Mikroskopu ištirkite nuolatinį mikropreparatą – varlės kraują mažu ir dideliu mikroskopo padidinimu. Regėjimo lauke matomos atskiros taisyklingos ovalo formos ląstelės su vienalyte intensyviai rausvos spalvos citoplazma. Ląstelės centre pastebimas mėlynai violetinis, pailgas branduolys. Regėjimo lauke yra didesnės sferinės ląstelės – leukocitai su šviesia citoplazma, su sferiniais arba skilteliniais branduoliais.
Ištirkite gatavą nudažytą varlės kraujo preparatą mažu ir dideliu padidinimu. Visas matymo laukas yra padengtas ląstelėmis. Didžiąją dalį ląstelių sudaro eritrocitai ovalo formos, rausva citoplazmos spalva ir pailgas mėlynas branduolys violetinė. Tarp eritrocitų kartais randama leukocitų. Jie skiriasi nuo eritrocitų apvalia forma ir branduolio sandara, kuris yra padalintas į segmentus (neutrofilus) arba turi apvali forma(limfocitai). Atkreipkite dėmesį, kad gyvūnų ląstelėse, skirtingai nei augalų ląstelėse, ląstelių sienelės yra beveik nematomos.
Norėdami nubrėžti eskizą, pasirinkite preparato skyrių, kuriame ląstelių elementai nėra taip tankiai.
Nubraižykite kai kuriuos eritrocitus.
Padarykite užrašus:
Eritrocitas.
Lukštas.
Šerdis.
Citoplazma.
4. Žmogaus kraujo ląstelės
Žmogaus kraujo tepinėlis. Apsvarstykite galimybę naudoti nuolatinį mikropreparatą mažu ir dideliu padidinimu. Bespalvės plazmos fone matomi rausvi, sferiniai eritrocitai, turintys apvalių, abipus įgaubtų, 6–7, 5–8 mikrometrų skersmens diskų formą. Branduolio nėra visų žinduolių eritrocituose. Leukocitai randami rečiau. Jie turi purpurinius įvairių formų branduolius, didesnius nei raudonieji kraujo kūneliai.
Nubrėžkite keletą langelių.
Padarykite užrašus:
Eritrocitai.
Leukocitai.
Plazma yra neląstelinė struktūra.
2 pratimas
Tema:
Citoplazminių membranų sandara ir funkcijos. Medžiagų pernešimas per membraną.
2. Mokymosi tikslai:
Žinoti universalios biologinės membranos sandarą; pasyvaus ir aktyvaus medžiagų transportavimo per membranas modeliai;
Gebėti atskirti transporto rūšis;
Įvaldykite laikinųjų mikropreparatų ruošimo techniką.
3. Klausimai, kaip savarankiškai pasirengti įsisavinti šią temą:
Eukariotinės ląstelės sandara.
Idėjų apie ląstelės membranos struktūrą raidos istorija.
Molekulinė organizacija citoplazminė membrana(Danieli ir Dawson, Lenard modeliai (mozaika).
Šiuolaikinis skysčio mozaikinis ląstelės membranos struktūros modelis, kurį sukūrė Lenardas-Singer-Nicholson.
Ląstelės membranos cheminė sudėtis.
Membranos funkcijos.
Pasyvus medžiagų pernešimas per membraną: osmosas, paprasta difuzija, palengvinta difuzija.
aktyvus transportas. Natrio-kalio siurblio veikimo principas.
Endocitozė. fagocitozės stadijos. Pinocitozė.
Egzocitozė.
4. Pamokos tipas: laboratorija – praktinė.
5. Pamokos trukmė– 3 valandos (135 minutės).
6. Įranga.
Lentelės: Nr. 11 „Citoplazminės membranos modeliai“; Nr.12 „Skystas-mozaikinis membranos modelis“, mikroskopai, stikleliai ir dengiamieji stikleliai, kūgiai su 0,9% ir 20% NaCl tirpalais, pipetės, filtravimo popieriaus juostelės, distiliuotas vanduo, elodėjos šakelės.
7.1. Pradinio žinių ir įgūdžių lygio kontrolė.
Testo užduočių vykdymas.
7.2. Pagrindinių klausimų, reikalingų įsisavinant pamokos temą, analizė su mokytoju.
7.3. Mokytojo praktinių technikų metodikos demonstravimas šia tema .
Mokytojas supažindina mokinius su dirigavimo planu ir metodais praktinis darbas.
7.4. Savarankiškas mokinių darbas vadovaujant mokytojui
Praktinis darbas
1. Elodėjos lapų ląstelės struktūra
Medžiaga ir įranga: mikroskopai, stikleliai ir dengiamieji stikleliai, distiliuotas vanduo, pipetės, filtravimo popieriaus juostelės, elodėjos šakelės, lentelės.
Tiriami objektai: Elodea.
Praktinio darbo tikslas: Ištirkite augalo ląstelės struktūrą ir raskite skirtumus nuo gyvūninės ląstelės
Pincetu ir žirklėmis nuo elodėjos šakelės nupjaukite 4-5 mm dydžio lapo gabalėlį, padėkite ant stiklelio į vandens lašelį, uždenkite dengiamuoju stikleliu ir apžiūrėkite preparatą mažu ir dideliu padidinimu. mikroskopu. Elodea lapas susideda iš 2 ląstelių sluoksnių, todėl jį tyrinėjant reikia pasukti mikrometro varžtą, kad aiškiai matytumėte viršutinį arba apatinį sluoksnį. Elodea ląstelės beveik stačiakampio formos, turi tankius lukštus. Tarp atskirų ląstelių membranų pastebimi siauri tarpląsteliniai praėjimai. Ląstelių branduoliai nėra matomi, nes nedažytoje ląstelėje branduolio ir citoplazmos lūžio rodikliai yra beveik vienodi. Ląstelių citoplazmoje yra žali suapvalinti plastidai - chloroplastai. Chloroplastai užmaskuoja branduolį ir juos sunku aptikti ląstelėje. Šviesesnė erdvė citoplazmoje yra vakuolės, užpildytos ląstelių sultimis. Esant aukštesnei nei 10 °C temperatūrai Elodea ląstelėse, galima pastebėti citoplazmos judėjimą šalia ląstelės membranos, išilgai žaliųjų plastidų judėjimo išilgai ląstelės sienelių. Jei plastidas nejuda, tai gali atsirasti supjaustant lapą į mažus gabalėlius arba į vandenį įlašinus kelis lašus alkoholio.
Mikroskopu nubraižykite 3-4 elodėjos lapo ląsteles dideliu padidinimu.
Padarykite užrašus:
apvalkalas,
citoplazma,
3. Chloroplastai,
4. Vakuolės su ląstelių sultimis.
Kraujas - jungiamasis audinys, kuri atlieka keletą gyvybiškai svarbių funkcijų, iš kurių viena yra perdavimas maistinių medžiagų, medžiagų apykaitos produktai ir dujos. Varlės kraujo tepinėlis yra preparatas, kurį panardinus galima tirti padidinus maždaug 15 kartų.
Kraujas susideda iš plazmos ir joje suspenduotų ląstelių – eritrocitų, turinčių hemoglobino ir turinčių branduolį, bei leukocitų.
Ant kraujo tepinėlio mikropreparato matoma plazma ir kraujo ląstelės: eritrocitai, leukocitai ir trombocitai.
1. Varlių eritrocitai, skirtingai nei žmogaus eritrocitai, yra branduoliniai, be to, turi ovalo formą. Ši funkcija yra susijęs su žmogaus eritrocitų pernešamo hemoglobino kiekiu – abipus įgaubtas paviršius ir branduolio nebuvimas padidina plotą, kurį gali užimti deguonies molekulės.
Varlių eritrocitai gana dideli – iki 22,8 mikronų skersmens, nusidažę ant preparato m. rausva spalva. Tyrimo metu galima nustatyti, kad bendras šių kraujo ląstelių skaičius yra nedidelis – 1 mm3 jų yra ne daugiau kaip 0,33 – 0,38 mln.. Lyginant su eritrocitų kiekiu 1 mm3 žmogaus kraujo (apie 5 mln.), galima pastebėti, kad varliagyviams deguonies reikia daug mažiau nei žinduoliams. To priežastys - papildoma galimybė deguonies absorbcija varliagyvių odos paviršiuje ir mažas jo poreikis dėl poikilotermijos.
Varlių eritrocitų skersinė ašis – 15,8 μ, išilginė – 22,8 μ.
2. Leukocitai varlės kraujyje.
Leukocitai skirstomi į granulocitus, kuriuose yra granulių – grūdus ir agranulocitus. Granulocitams priklauso eozinofilai, neutrofilai, bazofilai, agranulocitai – monocitai ir limfocitai.
Bendras leukocitų skaičius 1 mm3 kraujo yra 6 - 25 tūkst.. Jie išoriškai panašūs į panašias žmogaus, vištų ir arklių kraujo ląsteles. Neutrofilai turi segmentuotą branduolį ir šviesiai rausvą citoplazmą, kurioje yra mažų rausvų granulių. Preparate esantys neutrofilai turi pastebimą segmentuotą branduolį ir šviesiai rausvą citoplazmą. Jų kiekis bendrame leukocitų skaičiuje yra ne didesnis kaip 17%.
Eozinofilai pastebimi dideliais ryškios plytos spalvos grūdeliais ir mažu branduoliu, suskirstytu į 2-3 segmentus. Bendras eozinofilų skaičius sudaro ne daugiau kaip 7% visų leukocitų.
