कॉम्ब्स प्रतिक्रिया(आर. आर. ए. कॉम्ब्स, अंग्रेजी प्रतिरक्षाविज्ञानी, 1921 में जन्म; syn.: कॉम्ब्स परीक्षण, एंटीग्लोबुलिन परीक्षण ) - एरिथ्रोसाइट्स के ऑटो- और आइसोएंटीजन के लिए अपूर्ण एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया।
प्रतिक्रिया 1908 में मोरेशी (एस. मोरेस्ची) द्वारा विकसित की गई थी, लेकिन प्राप्त हुई व्यापक अनुप्रयोगकेवल 1945 के बाद से, कॉम्ब्स ने रक्त आधान, रीसस संघर्ष, ऑटोएलर्जिक और ऑटोइम्यून स्थितियों का निदान आदि में अनुकूलता निर्धारित करने में अपनी भूमिका दिखाई।
के. आर. यह इसमें एक विशेष रूप से तैयार की गई तैयारी - एंटीग्लोबुलिन सीरम के उपयोग पर आधारित है। एंटीग्लोबुलिन सीरम की उपस्थिति में, अपूर्ण एंटीबॉडी से भरी एरिथ्रोसाइट्स एकत्रित हो जाती हैं। जिन एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर एंटीबॉडी नहीं होते हैं वे गैर-एग्लूटीनेटेड रहते हैं।
के. आर. व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है: ए) आइसोसेंसिटाइजेशन की स्थिति स्थापित करना, यानी बार-बार रक्त आधान (रक्त आधान देखें) या गर्भावस्था (गर्भावस्था देखें) के दौरान होने वाले आइसोएंटीबॉडी का पता लगाना; बी) हेमोट्रांसफ्यूजन के लिए अनुकूलता परीक्षण करना; सी) विभिन्न प्रकार के आरएच कारक की एरिथ्रोसाइट्स में परिभाषाएं (देखें); डी) अधिग्रहीत हेमोलिटिक एनीमिया (देखें) और अन्य ऑटोएलर्जिक रोगों (देखें) के साथ-साथ होने वाले कुछ संक्रमणों वाले रोगियों के एरिथ्रोसाइट्स पर ऑटोइम्यून एंटीबॉडी का पता लगाना एलर्जी घटक; ई) नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग से पीड़ित बच्चों के एरिथ्रोसाइट्स पर स्थापित आइसोइम्यून एंटीबॉडी का पता लगाना (देखें)। के. आर. इसका उपयोग फोरेंसिक और मानवशास्त्रीय अनुसंधान में भी किया जाता है।
के.आर. के मंचन के लिए मुख्य सामग्री। रोगी के सीरम या साइट्रेटेड प्लाज्मा और एरिथ्रोसाइट्स हैं। के. नदी के दो प्रकार हैं: अप्रत्यक्ष और प्रत्यक्ष। अप्रत्यक्ष के.पी. के साथ. रोगी के सीरम का अध्ययन करें, एक कट में स्वतंत्र रूप से प्रसारित होने वाले एंटीबॉडी को परिभाषित करें। एक सीधी रेखा के.पी. के साथ। इन पर स्थिर एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए लाल रक्त कोशिकाओं की जांच करें आकार के तत्वखून।
के. नदी के लिए एंटीग्लोबुलिन सीरम। टीकाकरण एक प्रयोगशाला द्वारा प्राप्त करें। जानवरों (खरगोश, बकरी, भेड़, आदि) को इथेनॉल, अमोनियम सल्फेट या सेफैडेक्स पर जेल निस्पंदन के साथ मानव सीरम से अलग किए गए ग्लोब्युलिन के साथ। एंटीग्लोबुलिन सीरम प्राप्त होने पर, मानव ग्लोब्युलिन के साथ जानवरों के टीकाकरण से उत्पन्न हेटेरोएग्लूटिनेटिंग एंटीबॉडी को हटाना आवश्यक है। यह उन लोगों की लाल रक्त कोशिकाओं के मिश्रण के साथ प्रतिरक्षा सीरम के अवशोषण द्वारा प्राप्त किया जाता है अलग समूहरक्त या सोडियम क्लोराइड के आइसोटोनिक घोल से पतला करना। बाद के मामले में, हेटेरो-एग्लूटीनिन का अनुमापांक कम होना चाहिए (1:16 - 1:32), ताकि कमजोर पड़ने के बाद, एंटीग्लोबुलिन सीरम बरकरार रहे अच्छी गतिविधिके. आर में
अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया
अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया दो चरणों में की जाती है। पहला चरण विशेष रूप से इस उद्देश्य के लिए डिज़ाइन की गई छोटी टेस्ट ट्यूबों में किया जाता है, आकार में 4 X 0.5 सेमी। प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में, सीरम की तीन बूंदें (संपूर्ण, 1: 2, आदि), जिसमें एंटीबॉडी की उपस्थिति होती है संदेह है, एक बूंद में ज्ञात एंटीजेनिक संरचना के एरिथ्रोसाइट्स का तलछट जोड़ा जाता है। ट्यूब की सामग्री को मिश्रित किया जाता है और 1 घंटे के लिए t° 37° पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। फिर एरिथ्रोसाइट्स को सोडियम क्लोराइड के आइसोटोनिक घोल से तीन बार धोया जाता है। दूसरे चरण में धुले हुए एरिथ्रोसाइट्स के 5% निलंबन की तैयारी और एंटीग्लोबुलिन सीरम की एक बूंद के साथ एरिथ्रोसाइट्स की एक बूंद की गीली सतह के साथ एक सफेद (चीनी मिट्टी के बरतन) प्लेट पर कनेक्शन शामिल है। परिणामों का लेखा-जोखा 10 मिनट तक किया जाता है। अपवाद गलत सकारात्मक परिणामकरने से उत्पन्न होता है नियंत्रण अध्ययन. प्रयोग आइसोटोनिक समाधानएंटीग्लोबुलिन सीरम के बजाय सोडियम क्लोराइड एरिथ्रोसाइट एग्लूटिनेशन के साथ नहीं होना चाहिए। अप्रत्यक्ष के.आर. का प्रदर्शन. एक ज्ञात फेनोटाइप के एरिथ्रोसाइट्स के संबंध में, आइसोएंटीजन आपको एंटीबॉडी की विशिष्टता स्थापित करने की अनुमति देता है। उदाहरण के लिए, एरिथ्रोसाइट्स 0(I), CDE, Kk, Fya के साथ रोगी के सीरम का अध्ययन; 0(1), सीडीई, केके, फुआ; 0(आई), सीडीई, केके, फ़्या; 0(आई), सीडीई, केके, फ़्या; 0(आई), सीडीई, केके, फ़िया ने दिखाया सकारात्मक परिणामपहले और चौथे मामले में रक्त के नमूने के साथ; अन्य रक्त नमूने (2, 3, 5वें मामले) दिखाए गए नकारात्मक परिणाम. सीरम में एंटी-ई एंटीबॉडी होते हैं। अप्रत्यक्ष के.आर. की सहायता से। एंटीजन के विरुद्ध अपूर्ण एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है: सी, डी, ई, सी, ई; के, के; फ़िया, फ़ाइब; ली, लेब; जेकेए, जेकेबी, आदि (रक्त प्रकार देखें)।
प्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया
निष्पादन तकनीक के अनुसार, प्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया अप्रत्यक्ष के.आर. के दूसरे चरण से मेल खाती है: रोगी के एरिथ्रोसाइट्स (5% निलंबन) को सोडियम क्लोराइड के आइसोटोनिक समाधान के साथ तीन बार धोया जाता है, एंटीग्लोबुलिन सीरम के साथ जोड़ा जाता है। प्रत्यक्ष के. आर. तब प्रदर्शन करें जब यह विश्वास करने का कारण हो कि विवो में अध्ययन के तहत रोगी की एरिथ्रोसाइट्स पहले से ही एंटीबॉडी द्वारा संवेदनशील हैं। सकारात्मक सीधी रेखा K. r. के लिए एक डायग्नोस्टिक मार्कर के रूप में कार्य करता है हेमोलिटिक रोगनवजात शिशु, भ्रूण के प्रतिजनों के प्रति महिला के शरीर की संवेदनशीलता और नाल के माध्यम से बच्चे के शरीर में एंटीबॉडी के प्रवेश के साथ-साथ अधिग्रहित के कारण हीमोलिटिक अरक्तता.
