שיטה לקביעת קבוצות דם. תגובה עקיפה של קומבס (בדיקת אנטיגלובולין, זיהוי של נוגדנים אנטי-אריתרוציטים לא שלמים), דם

תגובת COOMBS(ר.ר.א. קומבס, אימונולוג אנגלי, יליד 1921; סינ.: מבחן קומבס, בדיקת אנטיגלובולין ) - תגובה אימונולוגית לגילוי נוגדנים לא שלמים לאוטו-ואיזואנטיגנים של אריתרוציטים.

התגובה פותחה בשנת 1908 על ידי Moreshi (S. Moreschi), אך קיבלה יישום רחברק מאז 1945, לאחר שקומבס הראה את תפקידו בקביעת תאימות בעירויי דם, קונפליקט Rhesus, אבחון מצבים אוטואלרגיים ואוטואימוניים וכו'.

ק.ר. מבוסס על שימוש בתכשיר שהוכן במיוחד בו - סרום אנטיגלובולין. בנוכחות של נסיוב אנטיגלובולין, אריתרוציטים עמוסים בנוגדנים לא שלמים מתאגרפים. אריתרוציטים שאינם מכילים נוגדנים על פני השטח שלהם נשארים לא צמודים.

ק.ר. בשימוש נרחב עבור: א) ביסוס מצב האיזוסנסיטיזציה, כלומר זיהוי של נוגדנים איזו-נוגדנים המתרחשים במהלך עירויי דם חוזרים (ראה עירוי דם) או הריונות (ראה הריון); ב) ביצוע בדיקת התאמה לעירוי דם; ג) הגדרות באריתרוציטים של מגוון של גורם Rh (ראה); ד) זיהוי של נוגדנים אוטואימוניים על אריתרוציטים של חולים עם אנמיה המוליטית נרכשת (ראה) ומחלות אוטואלרגיות אחרות (ראה), כמו גם בחלק מהזיהומים המתרחשים עם מרכיב אלרגי; ה) זיהוי של נוגדנים איזו-אימוניים המקובעים על אריתרוציטים של ילדים הסובלים ממחלה המוליטית של היילוד (ראה). ק.ר. הוא משמש גם במחקר משפטי ואנתרופולוגי.

החומר העיקרי לבימוי ק.ר. הם סרום או פלזמה ציטראטית ואריתרוציטים של המטופל. ישנן שתי גרסאות של נהר K.: עקיף וישיר. עם עקיף ק.פ. סרום המחקר של המטופל, בחתך להגדיר נוגדנים במחזור חופשי. עם קו ישר K. p. לבדוק תאי דם אדומים עבור נוכחות של נוגדנים קבועים על אלה אלמנטים מעוצביםדָם.

סרום אנטיגלובולין עבור K. river. לקבל בחיסון מעבדה. בעלי חיים (ארנבות, עיזים, כבשים וכו') עם גלובולינים מבודדים מסרום אנושי על ידי חלוקה עם אתנול, אמוניום גופרתי או סינון ג'ל על Sephadex. לאחר קבלת סרום אנטיגלובולינים, יש צורך להסיר נוגדנים הטרוגלובולינים הנובעים מחיסון של בעלי חיים בגלובולינים אנושיים. זה מושג על ידי ספיחה של סרום חיסון עם תערובת של כדוריות דם אדומות מאנשים עם קבוצה אחרתדם או דילול עם הפתרון האיזוטוני של נתרן כלורי. במקרה האחרון, הטיטר של הטרו-אגלוטינינים צריך להיות נמוך (1: 16 - 1: 32), כך שלאחר דילול, סרום האנטיגלובולין נשמר פעילות טובהבק.ר.

תגובה עקיפה של קומבס

תגובת Coombs העקיפה מתבצעת בשני שלבים. השלב הראשון מתבצע במבחנות קטנות שתוכננו במיוחד למטרה זו, בגודל 4X0.5 ס"מ. בכל מבחנה, עד שלוש טיפות סרום (שלם, 1:2 וכו'), שבהן הימצאות נוגדנים. חשוד, טיפה אחת מתווספת משקעים של אריתרוציטים בהרכב אנטיגני ידוע. תוכן הצינור מעורבב ומכניסים לתרמוסטט ב- t° 37° למשך שעה. ואז האריתרוציטים נשטפים שלוש פעמים עם תמיסה איזוטונית של נתרן כלורי. השלב השני מורכב מהכנת תרחיף 5% של אריתרוציטים שטופים וחיבור על צלחת לבנה (פורצלן) עם משטח רטוב של טיפה אחת של אריתרוציטים עם טיפה אחת של סרום אנטיגלובולין. התחשבנות בתוצאות מתבצעת עד 10 דקות. יוצא מן הכלל תוצאות חיוביות שגויותמיוצר על ידי עשייה מחקרי בקרה. נוֹהָג פתרון איזוטונינתרן כלורי במקום נסיוב אנטיגלובולין לא צריך להיות מלווה בהצטברות אריתרוציטים. ביצועים של ק.ר עקיף. ביחס לאריתרוציטים של פנוטיפ ידוע, איזואנטיגנים מאפשרים לך לקבוע את הספציפיות של נוגדנים. לדוגמה, מחקר של נסיוב החולה עם אריתרוציטים 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fua; 0(I), cDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, Fya הראה תוצאה חיוביתעם דגימת דם במקרים 1 ו-4; דגימות דם אחרות (2, 3, 5 מקרים) הראו תוצאה שלילית. הסרום מכיל נוגדנים אנטי-E. בעזרת ק.ר עקיף. ניתן לזהות נוגדנים לא שלמים נגד אנטיגנים: C, D, E, c, e; ק,ק; פיא, פייב; לאה,לב; Jka, Jkb וכו' (ראה סוגי דם).