Bazofilai varlės kraujo preparate yra reti (ne daugiau kaip 2% viso), išsiskiria dideliais ryškiai violetiniais grūdeliais ir dideliu branduoliu.Daugiausia leukocitų priklauso limfocitams (iki 75,2%). Preparate jie išskiriami dėl didelio branduolio ir siauro citoplazmos sluoksnio, nudažyto šviesiai mėlyna spalva. būdingas bruožasšių kraujo kūnelių yra pseudopodai – citoplazmos ataugos, kurių pagalba jie juda.
Varlių monocitai turi bazofilinę citoplazmą, nudažytą švelniai pilka arba alyvine spalva. Branduolys gali turėti ataugų arba, atvirkščiai, įdubusias vietas.
Trombocitai yra ląstelės, turinčios branduolį, labai panašios į vištienos trombocitus.
Mikroskopu ištirkite nuolatinį mikropreparatą – varlės kraują mažu ir dideliu mikroskopo padidinimu. Regėjimo lauke matomos atskiros taisyklingos ovalo formos ląstelės su vienalyte intensyviai rausvos spalvos citoplazma.
Ląstelės centre pastebimas mėlynai violetinis, pailgas branduolys. Regėjimo lauke yra didesnės sferinės ląstelės – leukocitai su šviesia citoplazma, su sferiniais arba skilteliniais branduoliais.
Ištirkite gatavą nudažytą varlės kraujo preparatą mažu ir dideliu padidinimu. Visas matymo laukas yra padengtas ląstelėmis. Didžiąją dalį ląstelių sudaro eritrocitai, turintys ovalo formą, rausvą citoplazmos spalvą ir pailgą mėlynai violetinį branduolį. Tarp eritrocitų kartais randama leukocitų. Jie skiriasi nuo eritrocitų apvalia forma ir branduolio sandara, kuris yra padalintas į segmentus (neutrofilai) arba turi apvalią formą (limfocitai). Atkreipkite dėmesį, kad gyvūnų ląstelėse, skirtingai nei augalų ląstelėse ląstelių sienelės beveik nematomas.
Norėdami nubrėžti eskizą, pasirinkite preparato skyrių, kuriame ląstelių elementai nėra taip tankiai.
Nubraižykite kai kuriuos eritrocitus.
4. Žmogaus kraujo ląstelės
Žmogaus kraujo tepinėlis. Apsvarstykite galimybę naudoti nuolatinį mikropreparatą mažu ir dideliu padidinimu. Bespalvės plazmos fone matomi rausvi, sferiniai eritrocitai, turintys apvalių, abipus įgaubtų, 6–7, 5–8 mikrometrų skersmens diskų formą. Branduolio nėra visų žinduolių eritrocituose. Leukocitai randami rečiau. Jie turi purpurinius įvairių formų branduolius, didesnius nei raudonieji kraujo kūneliai.
Nubrėžkite keletą langelių.
Plazma yra neląstelinė struktūra.
2 pratimas
Citoplazminių membranų sandara ir funkcijos. Medžiagų pernešimas per membraną.
2. Mokymosi tikslai:
Žinokite universalo struktūrą biologinė membrana; pasyvaus ir aktyvaus medžiagų transportavimo per membranas modeliai;
Gebėti atskirti transporto rūšis;
Įvaldykite laikinųjų mikropreparatų ruošimo techniką.
3. Klausimai, kaip savarankiškai pasirengti įsisavinti šią temą:
Eukariotinės ląstelės sandara.
Idėjų apie ląstelės membranos struktūrą raidos istorija.
Citoplazminės membranos molekulinė organizacija (Danieli ir Dawson, Lenard modeliai (mozaika).
Šiuolaikinis skysčio mozaikinis ląstelės membranos struktūros modelis, kurį sukūrė Lenardas-Singer-Nicholson.
Ląstelės membranos cheminė sudėtis.
Pasyvus medžiagų pernešimas per membraną: osmosas, paprasta difuzija, palengvinta difuzija.
aktyvus transportas. Natrio-kalio siurblio veikimo principas.
Endocitozė. fagocitozės stadijos. Pinocitozė.
4. Pamokos tipas: laboratorinė – praktinė.
5. Pamokos trukmė 3 valandos (135 min.).
6. Įranga.
Lentelės: Nr. 11 „Citoplazminės membranos modeliai“; Nr.12 „Skystas-mozaikinis membranos modelis“, mikroskopai, stikleliai ir dengiamieji stikleliai, kūgiai su 0,9% ir 20% NaCl tirpalais, pipetės, filtravimo popieriaus juostelės, distiliuotas vanduo, elodėjos šakelės.
7.1. Pradinio žinių ir įgūdžių lygio kontrolė.
Testo užduočių vykdymas.
7.2. Pagrindinių klausimų, reikalingų įsisavinant pamokos temą, analizė su mokytoju.
7.3. Mokytojo praktinių technikų metodikos demonstravimas šia tema.
Mokytojas supažindina mokinius su praktinio darbo atlikimo planu ir metodika.
7.4. Savarankiškas mokinių darbas vadovaujant mokytojui
1. Elodėjos lapų ląstelės struktūra
Medžiaga ir įranga: mikroskopai, stikleliai ir dengiamieji stikleliai, distiliuotas vanduo, pipetės, filtravimo popieriaus juostelės, elodėjos šakelės, lentelės.
Tiriami objektai: elodea.
Praktinio darbo tikslas: Ištirti augalo ląstelės sandarą ir rasti skirtumus nuo gyvūninės ląstelės
Pincetu ir žirklėmis nuo elodėjos šakelės nupjaukite 4-5 mm dydžio lapo gabalėlį, padėkite ant stiklelio į vandens lašelį, uždenkite dengiamuoju stikleliu ir apžiūrėkite preparatą mažu ir dideliu padidinimu. mikroskopą. Elodėjos lapas susideda iš 2 ląstelių sluoksnių, todėl jį tyrinėjant reikia pasukti mikrometro varžtą, kad aiškiai matytumėte viršutinį arba apatinį sluoksnį. Elodea ląstelės yra beveik stačiakampio formos, turi tankius apvalkalus. Tarp atskirų ląstelių membranų pastebimi siauri tarpląsteliniai praėjimai. Ląstelių branduoliai nėra matomi, nes nedažytoje ląstelėje branduolio ir citoplazmos lūžio rodikliai yra beveik vienodi. Ląstelių citoplazmoje yra žali suapvalinti plastidai - chloroplastai. Chloroplastai užmaskuoja branduolį ir juos sunku aptikti ląstelėje. Šviesesnė erdvė citoplazmoje yra vakuolės, užpildytos ląstelių sultimis. Esant aukštesnei nei 10 °C temperatūrai Elodea ląstelėse, galima pastebėti citoplazmos judėjimą šalia ląstelės membranos, išilgai žaliųjų plastidų judėjimo išilgai ląstelės sienelių. Jei plastidas nejuda, tai gali atsirasti supjaustant lapą į mažus gabalėlius arba į vandenį įlašinus kelis lašus alkoholio.
Mikroskopu nubraižykite 3-4 elodėjos lapo ląsteles dideliu padidinimu.
Biologijos pamoka tema „Eritrocitai ir leukocitai“. 8 klasė
Pamokos tikslas: išsiaiškinti eritrocitų ir leukocitų sandaros ir funkcijų ryšį.
- Mokomasis – apibendrinti mokinių žinias apie vidinę aplinką ir jos santykinį pastovumą: atskleisti raudonųjų kraujo kūnelių sandaros ypatumus.
- Tobulinimas – tęsti įgūdžių formavimąsi nustatyti ryšį tarp organų sandaros ir funkcijų. vystytis pažintinis susidomėjimas gebėjimas lyginti ir apibendrinti.
- Ugdomasis – Formuoti rūpestingą požiūrį į savo sveikatą, skatinti tobulėjimą sveika gyvensena gyvenimą.
Įranga: tab. „Kraujas“, varlių ir žmonių kraujo mikrosklides, mikroskopai.
Sveiki vaikinai, labai džiaugiuosi galėdamas jus pasveikinti.
II. Apžiūra namų darbai. (priekinė apklausa)
Trijų rūšių skysčiai vidinė aplinka organizmas? (kraujas, limfa. audinių skystis)
Apibrėžkite, kas yra kraujas? Limfa? audinių skystis?
Užpildykite diagramą apie žmogaus kūno kraujo sudėtį.
III. Naujos medžiagos mokymasis.
Eritrocitai yra ląstelės, turinčios pastovią formą, būtent abipus įgaubtų diskų formą. Brandžiuose eritrocituose trūksta branduolio. Jie praranda jį vystymosi procese iš pirmtakų ląstelės - eritroblasto. Raudonieji kraujo kūneliai gaminami raudonuosiuose kaulų čiulpuose. Raudonieji kraujo kūneliai turi raudoną spalvą, nes hemoglobinas, raudonasis pigmentas, yra po plona membrana, o raudonųjų kraujo kūnelių funkcija yra susijusi su jo savybėmis.
Paprastai 1 kubiniame mm kraujo yra iki 5 milijonų raudonųjų kraujo kūnelių. Eritrocitas gyvena iki 120 dienų. Sunaikinta blužnyje.