पीछे पिछले साल काके. आर. काफी सुधार हुआ है। इसकी मदद से, न केवल एरिथ्रोसाइट्स पर एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाना संभव है, बल्कि इम्युनोग्लोबुलिन के वर्ग को स्थापित करना भी संभव है (देखें)। ऐसा करने के लिए, इम्युनोग्लोबुलिन के कुछ वर्गों के खिलाफ सीरम का उपयोग करें: आईजीजी, आईजीएम, आईजीए। आरएच, केल एंटीजन, डफी एंटीजन और अन्य एंटीजन के साथ-साथ गर्म ऑटोइम्यून एंटीबॉडी के खिलाफ आइसोइम्यून एंटीबॉडी आमतौर पर आईजीजी होते हैं। शीत ऑटोइम्यून एंटीबॉडी, साथ ही ले और कुछ अन्य एंटीजन के खिलाफ आइसोइम्यून एंटीबॉडी, एक नियम के रूप में, आईजीएम से संबंधित हैं। केवल दुर्लभ ऑटोइम्यून एंटीबॉडीज़ में IgA की प्रकृति होती है (ऑटोएंटीबॉडीज़ देखें)।
ग्रंथ सूची:डायगिन वी.पी. आंतरिक रोगों के क्लिनिक में ऑटोइम्यून रोग, एल., 1970, बिब्लियोग्र.; कैशियर-एस टू एंड वाई आई. ए. और अलेक्सेव जी. ए. क्लिनिकल हेमेटोलॉजी, एम., 1970; कोस्याकोव पी.एन. आईएसओ एंटीजन और सामान्य और रोग संबंधी स्थितियों में मानव एंटीबॉडी, एम., 1974, बिब्लियोग्र.; में के बारे में मैं वी मैं एन पी. ई. एक। लेस एनीमियास हेमोलिटिक्स, पी. 93, पी., 1971, ग्रंथ सूची; इम्यूनोलॉजी के नैदानिक पहलू, एड. पी. जी. एच. गेली द्वारा ए. ओ., ऑक्सफ़ोर्ड, 1975; कूम्ब्स आर. आर. ए., एम ओ यू जी ए एन टी ए. ई. ए. रेस आर.आर. हेमोलिटिक बीमारी वाले शिशुओं में लाल कोशिकाओं का इन-विवो आइसोसेंसिटाइजेशन, लैंसेट, वी। 1, पृ. 264, 1946.
में मौजूद कई एंटीजन में से मेडिकल अभ्यास करना उच्चतम मूल्यतीन प्रकार के रक्त एग्लूटीनोजेन को दिया जाता है। उनमें से एक आरएच कारक की अभिव्यक्ति के लिए जिम्मेदार प्रकार है: यदि यह एरिथ्रोसाइट झिल्ली पर मौजूद है, तो आरएच + रक्त समूह का निदान किया जाता है, यदि यह अनुपस्थित है - आरएच-। यदि Rh + एग्लूटीनोजेन वाले एरिथ्रोसाइट्स Rh-नकारात्मक रक्त की संरचना में प्रवेश करते हैं, तो शरीर एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया शुरू कर देता है और इस एंटीजन के लिए एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू कर देता है, जो रोग संबंधी स्थितियों का कारण बनता है।
संदर्भ! आरएच कारक कई दर्जन एंटीजन की एक जटिल बहुघटक प्रणाली है। इनमें से सबसे आम टाइप डी एग्लूटीनोजेन (85% मामले), साथ ही ई और सी हैं।
कॉम्ब्स का परीक्षण केवल प्रत्यक्ष संकेतों की उपस्थिति में ही किया जाता है। सामान्य सूचीकॉम्ब्स परीक्षण निर्धारित करने के कारण:
- गर्भावस्था की योजना और प्रबंधन (माता-पिता का Rh अलग-अलग होता है);
- रक्त आधान के लिए दान और तैयारी (आरएच में रक्त का बेमेल एबी0 प्रणाली में बेमेल से कम हानिकारक नहीं है);
- की योजना बनाई शल्य चिकित्सा संबंधी व्यवधान(रक्त आधान की सहायता से रक्त की हानि की पूर्ति के मामले में);
- हेमोलिटिक रोगों का निदान
अधिक विशिष्ट संकेत किए जा रहे अध्ययन के प्रकार पर निर्भर करते हैं।
प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण
एक प्रत्यक्ष परीक्षण लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर एंटीबॉडी का पता लगाता है। मौजूदा के निदान के लिए यह जरूरी है हेमोलिटिक विकृति विज्ञान:
- ऑटोइम्यून (एरिथ्रोसाइट्स और हीमोग्लोबिन शरीर के स्वयं के एंटीबॉडी के हमले के परिणामस्वरूप नष्ट हो जाते हैं);
- चिकित्सा ( पैथोलॉजिकल प्रक्रियाकुछ लेना शुरू कर देता है दवाइयाँक्विनिडाइन या प्रोकेनामाइड प्रकार);
- ट्रांसफ़्यूज़न के बाद (ट्रांसफ़्यूज़न के दौरान रक्त प्रकार के बेमेल के साथ), साथ ही गर्भावस्था के दौरान आरएच संघर्ष के रूप में (नवजात शिशुओं के एरिथ्रोब्लास्टोसिस)।
संदर्भ! हेमोलिटिक एनीमिया हेमोलिसिस के परिणामस्वरूप लाल रक्त कोशिकाओं के समय से पहले विनाश से जुड़ी एक बीमारी है, जो अपर्याप्त रक्त ऑक्सीजन संतृप्ति और मस्तिष्क और / या आंतरिक अंगों के हाइपोक्सिया की ओर ले जाती है।
रक्त तत्वों का हेमोलिसिस ऑन्कोलॉजिकल, संक्रामक, में देखा जाता है आमवाती रोग, इसलिए प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण का उपयोग इस प्रकार किया जा सकता है अतिरिक्त उपायनिदान रोग संबंधी स्थिति. यह याद रखने योग्य है: नकारात्मक अर्थविश्लेषण हेमोलिसिस की संभावना को बाहर नहीं करता है, लेकिन अतिरिक्त परीक्षा का एक कारण है।
अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण
रोग संबंधी स्थितियों को रोकने के लिए अप्रत्यक्ष परीक्षण का अधिक बार उपयोग किया जाता है।यह रक्त प्लाज्मा में एंटीबॉडी का पता लगाने में मदद करता है, जो ट्रांसफ्यूजन अनुकूलता का आकलन करने और गर्भावस्था के दौरान आरएच संघर्ष के जोखिमों का निदान करने के लिए आवश्यक है।
80% से अधिक लोगों में क्रमशः सकारात्मक Rh कारक (Rh+) होता है, केवल 20% से कम Rh-नकारात्मक होते हैं। यदि एक Rh- माँ में Rh+ बच्चा विकसित होता है, तो उसके शरीर में एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू हो जाता है जो भ्रूण की लाल रक्त कोशिकाओं पर हमला करता है, जिससे हेमोलिसिस होता है।
यह देखते हुए कि "विभिन्न-रीसस" विवाहों का प्रतिशत 12-15% तक पहुँच जाता है, नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग का जोखिम अधिक होना चाहिए, लेकिन वास्तव में 25 में से केवल 1 में इसी तरह के मामलेमहिलाओं में, संवेदीकरण की घटना देखी जाती है (200 सफल जन्मों के लिए, हेमोलिटिक पैथोलॉजी का 1 उदाहरण)। यह आंशिक रूप से इस तथ्य के कारण है कि पहला आरएच-पॉजिटिव बच्चा आमतौर पर मां के शरीर की खुली आक्रामकता का कारण नहीं बनता है; अधिकांश मामले दूसरे और उसके बाद के बच्चों में होते हैं। किसी विशेष एलर्जेन के प्रति पारंपरिक संवेदीकरण के साथ भी यही सिद्धांत लागू होता है।
प्रथम संपर्क पर कोई प्रतिक्रिया नहीं होती. शरीर केवल इसके लिए एक नए एंटीजन से परिचित होता है, जो आईजीएम वर्ग के एंटीबॉडी का उत्पादन करता है, जो तेजी से प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए जिम्मेदार होते हैं, लेकिन शायद ही कभी बच्चे के रक्त में प्लेसेंटल बाधा को भेदते हैं। सभी रोग संबंधी प्रतिक्रियाएं बार-बार "मिलने" पर प्रकट होती हैं, जब शरीर में एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू होता है। कक्षा आईजीजी, आसानी से भ्रूण के रक्तप्रवाह में प्रवेश करके, हेमोलिसिस की प्रक्रिया शुरू करता है।
गर्भावस्था के दौरान अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षणआपको मां के शरीर में एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने और समय पर पहचानने की अनुमति देता है आरंभिक चरणसंवेदीकरण. सकारात्मक उत्तर के लिए एंटीबॉडी टिटर के मासिक अध्ययन के साथ पंजीकरण और प्रसव से 3-4 सप्ताह पहले अनिवार्य अस्पताल में भर्ती होने की आवश्यकता होती है।
संदर्भ! आरएच कारक असंगति किसी भी तरह से मां की स्थिति को प्रभावित नहीं करती है, हेमोलिटिक रोग केवल एक बच्चे में विकसित होता है। में गंभीर मामलेंऔर समय पर प्रतिक्रिया के अभाव में, भ्रूण गर्भ में या जन्म के तुरंत बाद मर सकता है।
प्रक्रिया और उसके कार्यान्वयन के लिए तैयारी
निदान के लिए उपयोग किया जाता है नसयुक्त रक्त. कॉम्ब्स परीक्षण के लिए विशेष दीर्घकालिक तैयारी की आवश्यकता नहीं है। विश्लेषण के लिए नस से रक्त लेने से पहले नियमों के एक मानक सेट का पालन करने का प्रयास करें:
- 3 दिन के लिए शराब छोड़ दें, दवाएं(अगर संभव हो तो);
- विश्लेषण के लिए रक्त लेने से 8 घंटे पहले अंतिम भोजन की योजना बनाएं;
- 1 घंटे में धूम्रपान, शारीरिक, मानसिक और भावनात्मक तनाव छोड़ें;
- प्रक्रिया से पहले, एक गिलास साफ गैर-कार्बोनेटेड पानी पियें।
शोध पद्धति हेमग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया पर आधारित है।
प्रत्यक्ष परीक्षण करते समयरक्त के नमूने को ज्ञात संकेतकों के साथ पहले से तैयार एंटीग्लोबुलिन सीरम के संपर्क में लाया जाता है, मिश्रण को कुछ समय के लिए रखा जाता है और एग्लूटीनेट्स की जांच की जाती है, जो तब बनते हैं जब एंटीबॉडी एरिथ्रोसाइट्स पर मौजूद होते हैं। एग्लूटीनेट्स के स्तर का निदान एग्लूटीनेटिंग टिटर का उपयोग करके किया जाता है।
अप्रत्यक्ष परीक्षणकॉम्ब्स के पास एक समान तकनीक है, लेकिन क्रियाओं का अधिक जटिल क्रम है। एंटीजेनिक एरिथ्रोसाइट्स (आरएच कारक के साथ) को अलग किए गए रक्त सीरम में इंजेक्ट किया जाता है, और इन जोड़तोड़ के बाद ही, एग्लूटीनेट्स के निदान और अनुमापांक के लिए एंटीग्लोबुलिन सीरम जोड़ा जाता है।
शोध का परिणाम
आम तौर पर, दोनों प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षणनकारात्मक परिणाम देना चाहिए:
- एक नकारात्मक प्रत्यक्ष परीक्षण इंगित करता है कि लाल रक्त कोशिकाओं से जुड़े आरएच कारक के विशिष्ट एंटीबॉडी रक्त में अनुपस्थित हैं और हेमोलिसिस का कारण नहीं हो सकते हैं
- एक नकारात्मक अप्रत्यक्ष परीक्षण से पता चलता है कि रक्त प्लाज्मा में आरएच कारक के लिए कोई मुक्त एंटीबॉडी भी नहीं हैं; तथ्य आरएच कारक के अनुसार दाता के रक्त की प्राप्तकर्ता के रक्त (या मां और बच्चे के रक्त) के साथ संगतता को इंगित करता है।
एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण शरीर के आरएच संवेदीकरण के तथ्य को इंगित करता है, जो कि है मुख्य कारणरक्त आधान के मामले में या भिन्न Rh स्थिति वाले बच्चे को ले जाते समय Rh संघर्ष। इस मामले में, परिणाम 3 महीने (एरिथ्रोसाइट जीवनकाल) तक अपरिवर्तित रहते हैं। यदि ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया इसका कारण बन गया है, तो एक सकारात्मक परीक्षण रोगी को कई वर्षों तक (कुछ मामलों में, जीवन भर) परेशान कर सकता है।
संदर्भ! एंटीग्लोबुलिन परीक्षण अलग है उच्च संवेदनशील, लेकिन इसमें जानकारी संबंधी सामग्री बहुत कम है। यह हेमोलिटिक प्रक्रिया की गतिविधि को पंजीकृत नहीं करता है, एंटीबॉडी के प्रकार का निर्धारण नहीं करता है और पैथोलॉजी के कारण की पहचान करने में सक्षम नहीं है। अधिक संपूर्ण चित्र प्राप्त करने के लिए, उपस्थित चिकित्सक को अवश्य लिखना चाहिए अतिरिक्त शोध(रक्त माइक्रोस्कोपी, सामान्य और जैव रासायनिक विश्लेषण, आमवाती परीक्षण, ईएसआर, आयरन और फेरिटिन स्तर)।
संवेदीकरण की डिग्री में गुणात्मक अभिव्यक्ति ("+" से "++++") या मात्रात्मक - कैप्शन के रूप में हो सकती है:
- 1:2 - कम मूल्य, कोई खतरा पैदा नहीं करता;
- 1:4 - 1:8 - एक प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया के विकास की शुरुआत; कोई खतरा नहीं है, लेकिन निरंतर निगरानी की आवश्यकता है;
- 1:16 -1:1024 - संवेदीकरण का एक उज्ज्वल रूप, उपाय तुरंत किए जाने चाहिए।
सकारात्मक परीक्षण का कारण हो सकता है:
- बिना टाइप किए रक्त का आधान (या टाइपिंग त्रुटि के साथ), जब दाता और प्राप्तकर्ता का आरएच कारक मेल नहीं खाता;
- गर्भावस्था के दौरान रीसस संघर्ष (यदि पिता और माता में रक्त प्रतिजनों की संरचना मेल नहीं खाती);
- ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया - जन्मजात (प्राथमिक) और माध्यमिक दोनों, जो कुछ बीमारियों (इवांस सिंड्रोम, संक्रामक निमोनिया, सिफलिस, शीत हीमोग्लोबिनुरिया, लिम्फोमा) का परिणाम है;
- दवा हेमोलिटिक प्रतिक्रिया.
उपरोक्त में से कोई भी समस्या बिना रोगी द्वारा हल नहीं की जा सकती चिकित्सा देखभाल. सभी मामलों में, तत्काल परामर्श, पंजीकरण या आपातकालीन अस्पताल में भर्ती की आवश्यकता होगी।
ध्यान! दुर्लभ मामलों में, गलत सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण संभव है। इसका कारण बार-बार रक्त संक्रमण के साथ-साथ कई बीमारियाँ भी हो सकती हैं: रूमेटाइड गठिया, ल्यूपस एरिथेमेटोसस, सारकॉइडोसिस। इसके अलावा, इस घटना को प्लीहा को हटाने के बाद, साथ ही प्रतिक्रिया के पाठ्यक्रम के उल्लंघन (सामग्री का बार-बार हिलना, दूषित पदार्थों की उपस्थिति) के बाद भी देखा जा सकता है।
हाल के वर्षों में, विभिन्न आयु के रोगियों में रक्त रोगों की संख्या में वृद्धि हुई है, और उनके निदान के लिए, विभिन्न तरीकेऔर धन. कॉम्ब्स परीक्षण है नैदानिक परीक्षणरक्त, और इसके संचालन का उद्देश्य कुछ ऐसे जीवों की पहचान करना है जो मानव स्वास्थ्य के लिए खतरा पैदा करते हैं।
एंटीबॉडीज़ का पालन हो सकता है और परिणाम स्थिति का उल्लंघन हो सकता है प्रतिरक्षा तंत्र. डायरेक्ट कॉम्ब्स परीक्षण एक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण है जो लाल रक्त कोशिकाओं की सतह से जुड़े एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए किया जाता है।
आमतौर पर, विशेषज्ञ निम्नलिखित स्थितियों में एंटीबॉडी परीक्षण का सहारा लेते हैं:
- रक्त आधान की आवश्यकता. स्कूल शरीर रचना पाठ्यक्रम से यह ज्ञात होता है कि एक व्यक्ति में चार रक्त प्रकारों में से एक हो सकता है। एंटीग्लोबुलिन परीक्षण आयोजित करने से आप किसी अन्य जीव में रक्त आधान की संभावना निर्धारित कर सकते हैं। यह कहना संभव है कि कोई मरीज़ ट्रांसफ़्यूज़न के लिए दाता तभी बन सकता है जब उसका रक्त मरीज़ के प्रकार से मेल खाता हो, यानी उसमें समान एंटीजन हों। ऐसी स्थिति में जब रोगी और दाता के एंटीजन में अंतर होता है, तो इससे प्रतिरक्षा प्रणाली द्वारा ट्रांसफ्यूज्ड कोशिकाओं को नष्ट किया जा सकता है। इससे विकास हो सकता है गंभीर रोगऔर जटिलताएँ, और यहाँ तक कि मौत. बिल्कुल इसी वजह से महत्वपूर्ण भूमिकाखोज से जुड़ा हुआ है वांछित प्रकारजब रक्त आधान की आवश्यकता हो।