תגובה ישירה של קומבס

על פי טכניקת הביצוע, התגובה הישירה של Coombs מתאימה לשלב השני של K. r. עקיף: אריתרוציטים של המטופל (5% תרחיף) שנשטפו שלוש פעמים בתמיסה איזוטונית של נתרן כלוריד משולבים עם סרום אנטיגלובולין. ישיר ק.ר. לבצע כאשר יש סיבה להאמין שהאריתרוציטים של החולה הנחקר in vivo כבר רגישים על ידי נוגדנים. קו ישר חיובי K. r. משמש כסמן אבחוני עבור מחלה המוליטיתיילודים, עקב הרגישות של גוף האישה לאנטיגנים עובריים וחדירת נוגדנים דרך השליה לגוף הילד, וכן עם נרכש אנמיה המוליטית.

מֵאָחוֹר השנים האחרונותק.ר. השתפר משמעותית. בעזרתו, ניתן לא רק לברר את נוכחותם של נוגדנים על אריתרוציטים, אלא גם להקים את המעמד של אימונוגלובולינים (ראה). לשם כך, השתמש בסרום נגד מחלקות מסוימות של אימונוגלובולינים: IgG, IgM, IgA. נוגדנים איזו-אימוניים נגד אנטיגנים Rh, Kell, אנטיגנים של Duffy ואנטיגנים אחרים, כמו גם נוגדנים אוטואימוניים חמים, הם בדרך כלל IgG. נוגדנים אוטואימוניים קרים, כמו גם נוגדנים איזו-אימוניים נגד Le וכמה אנטיגנים אחרים, שייכים ככלל ל-IgM. רק לנוגדנים אוטואימוניים נדירים יש אופי של IgA (ראה נוגדנים עצמיים).

בִּיבּלִיוֹגְרָפִיָה: Dygin V. P. מחלות אוטואימוניות במרפאה של מחלות פנימיות, L., 1970, bibliogr.; קופאית-עם אל ו-י I. A. and Alekseev G. A. Clinical Hematology, M., 1970; Kosyakov P. N. אנטיגנים ISO ונוגדנים אנושיים במצבים נורמליים ופתולוגיים, M., 1974, bibliogr.; בערך ב-i v i n P. e. א. Les anemias hemolytiques, p. 93, P., 1971, bibliogr.; היבטים קליניים של אימונולוגיה, עורך. מאת פ.ג.ה.גלי א. o., Oxford, 1975; Coombs R. R. A., M o u g a n t A. E. a. גזע R.R. אי-סנסיטיזציה של תאים אדומים בתינוקות עם מחלה המוליטית, Lancet, v. 1, עמ'. 264, 1946.

מבין האנטיגנים הרבים הקיימים ב פרקטיקה רפואית הערך הגבוה ביותרניתן לשלושה סוגים של אגלוטינוגנים בדם. אחד מהם הוא הסוג האחראי לביטוי של גורם ה-Rh: אם הוא קיים על קרום האריתרוציטים, מאובחנת קבוצת הדם Rh+, אם היא נעדרת - Rh-. אם אריתרוציטים עם Rh + agglutinogens נכנסים להרכב הדם שלילי Rh, הגוף מפעיל תגובה חיסונית ומתחיל לייצר נוגדנים לאנטיגן זה, מה שגורם למצבים פתולוגיים.

התייחסות! גורם Rh הוא מערכת מורכבת מרובת רכיבים של כמה עשרות אנטיגנים. הנפוצים שבהם הם אגלוטינוגנים מסוג D (85% מהמקרים), וכן E ו-C.

בדיקת Coombs מתבצעת רק בנוכחות אינדיקציות ישירות. רשימה משותפתסיבות לרישום בדיקת Coombs:

• תכנון וניהול הריון (להורים יש Rh שונה);
• תרומה והכנה לעירוי דם (אי התאמה של דם ב-Rh מזיקה לא פחות מחוסר התאמה במערכת AB0);
• מתוכנן התערבות כירורגית(במקרה של חידוש איבוד דם בעזרת עירוי דם);
• אבחון של מחלות המוליטיות.

אינדיקציות ספציפיות יותר תלויות בסוג המחקר הנערך.

