelani s testnim serumom + antiglobulinski serum.
50. Reakcija pasivne hemaglutinacije. Mehanizem. Komponente. Aplikacija.
Reakcija indirektne (pasivne) hemaglutinacije(RNGA, RPGA) temelji na uporabi eritrocitov (ali lateksa) z adsorbiranimi antigeni ali protitelesi na njihovi površini, katerih interakcija z ustreznimi protitelesi ali antigeni krvnega seruma bolnikov povzroči, da se eritrociti zlepijo in izpadejo na dno. cev ali celica v obliki nazobčane usedline.
Komponente. Za proizvodnjo RNHA se lahko uporabijo eritrociti ovc, konj, zajcev, kokoši, miši, ljudi in drugih, ki jih poberejo za prihodnjo uporabo, obdelajo s formalinom ali glutaraldehidom. Adsorpcijska sposobnost eritrocitov se poveča, če jih obdelamo z raztopinami tanina ali kromovega klorida.
Kot antigeni v RNGA lahko služijo polisaharidni antigeni mikroorganizmov, izvlečki bakterijskih cepiv, antigeni virusov in rikecij ter druge snovi.
Eritrocite, senzibilizirane z AG, imenujemo eritrocitni diagnostiki. Za pripravo eritrocitnega diagnostika se najpogosteje uporabljajo ovčji eritrociti, ki imajo visoko adsorbcijsko aktivnost.
Aplikacija. RNHA se uporablja za diagnosticiranje nalezljivih bolezni, določanje gonadotropnega hormona v urinu ob ugotovitvi nosečnosti, za odkrivanje preobčutljivosti na zdravila, hormone in v nekaterih drugih primerih.
Mehanizem. Reakcija posredna hemaglutinacija(RNGA) ima bistveno večjo občutljivost in specifičnost kot reakcija aglutinacije. Uporablja se za identifikacijo patogena po njegovi antigenski strukturi ali za indikacijo in identifikacijo bakterijskih produktov - toksinov v proučevanem patološkem materialu. V skladu s tem se uporabljajo standardni (komercialni) diagnostiki eritrocitnih protiteles, pridobljeni z adsorpcijo specifičnih protiteles na površino taniziranih (s taninom obdelanih) eritrocitov. Zaporedne razredčitve preskusnega materiala pripravimo v vdolbinicah plastičnih plošč. Nato v vsako vdolbinico dodamo enak volumen 3 % suspenzije eritrocitov, napolnjenih s protitelesi. Če je potrebno, reakcijo postavimo vzporedno v več vrstic vdolbinic z eritrociti, napolnjenimi s protitelesi različnih skupin specifičnosti.
Po 2 urah inkubacije pri 37 ° C se rezultati upoštevajo in ocenijo videz usedlina eritrocitov (brez stresanja): z negativno reakcijo se na dnu vdolbinice pojavi oborina v obliki kompaktnega diska ali obroča, z pozitivna reakcija- značilna čipkasta usedlina eritrocitov, tanek film z neenakomernimi robovi.