- आरएच संवेदीकरण के जोखिम का निर्धारण। आधुनिक दवाईआरएच को एक एंटीजन के रूप में परिभाषित करता है, और इसकी पूरी परिभाषा "आरएच कारक" की अवधारणा है। कॉम्ब्स परीक्षण के लिए धन्यवाद, महिलाओं के रक्त में आरएच कारक के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति का निदान करना संभव है। मामले में अगर भावी माँएक नकारात्मक आरएच कारक है, और पिता सकारात्मक है, तो अजन्मे बच्चे को उनमें से कोई भी विरासत में मिल सकता है। यदि अजन्मे बच्चे में सकारात्मक आरएच कारक पाया जाता है, तो आरएच संवेदीकरण विकसित होने का खतरा बढ़ जाता है - यह गर्भावस्था या प्रसव के दौरान रक्त और मां के मिश्रण की प्रक्रिया है।
यदि माँ और बच्चे के समूह के बीच असंगति है, तो प्रतिरक्षा प्रणाली महिला शरीरभ्रूण को एक विदेशी वस्तु के रूप में समझना शुरू कर देता है और उस पर सभी प्रकार के हमले करता है। इसका परिणाम बच्चे में गंभीर विकृति का विकास हो सकता है, जिसे एरिथ्रोब्लास्टोसिस कहा जाता है। कुछ मामलों में, अनुपस्थिति में प्रभावी उपचारभ्रूण की मृत्यु गर्भ में या जन्म के तुरंत बाद होती है।
कुछ मामलों में, ऑटोइम्यून हेमोलिटिक का पता लगाने के लिए कॉम्ब्स परीक्षण किया जाता है।
ऐसी बीमारी काफी दुर्लभ है और अपने ही शरीर में एरिथ्रोसाइट एंटीजन के निर्माण में प्रकट होती है।
विशेषज्ञ दो प्रकार के कॉम्ब्स नमूनों में अंतर करते हैं, जिनमें से प्रत्येक का उपयोग विशिष्ट उद्देश्यों के लिए किया जाता है।
प्रत्यक्ष परीक्षण. चिकित्सा पद्धति में प्रत्यक्ष परीक्षण को प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण भी कहा जाता है और इसकी मदद से सतह से जुड़ी एंटीबॉडी का निदान करना संभव है। कुछ मामलों में, मानव शरीर में ऐसे एंटीबॉडी का उत्पादन विभिन्न दवाओं की प्रगति या दवाओं के उपयोग के परिणामस्वरूप होता है:
- क्विनिडाइन
- मिथाइलडोप
- प्रोकेनामाइड
ऐसे एंटीबॉडी का खतरा इस तथ्य में निहित है कि वे विकास का कारण बन सकते हैं और विनाशकारी प्रभाव डाल सकते हैं। कभी-कभी कॉम्ब्स परीक्षण का सहारा लिया जाता है जब एनीमिया और जैसे विकृति विज्ञान के विकास के कारणों की पहचान करना आवश्यक होता है।
कॉम्ब्स परीक्षण- सतह से जुड़ी या प्लाज्मा में घुली एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए विश्लेषण। इसकी मदद से टीकाकरण और लाल रक्त कोशिकाओं में एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है। दूसरा नाम है एंटीग्लोबुलिन टेस्ट। यह प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष रूप से होता है।
पर प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणएरिथ्रोसाइट्स की सतह पर स्थिर एंटीबॉडी का पता लगाता है। यह दवाएँ (मिथाइलडोपा, पेनिसिलिन, कुनैन) लेने के बाद, अन्य ऑटोइम्यून बीमारियों के संदेह में किया जाता है।
एरिथ्रोसाइट्स को विवो में संवेदनशील बनाया गया है - एंटीबॉडी पहले से ही मजबूती से उनसे जुड़ी हुई हैं, और एंटीग्लोबुलिन सीरम (एंटी-आईजीजी) के जुड़ने से संवेदनशील कोशिकाएं एक साथ चिपक जाती हैं, जो नग्न आंखों को दिखाई देती है।
अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षणरक्त प्लाज्मा में एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाता है, यह रक्त आधान से पहले और उसके दौरान किया जाता है।
एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी एक प्रकार के ऑटोएंटीबॉडी हैं, यानी। अपने स्वयं के ऊतकों के विरुद्ध एंटीबॉडीज। ऑटोएंटीबॉडी तब होती है जब प्रतिरक्षा प्रणाली कुछ दवाओं, जैसे कि असामान्य रूप से प्रतिक्रियाशील होती है उच्च खुराकपेनिसिलीन.
उनकी सतह पर एरिथ्रोसाइट्स में विभिन्न प्रकार होते हैं रासायनिक संरचनाएँ(ग्लाइकोलिपिड्स, सैकराइड्स, ग्लाइकोप्रोटीन और प्रोटीन), चिकित्सा में एंटीजन के रूप में जाना जाता है। एक व्यक्ति को अपने माता-पिता से प्रत्येक लाल रक्त कोशिका पर एंटीजन का एक निश्चित मानचित्र विरासत में मिलता है।
एंटीजन को समूहों में संयोजित किया जाता है और इसके बाद रक्त को कई समूहों में विभाजित किया जाता है - AB0 प्रणाली के अनुसार, Rh, केल, लुईस, किड, डफी। एक डॉक्टर के काम में सबसे प्रसिद्ध और महत्वपूर्ण AB0 और Rh फ़ैक्टर (Rh) हैं।
AB0 प्रणाली
किसी व्यक्ति की Rh-संबद्धता इन एंटीजन की उपस्थिति से निर्धारित होती है। एक विशेष रूप से महत्वपूर्ण एरिथ्रोसाइट एंटीजन एंटीजन डी है। यदि यह मौजूद है, तो वे इसके बारे में बात करते हैं Rh धनात्मक रक्त RhD, और यदि यह नहीं है - के बारे में Rh नकारात्मक Rhd.
यदि संबंधित एंटीबॉडी एरिथ्रोसाइट्स के एंटीजन से जुड़ जाता है, तो एरिथ्रोसाइट नष्ट हो जाता है - होगा hemolysis.