בדיקת קומבס ישירה

בדיקה ישירה מזהה נוגדנים על פני כדוריות הדם האדומות. זה הכרחי לאבחון הקיים פתולוגיות המוליטיות:

• אוטואימונית (אריתרוציטים והמוגלובין נהרסים כתוצאה מהתקף של הנוגדנים של הגוף עצמו);
• רפואי ( תהליך פתולוגימתחיל לקחת קצת תרופותסוג כינידין או פרוקאינאמיד);
• לאחר עירוי (עם אי התאמה של סוג הדם במהלך העירוי), כמו גם בצורה של קונפליקט Rh במהלך ההריון (אריתרובלסטוזיס של יילודים).

התייחסות! אנמיה המוליטית היא מחלה הקשורה להרס מוקדם של תאי דם אדומים כתוצאה מהמוליזה, מה שמוביל לרוויה לא מספקת של חמצן בדם ולהיפוקסיה של המוח ו/או האיברים הפנימיים.

המוליזה של יסודות הדם נצפית באונקולוגיות, זיהומיות, מחלות ראומטיות, כך שניתן להשתמש במבחן Coombs הישיר בתור תרופה נוספתאבחון מצב פתולוגי. כדאי לזכור: משמעות שליליתניתוח אינו שולל את האפשרות של המוליזה, אך מהווה סיבה לבדיקה נוספת.

מבחן Coombs עקיף

בדיקה עקיפה משמשת לעתים קרובות יותר למניעת מצבים פתולוגיים.זה עוזר לזהות נוגדנים בפלסמת הדם, הכרחי להערכת תאימות עירוי ואבחון הסיכונים לקונפליקט Rh במהלך ההריון.

ליותר מ-80% מהאנשים יש גורם Rh חיובי (Rh+), בהתאמה, קצת פחות מ-20% הם Rh שליליים. אם Rh- אם מפתחת תינוק Rh+, הגוף שלה מתחיל לייצר נוגדנים שתוקפים את תאי הדם האדומים של העובר, וגורמים להמוליזה.

בהתחשב בכך שאחוז הנישואים ה"שונים-רזוס" מגיע ל-12-15%, הסיכון למחלה המוליטית של היילוד אמור להיות גבוה, אך בפועל רק ב-1 מתוך 25 מקרים דומיםאצל נשים נצפית תופעת הרגישות (עבור 200 לידות מוצלחות, דוגמה אחת לפתולוגיה המוליטית). זה נובע בחלקו מהעובדה שהילד הראשון Rh חיובי בדרך כלל אינו גורם לתוקפנות גלויה של גוף האם; הרוב המכריע של המקרים מתרחשים בילדים השניים ואחריו. אותו עיקרון חל כמו עם רגישות קונבנציונלית לאלרגן מסוים.

לא מתרחשת תגובה במגע ראשון. הגוף מתוודע רק לאנטיגן חדש עבורו, המייצר נוגדנים מקבוצת IgM, שאחראים לתגובה חיסונית מהירה, אך לעיתים רחוקות חודרים את מחסום השליה לדם הילד. כל התגובות הפתולוגיות מתבטאות ב"פגישה" חוזרת, כאשר מתחילים להיווצר נוגדנים בגוף. מחלקה IgG, חודר בקלות לזרם הדם של העובר, ומתחיל את תהליך המוליזה.

בדיקת Coombs עקיפה במהלך ההריוןמאפשר לזהות נוכחות של נוגדנים בגוף האם ולזהות בזמן שלב ראשונירגישות. תשובה חיובית מחייבת רישום עם מחקר חודשי של טיטר נוגדנים ואשפוז חובה 3-4 שבועות לפני הלידה.

התייחסות! חוסר התאמה של גורם Rh אינו משפיע על מצב האם בשום צורה, מחלה המוליטית מתפתחת רק אצל ילד. IN מקרים חמוריםובהיעדר תגובה בזמן, העובר עלול למות ברחם או מיד לאחר הלידה.

הכנה להליך ויישומו

משמש לאבחון דם ורידי. אין צורך בהכנה מיוחדת לטווח ארוך למבחן Coombs. נסה לעקוב אחר מערכת כללים סטנדרטית לפני נטילת דם מוריד לניתוח:

• לוותר על אלכוהול למשך 3 ימים, תרופות(אם אפשר);
• לתכנן את הארוחה האחרונה לאחר 8 שעות לפני נטילת דם לניתוח;
• לוותר על עישון, מתח פיזי, נפשי ורגשי תוך שעה;
• לפני ההליך, שתו כוס מים נקיים ללא מוגזים.

שיטת המחקר מבוססת על תגובת ההמגלוטינציה.

בעת ביצוע בדיקה ישירהדגימת דם נחשפת לסרום אנטיגלובולין שהוכן מראש עם אינדיקטורים ידועים, התערובת נשמרת במשך זמן מה ונבדקת לאגלוטינטים, הנוצרים כאשר נוגדנים נמצאים על אריתרוציטים. רמת האגלוטינטים מאובחנת באמצעות טיטר צבירה.

מבחן עקיףלקומבס יש טכניקה דומה, אבל רצף מורכב יותר של פעולות. אריתרוציטים אנטיגנים (עם פקטור Rh) מוזרקים לסרום הדם המופרד, ורק לאחר מניפולציות אלו, מוסיפים סרום אנטיגלובולין לצורך אבחון וטיטר של אגלוטינטים.