Hemoglobinas yra sudėtingas kraujo baltymas. Jis yra raudonuosiuose kraujo kūneliuose - eritrocituose. Hemoglobino sudėtyje yra geležies jonų, apsuptų baltymo, vadinamo globinu. Jis organizme atsiranda šiomis cheminėmis formomis:
- oksihemoglobinas – hemoglobino ir deguonies junginys, pernešantis deguonį iš plaučių į kitus organus;
- deoksihemoglobinas - hemoglobino forma, kurioje jis gali prijungti kitas medžiagas;
- karboksihemoglobinas – hemoglobino ir anglies dioksido junginys, dėl kurio dalis organizmo anglies dvideginio patenka į plaučius;
- methemoglobinas – forma su labiau oksiduotu geležies jonu, susidaro apsinuodijus toksinėmis medžiagomis.
Leukocitų struktūra ir funkcijos. (mokytojo pasakojimas, 3 priedas)
Leukocitai gavo savo pavadinimą iš graikų kalbos. “ leukos"Balta, bespalvė". Tai didžiausios kraujo ląstelės. Jų dydis svyruoja nuo 8 iki 20 mikronų, jie turi sferinę formą ir branduolį, gali būti nepriklausomi aktyvus judėjimas, einantis už laivų. Leukocitai skirstomi į dvi pagrindines grupes: granulocitai(granuliuotas) – neutrofilai, eozinofilai, bazofilai) ir agranulocitai(negranuliuotas) – monocitai ir limfocitai.
Daugumos baltųjų kraujo kūnelių gyvenimo trukmė yra kelios dienos ar savaitės, tačiau kai kurios gali gyventi iki 10 metų. Leukocitai, kaip ir eritrocitai, susidaro raudonuosiuose kaulų čiulpuose ir limfmazgiuose, praeinantys visus brendimo etapus. Šis procesas yra sudėtingas ir jį gali sutrikdyti radiacijos poveikis arba cheminiai veiksniai.
Ar tu žinai. (Studento žinutė)
- . kad kraujas yra nuostabiausias mūsų kūno audinys, kraujyje plūduriuojančius kūnus pirmasis atrado italų anatomas M. Malpighi. Jis juos supainiojo su riebalų kamuoliukais. O kraujo kamuoliukais juos vadino tik olandas A. Livengukas. Vėliau jie buvo teisingai vadinami kraujo kūneliais.
- . kad vyrų organizme yra apie 5 litrus kraujo, o moterų – apie 4 litrus. Ramybės būsenoje jis pasiskirsto taip: ketvirtadalis viso tūrio yra raumenyse, kitas ketvirtadalis inkstuose, 15% žarnyno sienelių kraujagyslėse, 10% kepenyse, 8% smegenyse, 4%. širdies vainikinėse kraujagyslėse, 13 % - plaučių ir kitų organų kraujagyslėse.
- . kad raudona kraujo spalva suteikia geležį, kuri yra hemoglobino dalis (5 litruose kraujo yra 3 g geležies). Daug cheminiai junginiai, kurių sudėtyje yra geležies oksido, įgauna raudoną spalvą. Visų stuburinių gyvūnų, taip pat sliekų, dėlių ir kai kurių moliuskų kraujo hemoglobine yra geležies oksido.
- . kad kai kurie jūriniai kirminai turi chlorokruoriną vietoj hemoglobino. Jame yra geležies, todėl jų kraujas yra žalias. At vėžiai, skorpionų, vorų, aštuonkojų ir sepijų kraujas yra mėlynas. Vietoj hemoglobino jame yra hemocianino, kurio sudėtyje yra vario.
- . kad suaugusiam žmogui kas valandą miršta 5 milijardai raudonųjų kraujo kūnelių, 5 milijardai baltųjų kraujo kūnelių ir 2 milijardai trombocitų. Kraujo ląstelių žūties vieta: kepenys ir blužnis, o leukocitai taip pat yra uždegiminio proceso vietos.
IV. Tirtos medžiagos apie kraujo kūnelius konsolidavimas.
Laboratoriniai darbai“ Mikroskopinė struktūra kraujas“.
1. Paruoškite mikroskopą darbui.
2. Po mikroskopu padėkite žmogaus kraujo mikropreparatą.
3. Apsvarstykite, suraskite raudonųjų kraujo kūnelių. (2 priedas)
4. Dabar po mikroskopu padėkite varlės kraujo stiklelį. Kuo jie skiriasi nuo žmogaus raudonųjų kraujo kūnelių? (1 priedas)
5. Kieno kraujo raudonieji kraujo kūneliai – žmogaus ar varlės – geba pernešti daugiau deguonies. Paaiškinkite priežastį.
6. Užrašykite išvadą: „Stuburinių gyvūnų eritrocitų evoliucija ėjo ta kryptimi. “.
Varlės leukocitai po mikroskopu
Išmokite atskirti žmogaus kraujo tepinėlius formos elementai.
suaugusiųjų kraujo tepinėlis
Varlės kraujo tepinėlis
raudonos spalvos dėmė kaulų čiulpai
1. Apsvarstykite paruošimą 1. Žmogaus kraujo tepinėlis (2.4, 2.5 pav.). Dažymas žydra II ir eozinu.
Esant mažam padidinimui, atkreipkite dėmesį į skirtingas eritrocitų ir leukocitų spalvas. Raudonieji kraujo kūneliai yra daugiausia kraujo kūnelių ir jie sudaro didžiąją dalį tepinėlyje.
Padidinus mikroskopą, randami eritrocitai (2.4 pav.), nudažyti eozinu rausvai. Atkreipkite dėmesį, kad eritrocituose periferinė dalis yra intensyviau dažoma, o centrinė sritis yra blyški. Taip yra dėl to, kad eritrocitas turi abipus įgaubto disko formą.
Matymo lauke raskite neutrofilinį segmentuotą leukocitą (2.4 pav.). Neutrofilo citoplazma yra šviesiai alyvinės arba mėlynos spalvos, granuliuota, joje yra tamsių azurofilinių granulių, kurios yra pirminės lizosomos. Branduolys yra skiltinis (nuo 3 iki 5 segmentų, sujungtų plonais "tiltais"), nudažytas violetine spalva.
Ant tepinėlio raskite eozinofilinį leukocitą (2.4 pav.). Ląstelės branduolys dažniausiai yra dvisluoksnis, o citoplazma užpildyta didelėmis eozinofilinėmis (tamsiai rožinėmis) specifinėmis tokio paties dydžio granulėmis.
Bazofiliniai granulocitai yra reti. Jiems būdinga didelė granuliuota violetinė spalva (2.4 pav.). Bazofilų branduolys dažniausiai yra reniformas, dviburkis, dažnai nepastebimas dėl granulių gausos ir silpno dažymo.
Matymo lauke raskite limfocitą ir monocitą. Limfocitai turi suapvalintą tankų branduolį su siauru citoplazmos kraštu (2.5 pav.). Monocitus lengviau rasti tepinėlio periferijoje. Tai didelės ląstelės su plačia citoplazma. mėlyna spalva(2.6 pav.). Branduolio forma yra pasagos arba dviburkė, nusidažo silpniau nei limfocituose, todėl jame gerai matomi branduoliai.
Trombocitai yra mažo dydžio (3 kartus mažesni už eritrocitus), išsidėstę nedidelėmis grupėmis tarp ląstelių ir turi švelniai violetinę spalvą.
2. Nubraižykite ir pažymėkite: 1) eritrocitus; 2) neutrofilinis segmentuotas leukocitas; 3) eozinofilinis leukocitas; 4) bazofilinis leukocitas; 5) limfocitų; 6) monocitas. Išskirkite branduolį, citoplazmą, granules granulocituose. Agranulocituose nurodykite branduolį, citoplazmą.
3. Ištirkite pasiruošimą 2. Varlės kraujo tepinėlis (2.7 pav.). Dažymas žydra II ir eozinu.
Regėjimo lauke matomi branduoliniai eritrocitai, būdingi visoms stuburinių gyvūnų klasėms, išskyrus žinduolius. Vietoj trombocitų varlės kraujo tepinėlis rodo trombocitus, mažas ląsteles, kurios sėdi mažomis grupėmis tarp kitų kraujo ląstelių. Eritrocitai yra ovalo formos. Jų citoplazma yra rausvos spalvos. Ląstelės centre yra ovalus tamsiai mėlynos spalvos branduolys.
Neutrofilai yra mažesni už eritrocitus, jų citoplazmoje yra lazdelės formos granulės. Branduoliai yra segmentuoti. Limfocitai ir monocitai neturi reikšmingų savybių.
4. Eskizas ir etiketė: 1) eritrocitai (nustatyti juose esantį branduolį, citoplazmą, plazmolemą); 2) neutrofilai; 3) eozinofilai; 4) trombocitai; 5) limfocitai; 6) monocitai.
5. Ištirkite preparatą. 3. Raudonųjų kaulų čiulpų tepinėlis. Dažymas pagal Romanovskio-Giemsos metodą.
Raudonųjų kaulų čiulpų tepinėlis (2.8. - 2.12 pav.) leidžia tirti šviesos mikroskopu įvairūs etapai ir hematopoezės tipai, nes ląstelės po gydymo antikoaguliantais ir dažymo nėra išsidėsčiusios grupėmis, o pavieniui ir yra aiškiai atskiriamos.
6. Nubraižykite ir pažymėkite: 1) eritroblastus (bazofilinius, polichromatofilinius, oksifilinius); 2) retikulocitai; 3) eritrocitai; 4) promielocitai; 5) metamielocitai; 6) dūris; 7) segmentuoti granulocitai (bazofiliniai, neutrofiliniai ir eozinofiliniai); 8) promonocitai; 9) monocitai; 10) promegakariocitai; 11) megakariocitai; 12) limfocitai (dideli, vidutiniai, maži).