संकेत
के लिए मुख्य संकेत प्रत्यक्षएंटीग्लोबुलिन परीक्षण- हेमोलिटिक एनीमिया का संदेह. अधिकतर यह प्राथमिक ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया, रूमेटिक, ट्यूमर के साथ हेमोलिसिस के साथ किया जाता है। संक्रामक रोगदवा-प्रेरित हेमोलिसिस।
यदि रक्त आधान के कुछ दिनों या महीनों बाद या नवजात शिशु में लंबे समय तक पीलिया के साथ एनीमिया दिखाई देता है, तो सीधे कॉम्ब्स परीक्षण भी किया जाता है।
अप्रत्यक्षएंटीग्लोबुलिन परीक्षण किया गयारक्त आधान से पहले और Rh-नकारात्मक महिला की गर्भावस्था के दौरान।
ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया
ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया (प्राथमिक)यह एक क्लासिक ऑटोइम्यून बीमारी है अज्ञात कारण. प्रतिरक्षा प्रणाली के भीतर परस्पर क्रिया बाधित हो जाती है, जिससे व्यक्ति को अपने स्वयं के एरिथ्रोसाइट्स विदेशी लगने लगते हैं। लिम्फ नोड्स में, आईजीजी वर्ग (टी 37 डिग्री सेल्सियस पर प्रतिक्रिया) और / या आईजीएम (टी 40 डिग्री सेल्सियस पर) के एंटीबॉडी संश्लेषित होते हैं, जो एरिथ्रोसाइट की सतह से जुड़े होने पर, कई एंजाइम शुरू करते हैं ( पूरक प्रणाली) और एरिथ्रोसाइट दीवार को "छिद्रित" करती है, जिससे इसका विनाश होता है - हेमोलिसिस।
पहले लक्षण लाल रक्त कोशिकाओं के नष्ट होने और हीमोग्लोबिन में कमी दोनों के कारण होते हैं। उनमें से:
- थकान, सामान्य कमज़ोरी, चिड़चिड़ापन
- श्वास कष्ट
- पेट और सीने में दर्द, मतली
- मूत्र का रंग गहरा होना
- पीठ दर्द
- त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली का पीला रंग
- एरिथ्रोसाइट्स की संख्या में कमी और
सकारात्मक प्रत्यक्ष परिणाम कॉम्ब्स परीक्षण 100% ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया के निदान की पुष्टि करता है, जो इसकी ऑटोइम्यून उत्पत्ति को साबित करता है। उसी समय, एक नकारात्मक परिणाम निदान को दूर करना संभव नहीं बनाता है।
माध्यमिक हेमोलिटिक एनीमिया
माध्यमिक ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया और एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण निम्नलिखित बीमारियों के साथ हो सकता है:
- इवांस सिंड्रोम
- निमोनिया संक्रमण
इन बीमारियों में एक सकारात्मक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण लक्षणों में से एक है, निदान मानदंड नहीं।
नवजात शिशु का हेमोलिटिक रोग
कारण नवजात शिशु का हेमोलिटिक रोगमाँ और भ्रूण में रक्त समूह की असंगति, ज्यादातर मामलों में आरएच प्रणाली के अनुसार, एकल मामलों में - एबी0 प्रणाली के अनुसार, आकस्मिक रूप से - अन्य एंटीजन के अनुसार।
Rh-संघर्ष तब विकसित होता है जब Rh-नेगेटिव महिला में भ्रूण को अपने पिता से Rh-पॉजिटिव रक्त विरासत में मिला हो।
नवजात शिशु में रोग तभी विकसित होता है जब मां ने पहले से ही संबंधित एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी विकसित कर ली हो, जो पिछली गर्भधारण, गर्भपात, असंगत रक्त के संक्रमण के बाद होता है। अधिकांश सामान्य कारणएरिथ्रोसाइट झिल्ली के एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी के संश्लेषण को ट्रिगर करना - प्रसव (भ्रूण-मातृ रक्तस्राव)। पहला जन्म आम तौर पर जटिलताओं के बिना गुजरता है, लेकिन बाद के जन्म जन्म के बाद पहले दिनों में नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग से भरे होते हैं।
नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग के लक्षण:
- त्वचा का पीलापन
- , और श्लेष्मा
- यकृत और प्लीहा का बढ़ना
- श्वसन संबंधी विकार
- पूरे शरीर में सूजन
- केंद्रीय तंत्रिका तंत्र की उत्तेजना और क्रमिक अवसाद
रक्त आधान के बाद एनीमिया
अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षणअनुकूलता का आकलन करने के लिए रक्त आधान से पहले किया जाता है, और यदि रक्त-आधान के बाद हेमोलिसिस का संदेह होता है, तो इसके बाद एक सीधा कॉम्ब्स परीक्षण किया जाता है। यदि आपको बुखार, पानी आना (नीचे पढ़ें) जैसे लक्षण हैं। परीक्षण का उद्देश्य ट्रांसफ्यूज्ड आरबीसी के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाना है जो प्राप्तकर्ता के आरबीसी से बंधे हैं और ट्रांसफ्यूजन के बाद हेमोलिसिस का कारण बनते हैं, साथ ही प्राप्तकर्ता (रिसीवर के) परिसंचरण से दाता आरबीसी को समय से पहले हटा देते हैं।
लक्षण:
- शरीर के तापमान में वृद्धि
- त्वचा पर दाने
- पीठ दर्द
- लाल
- जी मिचलाना
- चक्कर आना
डिक्रिप्शन
यह याद रखने योग्य है कि प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों को डिकोड करने के मूलभूत नियम समान हैं। एकमात्र अंतर एंटीबॉडी का स्थान है - रक्त में या पहले से ही एरिथ्रोसाइट पर।
- अगर प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण नकारात्मक है- इसका मतलब है कि एंटीबॉडी एरिथ्रोसाइट्स पर "बैठती" नहीं है और लक्षणों का कारण आगे देखा जाना चाहिए और एक अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण किया जाना चाहिए
- यदि रक्त आधान, संक्रमण, दवाओं के बाद सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण परिणाम का पता चलता है - सकारात्मकता 3 महीने तक रहती है (एरिथ्रोसाइट जीवन काल 120 दिन - 3 महीने)
- सकारात्मक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण परिणाम स्व - प्रतिरक्षी रोगमहीनों और वर्षों तक रहता है
आदर्श
- प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण - नकारात्मक
- अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण - नकारात्मक
गुणात्मक रूप से, एक सकारात्मक परिणाम को एक से चार (+, ++, +++, ++++) तक प्लस की संख्या में मापा जाता है, और मात्रात्मक रूप से डिजिटल रूप में - 1:16, 1:256, आदि।
एंटीग्लोबुलिन टेस्ट के नुकसान
- किसी एंटीजन की एंटीबॉडी से जुड़ने की शक्ति निर्धारित नहीं कर सकता
- बाध्य एंटीबॉडी की अज्ञात संख्या
- एंटीबॉडी के प्रकार का निर्धारण नहीं करता
- एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण इसका कारण निर्धारित करने में मदद नहीं करेगा
- 0,5% स्वस्थ लोगपास सकारात्मक नमूनाहेमोलिटिक एनीमिया के किसी भी सबूत के बिना कॉम्ब्स
- उपचार की सफलता की निगरानी के लिए उपयुक्त नहीं है, क्योंकि यह एरिथ्रोसाइट्स के हेमोलिसिस की गतिविधि को इंगित नहीं करता है
अतिरिक्त शोध
- के लिए रक्त परीक्षण
- रक्त धब्बा माइक्रोस्कोपी
- — ( , ), ( , )
- — 2. 5-10-20 साल पहले मुझे रक्त-आधान हुआ था, क्या अब मुझे नया रक्त-आधान से पहले डॉक्टर को इसके बारे में बताना चाहिए?