תוצאות מחקר

בדרך כלל, גם ישיר וגם מבחן Coombs עקיףאמור לתת תוצאה שלילית:

• בדיקה ישירה שלילית מצביעה על כך שנוגדנים ספציפיים לגורם Rh הקשור לתאי דם אדומים נעדרים בדם ואינם יכולים להיות הגורם להמוליזה
• בדיקה עקיפה שלילית מראה שאין גם נוגדנים חופשיים לגורם Rh בפלסמת הדם; העובדה מצביעה על התאימות של הדם של התורם לדם של המקבל (או לדם של האם והילד) לפי גורם Rh.

בדיקת Coombs חיובית מצביעה על העובדה של רגישות Rh של הגוף, כלומר סיבה מרכזיתקונפליקט Rh במקרה של עירוי דם או בעת נשיאת ילד עם סטטוס Rh שונה. במקרה זה, התוצאות נשארות ללא שינוי למשך 3 חודשים (תוחלת חיים של אריתרוציטים). אם אנמיה המוליטית אוטואימונית הפכה לגורם, אזי בדיקה חיובית יכולה לרדוף את החולה במשך מספר שנים (במקרים מסוימים, לכל החיים).

התייחסות! בדיקת האנטיגלובולין שונה רגישות גבוהה, אך יש לו מעט תוכן מידע. הוא אינו רושם את פעילות התהליך ההמוליטי, אינו קובע את סוג הנוגדן ואינו מסוגל לזהות את הגורם לפתולוגיה. כדי לקבל תמונה מלאה יותר, על הרופא המטפל לרשום מרשם מחקר נוסף(מיקרוסקופ דם, כללי ו ניתוח ביוכימי, בדיקות ראומטיות, ESR, רמות ברזל ופריטין).

למידת הרגישות יכולה להיות ביטוי איכותי (מ-"+" ל-"++++") או כמותי - בצורה של כיתוב:

• 1:2 - ערך נמוך, אינו מהווה סכנה;
• 1:4 - 1:8 - תחילת התפתחות תגובה אימונולוגית; אינו מהווה סכנה, אך דורש ניטור מתמיד;
• 1:16 -1:1024 - צורה בהירה של רגישות, יש לנקוט באמצעים מיד.

הסיבה לבדיקה חיובית עשויה להיות:

• עירוי של דם לא מסומן (או עם שגיאת הקלדה), כאשר גורם ה-Rh של התורם והמקבל אינו תואם;
• קונפליקט רזוס במהלך ההריון (אם הרכב אנטיגנים בדם באב ובאם אינו תואם);
• אנמיה המוליטית אוטואימונית - גם מולדת (ראשונית) וגם משנית, שהיא תוצאה של מחלות מסוימות (תסמונת אוונס, דלקת ריאות זיהומית, עגבת, המוגלובינוריה קרה, לימפומה);
• תגובה המוליטית לתרופה.

אף אחת מהבעיות לעיל לא יכולה להיפתר על ידי המטופל בלעדיה טיפול רפואי. בכל המקרים יידרש ייעוץ דחוף, רישום או אשפוז חירום.

תשומת הלב! במקרים נדירים, בדיקת Coombs חיובית כוזבת אפשרית. הסיבה לכך יכולה להיות עירויי דם תכופים, כמו גם מספר מחלות: דלקת מפרקים שגרונית, לופוס אריתמטוסוס, סרקואידוזיס. כמו כן, ניתן להבחין בתופעה זו לאחר הסרת הטחול, כמו גם תוך הפרה של מהלך התגובה (טלטול תכוף של התוכן, נוכחות של מזהמים).

בשנים האחרונות, בקרב חולים בגילאים שונים, גדל מספר מחלות הדם, ולצורך אבחנה, שיטות שונותוקרנות. מבחן קומבס הוא ניסוי קלינידם, ומטרת התנהלותו היא לזהות אורגניזמים מסוימים המהווים איום על בריאות האדם.

נוגדנים יכולים להיצמד והתוצאה יכולה להיות הפרה של המצב מערכת החיסון. בדיקת קומבס הישירה היא בדיקת אנטיגלובולין המבוצעת על מנת לזהות נוגדנים המחוברים לפני השטח של תאי דם אדומים.

בדרך כלל, מומחים פונים לבדיקת נוגדנים במצבים הבאים:

• הצורך בעירוי דם. מהקורס אנטומיה בבית הספר, ידוע שאדם יכול להיות אחד מארבעה סוגי דם. עריכת בדיקת אנטיגלובולין מאפשרת לקבוע את האפשרות של עירוי דם לאורגניזם אחר. אפשר לומר שחולה יכול להפוך לתורם לעירוי רק אם הדם שלו מתאים לסוג החולה, כלומר מכיל את אותם אנטיגנים. במקרה שלחולה לתורם יש הבדל באנטיגנים, הדבר עלול להוביל להרס של התאים שעברו עירוי על ידי מערכת החיסון. זה עלול לגרום להתפתחות מחלה רציניתוסיבוכים, ואפילו מוות. בדיוק בגלל הסיבה הזו תפקיד חשובמצורף לחיפוש סוג רצוידם כאשר יש צורך בעירוי.
• קביעת הסיכון לרגישות Rh. תרופה מודרניתמגדיר את Rh כאנטיגן, והגדרתו המלאה היא המושג "גורם Rh". הודות לבדיקת Coombs, ניתן לאבחן נוכחות של נוגדנים לגורם Rh בדם של נשים במהלך. במקרה אם אמא לעתידיש גורם Rh שלילי, והאב חיובי, אז הילד שטרם נולד יכול לרשת כל אחד מהם. אם מתגלה גורם Rh חיובי בילד שטרם נולד, הסיכון לפתח רגישות ל-Rh עולה - זהו תהליך ערבוב הדם והאם במהלך ההריון או הלידה.

במקרה שיש חוסר התאמה בין קבוצת האם והילד, אזי מערכת החיסון גוף נשימתחיל לתפוס את העובר כעצם זר ומפעיל עליו כל מיני התקפות. התוצאה של זה עשויה להיות התפתחות של פתולוגיה חמורה אצל ילד, אשר נקראת אריתרובלאסטוזיס. במקרים מסוימים, בהיעדר טיפול יעילמוות עובר מתרחש ברחם או מיד לאחר הלידה.

במקרים מסוימים, בדיקת Coombs מבוצעת כדי לזהות המוליטיקה אוטואימונית.

מחלה כזו היא די נדירה ומתבטאת ביצירת אנטיגנים אריתרוציטים של גופה.

מומחים מבחינים בשני סוגים של דגימות Coombs, שכל אחת מהן משמשת למטרות ספציפיות.

מבחן ישיר. בדיקה ישירה בפרקטיקה הרפואית נקראת גם בדיקת אנטיגלובולין ישירה ובעזרתה ניתן לאבחן נוגדנים המחוברים למשטח. במקרים מסוימים, ייצור של נוגדנים כאלה בגוף האדם מתרחש כתוצאה מהתקדמות של שונים או שימוש בתרופות כגון:

• קווינידין
• מתיל-דופ
• פרוקאינאמיד

הסכנה של נוגדנים כאלה טמונה בעובדה שהם יכולים לגרום להתפתחות ולהשפיע הרסנית על. לפעמים פונים למבחן Coombs כאשר יש צורך לזהות את הגורמים להתפתחות פתולוגיות כגון אנמיה ו.

מבחן קומבס- אנליזה לאיתור נוגדנים המחוברים למשטח או מומסים בפלזמה. בעזרתו מתגלים חיסון ונוגדנים לתאי דם אדומים. השם השני הוא בדיקת האנטיגלובולין. זה קורה ישיר ועקיף.

בְּ בדיקת אנטיגלובולין ישירהמזהה נוגדנים קבועים על פני השטח של אריתרוציטים. זה מתבצע עם חשד של, עם מחלות אוטואימוניות אחרות, לאחר נטילת תרופות (מתילדופה, פניצילין, כינין) ו.

האריתרוציטים עברו רגישות in vivo - נוגדנים כבר מחוברים אליהם בחוזקה, ותוספת של סרום אנטיגלובולין (אנטי-IgG) גורמת להיצמדות התאים הרגישים זה לזה, הנראית לעין בלתי מזוינת.

מבחן Coombs עקיףמזהה נוגדנים אנטי-אריתרוציטים בפלסמת הדם, הוא מבוצע לפני עירוי דם ובמהלכו.

נוגדנים נגד אריתרוציטים הם סוג של נוגדנים עצמיים, כלומר. נוגדנים נגד הרקמות שלהם. נוגדן עצמי מתרחש כאשר מערכת החיסון מגיבה בצורה חריגה לתרופות מסוימות, כגון מינונים גבוהיםפֵּנִיצִילִין.

אריתרוציטים על פני השטח שלהם מכילים שונים מבנים כימיים(גליקוליפידים, סכרידים, גליקופרוטאינים וחלבונים), ברפואה המכונה אנטיגנים. אדם יורש מהוריו מפה מסוימת של אנטיגנים על כל כדורית דם אדומה.

אנטיגנים משולבים לקבוצות ולצד זה מתחלק הדם למספר קבוצות - לפי מערכת AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. המפורסמים והמשמעותיים ביותר בעבודתו של רופא הם AB0 ו-Rh factor (Rh).

מערכת AB0

השתייכות Rh של אדם נקבעת על ידי נוכחותם של אנטיגנים אלה. אנטיגן אריתרוציטים חשוב במיוחד הוא אנטיגן D. אם הוא קיים, אז הם מדברים על דם Rh חיובי RhD, ואם לא - בערך Rh שלילי Rhd.

אם הנוגדן המתאים מצטרף לאנטיגנים של אריתרוציטים, אז האריתרוציט נהרס - יהיו המוליזה.

אינדיקציות

האינדיקציה העיקרית עבור ישירבדיקת אנטיגלובולין- חשד לאנמיה המוליטית. לרוב זה מתבצע עם אנמיה המוליטית אוטואימונית ראשונית, המוליזה עם ראומטי, גידול, מחלות מדבקותהמוליזה הנגרמת על ידי תרופות.