Kontroliniai klausimai ir užduotys savarankiškam darbui
Varlės kraujas po mikroskopu
2. Leukocitai varlės kraujyje.
laboratorinis darbas "žmogaus ir varlės kraujo mikroskopinė struktūra"
- Žmogaus ir varlės kraujo mikroskopinė struktūra
Kraujas yra skystas jungiamasis audinys. Jį sudaro plazma ir suformuoti elementai: raudonieji kraujo kūneliai, eritrocitai, baltieji kraujo kūneliai, leukocitai ir trombocitai.
Trombocitai dalyvauja kraujo krešėjimo procese. Leukocitai žaidžia svarbus vaidmuo apsaugant organizmą nuo mikrobų, toksinių medžiagų, organizmui svetimų ląstelių ir audinių. Yra keletas leukocitų tipų, kurie skiriasi struktūra ir funkcija. Raudonieji kraujo kūneliai perneša deguonį iš plaučių į audinius ir anglies dioksidas iš audinių į plaučius, dalyvauja palaikant vidinės organizmo aplinkos pastovumą.
Tikslas: ištirti žmonių ir varlių kraujo sandarą. Nustatykite, kieno kraujas gali pernešti daugiau deguonies.
Įranga: paruošti žmogaus ir varlės kraujo mikropreparatai, mikroskopas.
Saugos priemonės: būkite atsargūs dirbdami su mikropreparatais. Atsargiai elkitės su mikroskopu. Perkeldami objektyvą į didelį padidinimą, atsargiai dirbkite su varžtu, kad nesutraiškytų mikropreparato.
I. Žmogaus kraujas
1. Žiūrėkite žmogaus kraujo mėginį mažu, tada dideliu padidinimu.
2. Kokia eritrocitų ir leukocitų forma, santykinis dydis ir skaičius?
3. Nubraižykite 34 eritrocitus ir vieną leukocitą, pažymėkite ląsteles ir leukocito branduolį.
II. varlės kraujas
1. Tuo pačiu didindami mikroskopą, ištirkite varlės kraujo mėginį.
2. Koks santykinis eritrocitų ir leukocitų dydis, forma ir skaičius preparate?
3. Nubraižykite 34 eritrocitus ir vieną leukocitą, pažymėkite ląsteles ir jų branduolius.
1. Kokie yra žmogaus ir varlės eritrocitų sandaros panašumai?
2. Kuo skiriasi žmogaus ir varlės eritrocitų sandara?
3. Kieno žmogaus ar varlės kraujas gali pernešti daugiau deguonies? Pagrįskite atsakymą.
4. Kokia kryptimi pakrypo stuburinių gyvūnų eritrocitų evoliucija?
1. Įsivaizduokite, kad žinduolio kraujyje visi raudonieji kraujo kūneliai staiga subyrėjo. Kokios bus to pasekmės?
2. Kodėl eritrocitų kraujyje daug daugiau nei leukocitų?
3. Kodėl leukocitų kiekis žmogaus kraujyje padidėja per 3–4 valandas po valgio?
Mikroskopinė varlės ir žmogaus kraujo struktūra
Varlių ir žmogaus kraujo mikroskopinės sandaros lyginamoji analizė atliekant laboratorinius darbus su bendrojo lavinimo mokyklos mokiniais.
Peržiūrėkite dokumento turinį
"Mikroskopinė varlių ir žmonių kraujo struktūra"
Laboratorinis darbas „Žmogaus ir varlės kraujo mikroskopinė sandara“ Tikslas: Ištirti žmogaus ir varlės kraujo sandarą. Palyginkite žmogaus ir varlės kraujo sandarą ir nustatykite, kieno kraujas gali pernešti daugiau deguonies. Įranga: paruošti beicuoti žmogaus ir varlės kraujo mikropreparatai, šviesos mikroskopas.
- Žmonės turi labai mažus raudonuosius kraujo kūnelius– jų skersmuo yra 7–8 µm ir maždaug lygus skersmeniui kraujo kapiliarai. Varlės eritrocitai yra labai dideli – iki 22,8 mikronų skersmens, tačiau jų skaičius nedidelis – 0,38 mln. 1 mm3 kraujo. (padidinimas 150x)
2. Puiki koncentracija eritrocitų žmogaus kraujyje ir didelio bendro paviršiaus ploto (1 mm3 kraujo yra apie 5 mln. eritrocitų, bendras jų paviršiaus plotas apie 3 tūkst. m2).
abipus įgaubtos disko formos
4. Branduolių nebuvimas brandžiuose žmogaus eritrocituose(jauni eritrocitai turi branduolius, bet vėliau jie išnyksta) leidžia į eritrocitą patalpinti daugiau hemoglobino molekulių.
Taigi žmogaus eritrocitų struktūra idealiai tinka jų dujų funkcijai. Dėl eritrocitų sandaros ypatumų kraujas greitai ir dideliais kiekiais prisotinamas deguonimi ir tiekiamas chemiškai. surišta forma audinyje. Ir tai yra viena iš žinduolių, tarp jų ir žmonių, šiltakraujiškumo priežasčių (greta keturių kamerų širdies, visiško veninio ir arterinio kraujotakos atsiskyrimo, progresuojančių plaučių struktūros pokyčių ir kt.).
Eritrocitų funkcijos. Eritrocitų funkcijų atlikimo mechanizmas.
1) Leukocitų ir eritrocitų skaičius varlės ir žmogaus kraujyje. 2) Varlių ir žmogaus leukocitų ląstelių forma. 3) Leukocitų ir eritrocitų santykinė vertė žmogaus ir varlės kraujyje. 4) Branduolio buvimas eritrocituose ir leukocituose varlių ir žmonių kraujyje.
Atsakymai ir paaiškinimai
1) leukocitų skaičius varlės kraujyje, tūkst. 1 mm³; eritrocitų ne daugiau kaip 0,33–0,38 mln. 1 mm³.
Žmogus turi 4-9 tūkstančius leukocitų 1 ml kraujo; eritrocitų 4-5 milijonai 1 ml kraujo.
2) varlės forma leukocitai – apvalūs, eritrocitai – ovalūs;
Žmogaus leukocitai yra beformiai arba panašūs į amebas, eritrocitai yra abipus įgaubti.
3) reikšmių reikės ieškoti atskirai (atsiprašau)
4) varlėje ir leukocitai, ir eritrocitai turi branduolius. Žmonėms tik leukocitai turi branduolį.
LABORATORINIS DARBAS „ŽMOGAUS IR VALYS KRAUJO TYRIMAS PO MIKROSKOPU“ – pristatymas
Pristatymas tema: "LABORATORINIS DARBAS "ŽMOGAUS IR VALIŲ KRAUJO TYRIMAS PO MIKROSKOPU"" - Pranešimo stenograma:
1 LABORATORINIS DARBAS „ŽMOGAUS IR VALYS KRAUJO TYRIMAS PUO MIKROSKOPO“
2 TIKSLAS: 1. Ištirti žmogaus ir varlės kraujo eritrocitų sandarą. 2. Palyginkite žmogaus ir varlės kraujo eritrocitų sandarą ir nustatykite atskleistų skirtumų reikšmę.
3 LABORATORINĖ PROCEDŪRA 1. Ištirti žmogaus kraujo mikropreparatą. Raskite raudonųjų kraujo kūnelių, atkreipkite dėmesį į jų spalvą, formą, dydį. 2. Ištirkite varlių kraujo mikropreparatą, atkreipkite dėmesį į jų dydį ir formą. 3. Palyginkite varlės ir žmogaus eritrocitus. 4. Padarykite išvadą: kokią reikšmę turi atskleisti varlės ir žmogaus eritrocitų sandaros skirtumai?
4 1 užduotis Apsvarstykite preparatą „Žmogaus kraujas“. Raskite eritrocitus ir įdėkite juos į cilindrą spustelėdami pele.
5 2 užduotis Interaktyviai ištirkite žmogaus eritrocitų struktūrą spustelėdami visas aktyvias zonas. Atkreipkite dėmesį į eritrocitų formą, santykinį dydį ir skaičių preparate, į branduolio nebuvimą. eritrocitų ląstelių membranos citoplazma
6 Eritrocitai (iš graikų ρυθρός red ir κύτος talpykla, ląstelė) – raudonieji kraujo kūneliai. Jie turi abipus įgaubtų diskų formą ir primena suplokštą sferinį objektą arba apskritimą suplokščiais kraštais. Žinduolių eritrocitai neturi branduolio. Jie perneša deguonį iš kvėpavimo organų į audinius ir anglies dioksidą iš audinių į kvėpavimo organus. Eritrocitų kiekį daugiausia sudaro kvėpavimo pigmentas - hemoglobinas, kuris sukelia raudoną kraujo spalvą. Eritrocitų kiekis kraujyje paprastai išlaikomas pastovus (žmogus turi 4,5–5 mln. eritrocitų 1 mm³ kraujo). Raudonųjų kraujo kūnelių gyvenimo trukmė yra iki 130 dienų, po to jie sunaikinami kepenyse ir blužnyje.
7 3 užduotis Interaktyviai ištirkite varlės kraujo eritrocitų struktūrą spustelėdami visas aktyvias zonas. Atkreipkite dėmesį į eritrocitų dydį, formą ir skaičių preparate, į branduolio buvimą. Eritrocitai ląstelės membranos citoplazmos branduolys
8 Varlių eritrocitai yra taisyklingos ovalo formos ląstelės su vienalyte intensyviai rausvos spalvos citoplazma. Ląstelės centre yra pailgos ovalo formos branduolys.