हाँ। यह तथ्य कि आपको रक्त आधान प्राप्त हुआ है, आपके डॉक्टर को पता होना चाहिए, क्योंकि यह अब परीक्षण परिणामों की सही व्याख्या को प्रभावित करता है। किसी और का (यद्यपि कई बार परीक्षण किया गया रक्त) प्राप्त करते समय, इस बात की संभावना हमेशा बनी रहती है कि आपके शरीर में चढ़ाए गए रक्त के खिलाफ एंटीबॉडी विकसित हो जाएंगी। ये एंटीबॉडीज़ ही हैं जो ऐसा करेंगी बुरा प्रभावस्वास्थ्य की स्थिति पर. बाद के रक्त आधान के साथ, डॉक्टर को पता होना चाहिए कि आपको पहले ही रक्त आधान प्राप्त हो चुका है, जिसका अर्थ है कि एंटीबॉडी के संश्लेषण के लिए समय था। गर्भवती महिलाओं के लिए यह जानकारीऔर भी अधिक प्रासंगिक.
3. यदि माँ और बच्चे के बीच आरएच कारक में बेमेल है, तो क्या सभी बच्चे बीमार होंगे?
यह इस पर निर्भर करता है कि बच्चा Rh-पॉजिटिव है या नेगेटिव (RhD)। रक्त प्रकार I, II, III और IV के वाहक Rh-पॉजिटिव और नेगेटिव दोनों हो सकते हैं। ऐसी स्थिति में जहां मां आरएच-नकारात्मक है और बच्चा आरएच-पॉजिटिव है, एंटीबॉडी का उत्पादन पहली गर्भावस्था के साथ ही हो जाएगा, लेकिन केवल पहले जन्म (या गर्भावस्था की समाप्ति) के बाद ही रक्त के बीच सीधा संपर्क होगा। माँ और बच्चा. एंटीबॉडी के हेमोलिटिक प्रभाव का कार्यान्वयन केवल दूसरे और के साथ होगा अगला जन्मजिससे नवजात शिशु में हेमोलिटिक रोग हो जाता है।
हर महिला के साथ नकारात्मक Rh कारकगर्भावस्था के दौरान और प्रसव के बाद सावधानीपूर्वक जांच की जानी चाहिए निवारक उपचारएंटीबॉडी की उपस्थिति और आगे की जटिलताओं को रोकने के लिए।
4. क्या गर्भावस्था के दौरान कॉम्ब्स टेस्ट कराने से पहले पति का ब्लड ग्रुप जानना जरूरी है?
गर्भावस्था के दौरान न सिर्फ जानना जरूरी है, बल्कि बच्चे के जैविक पिता का ब्लड ग्रुप भी जांचना जरूरी है।
आंकड़े
- 1945 में कैंब्रिज में पहली बार प्रस्तावित किया गया
- संवेदनशीलता सीमा - एक एरिथ्रोसाइट पर कम से कम 300 निश्चित एंटीबॉडी अणु
- हेमोलिसिस को ट्रिगर करने वाले एंटीबॉडी की संख्या - प्रत्येक व्यक्ति के लिए व्यक्तिगत रूप से (16-30 से 300 तक)
- दूसरों की गतिशीलता प्रयोगशाला संकेतकहेमोलिटिक एनीमिया (हीमोग्लोबिन, बिलीरुबिन, रेटिकुलोसाइट्स) सामान्य हो सकता है, और कॉम्ब्स परीक्षण उसी स्तर पर रहेगा
कॉम्ब्स परीक्षण अंतिम बार संशोधित किया गया था: 16 मार्च, 2018 तक मारिया बोडियन
एंटी-रीसस एंटीबॉडी के निर्धारण के लिए एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया (अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया)आवेदन करनाइंट्रावस्कुलर हेमोलिसिस वाले रोगियों में। इनमें से कुछ रोगियों में एंटी-रीसस एंटीबॉडीज पाए जाते हैं, जो अपूर्ण, मोनोवैलेंट होते हैं। वे विशेष रूप से आरएच-पॉजिटिव एरिथ्रोसाइट्स के साथ बातचीत करते हैं, लेकिन उनके एग्लूटिनेशन का कारण नहीं बनते हैं। ऐसे अपूर्ण एंटीबॉडी की उपस्थिति अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया में निर्धारित की जाती है। ऐसा करने के लिए, एंटी-आरएच एंटीबॉडी + आरएच-पॉजिटिव एरिथ्रोसाइट्स को सिस्टम में एंटीग्लोबुलिन सीरम (मानव इम्युनोग्लोबुलिन के खिलाफ एंटीबॉडी) जोड़ा जाता है, जो एरिथ्रोसाइट्स के एग्लूटीनेशन का कारण बनता है। कॉम्ब्स प्रतिक्रिया का उपयोग करते हुए, प्रतिरक्षा मूल के एरिथ्रोसाइट्स के इंट्रावस्कुलर लसीका से जुड़ी रोग संबंधी स्थितियों का निदान किया जाता है, उदाहरण के लिए, नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग: आरएच-पॉजिटिव भ्रूण के एरिथ्रोसाइट्स रक्त में घूमने वाले आरएच कारक के लिए अपूर्ण एंटीबॉडी के साथ जुड़ते हैं, जो पार हो जाता है Rh-नेगेटिव मां से प्राप्त प्लेसेंटा।