אם מופיעה אנמיה מספר ימים או חודשים לאחר עירוי דם או עם צהבת ממושכת ביילוד, נעשית גם בדיקת קומבס ישירה.

עקיףבוצעה בדיקת אנטיגלובוליןלפני עירוי דם ובמהלך הריון של אישה שלילית Rh.

אנמיה המוליטית אוטואימונית

אנמיה המוליטית אוטואימונית (ראשונית)היא מחלה אוטואימונית קלאסית סיבות לא ידועות. האינטראקציה בתוך מערכת החיסון מופרעת, מה שמוביל לתפיסה של אריתרוציטים של עצמו כזרים. בבלוטות הלימפה מסונתזים נוגדנים מקבוצת IgG (מגיבים ב-37 מעלות צלזיוס t) ו/או IgM (ב-40 מעלות צלזיוס t), אשר, כאשר הם מחוברים לפני השטח של האריתרוציט, מתחילים מספר אנזימים (ה מערכת משלים) ו"לחורר" את דופן האריתרוציטים, מה שמוביל להרס שלו - המוליזה.

התסמינים הראשונים נובעים הן מהרס של כדוריות הדם האדומות והן מירידה בהמוגלובין. ביניהם:

• עייפות, חולשה כללית, עצבנות
• קוֹצֶר נְשִׁימָה
• כאבי בטן וחזה, בחילות
• צבע שתן כהה
• כאב גב
• צבע איקטרי של העור והריריות
• ירידה במספר אריתרוציטים ו

תוצאה ישירה חיובית מבחן קומבס 100% מאשר את האבחנה של אנמיה המוליטית אוטואימונית, מה שמוכיח את המקור האוטואימוני שלה. יחד עם זאת, תוצאה שלילית אינה מאפשרת להסיר את האבחנה.

אנמיה המוליטית משנית

אנמיה המוליטית אוטואימונית משנית ובדיקת Coombs חיובית יכולות להיות עם המחלות הבאות:

• תסמונת אוונס
• זיהום בדלקת ריאות

בדיקת אנטיגלובולין חיובית במחלות אלו היא אחד התסמינים, לא קריטריון אבחנתי.

מחלה המוליטית של היילוד

גורם מחלה המוליטית של היילודאי התאמה של קבוצת הדם באם ובעובר, ברוב המקרים לפי מערכת Rh, במקרים בודדים - לפי מערכת AB0, באופן מזדמן - לפי אנטיגנים אחרים.

קונפליקט Rh מתפתח אם אצל אישה שלילית Rh העובר ירש דם Rh חיובי מאביה.

המחלה ביילוד מתפתחת רק אם האם כבר פיתחה נוגדנים לאנטיגנים המתאימים, מה שקורה לאחר הריונות קודמים, הפלות, עירויים של דם לא תואם. רוב סיבה נפוצההפעלת סינתזה של נוגדנים לאנטיגנים של קרום האריתרוציטים - לידה (דימום עוברי-אם). הלידות הראשונות עוברות בדרך כלל ללא סיבוכים, אך הלידות הבאות רצופות במחלה המוליטית של היילוד בימים הראשונים לאחר הלידה.

תסמינים של מחלה המוליטית של היילוד:

• צהבהב של העור
• , ורירית
• הגדלה של הכבד והטחול
• הפרעות בדרכי הנשימה
• נפיחות של כל הגוף
• עירור ודיכאון הדרגתי של מערכת העצבים המרכזית

אנמיה לאחר עירוי דם

מבחן Coombs עקיףמבוצעת לפני עירוי דם כדי להעריך תאימות, ובדיקת קומבס ישירה לאחריה אם יש חשד להמוליזה לאחר עירוי, כלומר. אם יש לך תסמינים כגון חום, השקיה (קרא להלן). מטרת הבדיקה היא לזהות נוגדנים ל-RBC שעבר עירוי אשר נקשרו ל-RBCs של הנמען ומהווים את הגורם להמוליזה לאחר עירוי, וכן הסרה מוקדמת של RBCs התורמים ממחזור הדם של הנמען (המקבל).

תסמינים:

• עלייה בטמפרטורת הגוף
• פריחה על העור
• כאב גב
• אָדוֹם
• בחילה
• סְחַרחוֹרֶת

פענוח

ראוי לזכור כי הכללים הבסיסיים לפענוח בדיקות אנטיגלובולין ישירות ועקיפות זהים. ההבדל היחיד הוא מיקומם של הנוגדנים - בדם או כבר על אריתרוציט.

• אם בדיקת Coombs ישירה היא שלילית- זה אומר שהנוגדן לא "יושב" על האריתרוציטים ויש לחפש עוד את הסיבה לתסמינים ולבצע בדיקת קומבס עקיפה
• אם מתגלה תוצאה חיובית של בדיקת Coombs לאחר עירוי דם, זיהומים, תרופות - החיוביות נמשכת עד 3 חודשים (משך חיים של אריתרוציטים 120 יום - 3 חודשים)
• תוצאה חיובית של בדיקת אנטיגלובולין מחלת כשל חיסונינמשך חודשים ואפילו שנים

נוֹרמָה

• בדיקת קומבס ישירה - שלילית
• בדיקת Coombs עקיפה - שלילית

מבחינה איכותית, תוצאה חיובית נמדדת במספר הפלוסים מאחד עד ארבע (+, ++, +++, ++++), ומבחינה כמותית בצורה דיגיטלית - 1:16, 1:256 וכו'.