9 4 užduotis Palyginkite varlės ir žmogaus eritrocitus? ? ? Ląstelės membrana Citoplazma Branduolys
10 5 užduotis Branduolio buvimas Įgaubto disko forma Funkcija yra deguonies perdavimas Išgaubto disko forma Hemoglobino buvimas Didelis skaičius Ląstelės membranos buvimas Didelės ląstelės Mažos ląstelės Varlei būdinga Dviems organizmams būdinga Žmogaus charakteristika Surūšiuokite eritrocitų požymius į tris stulpelius
11 Padarykite išvadą Kokią reikšmę turi atskleisti varlės ir žmogaus eritrocitų sandaros skirtumai? 6 užduotis
12 TEISINGAS ATSAKYMAS Žmogaus eritrocitai, skirtingai nei varlių eritrocitai, neturi branduolio ir yra įgavę abipus įgaubtą formą. Dėl abipus įgaubtos žmogaus eritrocito formos padidėja ląstelės paviršius, o jose esančio branduolio vieta prisipildo hemoglobino, todėl kiekvienas žmogaus eritrocitas gali sugauti daugiau deguonies nei varlės eritrocitai. Žmogaus eritrocitai yra mažesnio dydžio nei varlės eritrocitai, todėl žmogaus kraujyje tūrio vienete eritrocitų yra daugiau (1 mm 3 5 mln.) nei varlės kraujyje. Remiantis eritrocitų struktūrinėmis ypatybėmis ir dideliu jų kiekiu žmogaus kraujyje, darytina išvada, kad žmogaus kraujyje yra daugiau deguonies nei varlės kraujyje. Kvėpavimo funkcijažmogaus kraujas yra daug efektyvesnis nei varliagyvių.
13 LABORATORINIO DARBO REZULTATAI Už teisingą kiekvienos užduoties atlikimą skiriamas 1, 4, 1 balas. Už teisingą kiekvienos užduoties atlikimą skiriami 5, 6, 2 balai. Už 5 užduotį 1 balas skiriamas, jei atliekant užduotį buvo padaryta viena klaida. Už 6 užduoties atlikimą, jei nėra išsamaus atsakymo į užduoties klausimą, skiriamas 1 balas. „5“ – 6 taškai, „4“ – 5 taškai, „3“ taškai
Varlių eritrocitai: struktūra ir funkcijos
Kraujas yra jungiamasis audinys, atliekantis keletą gyvybiškai svarbių funkcijų, iš kurių viena yra maistinių medžiagų, medžiagų apykaitos produktų ir dujų transportavimas. Varlės kraujo tepinėlis yra preparatas, kurį panardinus galima tirti padidinus maždaug 15 kartų.
Kraujas susideda iš plazmos ir joje suspenduotų ląstelių – eritrocitų, turinčių hemoglobino ir turinčių branduolį, bei leukocitų.
Ant kraujo tepinėlio mikropreparato matoma plazma ir kraujo ląstelės: eritrocitai, leukocitai ir trombocitai.
1. Varlių eritrocitai, skirtingai nei žmogaus eritrocitai, yra branduoliniai, be to, turi ovalo formą. Ši savybė siejama su žmogaus eritrocitų pernešamu hemoglobino kiekiu – abipus įgaubtas paviršius ir branduolio nebuvimas padidina plotą, kurį gali užimti deguonies molekulės.
Varlių eritrocitai gana dideli – iki 22,8 mikronų skersmens, ant preparato nudažyti rausva spalva. Tyrimo metu galima nustatyti, kad bendras šių kraujo kūnelių skaičius yra mažas – 1 mm3 jų yra ne daugiau kaip 0,33 – 0,38 mln.. Lyginant su raudonųjų kraujo kūnelių kiekiu 1 mm3 žmogaus kraujo (apie 5 mln. ), galima pastebėti, kad varliagyviams deguonies reikia daug mažiau nei žinduoliams. To priežastys – papildoma deguonies pasisavinimo galimybė varliagyvių odos paviršiumi ir mažas jo poreikis dėl poikilotermijos.
Varlių eritrocitų skersinė ašis – 15,8 μ, išilginė – 22,8 μ.
2. Leukocitai varlės kraujyje.
Leukocitai skirstomi į granulocitus, kuriuose yra granulių – grūdus ir agranulocitus. Granulocitams priklauso eozinofilai, neutrofilai, bazofilai, agranulocitai – monocitai ir limfocitai.
Bendras leukocitų skaičius 1 mm3 kraujo yra tūkstantis. Išoriškai jie yra panašūs į panašias žmonių, viščiukų ir arklių kraujo ląsteles. Neutrofilai turi segmentuotą branduolį ir šviesiai rausvą citoplazmą, kurioje yra mažų rausvų granulių. Preparate esantys neutrofilai turi pastebimą segmentuotą branduolį ir šviesiai rausvą citoplazmą. Jų kiekis bendrame leukocitų skaičiuje yra ne didesnis kaip 17%.
Eozinofilai pastebimi dideliais ryškios plytos spalvos grūdeliais ir mažu branduoliu, suskirstytu į 2-3 segmentus. Bendras eozinofilų skaičius sudaro ne daugiau kaip 7% visų leukocitų.
Bazofilai varlės kraujo preparate yra reti (ne daugiau kaip 2% viso), išsiskiria dideliais ryškiai violetiniais grūdeliais ir dideliu branduoliu.Daugiausia leukocitų priklauso limfocitams (iki 75,2%). Preparate jie išskiriami dėl didelio branduolio ir siauro citoplazmos sluoksnio, nudažyto šviesiai mėlyna spalva. Būdingas šių kraujo ląstelių bruožas yra pseudopodai - citoplazmos ataugos, kurių pagalba jie juda.
Varlių monocitai turi bazofilinę citoplazmą, nudažytą švelniai pilka arba alyvine spalva. Branduolys gali turėti ataugų arba, atvirkščiai, įdubusias vietas.
Atsižvelgiant į varliagyvių kraujo mikropreparatą, matyti, kad jo sudėtį lemia gyvenimo būdas ir kiti veiksniai. fiziologinės savybės organizmas. Šie mikroskopai padės ištirti varlės kraują:
Kosmetologinės lupos-lempos naudingas prietaisas, kuris gali būti naudingas grožio salonuose, juvelyruose, kriminologuose ir net namuose kosmetikos tikslais ar rankdarbiams. Kai kurie žmonės galvoja, kad kai normalus regėjimas nepageidautina naudoti didinamuosius prietaisus, bet tai yra kliedesys.
Mikroskopai Levenhuk Fixies
Levenhuk Fixiki mikroskopai yra vienas iš paprasčiausių pradinio lygio mikroskopų. Idealiai tinka labai mažiems vaikams. Ryskios spalvos padės pažadinti vaikų susidomėjimą moksliniais tyrimais!
Darbas su mikroskopais tiriant žmonių ir varlių kraujo tepinėlius
1) Kraujo sudedamosios dalys: susidarę elementai (eritrocitai, trombocitai, leukocitai) ir kraujo plazma.
2) Morfofunkcinės eritrocitų savybės:
1. Matmenys: normocitai - 7,0 - 7,9 mikronai; makrocitai - daugiau nei 8,0 mikronų; mikrocitai – mažiau nei 6,0 mikronų.
2. Forma: abipus įgaubti diskai - diskocitai (80%); likusieji 20% yra sferocitai, planocitai, echinocitai, balno formos, dvigubi kauliukai, stomatocitai.
3. Šerdis: neturi.
4. Citoplazma: užpildyta pigmento inkliuzu – hemoglobinu, trūksta daugumos organelių.
5. Funkcijos: kvėpavimas – dujų (O2 ir CO2) transportavimas; kitų citolemos paviršiuje absorbuotų medžiagų (hormonų, imunoglobulinų, vaistinių medžiagų, toksinai ir kt.).
6. Kiekio kraujyje pokytis: žmogui 1 mm³ kraujo 4,5-5 mln.
7. Gyvenimo trukmė: apie 120 dienų.
8. Mirties vieta: daugiausia blužnis.
3) Sveiko suaugusio žmogaus leukoformulė yra procentais įvairių formų leukocitų (į bendrą leukocitų skaičių %). Pateikiama leukocitų klasifikavimo lentelė leukocitų formulė Sveikas kūnas.
4) Granulocitų morfofunkcinės charakteristikos
1. Ląstelių tipai: neutrofilai: jauni; dūris; segmentuotas; eozinofilai; bazofilų.
2. Matmenys: svyruoja 9-13 mikronų ribose
Neutrofilai: citoplazmoje yra smulkių granulių, nudažytų šiek tiek oksifiline (rožine) spalva, tarp kurių išskiriamos nespecifinės azurofilinės granulės - lizosomų tipas, specifinės granulės, kitos organelės yra silpnai išsivysčiusios.
Eozinofilai: didelės oksifilinės (raudonos) granulės citoplazmoje, susidedančios iš dviejų tipų granulių: specifinės azurofilinės – savotiškos lizosomos, turinčios fermento peroksidazės, nespecifinės granulės, turinčios rūgštinės fosfatazės, kitos organelės yra silpnai išvystytos.
Bazofilai: citoplazmoje yra didelių granulių, kurios metachromatiškai nudažytos baziniais dažais dėl juose esančių glikozaminoglikanų - heparino, taip pat histamino, serotonino ir kitų biologiškai. veikliosios medžiagos; kitos organelės yra prastai išvystytos.