तंत्र. अपूर्ण (मोनोवैलेंट) एंटीबॉडी का पता लगाने में कठिनाई इस तथ्य के कारण होती है कि ये एंटीबॉडी, जब एक विशिष्ट एंटीजन के एपिटोप से जुड़ते हैं, तो एक जाली संरचना नहीं बनाते हैं, और एंटीजन और एंटीबॉडी के बीच प्रतिक्रिया का पता एग्लूटिनेशन, अवक्षेपण या द्वारा नहीं लगाया जाता है। अन्य परीक्षण. गठित एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स की पहचान करने के लिए अतिरिक्त परीक्षण प्रणालियों का उपयोग करना होगा। अपूर्ण एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए, उदाहरण के लिए, एक गर्भवती महिला के रक्त सीरम में एरिथ्रोसाइट्स के आरएच एंटीजन के लिए, प्रतिक्रिया दो चरणों में की जाती है: 1) आरएच एंटीजन युक्त एरिथ्रोसाइट्स को परीक्षण सीरम के दो गुना कमजोर पड़ने में जोड़ा जाता है। और एक घंटे के लिए 37°C पर रखा गया; 2) पहले चरण के बाद अच्छी तरह से धोए गए एरिथ्रोसाइट्स में, खरगोश विरोधी मानव विरोधी ग्लोब्युलिन सीरम (पूर्व-अनुमापित कार्यशील कमजोर पड़ने में) जोड़ें। 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट तक ऊष्मायन के बाद, परिणामों का मूल्यांकन हेमग्लूटीनेशन (सकारात्मक प्रतिक्रिया) की उपस्थिति से किया जाता है। प्रतिक्रिया के अवयवों को नियंत्रित करना आवश्यक है: 1) एंटीग्लोबुलिन सीरम + एरिथ्रोसाइट्स स्पष्ट रूप से विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ संवेदनशील; 2) सामान्य सीरम + एंटीग्लोबुलिन सीरम से उपचारित एरिथ्रोसाइट्स; 3) आरएच-नकारात्मक एरिथ्रोसाइट्स का परीक्षण सीरम + एंटीग्लोबुलिन सीरम के साथ इलाज किया जाता है।
50. निष्क्रिय रक्तगुल्म प्रतिक्रिया. तंत्र। अवयव। आवेदन पत्र।
अप्रत्यक्ष (निष्क्रिय) रक्तगुल्म की प्रतिक्रिया(आरएनजीए, आरपीजीए)यह उनकी सतह पर अवशोषित एंटीजन या एंटीबॉडी के साथ एरिथ्रोसाइट्स (या लेटेक्स) के उपयोग पर आधारित है, जिसकी रोगियों के रक्त सीरम के संबंधित एंटीबॉडी या एंटीजन के साथ बातचीत से एरिथ्रोसाइट्स एक साथ चिपक जाते हैं और नीचे की ओर गिर जाते हैं। स्कैलप्ड तलछट के रूप में ट्यूब या कोशिका।
अवयव।आरएनएचए के उत्पादन के लिए, भेड़, घोड़ों, खरगोशों, मुर्गियों, चूहों, मनुष्यों और अन्य लोगों के एरिथ्रोसाइट्स का उपयोग किया जा सकता है, जिन्हें भविष्य में उपयोग के लिए काटा जाता है, फॉर्मेलिन या ग्लूटाराल्डिहाइड के साथ इलाज किया जाता है। एरिथ्रोसाइट्स की सोखने की क्षमता तब बढ़ जाती है जब उन्हें टैनिन या क्रोमियम क्लोराइड के घोल से उपचारित किया जाता है।
सूक्ष्मजीवों के पॉलीसेकेराइड एंटीजन, जीवाणु टीकों के अर्क, वायरस और रिकेट्सिया के एंटीजन, साथ ही अन्य पदार्थ आरएनजीए में एंटीजन के रूप में काम कर सकते हैं।
एजी द्वारा संवेदनशील एरिथ्रोसाइट्स को एरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम कहा जाता है। एरिथ्रोसाइट डायग्नोस्टिकम की तैयारी के लिए, रैम एरिथ्रोसाइट्स, जिनमें उच्च सोखने की गतिविधि होती है, का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है।
आवेदन. आरएनएचए का उपयोग संक्रामक रोगों का निदान करने, गर्भावस्था स्थापित होने पर मूत्र में गोनैडोट्रोपिक हार्मोन निर्धारित करने, दवाओं, हार्मोन और कुछ अन्य मामलों में अतिसंवेदनशीलता का पता लगाने के लिए किया जाता है।
तंत्र. प्रतिक्रिया अप्रत्यक्ष रक्तगुल्म(आरएनजीए) में एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया की तुलना में काफी अधिक संवेदनशीलता और विशिष्टता होती है। इसका उपयोग रोगज़नक़ को उसकी एंटीजेनिक संरचना द्वारा पहचानने या अध्ययन किए गए रोग संबंधी सामग्री में बैक्टीरिया उत्पादों - विषाक्त पदार्थों को इंगित करने और पहचानने के लिए किया जाता है। तदनुसार, मानक (वाणिज्यिक) एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी डायग्नोस्टिकम का उपयोग किया जाता है, जो टैनाइज्ड (टैनिन-उपचारित) एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर विशिष्ट एंटीबॉडी के सोखने से प्राप्त होता है। परीक्षण सामग्री का क्रमिक तनुकरण प्लास्टिक प्लेटों के कुओं में तैयार किया जाता है। फिर, प्रत्येक कुएं में एंटीबॉडी-लोडेड एरिथ्रोसाइट्स के 3% निलंबन की एक समान मात्रा डाली जाती है। यदि आवश्यक हो, तो प्रतिक्रिया को विभिन्न समूह विशिष्टता के एंटीबॉडी से भरे एरिथ्रोसाइट्स के साथ कुओं की कई पंक्तियों में समानांतर में रखा जाता है।
37 डिग्री सेल्सियस पर 2 घंटे के ऊष्मायन के बाद, मूल्यांकन करते हुए, परिणामों को ध्यान में रखा जाता है उपस्थितिएरिथ्रोसाइट तलछट (बिना हिलाए): एक नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, एक अवक्षेप कुएं के तल पर एक कॉम्पैक्ट डिस्क या अंगूठी के रूप में दिखाई देता है सकारात्मक प्रतिक्रिया- एरिथ्रोसाइट्स की एक विशिष्ट लेसी तलछट, असमान किनारों वाली एक पतली फिल्म।