חסרונות בדיקת האנטיגלובולין

• לא יכול לקבוע את חוזק הקישור של אנטיגן לנוגדן
• מספר לא ידוע של נוגדנים קשורים
• אינו קובע את סוג הנוגדן
• בדיקת Coombs חיובית לא תעזור לקבוע את הסיבה לה
• 0,5% אנשים בריאיםיש מדגם חיוביקומבס ללא כל עדות לאנמיה המוליטית
• אינו מתאים לניטור הצלחת הטיפול, מכיוון שאינו מעיד על פעילות המוליזה של אריתרוציטים

מחקר נוסף

• בדיקת דם עבור
• מיקרוסקופ מריחת דם
• — ( , ), ( , )
• — 2. לפני 5-10-20 שנים עשיתי עירוי דם, האם כדאי לי לספר על כך לרופא עכשיו לפני עירוי דם חדש?

  כן. העובדה שקיבלת עירוי דם חייבת להיות ידועה לרופא שלך, שכן היא משפיעה על הפרשנות הנכונה של תוצאות הבדיקה כעת. כאשר מקבלים דם של מישהו אחר (אם כי פעמים רבות שנבדקו), תמיד קיימת האפשרות שהגוף שלך יפתח נוגדנים נגד הדם שעבר עירוי. הנוגדנים האלה הם שיעשו זאת השפעה רעהעל מצב הבריאות. עם עירויי דם לאחר מכן, הרופא צריך לדעת שכבר קיבלת עירויים, מה שאומר שהיה זמן לסינתזה של נוגדנים. לנשים בהריון המידע הזהאפילו יותר רלוונטי.

  3. אם יש אי התאמה בגורם Rh בין האם לילד, האם כל הילדים יהיו חולים?

  תלוי אם הילד Rh חיובי או שלילי (RhD). נשאים של סוגי דם I, II, III ו-IV יכולים להיות חיוביים ל-Rh ושליליים. במצב בו האם Rh-שלילית והילד Rh-חיובי, ייווצרו נוגדנים כבר בהריון הראשון, אך רק לאחר הלידה הראשונה (או הפסקת ההריון) יהיה מגע ישיר בין הדם של האם והילד. יישום ההשפעה ההמוליטית של נוגדנים יהיה רק ​​עם השני ו לידה הבאהמה שמוביל למחלה המוליטית ביילוד.

  כל אישה עם גורם Rh שלילייש לבחון בקפידה במהלך ההריון, ולאחר הלידה מתבצעת טיפול מונעכדי למנוע הופעת נוגדנים וסיבוכים נוספים.

  4. האם במהלך ההריון יש צורך לדעת את סוג הדם של הבעל לפני ביצוע בדיקת קומבס?

  יש צורך לא רק לדעת, אלא גם לבדוק את סוג הדם של האב הביולוגי של הילד במהלך ההריון.

  נתונים

  • הוצע לראשונה בקיימברידג' ב-1945
  • סף רגישות - לפחות 300 מולקולות נוגדנים קבועות על אריתרוציט אחד
  • מספר הנוגדנים המעוררים המוליזה - בנפרד עבור כל אדם (מ-16-30 עד 300)
  • דינמיקה של אחרים מדדי מעבדהאנמיה המוליטית (המוגלובין, בילירובין, רטיקולוציטים) עלולה לחזור לקדמותה, ובדיקת Coombs תישאר באותה רמה

  מבחן Coombs שונה לאחרונה: 16 במרץ 2018 על ידי מריה בודיאן

תגובת צבירה לקביעת נוגדנים נגד רזוס (תגובת Coombs עקיפה)להגיש מועמדותבחולים עם המוליזה תוך וסקולרית. בחלק מהחולים הללו נמצאים נוגדנים נגד רזוס שאינם שלמים, חד ערכיים. הם מקיימים אינטראקציה ספציפית עם אריתרוציטים חיוביים ל-Rh, אך אינם גורמים לאגלוטינציה שלהם. נוכחותם של נוגדנים לא שלמים כאלה נקבעת בתגובת Coombs העקיפה. לשם כך מוסיפים סרום אנטיגלובולינים (נוגדנים נגד אימונוגלובולינים אנושיים) למערכת נוגדני רזוס + אריתרוציטים חיוביים ל-Rh, הגורם לאגלוטינציה של אריתרוציטים. באמצעות תגובת Coombs, מאובחנים מצבים פתולוגיים הקשורים לתמוגה תוך-וסקולרית של אריתרוציטים ממקור חיסוני, למשל, מחלה המוליטית של היילוד: אריתרוציטים של עובר חיובי ל-Rh מתחברים עם נוגדנים לא שלמים לגורם Rh שמסתובב בדם, שחצו השליה מאם Rh שלילית.