Neutrofilai: segmentuotas branduolys;
Eozinofilai: dviejų segmentų branduolys;
Bazofilai: didelis, silpnai segmentuotas branduolys;
Neutrofilai: bakterijų fagocitozė; imuninių kompleksų fagocitozė (antigenas-antikūnas); bakteriostatinis ir bakteriolitinis; chalonų išsiskyrimas ir leukocitų dauginimosi reguliavimas.
Eozinofilai: dalyvauja imunologinėse (alerginėse ir anafilaksinėse) reakcijose; slopina (slopina) alergines reakcijas neutralizuodamas histaminą ir serotoniną.
Bazofilų funkcijos yra dalyvauti imuninėse (alerginėse) reakcijose per granulių išsiskyrimą (degranuliaciją) ir jose esančias minėtas biologiškai aktyvias medžiagas, kurios sukelia. alerginės apraiškos(audinių edema, kraujo tiekimas, niežulys, glotnumo spazmas raumenų audinys ir kiti).
6. Gyvenimo trukmė: nuo kelių valandų iki kelių mėnesių, tikėtina, 8 dienos.
5) Agranulocitų morfofunkcinės charakteristikos
1. Ląstelių tipai: limfocitai ir monocitai.
2. Matmenys: mažas 4,5-6 mikronai; vidutiniškai 7-10 mikronų; didelis - daugiau nei 10 mikronų.
3. Forma: Monocitai: dažnai juose yra daug smulkių azurofilinių granulių. Dažnai citoplazmoje yra vakuolių, esančių šalia branduolio, fagocituotų ląstelių, pigmentinių grūdelių ir kt. Limfocitai: siauras bazofilinės citoplazmos kraštas, kuriame yra laisvų ribosomų ir silpnai išreikštų organelių - endoplazminio tinklo, pavienių mitochondrijų ir lizosomų.
4. Branduolys: Monocitai: branduolys užima didesnę arba lygią ląstelės dalį su citoplazma. Limfocitai: santykinai didelis apvalus branduolys, daugiausia sudarytas iš heterochromatino.
5. Funkcijos: B-limfocitai ir plazmos ląstelės suteikia humoralinis imunitetas- organizmo apsauga nuo pašalinių korpuskulinių antigenų (bakterijų, virusų, toksinų, baltymų ir kt.); T-limfocitai pagal savo funkcijas skirstomi į: - žudikus; - pagalbininkai; - slopintuvai. Žudikai arba citotoksiniai limfocitai apsaugo organizmą nuo svetimų ar genetiškai modifikuotų savų ląstelių. ląstelinis imunitetas. T-pagalbininkai ir T-slopintuvai reguliuoja humoralinį imunitetą: pagalbininkai - stiprina, slopintojai - slopina.
6. Gyvenimo trukmė: nuo daugelio metų (atminties B ląstelės) iki kelių savaičių (plazminių ląstelių klonai).
Ryžiai. 3 Suaugusio žmogaus leukoformulė.
Vaistas. Žmogaus kraujo tepinėlis:
Dažymas pagal Romanovsky-Giemsa. (Romanovskio-Giemsos dažai susideda iš šarminių ir rūgščių dalių. Šarminė – žydra II, o rūgštinė – eozinas. Azur II nusidažo ryškiai mėlyna, eozinas rausvai raudonai). Preparate reikia rasti ir nupiešti eritrocitus, nudažytus rožine eozinu. Kadangi eritrocitai turi abipus įgaubto disko formą, jų centrinė dalis yra plonesnė ir šviesesnės spalvos. Raudonieji kraujo kūneliai yra daugiausia kraujo kūnelių, ir jie sudaro didžiąją dalį tepinėlyje. Tarp eritrocitų matomi leukocitai (matymo lauke 1 - 5).
Labiausiai paplitę yra segmentuoti neutrofilai, turintys tamsiai violetinį segmentuotą branduolį ir beveik skaidrią (blankiai rausvą) citoplazmą su labai smulkiu, sunkiai atskiriamu granuliuotumu. Eozinofiliniai granulocitai, priešingai, išsiskiria ryškia citoplazmos oksifilija, užpildyta didelėmis rožinėmis tokio paties dydžio granulėmis. Branduolys yra mažiau tankus nei segmentuoto neutrofilo, paprastai turi du segmentus, bet gali turėti ir tris. Bazofiliniai granulocitai yra reti, todėl juos reikia apžiūrėti ir nubraižyti iš demonstracinės skaidrės. Jiems būdingi blyškūs, ne visada iki galo segmentuoti branduoliai ir purpuriniai skirtingų dydžių(dažniausiai didelės) granulės citoplazmoje.
Limfocitai, skirtingai nei granulocitai, turi suapvalintą branduolį ir nedidelį citoplazmos kraštą. Branduolio chromatinas yra smarkiai kondensuotas, todėl ant preparatų yra tamsiai violetinės spalvos. Maži, vidutiniai ir dideli limfocitai skiriasi vienas nuo kito branduolių dydžiu ir tankiu. Maži limfocitai turi labai kondensuotą chromatiną branduolyje ir siaurą citoplazmos kraštą. Vidutinio limfocito branduolio chromatinas yra šiek tiek labiau išsklaidytas, o citoplazmos kraštas yra platesnis. Šerdis didelis limfocitas dar didesnis ir laisvesnis, o citoplazmos tūris padidėja.
Monocitus lengviau rasti tepinėlio periferijoje. Tai didelės ląstelės su plačia mėlynos citoplazmos zona ir dideliu, pupelės formos arba netaisyklingos formos blyškios spalvos branduoliu.
Trombocitai yra maži (tris kartus mažesni už eritrocitą), išsidėstę nedidelėmis grupėmis tarp ląstelių ir turi švelniai violetinę spalvą.
Varlės kraujo tepinėlis:
Kitų stuburinių gyvūnų kraujas savo sudėtimi panašus į žmogaus kraują, tačiau morfologija ląstelių elementai adresu įvairios grupės gyvūnai turi savo ypatybes.
Ant preparato dideliu padidinimu matyti, kad tarp susidariusių kraujo elementų vyrauja raudonieji kraujo kūneliai, eritrocitai. Skirtingai nuo žmogaus eritrocitų, jie yra didelės ovalios abipus išgaubtos ląstelės su vienalyte protoplazma. Ląstelės centrą užima ovalo formos branduolys, intensyviai nudažytas mėlynai violetinės spalvos hematoksilinu. Dėl šios ląstelės organizme ištirpusio hemoglobino šių ląstelių citoplazma nusidažo eozinu oranžinės-raudonos spalvos. 1 mm3 kraujo yra apie 380 tūkstančių eritrocitų. Leukocitų yra žymiai mažiau (1 mm 3 kraujo - nuo 6 iki 25 tūkst.): granulocitų ir agranulocitų. Žmonėms kiekybiškai vyrauja granuliuotos ląstelės, varliagyviuose – negranuliuotos, būtent limfocitai yra apvalios ląstelės, mažesnės už eozinofilus ir eritrocitus, tankiu suapvalintu branduoliu ir siaura mėlynos (bazofilinės) citoplazmos riba. Dažnai šios ląstelės yra trumpos, netaisyklingos formos pseudopodia.
Leukocitai savo struktūra labai panašūs į žmogaus. Tarp granulocitų yra neutrofilų, eozinofilų (suapvalintos ląstelės, didesnės už eritrocitus, su 3-4 segmentuotais tankiais branduoliais ir ryškiai oranžinės spalvos granuliuotumu citoplazmoje), bazofilų. Agranulocitai apima limfocitus ir monocitus.
Trombocitai randami ant preparato – ląstelės išsidėsčiusios grupėmis nuo 3 iki 6. Trombocitai yra daug mažesni už eritrocitus; skirtingai nuo eritrocitų, jų protoplazma beveik nesidažo. Varliagyvių trombocitai yra tikros ląstelės su branduoliu. Ląstelės ir branduolio forma yra ovali.
5. Kraujo paėmimas iš piršto. Kraujo reologinių parametrų tyrimas. Eritrocitų deformuojamumo tyrimas; eritrocitų agregacija naudojant agregometrą MA-1, Myrenne. Susipažinimas su biochemiliuminometro BHL-3606M veikimo principu. Žmogaus viso kraujo biochemiliuminescencinė analizė. Spektrofluorimetrinė analizė
Reologiniai kraujo parametrai:
Kraujo ląstelės, kurios sudaro apie pusę viso kraujo tūrio, atlieka svarbiausias jo funkcijas. Eritrocitai yra gausiausia ląstelių frakcija, jų skaičius 1 μl kraujo – apie 5 mln.Apatinių stuburinių gyvūnų kraujyje eritrocitai turi visą viduląstelinių organelių kompleksą, įskaitant branduolį, ir dalijasi mitozės arba amitozės būdu. Žinduolių brendimo metu eritrocitai netenka tarpląstelinių organelių ir branduolio, o įgauna abipus įgaubtą formą ir praranda gebėjimą dalytis. Vidutinis suaugusio žmogaus eritrocitų skersmuo yra apie 7 mikronai, naujagimio – iki 10 mikronų. Raudonųjų kraujo kūnelių forma keičiasi dėl jų membranos elastingumo, todėl jie gali praeiti pro kapiliarus, kurių daugumos skersmuo yra 5 mikronai. Yra žinomos maždaug penkios normalios eritrocitų formos ir iki 10 patologinių formų. Ląstelių formos palaikymą užtikrina jose esanti energija ATP, kuri susidaro glikolizės metu, todėl raudonieji kraujo kūneliai aktyviai vartoja gliukozę.
Palyginti su kitų ląstelių membranomis, eritrocitų membranos buvo ištirtos išsamiau. Baltymai užima apie 1/4 membranos paviršiaus, „plaukioja“ ant dvigubo lipidų sluoksnio ir iš dalies arba visiškai prasiskverbia į jį. bendro ploto vieno eritrocito membrana siekia 140 μm2, jo masažas. Lipidai (cholesterolis, neutralūs lipidai, lecitinas) sudaro apie 40% sausos membranos liekanos, 10% yra angliavandeniai. Ant jo yra vienas iš membraninių baltymų – spektrinas viduje, tiesiai virš citoplazmos, formuojantis elastingą pamušalą, dėl kurio eritrocitas nesugriūva, keičia savo formą judėdamas siaurais kapiliarais bei svyruojant pH, temperatūrai, osmosiniams parametrams. Viename eritrocite yra beveik spektrino molekulės. Kitas baltymas – glikoforinas, kuris yra glikoproteinas, prasiskverbia pro membranos lipidinius sluoksnius ir išsikiša į išorę. Monosacharidų grupės yra prijungtos prie jo polipeptidinių grandinių, kurios, savo ruožtu, yra susijusios su sialo rūgšties molekulėmis. Iš visošio baltymo molekulių viename eritrocite.
Dalis krauju pernešamų medžiagų ištirpsta plazmoje, kita dalis susijungia su baltymais ir kraujo ląstelėmis. Bilirubinas (medžiaga geltona spalva, susidaręs dėl hemoglobino naikinimo eritrocitų senėjimo metu) jungiasi su plazmos albuminu santykiu 5:1 ir yra pernešamas į šalinimo organus: inkstus, kepenis, žarnyną. Plazmos lipoproteinai transportuoja cholesterolį, vieną iš labiausiai paplitusių fosfolipidų, sudarančių membranas. Per didelis šios medžiagos nusėdimas kraujagyslių sienelėse yra susijęs su aterosklerozės išsivystymu.
Plazmos baltymai taip pat perneša laisvoje būsenoje toksiškus jonus (geležies, vario) į organus, kur jie naudojami biosintezės procesuose. Transporto dėka susidaro laikinas tam tikrų medžiagų telkinys. Taigi eritrocitai perneša insuliną, kuris surišta būsena neaktyvus, taip pat albuminas, gliukozė, aminorūgštys. Vienas eritrocitas gali prijungti iki 109 albumino molekulių. Albuminas, savo ruožtu, yra medžiagų apykaitos produktų nešiklis onkologinės ligos. Ir jo koncentracijos padidėjimas kraujyje aiškiai rodo esama patologija susijęs su vėžiu.
Norint ištirti eritrocitų gebėjimą deformuotis, naudojami įvairūs eksperimentiniai metodai:
1. Eritrocitų įsiurbimo į mikropipetę, kurios vidinis skersmuo 2,8-3 mikronai, būdas;
2. Centrifugavimo būdas – apie eritrocitų gebėjimą deformuotis sprendžiama pagal jų dydžio pasikeitimą veikiant išcentrinėms jėgoms;
3. Filtravimo metodas – nustatyti eritrocitų prasiskverbimo greitį per popierinius, nitroceliuliozės ar polikarbonato filtrus su fiksuotu porų dydžiu (3 mikronai);
4. Reoskopija – mikroskopu išmatuoti skysčio srauto deformuotų eritrocitų dydį;
5. Ektacitometrija – šis metodas pagrįstas helio-neono lazerio spindulių difrakcijos reiškiniu ant plono eritrocitų sluoksnio, kurį deformuoja klampus skysčio srautas, dėl kurio pasikeičia difrakcijos raštas, pagal kurį galima spręsti apie eritrocitai
Kai suaktyvėja eritrocitai ir trombocitai, įvyksta panaši reakcija, kuri baigiasi fosfolipazės aktyvavimu. Dėl to ląstelės membrana tampa lanksti ir gali liestis su kaimyninėmis ląstelėmis. Dėl to trombocitai gali agreguotis vienas su kitu ir sudaryti trombocitų trombą. Trombocitų aktyvinimas yra labai svarbus hemostazinio proceso žingsnis, nes jis yra normalios hemostazės ir patologinio trombų susidarymo bei diseminuotos intravaskulinės koaguliacijos pagrindas. Nuolatinis per didelis trombocitų aktyvavimas yra vienas iš esminių aterogenezės ir kraujagyslių pažeidimų etapų. Tuo pačiu metu dėl sutrikusios eritrocitų aktyvacijos, sulėtėjus ar sustabdžius adheziją ir agregaciją, padidėjus dezagregacijai, atsiranda sunkūs kraujavimai. Trombocitų aktyvinimas daugiausia susijęs su trombocitų pajėgumo įgijimu tinkamam sukibimui ir agregacijai. Trombocitų agregacija gali būti grįžtama arba negrįžtama. Grįžtamasis agregavimas yra tiesiogiai transformuojamas į negrįžtamą agregaciją.
Ryžiai. 4 Prietaisas eritrocitų deformuojamumui nustatyti
Agregacija yra greita ir negrįžtama, kai trombinas veikia trombocitus, taip pat kolageną ir ADP didelės koncentracijos. Pastarieji taip pat padidina Ca2+ išsiskyrimą į citoplazmą. Šiuo metu įprasti eritrocitų agregacijos vertinimo metodai yra tirti trombocitų plazmos optinio tankio (šviesos pralaidumo padidėjimo) greitį ir laipsnį, kai ji sumaišoma su agregacijos induktoriais (jie nededami tiriant spontanišką agregaciją). Trombocitų agregatų susidarymą veikiant stimuliatoriams taip pat galima įvertinti vizualiai arba naudojant mikroskopą. Svarbiausi kraujo apytakai yra rodikliai, apibūdinantys hidrodinaminį stiprumą, susidarymo greitį ir agregatų dydį.
Agregatinė jėga, t.y. gebėjimas sugriauti dideliu greičiu poslinkis, lemia jų likimą arterinėje sistemoje, taigi ir mikrocirkuliacijos likimą. Normali (fiziologinė) agregacija pasižymi tiesinėmis grandinėmis monetų stulpelių pavidalu, susidedančių iš 5-6 ląstelių ir galimo visiško hidrodinaminio eritrocitų išskaidymo kraujagyslių lovoje.
Grynasis ir gniuždytas agregacija, padidėjus sukibimo stiprumui tarp eritrocitų yra Pagrindinis bruožas patologinė agregacija. Grubinė agregacija kraują iš emulsijos paverčia stambia suspensija, kaip agregacija, kuri išlieka esant dideliam šlyties greičiui. Veiksniai, rodantys kraujo suspensijos stabilumą ir lemiantys sanglaudos tarp ląstelių padidėjimą, gali būti eritrocitai, t.y. susijęs su eritrocitų membranos paviršiaus formos ar modifikacija ir plazmos pokyčiais baltymų sudėtis plazma.
2 laboratorijos tikslas:Išmokite atskirti susidariusius elementus žmogaus kraujo tepinėliuose.
Įranga ir medžiagos: laboratorinis mikroskopas, histologiniai preparatai:
suaugusiųjų kraujo tepinėlis
Varlės kraujo tepinėlis
Raudonųjų kaulų čiulpų tepinėlis
Laboratorinis darbas skirtas 2 auditorinėms valandoms.
Progresas:
1. Apsvarstykite 1 vaistą.Žmogaus kraujo tepinėlis (2.4, 2.5 pav.). Dažymas žydra II ir eozinu.
Esant mažam padidinimui, atkreipkite dėmesį į skirtingas eritrocitų ir leukocitų spalvas. Raudonieji kraujo kūneliai yra daugiausia kraujo kūnelių ir jie sudaro didžiąją dalį tepinėlyje.
Padidinus mikroskopą, randami eritrocitai (2.4 pav.), nudažyti eozinu rausvai. Atkreipkite dėmesį, kad eritrocituose periferinė dalis yra intensyviau dažoma, o centrinė sritis yra blyški. Taip yra dėl to, kad eritrocitas turi abipus įgaubto disko formą.
Matymo lauke raskite neutrofilinį segmentuotą leukocitą (2.4 pav.). Neutrofilo citoplazma yra šviesiai alyvinės arba mėlynos spalvos, granuliuota, joje yra tamsių azurofilinių granulių, kurios yra pirminės lizosomos. Branduolys yra skiltinis (nuo 3 iki 5 segmentų, sujungtų plonais "tiltais"), nudažytas violetine spalva.
Ant tepinėlio raskite eozinofilinį leukocitą (2.4 pav.). Ląstelės branduolys dažniausiai yra dvisluoksnis, o citoplazma užpildyta didelėmis eozinofilinėmis (tamsiai rožinėmis) specifinėmis tokio paties dydžio granulėmis.
Bazofiliniai granulocitai yra reti. Jiems būdinga didelė granuliuota violetinė spalva (2.4 pav.). Bazofilų branduolys dažniausiai yra reniformas, dviburkis, dažnai nepastebimas dėl granulių gausos ir silpno dažymo.
Matymo lauke raskite limfocitą ir monocitą. Limfocitai turi suapvalintą tankų branduolį su siauru citoplazmos kraštu (2.5 pav.). Monocitus lengviau rasti tepinėlio periferijoje. Tai didelės ląstelės su plačia mėlyna citoplazma (2.6 pav.). Branduolio forma yra pasagos arba dviburkė, nusidažo silpniau nei limfocituose, todėl jame gerai matomi branduoliai.
Trombocitai yra mažo dydžio (3 kartus mažesni už eritrocitus), išsidėstę nedidelėmis grupėmis tarp ląstelių ir turi švelniai violetinę spalvą.