מַנגָנוֹן. הקושי באיתור נוגדנים לא שלמים (חד-ערכיים) נובע מכך שנוגדנים אלו, כאשר הם נקשרים לאפיטופים של אנטיגן ספציפי, אינם יוצרים מבנה סריג, והתגובה בין אנטיגנים ונוגדנים אינה מתגלה על ידי אגלוטינציה, משקעים או משקעים. בדיקות אחרות. כדי לזהות את מתחמי האנטיגן-נוגדנים שנוצרו, יש להשתמש במערכות בדיקה נוספות. כדי לזהות נוגדנים לא שלמים, למשל, לאנטיגן Rh של אריתרוציטים בסרום הדם של אישה בהריון, התגובה מתבצעת בשני שלבים: 1) אריתרוציטים המכילים את אנטיגן Rh מתווספים לדילול פי שניים של סרום הבדיקה. ונשמר ב-37 מעלות צלזיוס למשך שעה; 2) לאריתרוציטים שנשטפו ביסודיות לאחר השלב הראשון, הוסף סרום אנטי-גלובולין אנטי-אנושי של ארנב (בדילול עבודה שעבר טיטרציה מראש). לאחר דגירה של 30 דקות ב-37 מעלות צלזיוס, התוצאות מוערכות על ידי נוכחות של hemagglutination (תגובה חיובית). יש צורך לשלוט במרכיבי התגובה: 1) סרום אנטיגלובולין + אריתרוציטים בעלי רגישות נוגדנים ספציפיים; 2) אריתרוציטים שטופלו בסרום תקין + סרום אנטיגלובולין; 3) אריתרוציטים Rh שליליים שטופלו בסרום הבדיקה + סרום אנטיגלובולין.

50. תגובת המוגלוטינציה פסיבית. מַנגָנוֹן. רכיבים. יישום.

התגובה של hemagglutination עקיפה (פאסיבית).(RNGA, RPGA)מבוססת על שימוש באריתרוציטים (או לטקס) עם אנטיגנים או נוגדנים הנספגים על פני השטח שלהם, שהאינטראקציה שלהם עם הנוגדנים או האנטיגנים המתאימים של סרום הדם של החולים גורמת לאריתרוציטים להיצמד זה לזה ולנשור לתחתית צינור או תא בצורה של משקע מסולסל.

רכיבים.לייצור RNHA ניתן להשתמש באריתרוציטים של כבשים, סוסים, ארנבות, תרנגולות, עכברים, בני אדם ואחרים, אשר נקצרים לשימוש עתידי, מטופלים בפורמלין או גלוטראלדהיד. יכולת הספיחה של אריתרוציטים עולה כאשר הם מטופלים בתמיסות של טאנין או כרום כלוריד.

אנטיגנים פוליסכרידים של מיקרואורגניזמים, תמציות של חיסונים חיידקיים, אנטיגנים של וירוסים וריקטסיה, כמו גם חומרים אחרים יכולים לשמש כאנטיגנים ב-RNGA.

אריתרוציטים שעברו רגישות על ידי AG נקראים אבחוני אריתרוציטים. להכנת אריתרוציטים דיאגנוסטיקום, משתמשים לרוב באריתרוציטים של ראם, בעלי פעילות ספיחה גבוהה.

יישום. RNHA משמש לאבחון מחלות זיהומיות, קביעת הורמון גונדוטרופי בשתן כאשר נוצר הריון, לאיתור רגישות יתר לתרופות, הורמונים ובמקרים אחרים.

מַנגָנוֹן. תְגוּבָה המאגלוטינציה עקיפה(RNGA) יש רגישות וסגוליות גבוהות משמעותית מתגובת האגלוטינציה. הוא משמש לזיהוי הפתוגן לפי המבנה האנטיגני שלו או לציון וזיהוי תוצרים חיידקיים - רעלים בחומר הפתולוגי הנחקר. בהתאם לכך, נעשה שימוש באבחון נוגדני אריתרוציטים סטנדרטיים (מסחריים), המתקבלים על ידי ספיחה של נוגדנים ספציפיים על פני השטח של אריתרוציטים tanized (מטופלים בטאנין). דילולים עוקבים של חומר הבדיקה מוכנים בבארות של לוחות פלסטיק. לאחר מכן, נפח שווה של תרחיף 3% של אריתרוציטים טעוני נוגדנים מתווסף לכל באר. במידת הצורך, התגובה מתבצעת במקביל במספר שורות של בארות עם אריתרוציטים עמוסים בנוגדנים בעלי סגוליות קבוצתיות שונה.

לאחר שעתיים של דגירה ב-37 מעלות צלזיוס, התוצאות נלקחות בחשבון, תוך הערכה מראה חיצונימשקע אריתרוציטים (ללא רעד): עם תגובה שלילית, מופיע משקעים בצורת דיסק או טבעת בתחתית הבאר, עם תגובה חיובית- משקע תחרה אופייני של אריתרוציטים, סרט דק עם קצוות לא אחידים.