2. Nubrėžkite ir pažymėkite: 1) eritrocitai; 2) neutrofilinis segmentuotas leukocitas; 3) eozinofilinis leukocitas; 4) bazofilinis leukocitas; 5) limfocitų; 6) monocitas. Išskirkite branduolį, citoplazmą, granules granulocituose. Agranulocituose nurodykite branduolį, citoplazmą.
3. Apsvarstykite pasiruošimą 2. Varlės kraujo tepinėlis (2.7 pav.). Dažymas žydra II ir eozinu.
Regėjimo lauke matomi branduoliniai eritrocitai, būdingi visoms stuburinių gyvūnų klasėms, išskyrus žinduolius. Vietoj trombocitų varlės kraujo tepinėlis rodo trombocitus, mažas ląsteles, kurios sėdi mažomis grupėmis tarp kitų kraujo ląstelių. Eritrocitai yra ovalo formos. Jų citoplazma yra rausvos spalvos. Ląstelės centre yra ovalus tamsiai mėlynos spalvos branduolys.
Neutrofilai yra mažesni už eritrocitus, jų citoplazmoje yra lazdelės formos granulės. Branduoliai yra segmentuoti. Limfocitai ir monocitai neturi reikšmingų savybių.
4. Nubrėžkite ir pažymėkite: 1) eritrocitai (nustatyti juose esantį branduolį, citoplazmą, plazmolemą); 2) neutrofilai; 3) eozinofilai; 4) trombocitai; 5) limfocitai; 6) monocitai.
5. Apsvarstykite pasiruošimą 3. Raudonųjų kaulų čiulpų tepinėlis. Dažymas pagal Romanovskio-Giemsos metodą.
Raudonųjų kaulų čiulpų tepinėlis (2.8. - 2.12 pav.) leidžia šviesos mikroskopu ištirti įvairias hematopoezės stadijas ir tipus, nes ląstelės po gydymo antikoaguliantais ir dažymo išsidėsto ne grupėmis, o pavieniui ir aiškiai išsiskiria. .
6. Nubrėžkite ir pažymėkite: 1) eritroblastai (bazofiliniai, polichromatofiliniai, oksifiliniai); 2) retikulocitai; 3) eritrocitai; 4) promielocitai; 5) metamielocitai; 6) dūris; 7) segmentuoti granulocitai (bazofiliniai, neutrofiliniai ir eozinofiliniai); 8) promonocitai; 9) monocitai; 10) promegakariocitai; 11) megakariocitai; 12) limfocitai (dideli, vidutiniai, maži).
Kontroliniai klausimai ir užduotys savarankiškam darbui
1. Apibūdinkite kraują kaip audinį. 2. Kraujo sudėtis ir funkcijos. 3. Pateikite eritrocitų ir trombocitų morfofunkcines charakteristikas. 4. Leukocitai – klasifikavimo ypatumai. 5. Pateikite granuliuotų ir agranuliuotų leukocitų morfofunkcinę charakteristiką. 6. Ką reiškia terminas „leukocitų formulė“? 7. Iš kokių komponentų susideda limfa? 8. Kuo embrioninė hemocitopoezė skiriasi nuo poembrioninės? 9. Paaiškinkite embriono hematopoezę. 10. Apibūdinkite pagrindines poembrioninės kraujodaros stadijas. 11. Kas yra kamieninės, pusiau kamieninės ir unipotentinės ląstelės? 12. Paaiškinkite eritrocitų susidarymo stadijas. 13. Kokie yra pagrindiniai granulocitinių ląstelių diferenciacijos procesai? 14. Kokiuose organuose ir kaip susidaro T ir B limfocitai? 15. Kur susidaro monocitai? Kokius etapus jie praeina? 16. Kaip susidaro trombocitai?
LABORATORINIO DARBO TVARKA 1. Ištirti žmogaus kraujo mikropreparatą. Raskite raudonųjų kraujo kūnelių, atkreipkite dėmesį į jų spalvą, formą, dydį. 2. Ištirkite varlių kraujo mikropreparatą, atkreipkite dėmesį į jų dydį ir formą. 3. Palyginkite varlės ir žmogaus eritrocitus. 4. Padarykite išvadą: kokią reikšmę turi atskleisti varlės ir žmogaus eritrocitų sandaros skirtumai?
2 užduotis Interaktyviai ištirkite žmogaus eritrocitų struktūrą spustelėdami visas aktyvias zonas. Atkreipkite dėmesį į eritrocitų formą, santykinį dydį ir skaičių preparate, į branduolio nebuvimą. eritrocitų ląstelių membranos citoplazma
Eritrocitai (iš graikų ρυθρός red ir κύτος talpykla, ląstelė) yra raudonieji kraujo kūneliai. Jie turi abipus įgaubtų diskų formą ir primena suplokštą sferinį objektą arba apskritimą suplokščiais kraštais. Žinduolių eritrocitai neturi branduolio. Jie perneša deguonį iš kvėpavimo organų į audinius ir anglies dioksidą iš audinių į kvėpavimo organus. Eritrocitų kiekį daugiausia sudaro kvėpavimo pigmentas - hemoglobinas, kuris sukelia raudoną kraujo spalvą. Eritrocitų kiekis kraujyje paprastai išlaikomas pastovus (žmogus turi 4,5–5 mln. eritrocitų 1 mm³ kraujo). Raudonųjų kraujo kūnelių gyvenimo trukmė yra iki 130 dienų, po to jie sunaikinami kepenyse ir blužnyje.
5 užduotis Branduolio buvimas Įgaubto disko forma Funkcija - deguonies perdavimas Išgaubto disko forma Hemoglobino buvimas Didelis kiekis Ląstelės membranos buvimas Didelės ląstelės Mažos ląstelės Būdinga varlei Bendra dviem organizmams Žmogaus charakteristika Rūšiuoti ženklus eritrocitus į tris stulpelius
TEISINGAS ATSAKYMAS Žmogaus eritrocitai, skirtingai nei varlės eritrocitai, neturi branduolio ir yra įgavę abipus įgaubtą formą. Dėl abipus įgaubtos žmogaus eritrocito formos padidėja ląstelės paviršius, o jose esančio branduolio vieta prisipildo hemoglobino, todėl kiekvienas žmogaus eritrocitas gali sugauti daugiau deguonies nei varlės eritrocitai. Žmogaus eritrocitai yra mažesnio dydžio nei varlės eritrocitai, todėl žmogaus kraujyje tūrio vienete eritrocitų yra daugiau (1 mm 3 5 mln.) nei varlės kraujyje. Remiantis eritrocitų struktūrinėmis ypatybėmis ir dideliu jų kiekiu žmogaus kraujyje, darytina išvada, kad žmogaus kraujyje yra daugiau deguonies nei varlės kraujyje. Žmogaus kraujo kvėpavimo funkcija yra daug efektyvesnė nei varliagyvių.
LABORATORINIO DARBO REZULTATAI Už teisingą kiekvienos užduoties atlikimą skiriamas 1, 4, 1 balas. Už teisingą kiekvienos užduoties atlikimą skiriami 5, 6, 2 balai. Už 5 užduotį 1 balas skiriamas, jei atliekant užduotį buvo padaryta viena klaida. Už 6 užduoties atlikimą, jei nėra išsamaus atsakymo į užduoties klausimą, skiriamas 1 balas. „5“ – 6 taškai, „4“ – 5 taškai, „3“ taškai
ŠALTINIAI Mikroskopas – st.com%2Fui%2F13%2F25%2F99%2F _ _1----.jpg&ed=1&text=%20%D0%BC%D0%B8%D0%BA%D1%80%D0%BE% D1%81%D0%BA%D 0%BE%D0%BF%D0%BE%D0%BC%20%D1%81%20%D0%BA%D0%BB%D0%B5%D1%82% D0 %BA%D0%B0%D0%BC%D0%B8%20%D0%BA%D1%80%D0%BE%D0%B2%D0%B8%20%D1%84%D0%BE%D1%82 %D0%BE&p=15%B8%20 %D1%84%D0%BE%D1%82%D0%BE&p=15 Žmogaus kraujo mikroskopinė struktūra - D1%80%D0%BE%D1%86%D0%B8% D1 %82%D1%8B%20%D0%BF%D0%BE%D0%B4%20% D0%BC%D0%B8%D0%BA%D1%80%D0%BE%D1%81%D0% BA %D0%BE%D0%BF%D0%BE %D0%BC&p=288&img_url= Varlės kraujo mikroskopinė struktūra – cheloveka-s-krovju-ljagushki.html cheloveka-s-krovju-ljagushki.html Eritrocitas – Kraujagyslė su kraujo kūneliais -% D0% BE% D0% B2% D0% B5% D0% BD% D0% BE% D1% 81% D0% BD% D1% 8B% D0% B9% 20% D 1% 81% D0% BE%D1%81%D1%83%D0%B4%20%D1%81%20%D0%BA%D0%BB%D0%B5% D1%82%D0%BA%D0%B0%D0%BC% D0%B8%20%D0%BA%D1%80%D0%BE%D0%B2%D0%B8%20%D1%80%D0%B8%D1%81%D1%83%D0%BD%D0% BE%D0%BA&p=321&img_ur l=medinfo.ua%2Ffile.php%3F00014e19108d4d2da49ff94b1a25bae7&rpt=simage80%D0%B8%D1%81%D1%83%BAimp&info1%D1%83%D0%g ua%2Ffile.php%3F00014e19108d4d2da49ff94b1a25bae7&rpt=simage
